空肠弯曲菌pcDNA3.1(-)-peb1A诱导的T细胞活化增殖研究

目的探讨空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni,CJ)pcDNA3.1(-)-peb1A疫苗免疫昆明种小鼠后T细胞活化增殖状态。方法重组质粒CJ pcDNA3.1(-)-peb1A免疫昆明种小鼠后,取其脾淋巴细胞,应用ELISA法检测其膜表面分子CD3、CD4、CD8、CD25和CD28。结果检测结果显示:CD3检测,佐剂DNA组高于裸DNA组,在第10天有显著性差异(P<0.05);CD8检测,佐剂DNA组高于裸DNA组,在第10、20天均有显著性差异(P<0.05),裸DNA组也高于两对照组,但仅在第20天有显著性差异(P<0.05);CD25检测,裸DNA组高于NS组,但仅在第10天有显著性差异(P<0.05),佐剂DNA组高于裸DNA组,也仅在第20天有显著性差异(P<0.05);CD4及CD28检测,佐剂DNA组高于裸DNA组,在第10、20天均有显著性差异(P<0.05);在第10、20天各脾淋巴细胞膜表面分子检测,佐剂DNA组高于两对照组,有显著性差异(P<0.05)。结论 CJ pcDNA3.1(-)-peb1A疫苗能够有效地诱导T细胞活化增殖。     

结核分枝杆菌小分子热休克蛋白16.3蛋白的原核表达及功能检测

目的进行结核分枝杆菌小分子热休克蛋白MTB Hsp16.3原核表达载体的构建、表达、纯化并初步观察其生物学效应。方法提取临床H37Rv分离株基因组DNA,PCR扩增Hsp16.3基因,将其重组到原核表达载体Pet28a中,构建原核表达载体Pet28a-Hsp16.3,进行双酶切及测序鉴定。将测序正确的重组质粒转化至E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达后,对表达产物进行SDS-PAGE检测,同时通过镍柱纯化试剂盒纯化Hsp16.3,测定纯化后蛋白浓度,并进行Western blot法检测。将不同浓度纯化后蛋白作用小鼠腹腔巨噬细胞,实时定量PCR(qRT-PCR)检测巨噬细胞IL-10和IFN-γ的表达,同时设定空白对照组及阳性对照组。结果成功构建重组质粒Pet28a-Hsp16.3,并在E.coli BL21(DE3)中获得成功表达,通过镍柱纯化系统得到纯化Hsp16.3融合蛋白。qRT-PCR检测结果显示,不同浓度纯化后Hsp16.3蛋白作用小鼠腹腔巨噬细胞,可促进IFN-γ的产生而抑制IL-10的产生。结论成功克隆、表达和纯化了MTB Hsp16.3蛋白,Hsp16.3能促进小鼠腹腔巨噬细胞产生IFN-γ,抑制IL-10的产生。     

体内和体外两种方法制备甲型副伤寒特异性转移因子

目的 比较体内、体外两种方法制备的甲删副伤寒特异性转移因子的理化性质及特异免疫活性.方法 此采用体内、体外两种方法制备甲型副伤寒特异性转移因子,检测其理化性质及以攻击试验测定特异免疫活性.结果 两种方法制备的甲型剐伤寒特异性转移因子理化性质及特异免疫活性无统计学差异,均符合中国药典生物制品标准.结论 定制备的甲型副伤寒特异性转移因子具有抗原特异性,能够转移针对甲型副伤寒沙门菌的特异免疫效庇.体外法是制备特异转移因子的一种更为简便、经济、有效的方法.     

HLA与病毒感染性疾病关联性的研究进展

人类主要组织相容性复合体即HLA（Human major histocompatibility complexor Human leucocyte antigen）复合体，是迄今发现最具有多态性的基因群。全部基因的测序发表于1999年10月的Nature杂志。HLA基因产物与免疫应答，免疫调节密切相关，研究HLA系统是一门新兴的、正在迅速发展的学科，它在器官移植、疾病的关联、法医学、人类学等领域得到了广泛的应用。本文旨在对近年来有关HLA与病毒感染性疾病关联性的研究进展做一综述。     

