冰片对大鼠体内CYP2D诱导作用研究

冰片是传统中药,近年来许多文献报道冰片能提高其他药物的生物利用度,促进其他药物进入血脑屏障,因而冰片与其他药物合用可能产生的药物相互作用受到高度重视,但冰片对肝脏细胞色素P450酶的影响却鲜有报道。本文研究了雄性Wistar大鼠连续灌胃冰片一周对大鼠肝脏CYP2D表达与活性以及对CYP2D探针底物右美沙芬大鼠体内药代动力学的影响。结果表明,冰片(33、100和300 mg·kg-1·d-1)给药一周对大鼠肝脏CYP2D1 m RNA和蛋白表达无明显影响,但却显著诱导了CYP2D活性(P<0.05),分别达到1.71、1.97和2.89倍。此外,与对照组相比,冰片(300 mg·kg-1·d-1)预给药一周组右美沙芬的达峰浓度Cmax降低了10.6%(P>0.05),曲线下面积AUC0-∞减少了27.5%(P<0.01),清除率CL/F增大了41.1%(P<0.01),表观分布容积Vz/F增大了23.1%(P>0.05),表明冰片预给药一周能明显加速CYP2D探针底物右美沙芬的体内清除。由于冰片对大鼠肝脏CYP2D活性的诱导作用,提示当冰片与CYP2D底物药物共用时,可能存在发生代谢性相互作用的风险。     

人角质化细胞生长因子2基因克隆、表达及其产物的纯化和鉴定

背景:人角质化细胞生长因子2具有广泛的生理功能,在胚胎发育、组织的修复、神经的再生、血管的生成和肿瘤发展中具有重要作用。目的:克隆人角质化细胞生长因子2基因,于大肠杆菌中表达,并检测其生物学活性,为进一步开发提供实验依据。设计:开放性实验。单位:中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所。材料:实验于2000-09/2002-05在中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所病毒基因工程国家重点实验室完成。pBV220温控表达载体为病毒基因工程国家重点实验室构建,EcoRⅠ、BamHⅠ、T4DNA连接酶(Promega公司);人角质化细胞生长因子2特异性聚合酶链反应引物(上海博亚生物技术有限公司合成);肝素-SepharoseCL-6B(Pharmacia公司);快速聚合酶链反应产物纯化试剂盒、总RNA提取Trizol试剂盒、反转录-聚合酶链反应试剂盒(GIBCO公司);质粒DNA快速提取试剂盒(博大公司);BL-21-codonpluscompentcells(Stratagene公司)。方法:用高表达菌株BL-21-codonpluscompententcells表达重组人角质化细胞生长因子2蛋白并初步纯化和检测其活性。通过反转录-聚合酶链反应从自然流产胎儿肺组织中钓取人角质化细胞生长因子2cDNA,将其克隆入pBV220载体质粒。在大肠杆菌BL-21-codonpluscompentcells中表达人角质化细胞生长因子2蛋白。采用亲和层析和离子交换层析分离纯化,以细胞增殖实验测定表达蛋白的生物活性。主要观察指标:人角质化细胞生长因子2cDNA的片段长度和序列,人角质化细胞生长因子2基因在大肠杆菌中的表达,纯化人角质化细胞生长因子2的活性。结果:人角质化细胞生长因子2cDNA片段大小约500bp,人角质化细胞生长因子2蛋白在BL-21中得到高效表达,于上清中可溶性表达,SDS-PAGE显示相对分子质量约20000;人角质化细胞生长因子2蛋白对NIH3T3细胞具有显著的促有丝分裂活性,1,5,10μg/L人角质化细胞生长因子2A值(490nm)高于空白对照组,差异有非常显著性意义(分别为0.174±0.022,0.220±0.029,0.306±0.050,0.066±0.004,P<0.001)。结论:成功克隆人角质化细胞生长因子2基因,并于大肠杆菌BL-21中得到高效表达;纯化的人角质化细胞生长因子2蛋白能刺激NIH3T3细胞的增殖,具有显著的促有丝分裂活性。     

