乳腺癌发生模型MCF10各阶段细胞系中TIMP3基因启动子区甲基化分析

目的探讨抑癌基因TIMP3失活与乳腺癌发生和进展的关系。方法用甲基化特异性PCR技术和亚硫酸盐测序技术检测乳腺癌发生模型MCF10的增生细胞系MCF10A、癌前细胞系MCF10AT、导管内癌细胞系MCF10DCIS.com、浸润癌细胞系MCF10CA1a和转移癌细胞系MCF10CA1d、MCF10CA1h中TIMP3启动子区甲基化状态。结果甲基化特异性PCR分析显示,在上述各细胞系中,TIMP3启动子区均呈高度甲基化状态。亚硫酸盐测序显示,在上述各细胞系中,测序区内的68个CG位点几乎全部发生了甲基化,且甲基化累及了绝大部分等位基因。结论TIMP3基因启动子区甲基化在乳腺癌的发生和进展中起重要作用,可能成为早期诊断乳腺癌和判断乳腺癌预后的分子生物学标记。     

关于送检病理标本的几点建议

病理检查送检单作为一种反映患者基本情况的信息记录 ,是联系临床医师和病理医师的纽带。临床医师有责任有义务将病理检查送检单填好 ,并确保送检标本合乎检查要求 ,病理医师则需要更多的临床资料以便从整体上把握疾病的发生发展过程 ,这对疾病的诊断、防治及预后评估都具有重要的意义。下面就病理标本送检中常出现的几个问题 ,并结合本院实际 ,提出几点建议。1　固定应及时凡是需要送检的各种组织 ,除了有特殊要求 (如快速冷冻切片或药敏实验等 )外 ,都要首先固定。固定的目的在于尽量使组织和细胞保持与活体时相似的成分和形态 ,防止组织…     

抗桥粒斑蛋白Ⅱ单克隆抗体的研制及鉴定

本文用改良构椽酸－枸椽酸钠法，从新鲜牛鼻表皮制备的ＤｅｓｍｏＰｌａｋｉｎⅡ（ＤＰⅡ）免疫ＢＡＬＢ／Ｃ，小鼠，取其脾淋巴细胞在ＰＥＧ介导下与ＳＰ２／０细胞融合，经筛选、克隆化获得４株能稳定分泌ＤＰⅡＭＣＡｂ的杂交癌细胞系（分别命名为ＤＰｙ—１，２，３，４）。４株ＭｃＡｂ均为ⅠｇＧＩ，染色体数目为９３～１０５．免疫组化分析表明，４株ＤＰⅡＭｃＡｂ具有很高的上皮组织特异性和敏感性，并提示ＤＰⅡ可能不存在于甲状腺滤泡上皮组织中。腺上皮细胞胞浆内ＤＰⅡＭｃＡｂ免疫组化染色阳性，可能是腺上皮细胞胞浆内存在ＤＰⅡ相关抗原的结果。实验表明ＤＰⅡＭｃＡｂ既可用于冰冻切片，又可用于石蜡切片，为上皮源性肿瘤的病理诊断和发生机理研究提供了一种有用的探针．     

肝外胆管高分化腺癌临床研究

目的：分析肝外胆管高分化腺癌的临床病理特点。为该肿瘤的病理诊断提供依据。方法：例胆总管高分化腺癌,观察和分析其临床资料和病理变化。结果：2例肿瘤均沿管壁浸润,不形成突入腔内的肿块,癌性腺体呈巢状排列或单个散在,腺体周围出现癌性间质反应和典型的同心园状纤维化,细胞分化好,核分裂罕见,可见周围神经侵犯,结论：肝外胆管高分化腺癌易与腺瘤和正常腺体混淆,病理上应根据细胞的轻度异型性,腺体不规则,癌性间质反应及周围神经侵犯综合判断其恶性。     

桥粒斑蛋白II在肿瘤组织中的表达

桥粒斑蛋白ＩＩ（ＤＰＩＩ）是一种新的上皮和上皮性肿瘤标记物。我们应用针对石蜡切片的抗ＤＰＩＩ单抗和抗细胞角蛋白（ＣＫ）单抗对２ｌ７例肿瘤作了免疫组织化学ＡＢＣ法染色的研究，结果：在１６３例上皮性肿瘤和双向分化的肿瘤中，１４７例表达ＤＰＩＩ，占９０．７％，９２例表达ＣＫ，占５６．４％。ＣＫ阳性染色全部位于细胞浆内，ＤＰＩＩ阳性染色则同时分布在细胞交界面上和细胞浆中。其他５４例不含桥粒的肿瘤均无ＤＰＩＩ和ＣＫ表达。结果表明，ＤＰＩＩ单抗是有用的含桥粒肿瘤的免疫组化探针。因ＤＰＩＩ不存在于一切含桥粒肿瘤，故在鉴别上皮性肿瘤时，ＤＰＩＩ单抗尚需与其他上皮标记物的抗体合并使用。     

