关于GB/T 21704-2008方法改进和适用范围的研究

目的 对GB/T 21704-2008《乳与乳制品中非蛋白氮含量的测定》中前处理部分提出方法改进,明确方法的适用范围。方法 用不同剂量的三氯乙酸溶液沉淀样品中蛋白质,过滤后测定滤液中非蛋白氮含量；加水完全溶解三组不同质量的三聚氰胺,加入不同体积的三氯乙酸溶液,观察三聚氰胺在不同浓度三氯乙酸溶液中的析出情况；加标不同量的三聚氰胺,测定计算回收率确定仪器的检测限。结果 样品中蛋白质含量低于20 g/ 100 g 时,20 mL 15%三氯乙酸溶液可完全沉淀样品中蛋白质；三氯乙酸浓度越高,三聚氰胺溶解度越小,越容易析出；本实验用的全自动凯氏定氮仪最低可准确稳定检测2 mg三聚氰胺/10g样品。结论 国标方法改进后可以节约试剂,在消化环节缩短加热时间,提高实验效率；三聚氰胺在三氯乙酸溶液中的溶解度情况和仪器检测限的限制框定方法的适用范围是2 mg -20 mg三聚氰胺/10g样品。     

超高效液相色谱-串联质谱法检测豆制品中的碱性橙2

目的 建立测定豆制品中碱性橙2的超高效液相色谱-串联质谱分析方法。方法 样品均质后,用0.4 %乙酸-20 mmol/L乙酸铵+乙腈(1+1)超声提取,经混合型阳离子交换固相萃取柱净化,氮吹、复溶后上机。采用0.1%甲酸-10 mmol/L甲酸铵(A)和乙腈(B)作为流动相进行梯度洗脱, 质谱(ESI+)采用多离子检测模式(MRM)对碱性橙2的定量离子和定性离子进行监测。结果 碱性橙2在0.1～10.0 ng/mL线性范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999。碱性橙2在4.0、8.0和40.0 μg/kg添加水平的回收率为86.2%～106.2%, 相对标准偏差小于4.0%(n=6), 方法定量限为4.0 μg/kg。结论 该方法快速、准确、灵敏, 适合豆制品中碱性橙2的测定分析。     

多功能免疫亲和柱净化-超高效液相色谱串联质谱法快速检测咖啡豆中的11种真菌毒素

建立了同时测定咖啡豆中11种真菌毒素的超高效液相色谱-串联质谱分析方法,实验考察了色谱柱选择、提取溶剂组成、固相萃取柱选择、流动相比例对分析结果的影响。以咖啡豆为研究对象,样品均质后,经乙腈-水-甲酸（85+14+1,V/V）振荡提取,离心,过Oasis PRiME HLB柱,取净化液10 mL用磷酸缓冲液稀释至50 mL,经多功能免疫亲和柱净化,氮吹、50%乙腈复溶,以0.1%甲酸-2 mmol/L乙酸铵溶液-乙腈为流动相,用Waters BEH C₁₈柱分离,超高效液相色谱-质谱仪分析,内标法定量。结果表明,11种真菌毒素在各自线性范围内线性关系良好,相关系数均大于0.998,检出限为0.008~0.544 μg/kg。在低、中、高3个添加水平下的平均回收率为80.2%~114%,相对标准偏差为1.4%~7.9%。本方法步骤简便、快速高效,适用于咖啡豆中11种真菌毒素的同时测定分析。     

在线免疫亲和固相萃取-高效液相色谱法快速测定食品中赭曲霉毒素A

目的建立在线免疫亲和固相萃取-高效液相色谱快速测定食品中赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)的分析方法。方法谷物、豆类样品采用乙腈-水(80:20,V:V)提取,葡萄酒类样品采用NaHCO_3/NaCl/水溶液(0.4:15:100,m:m:V)提取,3%Tween-20(m:V)溶液稀释后,直接经RIDA~?CREST ICE在线免疫亲和固相萃取系统净化-高效液相色谱荧光检测OTA含量。以乙酸铵-乙腈为流动相洗脱,流速1.0 mL/min,C_(18)色谱柱(150 mm×4.6mm,5μm)分离测定。结果方法检出限分别为0.020μg/kg(豆类、谷物)和0.050μg/kg(葡萄酒类);在OTA的浓度为12.5~500 ng/L的范围内线性关系良好,相关系数r~2为0.9995;日内加标回收率为87.4%~109.8%,相对标准偏差0.50%~4.80%。结论该方法分析速度快,灵敏度高,重现性好,可满足快速准确测定大批量食品样品中OTA含量的需要。     

流动相pH对苯甲酸等5种食品添加剂反相高效 液相色谱行为影响及分析方法的建立

目的研究反相高效液相色谱中流动相pH值对苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸、安赛蜜和糖精钠等5种食品添加剂色谱行为的影响。方法调节流动相甲醇-乙酸铵pH值,观察在不同品牌色谱柱中苯甲酸等5种化合物保留时间、分离度。结果在流动相pH=6.20±0.05条件下梯度洗脱,10个品牌的C_(18)色谱柱验证结果表明,苯甲酸等5种化合物均实现了基线分离。5种食品添加剂在0.10～100.0mg/L范围内线性关系良好(r~20.999),检出限和定量限分别为0.004～0.008 mg/L、0.01～0.04 mg/L。食品添加剂在调味品、肉制品类等6种基质中回收率范围为90.6%～109.0%,相对标准偏差为0.2%～7.2%。结论该方法具有稳定性强、准确、易操作且不需要刻意选择亲水性C_(18)色谱柱,适用于调味品、肉制品类等复杂基质的样品添加剂的检测。     