组织型纤溶酶原激活因子构建及其在人脐静脉内皮细胞的表达活性

背景：组织型纤溶酶原激活因子被认为是血管系统内初期血栓清除的关键酶。目的：构建pcDNA3．1（＋）组织型纤溶酶原激活因子真核表达载体转染人脐静脉内皮细胞，观察外源性组织型纤溶酶原激活因子的表达情况。设计：随机对照实验。单位：中南大学湘雅二医院及中国医学遗传学国家重点实验室。材料：实验于2002-09／2003-06在中国医学遗传学国家重点实验室完成。脐静脉内皮细胞取自中南大学湘雅二医院健康产妇分娩后胎盘脐带，pcDNA3．1为Smith Kline Beecham公司赠送。方法：构建真核表达载体pcDNA3．1（＋）组织型纤溶酶原激活因子，并将pcDNA3．1（＋）组织型纤溶酶原激活因子转入人脐静脉内皮细胞，用酶联免疫吸附法定量检测转基因后组织型纤溶酶原激活因子蛋白表达情况、发色底物法检测外源性组织型纤溶酶原激活因子活性。以转pcD-NA3．1（＋）组织型纤溶酶原激活因子基因人脐静脉内皮细胞为观察对象，未转pcDNA3．1（＋）组织型纤溶酶原激活因子基因人脐静脉内皮细胞作为对照。主要观察指标：组织型纤溶酶原激活因子蛋白定量及活性测定结果。结果：①组织型纤溶酶原激活因子蛋白定量表达结果为568．6ng／10。细胞／24h，未转pcDNA3．1（＋）组织型纤溶酶原激活因子的人脐静脉内皮细胞测得为17．8ng／10。细胞／24h。②组织型纤溶酶原激活因子活性为108．8IU／10。细胞／24h，未转pcDNA3．1（＋）组织型纤溶酶原激活因子的人脐静脉内皮细胞测得为5．6IU／105细胞／24h。结论：pcDNA3．1（＋）组织型纤溶酶原激活因子转染人脐静脉内皮细胞后，外源性组织型纤溶酶原激活因子基因获有效表达。为pcDNA3．1（＋）组织型纤溶酶原激活因子转入人体细胞确立了有效依据。     

双腔管冲洗外引流在脑室出血中的应用分析

随着人口老龄化，原发性脑室出血和继发性脑出血破入脑室的病例逐年增多，随着CT及MRI的普及应用，使该病的早期诊断率逐年提高，而以脑室系统大部或完全铸形的重度脑出血，临床上也不少见，此类患者过去治疗采用单侧脑室外引流，不能很快地排出脑室内积血，而且有时引流不畅，致使患者的致残率及死亡率很高。笔者收集广西医科大学一附院神经外科在2004年8月至2005年4月期问收治的病人24例，应用双腔管行双侧脑室穿刺及脑室内定时滴入尿激酶溶解血凝块，     

应用头孢哌酮后饮酒致双硫仑样反应11例临床报告

头孢哌酮(先锋必)系第三代头孢菌素，因其抗菌谱广、副作用少、疗效肯定，故在临床上应用广泛。但部分病人应用头孢哌酮后饮酒可出现双硫仑(disulfiram、又叫双硫仑、双硫醒)样反应。我们对应用头孢哌酮后饮酒致双硫仑样反应的11例患者进行了临床观察，现报告如下。     

非洛地平对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶的影响

目的:探讨钙通道阻断剂(CCB)非洛地平对载脂蛋白E基因敲除(apoEKO)小鼠动脉粥样硬化斑块及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸[NAD(P)H]氧化酶的影响。方法:apoEKO小鼠随机分为普通饮食组、高胆固醇饮食组、高胆固醇饮食加非洛地平组。无创血压系统测小鼠血压;内眦动脉取血检测血清TC和TG水平;冷冻切片光镜下定位主动脉根部,油红O染色评估斑块大小;实时定量PCR和Western blot方法检测主动脉中NAD(P)H氧化酶亚基p47phox和Rac-1表达。结果:高胆固醇饮食组小鼠血压没有明显变化,血脂明显升高(P<0.01),且斑块面积明显高于普食组(P<0.01);非洛地平可以明显减小斑块面积(P<0.01),同时还可以降低NAD(P)H氧化酶亚基p47phox和Rac-1表达(P<0.01)。结论:非洛地平可能通过阻断氧化应激反应抑制动脉粥样硬化发生发展。     

