微小毛霉凝乳酶蛋白质工程改造研究

微小毛霉凝乳酶(MPC)是微生物凝乳酶的主要来源之一。本研究将微小毛霉凝乳酶基因克隆到表达载体pET30a中并转化宿主BL21(DE3),使微小毛霉凝乳酶蛋白在大肠杆菌中表达。通过易错PCR技术对MPC进行随机突变建库,从中筛选出两株具有优良蛋白特性的突变体,为蛋白质结构与功能研究以及菌种改造奠定基础。     

产碱性纤维素酶菌株WS-135的筛选及酶学性质研究

对实验室保藏菌种短小芽孢杆菌WS-135进行紫外诱变,筛选出产酶高的菌株A-5,酶活力为22.1 U·mL~(-1),较未诱变菌株提高2.37倍。以紫外诱变筛选菌株为出发菌株,进行硫酸二乙酯诱变,筛选得到一株酶活为28.9 U·mL~(-1)的菌株B-7,较未诱变菌株提高1.3倍。B-7菌株连续传代8次,酶活力保持稳定。研究其酶学特性,结果表明温度为35℃时酶的活性最好,在pH为7-10时,有较好的酶活性;在40℃,pH 9.0、10.0条件下酶活稳定,在常温下保藏8个月后,仍有80%的酶活力,表明该酶稳定性较好。     

枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶发酵条件的优化

选用玉米粉、豆饼粉、KH_2PO_4及Na_2HPO_4为基础配方,通过单因素实验对枯草芽孢杆菌发酵产中性蛋白酶的发酵培养基、培养条件、发酵条件进行优化。确定了优化的发酵培养基为:20g·L~(-1)甘油,30g·L~(-1)豆饼粉,2mmol·L~(-1)氯化钙,0.3g·L~(-1 )KH_2PO_4,4g·L~(-1 )Na_2HPO_4;优化的培养条件为:培养温度30℃,接种量5%。调控发酵培养基pH值7.0控制发酵,发酵24h酶活达到7 344U·mL~(-1)。进行流加甘油实验,培养温度30℃,发酵过程控制pH值7.0,调整转速和通风量控制溶氧30%～35%,接种量5%,经过30h发酵,酶活达到10 654U·mL~(-1),较未补料提高了45%。     

可逆抑制剂对发酵生产洗涤用蛋白酶的影响

在微生物发酵生产蛋白酶过程中添加可逆抑制剂,通过抑制发酵液中蛋白酶活性,减少蛋白酶自身水解,提高储存稳定性。结果表明,可逆抑制剂的最佳添加方式为在发酵过程中连续流加,流加量为抑制蛋白酶活性40%最佳,最佳条件下蛋白酶产量提高49.1%。抑制剂的添加,不影响蛋白酶的提取,提取时发酵液中的可逆抑制剂可以通过超滤法减少或者去除,在正常含抑制剂条件下,蛋白酶室温储存90 d,酶活仍保持100%。     

工程管理中应用计算机技术的探讨

针对于工程管理工作的系统性、复杂性特点,通过计算机技术的运用,可以有效的提高工程管理工作的效率.但是计算机技术在工程管理中的应用还有进一步改进的空间,本文就对于当前工程管理中应用计算机技术的相关问题进行了分析与探讨.     

工程造价算量软件开发的思路

结合学术界对自动算量研究的思路,根据工程图纸等特点,论述了算量软件开发应具备的思路,提出“阅图式”图形算量概念,并分析了“阅图式”图形算量软件开发的技术保障和有待研究的技术难点。     

水解毛桃果酒中花色素苷的β-葡萄糖苷酶酶学特性

花色素苷广泛存在于植物细胞中,是植物花和果实的主要呈色物质。毛桃果酒酿造过程中添加β-葡萄糖苷酶处理后,花色素苷被分解,提升了果酒品质和风味。选取果酒中花色素苷含量最大的矢车菊素-3-O-葡萄糖苷作为样品,对β-葡萄糖苷酶水解花色素苷的特性进行了研究。结果显示:β-葡萄糖苷酶水解花色素苷的最佳条件为35℃、pH4.0、最佳添加酶量为30 U/mL,Na~+及Fe~(3+)能促进反应进行,适当乙醇浓度对酶活有促进作用,β-葡萄糖苷酶水解花色素苷的米氏常数Km和Vmax分别为1.175 mg/L和0.221 mg/h·L。     

枯草芽孢杆菌产碱性果胶酶发酵条件的优化

通过单因素实验对枯草芽孢杆菌菌株发酵产碱性果胶酶的培养基组分及培养条件进行优化。利用单因素实验确定了产酶的最优培养基:30 g/L豆饼粉、35 g/L马铃薯淀粉、20 g/L果胶、2.775 g/L氯化钙、4.025 g/L硫酸锌、113.6 g/L Na 2HPO 4。同时对温度、接种量、发酵pH进行优化,得到最优发酵条件:温度35℃、接种量3%、发酵过程控制pH=7.4,在此基础上进行补料流加实验,补料配方为350 g/L葡萄糖、10 g/L果胶,补料控制总糖浓度为20 ug/mL,并调整转速和风量控制溶氧30%~40%,最终酶活达到6120 U/mL,较初始酶活1061 U/mL提高了4.77倍。     

“阅图式”钢筋混凝土梁图形算量数据模型探索

针对业界的二维等算量软件使用以及学术界对自动算量研究共同面临的问题，基于“阅图式”图形算量技术思想，分析了钢筋混凝土梁构造特征，提出了其数据结构模型并描述了识别算法，最后提出了有待研究的问题。     

“阅图式”图形算量计算方法探索

为了解决图形自动算量系统在实际使用中面临的"可信赖"问题、计算范围问题与图形算量软件操作门槛过高问题,提出并论述了"阅图式"图形算量技术。该技术具有直观可视、条理清晰、工程过程无需记忆、可修改、符合遵守造价员工作习惯、使用低门槛和适用范围宽以及便于校对审核等特点。描述了"阅图式"图形算量系统主要功能,给出了基于AutoCAD图形数据库预处理功能算法、CAD图元信息结构、轴线功能算法及其信息结构、墙体模块功能算法及其信息结构。实验结果表明,本方法有效可行、优于其他图形算量系统。最后提出诸如知识库的结构、计算规则设置等有待进一步探索的问题。