16S rDNA相关技术在口腔细菌多态性研究中的应用

龋病、牙周病和粘膜病等多种口腔疾病都与口腔微生物相关,但致病菌种类尚不完全明确,可能仍存在未知的致病菌种[1]。在人类口腔中己检测出700多种细菌,其中有50%以上不能培养[2],可见用培养法研究多态性的局限性。因此,为口腔致病菌的研究寻找有效、快速、便捷的检测方法,有利于口腔疾病的研究。在细菌基因组中,编码16S     

人参三七川芎提取物对自然衰老大鼠血管外膜重构的干预机制

目的观察自然衰老大鼠血管外膜的重构特点,并探讨人参三七川芎提取物的干预作用。方法将85只20月龄的自然衰老Wistar大鼠按体重水平分层后随机分为衰老组、人参三七川芎醇提物低、中、高剂量组(下称中药低、中、高剂量组)及氯沙坦对照组(Losartan组),每组17只,另选14只2月龄青年Wistar大鼠作为青年组。中药高、中、低剂量组分别给予不同剂量的人参三七川芎醇提物[1493.4、746.7、373.4mg/(kg·d)]灌胃给药,Losartan组给予氯沙坦钾混悬液[10 mg/(kg·d)]灌胃,衰老组及青年组给予同体积蒸馏水灌胃,均每日1次。干预15周后,采用HE染色法观察各组大鼠胸主动脉壁形态;采用苦味酸天狼猩红染色法观测血管壁胶原种类、分布和含量;放射免疫分析法检测血浆肾素活性(plasma renin activity,PRA)、血浆血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)浓度及外膜组织AngⅡ含量;生物化学分析法检测外膜组织羟脯氨酸水平;实时荧光定量多聚酶链式反应(real-time PCR,RT-PCR)检测外膜组织血管紧张素Ⅱ1型受体(angiotensinⅡreceptor 1,AT_1R)、血管紧张素Ⅱ2型受体(angiotensinⅡreceptor 2,AT_2R)mRNA水平;Western blot法检测外膜组织AT_1R、AT_2R蛋白表达水平。结果与青年组比较,衰老组血管外膜增厚,外膜厚度/管径增高,胶原纤维堆积,Ⅰ型胶原面积增加,Ⅲ型胶原面积减少,Ⅲ型胶原/Ⅰ型胶原降低(P0.05),血浆PRA及AngⅡ降低(P0.01,P0.05),外膜组织AngⅡ及羟脯氨酸含量增高,AT_1R mRNA及蛋白表达下调,AT_2R mRNA及蛋白表达上调(P0.01,P0.05)。与衰老组比较,中药低、中、高剂量组均可改善衰老血管形态学改变;中药中、高剂量组及Losartan组外膜厚度/管径均减小,中药高剂量组及Losartan组Ⅰ型胶原面积减少,Ⅲ型胶原面积增加,Ⅲ型胶原/Ⅰ型胶原明显升高,血管外膜羟脯氨酸含量明显降低(P0.05,P0.01);中药中、高剂量及Losartan组外膜组织中AngⅡ水平降低(P0.01,P0.05);衰老组、中药各剂量组、Losartan组各组间PRA比较,差异无统计学意义(P0.05)。与衰老组比较,各治疗组AT_1R mRNA表达均增加(P0.01),中药中、高剂量组AT_2R mRNA表达亦增加(P0.05);中药高剂量组及Losartan组AT_1R蛋白表达升高(P0.01,P0.05);中药中、高剂量组AT_2R蛋白表达亦升高(P0.05)。结论衰老大鼠血管出现外膜重构,表现为外膜增厚,胶原堆积,Ⅰ型、Ⅲ型胶原比例紊乱等,其机制可能与局部肾素血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)激活有关;人参三七川芎提取物可能通过对外膜局部AngⅡ、AT_1R等多靶位的干预,改善外膜重构,进而延缓血管衰老。     

人参三七川芎提取物对衰老大鼠免疫器官及行为学的影响

目的:观察人参三七川芎提取物对老龄大鼠免疫器官功能及行为学的影响。方法:选取100只SD大鼠,饲养至18~19月龄,建立自然衰老大鼠模型。按体重水平分层后将成模大鼠随机分为5组,分别为衰老模型组、人参三七川芎中药低、中、高剂量组(2 305.64,1 152.82,576.41 mg·kg-1)和白藜芦醇组(50 mg·kg-1),另设2月龄SD大鼠做为青年对照组。干预3个月后,进行旷场实验,记录大鼠跨越方格总数和总行径距离,检测大鼠血清活性氧族(reactive oxygen species,ROS)含量,胸腺系数和脾脏系数。结果:与青年组大鼠比较,自然衰老组大鼠跨格总数减少(P0.01),总行径距离减少(P0.05),血清ROS含量增高(P0.01),胸腺系数和脾脏指数下降(均P0.01)。与衰老模型组比较,中药各组和白藜芦醇组大鼠的跨格次数和总行径距离均有增加(P0.05);血清活性氧族(ROS)含量降低(P0.05);中药高剂量组和白藜芦醇组可以增高大鼠的胸腺系数和脾脏系数(均P0.01),中药中剂量组可以增高大鼠的胸腺系数(P0.05)。结论:人参三七川芎提取物可以改善自然衰老大鼠精神迟缓状态,增强其空间探索性,同时能够提高免疫器官功能和降低血清活性氧含量。     

