一种无桥的水平板型凝胶电泳

凝胶电泳是研究核酸、蛋白质等生物大分子的一项重要技术,也是DNA的限制性核酸内切酶切割片段的分析、分离、纯化的一种不可缺少的方法。虽然垂直(管柱型及板型)凝胶电泳早已被广泛应用,但它不能用低浓度琼脂糖凝胶分离大分子DNA。水平板型凝胶     

线粒体基因组的研究——Ⅰ.猪肝线粒体基因组的限制性内切酶图谱

猪肝线粒体DNA 经限制性内切酶BamHI、BglI、EcoRI 和PstI 水解分别切成5、3、3和4个片段,对这些片段的分子量进行了测定.EcoRI 片段的顺序是以复制位移环(D-环)为基准通过部分水解产物的电泳和电镜分析确定的。BamHI、BglI 和PstI 的切割位点则根据双酶水解产物的分析,参照EcoRI 位点进行定位,从而得到了由15个片段组成的物理图谱。猪肝线粒体DNA 的分子量为10.40×10~6道尔顿,有15.76千碱基对。     

线粒体基因组的研究 Ⅰ.猪肝线粒体基因组的限制性内切酶图谱

猪肝线粒体DNA经限制性内切酶BamHI、BglI、EcoRI和PstI水解分别切成5、3、3和4个片段,对这些片段的分子量进行了测定。EcoRI片段的顺序是以复制位移环(D-环)为基准通过部分水解产物的电泳和电镜分析确定的。BamHI、BglI和PstI的切割位点则根据双酶水解产物的分析,参照EcoRI位点进行定位,从而得到了由15个片段组成的物理图谱。猪肝线粒体DNA的分子量为10.40×10~6道尔顿,有15.76千碱基对。     

哺乳类线粒体基因组

作为真核细胞的一种重要细胞器的线粒体含有独立的并自主复制和转录的DNA基因组。虽然线粒体蛋白质的大部分系核DNA编码,但有一小部分是线粒体DNA(mt DNA)编码,并由线粒体的蛋白质合成系统合成。线粒体蛋白质合成系统中的rRNA和tRNA也是mt DNA编码。mt DNA的复制、转录以及蛋白质合成系统均有其本身特点,既与非线粒体真核系统有所不同,又有别于原核细胞中者。因此,线粒体基因组的研究在生物学上有重要意义。此外,线粒体的起源和进化是许多生物学家所感兴趣的和长期争论的问题,而mt DNA的进化比较     

哺乳类线粒体基因组

作为真核细胞的一种重要细胞器的线粒体含有独立的并自主复制和转录的DNA基因组。虽然线粒体蛋白质的大部分系核DNA编码,但有一小部分是线粒体DNA(mt DNA)编码,并由线粒体的蛋白质合成系统合成。线粒体蛋白质合成系统中的rRNA和tRNA也是mt DNA编码。mt DNA的复制、转录以及蛋白质合成系统均有其本身特点,既与非线粒体真核系统有所不同,又有别于原核细胞中者。因此,线粒体基因组的研究在生物学上有重要意义。此外,线粒体的起源和进化是许多生物学家所感兴趣的和长期争论的问题,而mt DNA的进化比较     

限制性内切酶Bgl I与Pst I的提取和纯化

斯托氏变形杆菌印rovidencia stuartii）含 有一种限制性内切酶Pst I，其切割位点是 CTGCAG^[1]；球芽抱杆菌（Bacillus globiggi）含 有两种不同的限制性内切酶Bgl I和Bgl I,) Bgl I的识别位点是GCCNNNN}NGGC, Bgl II的识别位点是A杏GATCT^[1]。这些限制性内 切酶在DNA重组、基因的结构与功能的研究 中都是常用的工具酶。本文参照Greene等121的 方法分离和纯化了Bgl I和Pst I酶。在所采 用的球芽抱杆菌的菌株中，Bgl II的含量似乎 较少，未能得到较好结果。现简略报道如下。     

增强子与真核基因转录起始

许多真核基因的转录起始,除启动子外,还需要增强子。增强子是真核基因组中通过增强转录起始而参与基因表达调控的一类序列,近年不断发现于动物病毒和真核细胞中。对SV40增强子及SV40早区转录起始已经有比较深入的研究。本文综合近年研完进展,对增强子作用特点及结构特点等作概括介绍,并对其作用机理进行了讨论。