血液回收技术中应用钠钾镁钙葡萄糖注射液对肝肾功能和血气指标的影响

目的评价钠钾镁钙葡萄糖注射液应用于血液回收技术中对患者肝肾功能和血气指标的影响。方法选择需行血液回收的神经外科手术患者60例,男31例,女29例,年龄19～67岁,BMI 21～25 kg/m~2,ASAⅠ或Ⅱ级。随机分为钠钾镁钙葡萄糖注射液组(N组)和生理盐水组(C组),每组30例。N组肝素冲管液采用低分子肝素钠25 000 IU加入钠钾镁钙葡萄糖注射液500 ml中配置,洗涤液全部应用钠钾镁钙葡萄糖注射液;C组肝素冲管液采用低分子肝素钠25 000 IU加入生理盐水500 ml中配置,洗涤液全部应用生理盐水。于血液回收前(T_0)、自体血输注完毕后(T_1)、手术后6 h(T_2)采集血样,检测ALT、AST、血清总胆红素(TBIL)、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)等肝肾功能指标;血氧饱和度50%时的氧分压(P_(50))、pH、血浆HCO_3~-、乳酸(Lac)、电解质(K~+、Na~+、Cl~-、Ca~(2+))、血糖(Glu)浓度等血气指标。结果与T_0时比较,T_1时C组BUN、Scr、Lac、Na~+、Cl~-、Glu浓度明显升高(P0.05),P_(50)明显升高(P0.05),pH和血浆HCO_3~-浓度以及K~+、Ca~(2+)浓度明显降低(P0.05)。与T_1时比较,T_2时C组BUN、Scr、Lac、Na~+、Cl~-、Glu浓度明显升高(P0.05),P_(50)明显升高(P0.05),pH和血浆HCO_3~-浓度以及K~+、Ca~(2+)浓度明显降低(P0.05)。与N组比较,T_1和T_2时C组BUN、Scr、Lac、Na~+、Cl~-、Glu浓度明显升高(P0.05),P_(50)明显升高(P0.05),pH和血浆HCO_3~-浓度以及K~+、Ca~(2+)浓度明显降低(P0.05)。两组不同时点AST、ALT、TBIL浓度差异无统计学意义。结论在血液回收中应用钠钾镁钙葡萄糖注射液配置肝素冲管液和洗涤液有利于减轻红细胞的损伤,改善红细胞携氧能力,维持内环境稳定和酸碱平衡,有利于保护患者肾功能,但对肝功能无明显影响。     

中西医综合疗法治疗腰椎间盘突出症疗效观察

腰椎间盘突症是骨科的常见病和多发病，是由于腰椎间盘组织退变、损伤、劳损等原因导致纤维环部分或全部破裂，导致髓核从纤维环破裂口突出，压迫神经根或脊髓（马尾神经）而引起腰腿痛的一系列临床症状。     

锁定钢板治疗复杂粉碎性肱骨骨折16例体会

目的:探讨锁定钢板治疗复杂粉碎性肱骨骨折临床效果。方法:选择2010年5月-2011年5月收治的复杂粉碎性肱骨骨折患者16例,采用锁定钢板治疗,对其临床资料进行回顾性分析。结果:本组16例患者均行8～15个月的随访,平均12个月。患者均为肱骨头坏死、钢板断裂、骨不愈合或感染的情况发生,优12例,良3例,可1例,优良率为93.8%。结论:对复杂粉碎性肱骨骨折采用锁定钢板进行治疗,可减少对组织剥离的损伤,降低了术后并发症的发生率,术后早期可行功能锻炼,促进骨折愈合和术后康复,明显提高了临床效果,改善了患者生存质量。