大学生宿舍人际交往问题的心理咨询一例

来访者周某是一名在校大学二年级学生,因为和同宿舍同学相处困难,感觉自己被孤立,出现焦虑烦躁情绪,心理测验结果显示来访者中度焦虑。其心理问题符合一般心理问题的诊断标准。咨询师运用合理情绪疗法进行干预,经过4次咨询,来访者的焦虑情绪得到缓解,与室友能友好相处。     

参龙宁心胶囊治疗冠心病心绞痛的疗效及对血小板的影响

目的探讨参龙宁心胶囊治疗冠心病心绞痛的疗效及对血小板的影响。方法以100例冠心病心绞痛患者为对象,分为对照组与观察组。比较两组疗效及血小板功能指标水平。结果观察组总有效率为96.00%(48/50),高于对照组82.00%(41/50)(P<0.05)。两组治疗后心绞痛发作次数、持续时间均降低,观察组降低程度高于对照组(P<0.05)。两组治疗后肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)水平均降低,观察组降低程度高于对照组(P<0.05)。两组治疗后CD42 b水平升高,PAC-1、CD63水平降低,观察组升高/降低程度高于对照组(P<0.05)。结论参龙宁心胶囊治疗冠心病心绞痛的疗效确切,可控制患者症状,抑制炎症因子的释放,调节血小板功能。     

急性冠脉综合征中西医研究概况

以急性冠脉综合征(ACS)的病理生理为切入点,系统概述了国内外近几年来有关中西医结合对ACS的研究现状,尤其是基于ACS不稳定斑块和炎症反应的病理生理机制,阐述了中医药干预ACS的优势,并对中医药干预治疗ACS提供研究思路.     

肛周脓肿急症患者应用中药仙方活命饮进行治疗的机制研究

目的探讨肛周脓肿急症患者应用中药仙方活命饮的治疗效果和应用价值。方法选择我院手术治疗的肛周脓肿急症患者78例,随机分为治疗组和对照组,每组各39例,对照组手术治疗,治疗组在对照组基础上口服仙方活命饮治疗,观察两组治疗情况。结果治疗组患者创面症状各项积分降低幅度优于对照组(P0.05)。治疗组患者术后疼痛评分、创面愈合时间均优于对照组(P0.05)。治疗组患者治疗后肿瘤坏死因子α和IL-6细胞因子下降幅度优于对照组(P0.05)。结论在手术治疗肛周脓肿急症患者基础上口服仙方活命饮疗效显著,可以减轻患者术后疼痛,缩短创面愈合时间,值得在临床上大力推广使用。     

牡荆素对CVB3诱导的病毒性心肌炎大鼠心肌损伤的保护作用及机制研究

目的：探究牡荆素（Vitexin）对大鼠心肌损伤的保护作用及机制。方法：选择Balb/c新生乳鼠腹腔注射柯萨奇病毒B3（Coxsackie virus B₃，CVB3）建立大鼠病毒性心肌炎模型，分别设置正常未感染组（对照组）、感染CVB3组（模型组）、CVB3+Vitexin（10 mg·kg^-1）组[简称Vitexin（10 mg·kg^-1）组]、CVB3+Vitexin（20 mg·kg^-1）组[简称Vitexin（20 mg·kg^-1）组]和CVB3+Vitexin（50 mg·kg^-1）组[简称Vitexin（50 mg·kg^-1）组]，连续腹腔注射给药1周。HE染色观察心肌细胞损伤水平，TUNEL染色检测肿瘤细胞凋亡。免疫组织化学法和酶联免疫吸附实验（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检测心肌炎标记分子和心肌损伤标记物。利用蛋白质免疫印迹（Western Blot）技术检测肿瘤凋亡及其下游靶基因等相关分子表达。结果：与对照组比较，模型组细胞受损严重，炎症因子、心肌损伤标志物及细胞凋亡因子显著升高（P<0.05），TGF-β1及TNF-α蛋白活性显著升高（P<0.05）。相较于模型组，Vitexin处理组心肌细胞形态正常，心肌纤维排列整齐；细胞凋亡显著减少；Vitexin处理组心肌炎症因子、心肌损伤标志物及细胞凋亡因子显著低于模型组（P<0.05）。TGF-β1及TNF-α蛋白活性显著降低（P<0.05）；并且Vitexin高剂量优于低剂量组。结论：Vitexin可以减少细胞凋亡，降低炎症因子水平来保护心肌炎症细胞受到CVB3病毒诱导的损伤；Vitexin可能是通过抑制TGF-β1及TNF-α蛋白活性来发挥影响。     