五氯酚及其钠盐的样品前处理和分析检测技术研究进展

五氯酚是一种剧毒有机氯农药,其钠盐经酸化可转化为五氯酚。五氯酚曾被广泛运用于杀虫、除草、抗菌、防腐等方面,由于其性质稳定、难以降解,环境残留与污染严重,通过食物链的生物蓄积作用,进入人体并对人体造成毒副作用。本文综述了五氯酚及其钠盐测定的样品前处理技术和常用分析检测技术,样品前处理技术包括液-液萃取法、超声波萃取法、微波萃取法、固相萃取法、QuEChERS法、液相微萃取法、固相微萃取法、离子液体法、分子印迹法等,常用分析检测技术包括分光光度法、表面增强拉曼光谱法、电化学分析法、免疫分析法、气相色谱法、液相色谱法、气相色谱-串联质谱法、液相色谱-串联质谱法等,并对食品中五氯酚及其钠盐残留测定技术的研究和应用前景进行了展望。     

4种蛋白质沉淀剂测定乳粉中非蛋白氮含量的效果

目的 通过测定乳粉中非蛋白氮含量,比较四种蛋白质沉淀剂分离蛋白质和非蛋白含氮物质的效果。方法 样品加水溶解后分别用15 % 三氯乙酸溶液、丙酮、20 %乙酸铅溶液和3 % 草酸钾-7 % 磷酸氢二钠溶液、乙酸锌溶液和亚铁氰化钾溶液沉淀蛋白质,同时用三聚氰胺做加标回收,过滤后取滤液消化定氮。结果 三氯乙酸沉淀法计算非蛋白氮含量为0.2036%±0.0002%,相对标准偏差在四种方法中最小,为0.1023%,加标回收率为96.07±2.29%;丙酮沉淀法计算非蛋白氮含量为0.0981 %±0.0050 %,加标回收率在四种方法中最低,为50.56 %±7.90 %;乙酸铅沉淀法计算非蛋白氮含量为0.1372 %±0.0012 %,加标量为79.2mg三聚氰胺/10g样品时,乙酸铅沉淀法加标回收率比三氯乙酸沉淀法更稳定,为96.57%±1.07%;乙酸锌沉淀法计算非蛋白氮含量为0.3466 %±0.0100 %,加标回收率为86.81 %±2.87 %。结论 三氯乙酸沉淀法结果准确度和稳定性较其他三种方法更好,但受到加标量的影响。     

胶体金免疫层析法快速检测食品中的米酵菌酸

制备特异性识别米酵菌酸的单克隆抗体,并以胶体金标记用作示踪物,建立胶体金免疫层析快速检测方法。研究胶体金标记体系pH值、抗原、抗体质量浓度、离子强度、表面活性剂以及样品前处理方法等对胶体金层析卡性能的影响。结果表明:在最适条件下,所建立的胶体金免疫层析方法对米酵菌酸的定量检出限为1.2 μg/kg,线性范围1.8~7.2 μg/kg,定性检出限16.0 μg/kg。该方法特异性良好,与食品中常见的毒素无交叉反应,对银耳、木耳和米粉等样品的添加回收率在80.2%~101.2%之间,相对标准偏差小于6.4%,且结果与LC-MS/MS法一致。该方法具有准确、灵敏、简便、快速和低成本等特点,可以满足食品中米酵菌酸现场大批量筛查的需求。     

高效液相色谱法测定米面及制品中的过氧化苯甲酰与富马酸二甲酯

目的建立高效液相色谱法检测米面及制品中过氧化苯甲酰与富马酸二甲酯的分析方法。方法样品中的过氧化苯甲酰与富马酸二甲酯用50%甲醇水溶液为提取液,超声提取10min,静置3min,加20g/L FeSO4溶液与5%乙酸溶液各0.5 mL,振荡混匀后超声提取10 min, 10000 r/min离心3 min后取上清液过0.22μm水相微孔滤膜待测。对50 mg/L的过氧化苯甲酰与富马酸二甲酯混合标准溶液色谱峰进行光谱扫描,选择220nm作为高通量检测方法的测定波长。采用Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18(4.6 mm×150 mm, 5.0μm)色谱柱进行分离,以20mmol/L乙酸铵溶液:甲醇=70:30(V:V)为流动相,外标法定量。结果过氧化苯甲酰与富马酸二甲酯在0～100mg/L范围内,浓度与色谱峰面积的大小分别成正比例线性关系,过氧化苯甲酰线性方程为:Y=23.11X,相关系数为0.999;富马酸二甲酯线性方程为:Y=35.97X,相关系数为0.999。两者的方法检出限为0.40 mg/kg。在0.40、0.80、4.00 mg/kg水平进行加标回收试验与精密度试验,过氧化苯甲酰的回收率分别为85.0%、88.8%、94.0%,相对标准偏差分别为7.9%、6.7%、4.4%;富马酸二甲酯的回收率分别为82.5%、87.5%、94.5%,相对标准偏差分别为7.2%、7.1%、5.4%。结论该方法符合GB/T 27404-2008《实验室质量控制规范食品理化检测》的相应技术要求,方法准确稳定可靠,满足米面及制品中过氧化苯甲酰与富马酸二甲酯的高通量测定。