非综合征性唇腭裂患者血浆代谢组学的初步研究

目的初步研究非综合征性唇腭裂患者可能存在的代谢机制,同时探讨基于核磁共振（NMR）的代谢组学技术在临床应用中的可行性。方法分别收集10例非综合征性唇腭裂患者和10例正常人的血浆,在核磁共振仪上对血浆样本进行采样,获得一系列原始的一维NMR谱图,然后使用MESTRE-v4.7软件对NMR谱图进行积分简化数据,将谱图分解成212个区域进行积分,得到积分强度,利用SIMCA-P 11.0软件对积分强度进行主成分分析。结果非综合征性唇腭裂患者和正常人的血浆代谢存在差异,至少存在3种不同的代谢产物,分别为三羟丁酸γ甲基类物质、精氨酸和缬氨酸。非综合征性唇腭裂患者血浆代谢产物以缬氨酸和三羟丁酸γ甲基类物质为主,而正常人血浆代谢产物则以精氨酸为主。结论通过代谢组学技术,可以初步探讨非综合征性唇腭裂患者的代谢机制,同时该技术有望应用于临床。     

常见致龋菌代谢组学鉴定的初步研究

目的初步将基于核磁共振的代谢组学方法应用于口腔致龋菌的鉴定,期望寻找一种能快速鉴定口腔致龋菌的方法。方法在改良TPY培养基中接种变形链球菌及粘性放线菌,用比浊法绘制生长曲线,选择两种细菌生长后4个时期的培养液检测核磁共振波谱,用主成分分析法进行数据分析。结果主成分分析显示两组数据内部有集中的聚类关系,可以区分两种细菌。结论代谢组学技术有望应用于口腔细菌的快速鉴定。     

人天然牙的高分辨X线微区衍射分析

通过使用X线微区衍射法直接对人天然牙表面正常牙釉质、牙本质及龋坏组织三个测量点进行检测,以测试X'pert Pro型衍射仪对人天然牙正常和早期龋损组织晶体结构改变的检测能力.结果显示,牙磷灰石由多种物相构成,是一种生物混晶,主要物相为羟基磷灰石,龋坏组织中可能有新物相的形成.从正常牙釉质到牙本质再到龋坏组织,晶体a轴逐渐增大,c轴基本不变.晶体晶胞参数计算结果:正常牙釉a=9.550(A),c=6.883(A);正常牙本质a=9.554(A),c=6.883(A);龋坏组织a=9.558(A),c=6.884(A).晶粒尺寸计算结果:正常牙釉质D002=27.600 nm;正常牙本质D002=16.561 nm;龋坏组织D002=13.163 nm.结晶性:正常牙釉质＞正常牙本质＞龋坏组织.结果表明采用新型高分辨X线衍射仪可以非常方便地对牙齿进行X线衍射微区分析.     

基于核磁共振的代谢组学技术在生命科学领域的研究进展

基于核磁共振技术的代谢组学是近年发展起来的一种新的组学技术。作为系统生物学的一部分,代谢组学主要利用生物体液的核磁共振谱提供生物体内全部小分子代谢物的丰富信息。下面就当前基于核磁共振技术的代谢组学研究的数据采集、数据分析中所采用的技术及其在生物体的生理变化、疾病诊断等领域的应用作一综述,并对代谢组学的发展作一展望。     

应用代谢组学法分析3种常用口腔材料对细胞内小分子蛋白的影响

目的采用一氢核磁共振(1H-NMR)的代谢组学方法,分析3种常用口腔材料对细胞的胞内小分子蛋白质谱的影响,探讨代谢组学方法在评价材料生物相容性方面的潜在应用前景。方法将小鼠成纤维细胞分别与羟基磷灰石-磷酸三钙生物陶瓷、钛合金、聚甲基丙烯酸甲酯(自凝塑料)3种常用口腔材料进行体外培养,并设单独细胞培养作为空白对照。培养72 h后提取细胞内蛋白质,利用核磁共振技术检测细胞内蛋白变化谱,经数据处理和和偏最小二乘法判别分析(PLS-DA),比较各组间小分子蛋白质谱的变化情况,观察各组间小分子蛋白质谱的差异。结果3组材料引起的细胞内小分子蛋白质谱明显不同,均有各自聚集趋势,分布区域间有较大的分隔区,且区分明显。结论代谢组学分析细胞内小分子蛋白质谱可能是一种在分子水平上研究口腔材料生物相容性机制以及评价的有效方法。     

