猪骨骼肌MyHC-Ⅱb基因上调表达的分子机制

哺乳动物骨骼肌由各种不同类型的肌纤维镶嵌而成,不同类型肌球蛋白重链的表达是造成不同类型肌纤维的主要原因.目前已知的肌球蛋白重链家族包含8种亚型,其中长白猪骨骼肌My HC-Ⅱb的表达量显著高于中国地方猪,然而造成这种差异的分子机制未见报道.本研究用荧光定量PCR证明了长白猪背最长肌中My HC-Ⅱb m RNA的表达量显著高于莱芜猪(P=0.013).删除实验结果表明,从转录起始位点上游-1024 bp删除到-187 bp之后,My HC-Ⅱb表达量显著下降,分析发现,在这段启动子区域内存在3个E-box序列;分别突变这3个E-box序列后,My HC-Ⅱb启动子驱动的荧光素酶活性显著下降(P=0.036).另外,在My HC-Ⅱb上游启动子区?1398 bp处发现一个GT的突变,所检测的64头莱芜猪在该位点全部为GG型,65头长白猪中13头为GG型,16头为TT型,36头为GT型.在C2C12细胞系中的转染实验结果显示,G突变为T之后有增加My HC-Ⅱb表达的趋势.Western blot的结果表明,转录因子Myo D在两猪种间表达差异不显著(P=0.136),而Myf-5在长白猪中的表达量极显著高于其在莱芜猪中的表达量(P=0.0036).这些数据表明,Myf-5是造成猪My HC-Ⅱb基因m RNA上调表达的重要因素之一.     

双光子及共聚焦激光扫描显微镜同时多参数观察三尖杉酯碱诱导的HL-60细胞凋亡

三尖杉酯碱(harringtonine,HT)是从中国海南粗榧(Cephalotaxus hainanensis Li)中提取的一种抗肿瘤药物,能诱导人早幼粒白血病HL-60细胞凋亡.应用双光子及共聚焦激光扫描显微镜,结合特异性荧光探针Hoechst 33342,四甲基罗丹明乙酯(TMRE)和Fluo 3-AM,同时观察了HT诱导HL-60细胞凋亡过程中细胞核、线粒体膜电势和细胞内钙浓度的变化,建立了一种在单细胞层次适时、无损伤、多参数观察活细胞的方法.     

人胚肺二倍体细胞株KMB17凋亡模型的建立

细胞凋亡作为生命的基本现象之一受到科学界的广泛重视（Ｌｉｎｄａ等,１９９８）,对其机理和应用的研究已渗透到生命科学的各个领域,成为当今生命科学领域的研究热点。特别是以动物细胞为培养基质的医药生物技术领域尤显重要。因为动物细胞培养技术是现代生物技术研究...     

Simultaneous multi-parameter observation of Harringtonine-treating HL-60 cells with both two-photon and confocal laser scanning microscopy

Harringtonine (HT), a kind of anticancer drug isolated from Chinese herb-Cephalotaxus hainanensis Li, can induce apoptosis in promyelocytic leukemia HL-60 cells. With both two-photon laser scanning microscopy and confocal laser scanning microscopy in combination with the fluorescent probe Hoechst 33342, tetramethyrhodamine ethyl ester (TMRE) and Fluo 3-AM, we simultaneously observed HT-induced changes in nuclear morphology, mitochondrial membrane potential and intracellular calcium concentration ([Ca2+]i) in HL-60 cells, and developed a real-time, sensitive and invasive method for simultaneous multi-parameter observation of drug- treating living cells at the level of single cell.     

诱导凋亡:脊髓灰质炎病毒致细胞病变的机制

用脊髓灰质炎病毒(Poliovirus)减毒活疫苗株(中Ⅲ-2)感染人二倍体胚肺成纤维细胞株(KMBl7)后,细胞形态变化分为两个阶段第一阶段是致CPE过程,导致形态学上特有的细胞圆缩、体积缩小等CPE特征,经光学显微镜、荧光显微镜、细胞流式仪、电子显微镜、DNA凝胶电泳分析,证明该疫苗株诱导的细胞病理改变具典型的凋亡特征细胞圆缩、细胞核浓缩破裂、核染色质凝缩后分布于核膜边缘、绝大部分细胞出现在凋亡区域、DNA断裂。表明脊髓灰质炎病毒诱导的CPE本质是一个诱导细胞凋亡过程;第二阶段是Poliovirus诱导细胞坏死。进一步提示有可能通过抑制细胞凋亡提高脊髓灰质炎减毒活疫苗的产量。     

Simultaneous multi-parameter observation of Harringtonine-treating HL-60 cells with both two-photon and confocal laser scanning microscopy

Harringtonine (HT), a kind of anticancer drug isolated from Chinese herb-Cephalotaxus hainanensis Li, can induce apoptosis in promyelocytic leukemia HL-60 cells. With both two-photon laser scanning microscopy and confocal laser scanning microscopy in combination with the fluorescent probe Hoechst 33342, tetramethyrhodamine ethyl ester (TMRE) and Fluo 3-AM, we simultaneously observed HT-induced changes in nuclear morphology, mitochondrial membrane potential and intracellular calcium concentration ([Ca²⁺]_i) in HL-60 cells, and developed a real-time, sensitive and invasive method for simultaneous multi-parameter observation of drugtreating living cells at the level of single cell.     

间质性肺疾病患者生活质量与肺功能和焦虑抑郁情绪的关系及其影响因素分析

摘要 目的：探讨间质性肺疾病（ILD）患者生活质量与肺功能和焦虑抑郁情绪的关系及其影响因素。方法：选取2019年3月至2020年10月期间我院收治的100例ILD患者。比较ILD患者与一般人群的圣乔治呼吸问卷（SGRQ）评分、肺功能指标[第1秒用力呼气容积（FEV₁）、用力肺活量（FVC）、肺总量（TLC）及一氧化碳弥散量（DLCo）];观察患者的医院焦虑抑郁量表（HADS）评分（该评分包括焦虑和抑郁评分两部分）;分析ILD患者的SGRQ评分与肺功能指标,焦虑、抑郁评分的相关性;单因素、多因素Logistic回归分析ILD患者生活质量的影响因素。结果：ILD患者的SGRQ各维度评分及总分均高于一般人群,FVC、FEV₁、TLC及DLCo均低于一般人群（P<0.05）;ILD患者焦虑评分和抑郁评分均较高;ILD患者SGRQ各维度评分均与FVC、FEV1、TLC和DLCo呈负相关（P<0.05）,均与焦虑评分和抑郁评分呈正相关（P<0.05）。单因素分析结果显示,不同年龄、是否吸烟、不同收入情况的ILD患者生活质量有差异（P<0.05）;多因素Logistic回归分析结果显示DLCo、FVC、焦虑和抑郁情绪是ILD患者生活质量的影响因素（P<0.05）,其中焦虑情绪对其生活质量的影响最为显著。结论：ILD患者的生活质量与肺功能和焦虑抑郁情绪有关,提示临床工作中可通过干预ILD患者肺功能和焦虑抑郁情绪以改善其生活质量。