腭器官培养在腭裂发病机制研究中的应用

唇腭裂是人类最常见的出生缺陷之一,其发病机理复杂.多学科的研究表明,唇腭裂的病因涉及众多因素,受到多个因素的调控.其中导致腭裂发生的原因之一是腭板未能融合,而对于腭板融合过程的研究,在体内受诸多因素的限制,因此可以采用体外腭器官培养的方法进行研究.长期实践证明,与体内实验相比,体外腭器官培养模型可以模拟体内腭裂形成的过程.本文就腭器官培养方法在腭裂发病机制研究中的作用作一综述.     

口-面-指（趾）综合征I型一例

1 病例介绍患者女,18岁,因舌及下唇畸形18年,于2010年12月入院。患者出生时即发现舌及下唇发育畸形,影响发音,指（趾）并指畸形,影响功能,未行任何治疗。既往无其他疾病,为第一胎,足月顺产,父母及弟体健,其母无妊娠期间患病服药史、无中毒史,非近亲婚配,家族中无类似疾病史及其他遗传病史。     

地塞米松和维生素B_（12）交互作用对小鼠腭胚突超微结构影响的观察

目的:观察地塞米松和维生素B12作用后腭胚突超微结构的变化.方法:将孕鼠分为实验组(致畸组,拮抗组)和对照组,按体重分别注射地塞米松、地塞米松+维生素B12和生理盐水,分别在E14.5 d和E17.5 d处死孕鼠并获取胚胎,用扫描电镜观察E14.5 d的腭胚突表面结构,记录E17.5 d腭胚突的腭裂情况.结果:地塞米松作用后,小鼠胚胎的腭裂发生率从3.1%上升到42.1%(P<0.01),硬腭处细胞的伪足结构消失.维生素B12拮抗后,小鼠胚胎的腭裂发生率降低(P<0.05),伪足结构部分恢复.结论:维生素B12能部分恢复小鼠腭胚突细胞的表面超微结构,从而拮抗地塞米松的致腭裂效应.     

不同母体环境下小鼠腭胚突Fgf10/Fgfr2b/Shh信号通路的变化

目的：观察在腭发育关键时期不同母体环境对小鼠腭胚突Fgf10信号表达的影响。方法：建立A/WySnJ/C57BL/6两系小鼠胚胎移植模型,利用RT-PCR技术检测在胚胎12.5和13.5d胎鼠腭突Fgf10/Fgfr2b/Shh的表达。结果：胚胎12.5d,A/C两系小鼠受精卵相互之间移植前后比较,胎鼠腭突Fgf10和Fgfr2b的表达没有明显变化,A系小鼠移植到C系小鼠后,胎鼠腭突Shh表达显著下调（P〈0.01）;胚胎13.5d,A系小鼠移植到C系小鼠后,胎鼠腭突Fgf10和Fgfr2b的表达显著上调（P〈0.01）,Shh的表达显著下调（P〈0.01）,相反,C系小鼠移植到A/系小鼠后,胎鼠腭突Fgf10的水平显著下调,而Shh水平显著上调（P〈0.01）。结论：母体子宫微环境和对外界环境反应的改变可影响胚胎腭突发育过程中关键信号因子的表达。     

不同剂量地塞米松对小鼠胚胎腭裂发生的影响

目的 确立地塞米松诱导小鼠腭裂模型的最佳剂量,为进一步相关实验提供可靠模型.方法 分别将特定孕期的C57BL/6J雌鼠随机分为5组,即对照组和实验Ⅰ～Ⅳ组.E10-E12时,每天早上8时给予对照组每只孕鼠腹腔注射生理盐水0.1 mL,实验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组孕鼠分别腹腔注射地塞米松12.0、6.0、32、1.6mg/kg.于E17.5时处死孕鼠,称量并计算孕鼠和胚胎的体重,记录胚胎吸收数及胚胎腭裂数.结果 实验Ⅲ、Ⅳ组孕鼠与对照组孕鼠的体蕈的差异具有统计学意义(P<0.05),但其胚胎吸收数和胚胎腭裂数的差异无统计学意义(P>0.05);实验Ⅰ、Ⅱ组与对照组孕鼠胚胎腭裂发生率的差异具有统计学意义(P<0.05);实验Ⅰ组与对照组孕鼠胚胎吸收率的差异具有统计学意义(P<0.05);各组间胚胎体重的差别无统计学意义(P>0.05).结论 6.0mg/kg地寨米松是建立C57BL/6J胎鼠腭裂模型的适宜剂量.     

TCDD和B6 联合作用下小鼠腭板形态的扫描电镜观察

目的：二恶英（TCDD）和维生素B。联合作用下小鼠腭板形态的扫描电镜观察。方法：对孕期10d（GD10）的小鼠,分别胃饲TCDD24μg／kg,5mg、10mg、20mgB6／kg＋TCDD24μg／kg,对照组胃饲芝麻油50ml／kg,然后分别在GD12．5、GD13．5、GD14．5、GD15．5和GD17．5处死孕鼠,检查GDl7．5胎鼠有无腭裂的发生,GD12．5、GD13．5、GD14．5、GD15．5胎鼠用于扫描电镜观察。结果：TCDD组的腭裂发生率为55．56％,对照组未见腭裂发生,TCDD＋B6组浓度梯度下腭裂发生率为31．81％（5mg）,44．44％（10mg）,40．90％（20mg）。扫描电镜对照组腭中嵴上皮细胞形态规整,有大量微丝,伪足,随着孕期增加,融合的进行,微丝,伪足逐渐消失。TCDD组细胞肿胀变形,表面光滑,未见微丝,和伪足,而且形态并不随孕期的延长而改变,B6组腭中嵴上皮完全消失和TCDD组类似。结论：维生素B6不能恢复小鼠腭中嵴上皮细胞的表面超微结构,从而无法逆转TCDD导致腭裂效应。