草生欧文氏菌中酪氨酸酚裂解酶的体外定向进化及结构模拟

以来源于草生欧文氏菌(Erwinia herbicola)的酪氨酸酚裂解酶(Eh-TPL)为目的基因,通过易错PCR定向进化技术构建突变体文库,利用高通量筛选方法获得了比酶活提高的突变体S20C和E202R,再通过定点突变得到突变体S20C/E202R/N161S。经摇瓶发酵培养发现,突变体S20C/E202R/N161S比野生型Eh-TPL的比酶活提高了30.61%;酶学性质研究结果表明,突变体S20C/E202R/N161S的最适温度仍为37℃,最适pH值从8.2升至8.5,热稳定性、pH稳定性均得到明显提高;结构模拟结果表明,突变体S20C/E202R/N161S的三维结构无明显变化,突变位点附近氢键和表面电势有所变化。体外定向进化技术能有效提高Eh-TPL的催化效率,对酶法生产L-酪氨酸具有重要应用价值。     

穿越局域网的信使

近来，小芯（我)连入了LAN（局域网)，经过一段时间摸索．小芯发现Windows(笔者是Win2000)提供一种服务甚是方便．比如你和小芯在一个LAN上．你想叫小芯一起去外面散步．那么你就可以直接打上信息(如:咱一快去散步好吗?)和打上小蕊的名字，“啪”回车键．小芯的机子上就立刻跳出一个信息框，上面写着你发来的信息。这种方法不需要用户名，也不需要密码，也不管对方正在做什么，信息将会出现在所有窗口和任务的最前面（他不想看都不行呀！）。甚是好用，呵呵！是不是你要摇头说：“呵！别大街耍大刀——骗人了，可能吗？”是不是可能，你看了本文就有答案了。     

基于MBD的零件工艺信息建模及系统开发

目前MBD的技术研究主要集中在工艺设计、标注标准化和虚拟装配等方面,对于如何创建有效的MBD工艺信息模型仍是亟待解决的问题。本文分析了基于MBD的零件工艺信息模型的组织结构和Solid Works如何表达与组织模型的非几何信息,提出一种基于MBD的零件工艺信息模型的建模方法,并运用Solid Works API函数和Visual Basic 6.0开发了基于MBD的零件工艺信息模型辅助设计系统。     

煤低温实验研究(Ⅰ) 氮气中煤热失重及物理性质研究

利用热天平和电镜研究六种煤在温度低于 5 0 0℃氮气流中加热的性质变化 .研究表明 :煤变质程度对其失重变化影响大 ;随升温速率的提高 ,煤颗粒的增大 ,热重 TG曲线向高温区移动 ;氮气流量对煤低温热失重没有影响 ;扫描电镜照片显示 ,神府煤在 30 7℃受热后棱角变得圆滑     

分子蒸馏法分离发酵液中的乳酸

以预处理后乳酸发酵液为对象,用分子蒸馏法来进行乳酸的分离提纯,在pH值为2、温度为80℃、进料速率为150～180 mL/h、真空度在20～80 Pa下得到了纯度为96%、耐热15 min的乳酸,同时分析了乳酸的其它几项指标并做了乳酸产品及标准品的质谱图对比。分析的指标中,完全达到GB 2023—80对乳酸的质量规定,并且乳酸产品与标准品的质谱图吻合很好。     

不对称气隙单相永磁无刷直流电动机定位转矩分析

利用电磁场仿真分析软件MagNet对样机的气隙磁场进行了仿真分析,在此基础上利用Maxwell应力张量法和虚位移法,对样机的定位转矩进行了定量分析计算。利用MagNet软件的两种计算定位转矩的方法,分别对样机的定位转矩进行了仿真计算。最后,对比分析了利用Maxwell应力张量法、虚位移法和MagNet软件计算样机定位转矩的结果。Maxwell应力张量法更适合所研究对象定位转矩的计算。     

基于亥姆霍兹方程最小二乘法的运动声源识别研究

为有效解决水下运动声源的噪声源识别问题,研究了基于移动框架技术（MFAH）和亥姆霍兹方程最小二乘法（HELS）的运动声源识别理论,建立了基于MFAH与HELS的组合声全息算法,并通过了水池实验验证。实验研究结果表明该组合算法能够对水下任意形状运动声源进行准确识别,能够获得较高的声源定位精度,并且适用的频率范围较宽;对于存在多个相干声源的复杂声场,仅要求阵列的全息测量面为重建面的1.3倍就能够较准确的识别定位噪声源,实现了用小测量面、快速识别定位运动噪声源,为进一步的工程应用提供了方便     

用固定化脂肪酶Candida sp．99-125由粗米糠油酶法合成脂肪酸甲酯

The non-edible crude rice bran oil was extracted from white rice bran, and then was catalyzed by immobilized lipase for biodiesel production in this study. The effects of water content, oil/methanol molar ratio, temperature, enzyme amount, solvent,number of methanol added times and two-step methanolysis by using Candida sp. 99-125 as catalyst were investigated. The optimal conditions for processing 1 g rice bran oil were: 0.2 g immobilized lipase, 2 ml n-hexane as solvent, 20% water based on the rice bran oil mass, temperature of 40 °C and two-step addition of methanol. As a result, the fatty acid methyl esters yield was 87.4%. The immobilized lipase was proved to be stable when it was used repeatedly for 7 cycles.     

黄色短杆菌ilvN基因定点突变和ilvBN、ilvC串联表达对L-缬氨酸产量的影响

由ilvBN、ilvC基因编码的乙酰羟酸合成酶（AHAS）和乙酰羟酸异构还原酶（AHAIR）是L-缬氨酸合成途径的两个关键酶。本实验以黄色短杆菌Brevibacterium flavum MD515为出发菌株,通过PCR技术扩增其ilvBN和ilvC基因,对调节亚基ilvN进行定点突变,获得抗反馈抑制突变型编码基因ilvBN^rC;然后将其插入穿梭表达载体pZ8-1中,构建串联表达质粒pZ8-1-ilvBN^rC并转化出发菌株,筛选获得工程菌株B.flavum MD515/pZ8-1-ilvBN^rC。摇瓶发酵该工程菌株L-缬氨酸产量达29.5 g·L^-1,较出发菌株提高27.7%,同时生长速度和生物量也比出发菌株有所提高,丙氨酸含量降低,L-亮氨酸及L-异亮氨酸含量提高。在30 L发酵罐连续补料发酵60 h后L-缬氨酸产量达61.7 g·L^-1,糖酸转化率为39.2%。菌株MD515/pZ8-1-ilvBN^rC发酵液透光率较出发菌株高且蛋白含量低,这些特性有利于发酵液后期的分离提取。     

基于MBD的零件质量特性自动识别与提取技术

质量特性的识别与提取通常通过IGES、STEP等中性文件或者重新构建三维模型并结合特征识别与公差匹配技术来提取并传递数据,在传递过程中会出现相关的质量特性信息、数据丢失、识别过程繁琐、提取时间长等问题。基于模型的定义(MBD)是一种新的产品数字化定义技术,为零件模型的MBD信息表达方式提供了全三维CAD环境下产品的完整信息,可以高效便捷地识别和提取产品质量特性信息。