可溶性血管细胞黏附分子-1及凝血因子Ⅶ与脑梗死的相关性研究

目的分析可溶性血管细胞黏附分子-1(soluble vascular cell adhesion molecule-1,sVCAM-1)与凝血因子Ⅶ(coagulation factorⅦ,FⅦ)与脑梗死发生、发展的相关性。方法分别采用双抗体夹心ABC-ELISA法和全自动血凝仪CA500的一阶段凝固法动态检测30例急性脑梗死患者血清sVCAM-1及血浆FⅦ:C水平,以26例脑动脉供血不足患者和30例健康老年人为对照组。结果血清sVCAM-1水平在脑梗死发生第1d显著高于脑供血不足对照组和正常人对照组(P<0.01),1~7d呈增高趋势,7~14d呈下降趋势。脑梗死体积越大,sVCAM-1水平越高(P<0.01)。脑梗死患者血浆FⅦ:C水平两对照组无统计学差异(P>0.05)。结论sVCAM-1与急性脑梗死密切相关,与脑梗死的发生、发展有一定的联系,可用作脑梗死病程进展的监测指标。FⅦ与急性脑梗死的发生及进程均无显著相关性。     

肾综合征出血热与HLA-DR基因多态性的关联

目的　探讨人类主要组织相容性复合体 -DR(HLA DR)基因多态性与肾综合征出血热 (HFRS)之间的关联性。方法　采用聚合酶链反应 -序列特异性引物 (PCR SSP)DNA分型技术对遵义地区汉族 3 9例HFRS患者和2 8例健康对照进行HLA DR基因分型。结果　HLA DRB3 基因频率在HFRS患者组较正常对照组明显增高 (RR =5 .0 4,χ2 =9 988,P <0 0 1) ;HLA DRB1 0 90 12基因频率较正常对照组明显降低 (RR =0 2 4,χ2 =7 2 16,P <0 0 1) ;其它等位基因频率在患者组与对照组间无显著性差异。结论　在遵义地区汉族人群中 ,肾综合征出血热可能与HLA DRB3 基因呈正相关 ,与HLA DRB1 0 90 12基因呈负相关     

HFRS疫苗接种后人血片特异性抗原的消长规律研究

以HFRS疫苗人工免疫健康个体，经免疫荧光技术检测，在人血片白细胞中可检出HFRS病毒特异性抗原。血片白细胞特异性抗原在初次免疫7d后，阳性率为100％，强阳性率为77.7％，再次免疫7d后，强阳性率高达88.8％，但当继续加强免疫后，抗原阳性率及强阳性率均下降。在检测血片白细胞中抗原的同时，检测血清中特异性抗体，结果初次免疫7d后，低滴度抗体阳性率为88.8％，强阳性率仅为22.2％。     

贵州籍人群EHF疫苗接种后抗体应答及细胞因子变化

目的探讨贵州籍人群对EHF疫苗抗体应答能力和免疫后细胞因子的变化。方法对60名贵州健康自愿者进行EHF双价灭活疫苗全程接种，共3次(第0、7、28天)，接种前及末次接种后2周用间接免疫荧光法(IFA)检测血清抗EHF抗体水平，效价≥1：640为高应答者；效价≤1：80为低应答者，ELISA法检测高低应答组人群血清TNF-α、IFN-γ。结果60名EHF疫苗接种者均对EHF疫苗产生免疫应答，汉族46人中19人(41％)为高应答者，5人(10％)为低应答者；侗族10人中5人(50％)为高应答者，3人(30％)为低应答者；布依族4人中1人为高应答者，1人为低应答者，疫苗接种后TNF-α、IFN-γ均有升高。结论60名。EHF疫苗接种者均对EHF疫苗产生免疫应答，其中汉族、侗族、布依族对EHF疫苗的抗体应答能力有所不同，同时诱导TNF-α、IFN-γ的分泌。     

医学免疫学理论课教学改革的探讨

现代免疫学是生命科学领域中发展较快的前沿学科之一。免疫学在生命科学中的重要性 ,免疫学技术的发展不仅为生命科学的研究提供了有用的手段 ,而且免疫学研究的对象对阐明生命过程的基本特征提供了十分有效的途径。近 30年来医学免疫学无论在理论和实验技术方面都取得了重要的发展 ,形成了基础免疫学和临床免疫学的结构框架 ,发展了免疫生物学、免疫化学、免疫病理、免疫药理、肿瘤免疫、移植免疫、免疫缺陷、神经免疫、生殖免疫等分支学科。1989年全国医学院校教材编审委员会决定新增编写《医学免疫学》 ,1990年起全国部分院校首批使用了…     

创伤患者早期血清可溶性E-选择素水平及其临床意义

目的：探讨血清可溶性E－选择素（sE-selectin简称血清sE-选择素）在创伤早期的变化及其临床意义。方法：应用双抗体夹心ELISA法分别检测30例创伤患者及20例健康人血清sE-选择素水平。结果：创伤早期血清sE-选择素水平明显高于正常对照（P＜0．01）；重症组血清sE-选择素水平明显高于轻症组（P＜0．01）。结论：初步研究表明血清sE-选择素水平在创伤后升高，并与创伤严重程度密切相关，检测血清sE-选择素水平对创伤病情判断有一定的参考价值。