重组人Bcl-2腺病毒载体的构建与鉴定

目的　构建人bcl-2重组腺病毒载体。方法　通过酶切分析获得正向插入目的基因的真核表达载体pcDNA/bcl -2 ,然后将bcl -2定向克隆到腺病毒穿梭质粒pAdCMV中 ,通过体内同源重组 ,重组质粒与质粒pJM17共转染 2 93细胞 ,获得复制缺陷型重组腺病毒AdCMV/bcl -2 ,进行扩增、纯化。通过PCR检测病毒DNA ,空斑实验检测病毒滴度。结果　腺病毒穿梭质粒与pJM17体内同源重组后获得含目的基因的重组腺病毒 ,病毒滴度为 2 0× 10 1 0 pfu/ml。结论　基因重组腺病毒载体能成功获得高滴度含目的基因的腺病毒     

不同时程吗啡给药大鼠部分脑区超微病理变化观察

目的:观察不同时程吗啡依赖大鼠依赖相关脑区超微病理结构变化。方法:背部皮下递增注射吗啡建立不同时程吗啡依赖大鼠模型,应用透射电镜对吗啡依赖大鼠依赖相关脑区LC、中脑导水管周围灰质、黑质、豆状核、杏仁核、海马进行观察,并与空白对照组进行比较。结果:吗啡依赖大鼠依赖相关脑区部分神经细胞肿胀或固缩,神经毡灶性水肿,有髓神经纤维髓鞘分离,线粒体肿胀、畸形,内质网扩张,多聚核糖体解聚,轴突、树突灶性水肿,细胞器稀疏,突触小泡密集并向活性区聚集。空白对照组未见异常。结论:吗啡依赖大鼠依赖相关脑区神经细胞呈缺血、缺氧性及退行性改变。     

T细胞性淋巴瘤诊断中TCR基因重排检测的应用

目的：探讨T细胞受体( T cell receptors, TCR)基因重排检测对T细胞性淋巴瘤诊断的价值。方法收集T细胞性淋巴瘤30例和淋巴反应性增生组织30例,提取DNA,应用BIOMED-2引物系统中的56条引物进行PCR扩增,核酸分子异源双链凝胶电泳分析结果。结果30例T细胞性淋巴瘤标本中TCRβ、TCRγ、TCRδ的检出率分别为83．3%(25/30)、93．3%(28/30)、13．3%(4/30),三者联合检测的检出率为96．7%(29/30),30例淋巴反应性增生组织中均未检测出TCR基因重排。结论利用BIOMED-2引物系统检测TCR 基因重排可作为T细胞性淋巴瘤的辅助诊断工具。     

高血压患者外周血淋巴细胞中P53蛋白的表达

目的高血压、动脉粥样硬化、心肌肥大等心血管病大都是以细胞增生为主要特征的疾病，近年实验研究表明此过程与某些癌基因的表达紧密相关。方法本实验对５０例高血压患者及正常对照组用ＳＰ法测定其外周血涂片淋巴细胞中Ｐ５３蛋白的表达。结果发现高血压组阳性３５例（７０％），正常组阳性３７例（１４％）（Ｐ＜０．０１）。高血压组阳性细胞率为５９．９％±２４．４％显著高于正常组的２２．８％±１５．２％（Ｐ＜０．０１）。结论高血压患者存在Ｐ５３蛋白基因的突变。相关分析显示Ｐ５３蛋白阳性细胞率与室间隔厚度（ＩＶＳＴ）、左室后壁厚度（ＬＶＰＷＴ）呈正相关（ｒ值分别为０．４８、０．６６）。     

上皮性肿瘤标记物桥粒的提取

A simple method is reported for the isolation of desmosomes. The fresh noncornified layers of cow nose epidermis were immersed in 0.1 mol/L citric acid-sodium citrate buffer (pH 2.3, containing 0.5 mmol/L PMSF), and then treated with homogenization and discontinuous sucrose density gradient centrifugation. Desmosomes were located at the 50-56% sucrose interface. Electron microscopy revealed that the characteristic desmosome structure was well preserved, and that a few intermediate filament bundles attached to desmosome plaque were removed by the solubilizing action of the buffer. Approximate 100 mg desmosomes (dry weight) were got from 20g wet noncornified layers of epidermic tissue.