人参-三七-川芎提取物延缓高糖诱导的小鼠血管钙化的机制

目的:从小鼠颈总动脉、胸主动脉中骨桥蛋白(OPN)和平滑肌22α蛋白(SM22α)表达及血管钙盐沉积程度,探讨人参-三七-川芎提取物对高糖诱导的小鼠血管钙化的保护作用。方法:130只雄性C57BL/6小鼠先随机分为正常组和高糖组。高糖组腹腔注射链脲佐菌素(STZ)后,高脂饮食连续喂养7个月,之后再次随机分为模型组、人参-三七-川芎提取物低、高剂量组(0. 819,1. 638 g·kg~(-1))及二甲双胍组(150 mg·kg~(-1))。每组灌胃给药,每天1次,连续9周,并监测血糖变化。给药结束前7 d,购进一批4周龄雄性C57BL/6小鼠,正常喂养1周,作为青年组。全部给药结束后,收集小鼠颈总动脉和胸主动脉组织。分别采用冯库萨(Von Kossa)染色判断小鼠颈总动脉、胸主动脉钙盐沉积程度,免疫组化检测小鼠颈总动脉、胸主动脉中OPN与SM22α蛋白表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)测定小鼠颈总动脉中OPN与SM22α蛋白表达情况。结果:与青年组比较,正常组小鼠血糖升高无统计学差异,颈总动脉、胸主动脉结构染色均匀,未见黑色颗粒状沉淀;与正常组比较,模型组血糖显著升高(P 0. 01),血管中内膜弹性纤维内有大量棕黑色颗粒沉积,钙盐沉积程度明显;与模型组比较,各给药组血糖明显下降(P 0. 05,P 0. 01),血管钙盐沉积程度明显减轻。与青年组比较,正常组小鼠颈总动脉、胸主动脉中OPN蛋白和SM22α蛋白表达无显著改变;与正常组比较,模型组颈总动脉、胸主动脉中内膜OPN蛋白表达呈阳性,SM22α蛋白表达呈弱阳性,颈总动脉中OPN蛋白表达灰度值显著升高(P 0. 01),SM22α蛋白表达灰度值显著降低(P 0. 01);与模型组比较,各给药组颈总动脉、胸主动脉中内膜OPN蛋白和SM22α蛋白表达显著改善,颈总动脉中OPN蛋白表达灰度值明显降低(P 0. 05,P 0. 01),SM22α蛋白表达显著升高(P 0. 01)。结论:高糖能够诱导小鼠颈总动脉、胸主动脉钙化,加速血管老化,这一形成过程可能与OPN与SM22α表达有关。人参-三七-川芎提取物可通过调节OPN与SM22α表达,减轻血管钙化,延缓血管老化。     

人参-三七-川芎提取物对糖尿病小鼠心肌纤维化的保护作用

目的:从心肌纤维化程度及心肌组织中胶原蛋白Ⅰ型(CollagenⅠ),胶原蛋白Ⅲ型(CollagenⅢ)及转化生长因子β_1(TGF-β_1)蛋白表达,探讨人参-三七-川芎提取物(GNC)对糖尿病小鼠心肌纤维化的保护作用。方法:建立链脲佐菌素(STZ)联合高脂饲料诱导糖尿病小鼠模型,另设正常组,糖尿病小鼠按照随机数字表法分为模型组,GNC低、高剂量组(0. 819,1. 638 g·kg~(-1))及二甲双胍组(150 mg·kg~(-1))。各组均灌胃给药,正常组给与等剂量的去离子水,1次/d,连续9周。胶原纤维染色(Masson三色染色法)观察小鼠心肌间质纤维化程度,并用Image-pro plus 6. 0分析软件计算胶原密度比值;免疫组化检测小鼠心肌组织CollagenⅠ,CollagenⅢ及TGF-β_1蛋白表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠心肌组织内CollagenⅠ,CollagenⅢ和TGF-β_1的蛋白表达电泳及灰度值水平。结果:Masson实验结果显示,与正常组比较,模型组小鼠心肌细胞肥大、变形,心肌间质尤其是在微血管周围,有大量蓝染的胶原纤维沉积,相互连接交织成网状(P 0. 01);与模型组比较,GNC低、高剂量组和二甲双胍组小鼠心肌细胞排列紊乱明显改善,心肌间质蓝染的胶原纤维也较模型组明显减少(P 0. 05)。免疫组化和Western blot结果显示:与正常组比较,模型组小鼠心肌组织CollagenⅠ,CollagenⅢ和TGF-β_1阳性表达,蛋白表达含量明显升高(P 0. 05,P 0. 01);与模型组比较,各给药组蛋白阳性表达均降低,蛋白表达含量趋于正常(P 0. 05,P 0. 01)。结论:STZ联合高脂饲料能够诱导糖尿病小鼠心肌纤维化,诱导CollagenⅠ,CollagenⅢ和TGF-β_1蛋白高表达。人参-三七-川芎提取物可通过调节CollagenⅠ,CollagenⅢ和TGF-β_1蛋白表达,改善糖尿病小鼠心肌纤维化。