初探各实验条件对基于核磁共振的代谢组学研究结果的影响

鉴于代谢组学样品的制备分析过程中,样品个体差异、环境因素和人为因素会对实验结果造成一定的影响,本研究对不同样本个体,不同实验操作人员的实验结果进行比较。通过这样的双向比较,排查出主要影响因素,为今后的实验奠定基础。实验选取多元统计中聚类分析的方法对12个样本进行衡量。实验结果表明,大鼠间差异即样本个体差异会对代谢组学研究结果产生一定的影响;而实验者不同即实验环境、人为因素对结果的影响不显著。也就是说,样本先天的个体差异相对与不同实验者所造成的环境差异在代谢组学中表现更为明显。     

不同母体环境下小鼠腭胚突Fgf10/Fgfr2b/Shh信号通路的变化

目的：观察在腭发育关键时期不同母体环境对小鼠腭胚突Fgf10信号表达的影响。方法：建立A/WySnJ/C57BL/6两系小鼠胚胎移植模型,利用RT-PCR技术检测在胚胎12.5和13.5d胎鼠腭突Fgf10/Fgfr2b/Shh的表达。结果：胚胎12.5d,A/C两系小鼠受精卵相互之间移植前后比较,胎鼠腭突Fgf10和Fgfr2b的表达没有明显变化,A系小鼠移植到C系小鼠后,胎鼠腭突Shh表达显著下调（P〈0.01）;胚胎13.5d,A系小鼠移植到C系小鼠后,胎鼠腭突Fgf10和Fgfr2b的表达显著上调（P〈0.01）,Shh的表达显著下调（P〈0.01）,相反,C系小鼠移植到A/系小鼠后,胎鼠腭突Fgf10的水平显著下调,而Shh水平显著上调（P〈0.01）。结论：母体子宫微环境和对外界环境反应的改变可影响胚胎腭突发育过程中关键信号因子的表达。     

一氢核磁共振的血浆代谢组学分析维生素B12对地塞米松诱导腭裂小鼠的阻抑作用

目的采用基于一氢核磁共振（1H-NMR）的代谢组学方法研究使用维生素B12后,阻抑本已诱发的唇腭裂发育早期过程的变化,并评估其可行性。方法选取对照组和实验组各12只怀孕17.5 d的C57BL/6J雌鼠,分别是仅注射维生素B12的孕鼠和注射维生素B12后再注射过量地塞米松引起腭裂的孕鼠,处理动物的血浆样本,并且观察B12对腭裂产生率的的影响。利用核磁共振技术检测血浆内源性小分子代谢产物,通过主成分分析方法（PCA）确定代谢物成分的变化。结果根据2组腭裂是否发生,PCA得分散点图产生了显著的差别。结论核磁共振的代谢组学方法是一种可行和有效的方法,可以深入探索唇腭裂的发病机制,并且为以后研究维生素B12的代谢机制奠定了基础。     

变异链球菌、血链球菌及嗜酸乳杆菌代谢组学鉴定的初步研究

目的了解变异链球菌、血链球菌和嗜酸乳杆菌的代谢谱图,探讨基于核磁共振的代谢组学方法在口腔致龋菌快速鉴定中的应用。方法分别在改良TPY液体培养基中接种相同密度的变异链球菌、血链球菌及嗜酸乳杆菌菌悬液,采用比浊法计算细菌数,绘制生长曲线。选择这3种细菌生长稳定期的培养液检测核磁共振波谱,用主成分分析法进行数据分析。结果主成分分析显示3组数据内部有集中的聚类关系,可以区分这3种细菌。结论代谢组学分析是一种有良好发展前景的口腔细菌的快速鉴定方法。