掺锶聚磷酸钙的细胞相容性

摘要 背景：研究显示，以可降解生物陶瓷聚磷酸钙为基材，加入微量锶元素，通过调控材料结构如孔径、孔隙率等性能，可制备出有足够力学强度并可控降解的掺锶聚磷酸钙。 目的：观察成骨细胞与掺锶聚磷酸钙的细胞相容性。 方法：将兔成骨细胞与不同含锶质量分数(0~100%)的掺锶聚磷酸钙体外复合培养，进行形态学和功能测定。MTT法检测掺锶聚磷酸钙中成骨细胞的活力，并测定成骨细胞碱性磷酸酶活性。 结果与结论：在倒置显微镜、扫描电子显微镜和激光共聚焦显微镜下观察到成骨细胞在掺锶聚磷酸钙的表面和孔隙内大量黏附、增殖和生长，并且分泌细胞外基质及细胞表面的大量微绒毛，显示成骨细胞在掺锶聚磷酸钙材料上生长形态良好；同时通过MTT和碱性磷酸酶测定表明细胞功能良好，其中含锶1%掺锶聚磷酸钙细胞增殖活性及碱性磷酸酶活性最高，对成骨细胞无毒性，具有良好的细胞相容性。 关键词：掺锶聚磷酸钙；成骨细胞；锶；细胞相容性；生物材料 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.42.013     

纳米P(LLA-b-CL)与犬关节软骨细胞体外生物相容性实验研究

[目的] 研究具有纳米结构二嵌段共聚物左旋聚乳酸/聚已内酯(PLLA-b-PCL)与犬关节软骨细胞的体外生物相容性,探讨其作为软骨组织工程支架的可行性.[方法] 开环聚合制备PLLA-b-PCL,液-液相分离制备PLLA-b-PCL纳米支架,扫描电镜观察材料结构:分离培养犬膝关节软骨细胞,取第3代软骨细胞接种于PLLA-b-PCL膜进行复合二维培养,MTT法检测细胞毒性;通过倒置显微镜、Hoechst33342荧光法观察细胞的形态与粘附状况;另取第3代软骨细胞与纳米PLLA-b-PCL(实验组)、PLLA-b-PCL(对照组)支架材料上进行三维培养3周,扫描电镜观察软骨细胞的形态、粘附、生长状况,Hoechst33258荧光法检测复合物中细胞DNA含量、BCA法测定蛋白质含量.[结果] PLLA-b-PCL无细胞毒性,软骨细胞在纳米PLLA-b-PCL支架上粘附、增殖良好,随时间延长软骨细胞在支架材料上DNA和蛋白质含量逐渐增加,DNA和蛋白质含量均明显高于对照组(P<0.05).[结论] PLLA-b-PCL纳米支架能为软骨细胞的生长分化提供较好的环境,具有良好的生物相容性,有望成为一种较好的软骨组织工程支架材料.     

系统性红斑狼疮合并股骨头坏死行全髋关节置换术的特点及其并发症的防治

目的探讨全髋关节置换术（THA）治疗系统性红斑狼疮（SEE）合并股骨头缺血性坏死（ANFH）的临床特点、围手术期的处理、并发症的防治及早中期疗效。方法回顾性分析本组26例SLE合并中晚期ANFH行THA的患者,其中男1例,女25例,手术时年龄26—67岁,平均38．6岁;其中单髋置换11例,一期双髋置换15例。采用Harris评分和SF-36评分相结合的方法进行门诊随访。结果平均随访28个月,SF-36平均（67．2±6．9）分,Harris髋关节功能评分平均（91．6±5．4）分,优于术前的平均（42．6±9．3）分（t=4．73,P〈0．05）。X线显示假体位置均良好,无松动现象。共发生并发症4例,分别为1例关节脱位,1例大腿痛,1例股骨矩劈裂骨折,1例肾功能不全加重。结论THA能显著改善SLE合并中晚期ANFH患者的髋关节功能,提高生存质量。内外科医师密切合作制定围手术期的处理方案是提高疗效、预防并发症的关键。     

关节镜下同种异体跟腱骨一期重建膝关节前后交叉韧带

目的 评价关节镜下利用同种异体跟腱骨一期重建膝关节前后交叉韧带的疗效.方法 2000年7月至2005年2月收治15例患膝前后交叉韧带断裂但对侧膝关节完好者,在关节镜下先对合并存在的半月板损伤进行修复,然后使用2条同种异体跟腱骨一期重建前后交叉韧带.亚急性期或慢性期(>3周)重建12例,急性期(<3周)重建3例.手术前后采用IKDC和Lysholm评分系统对患膝关节功能进行评估,随访结果与对侧健康膝火节进行比较.结果 所有患者均获得36～40个月(平均38个月)随访.根据IKDC评分,术前所有患膝关节功能都严重异常,术后9例患膝功能改善为止常,5例接近正常,1例异常.Lysholm评分由术前平均(56±5)分改善为术后(90±4)分,差异有统汁学意义(t=15.660,P<0.05.结论同种异体跟腱骨可用于关节镜下重建膝关节前后交叉韧带,疗效满意.     

重组人白细胞介素1受体拮抗蛋白荧光质粒在软骨细胞的表达

背景：白细胞介素1受体拮抗蛋白能延缓骨性关节炎进程,通过转基因方法可以使白细胞介素1受体拮抗蛋白表达的增加。目的：观察重组人重组人白细胞介素1受体拮抗蛋白荧光质粒的构建及经脂质体转染软骨细胞的表达情况。方法：双酶切法切取重组人白细胞介素1受体拮抗蛋白的c-DNA片段,通过T4DNA连接酶连接到pEGFP-C1载体上。体外分离培养兔关节软骨细胞,然后用构建的重组人白细胞介素1受体拮抗蛋白质粒经脂质体转染软骨细胞,通过荧光显微镜观察转基因的表达和荧光定量PCR检测其表达。结果与结论：获得重组人pEGFP-C1-IL-1Ra真核表达载体质粒,酶切及测序结果证明表达质粒的DNA序列完全正确。荧光显微镜观察有绿色荧光蛋白表达,荧光定量PCR鉴定证实转染的软骨细胞基因得到表达。     

脊髓型颈椎病动物模型的初步建立

目的　建立脊髓型颈椎病动物模型。方法　 36只短毛豚鼠按处理方法不同随机分成 3组 ,A组 :在C4～C5或C5～C6 椎间盘后缘植入骨形态发生蛋白 (BMP)与聚乙烯吡咯烷酮 (PVP)复合制剂 ;B组 :在椎间盘后缘植入PVP ,C组系假手术组。分别于手术后 4、8、1 2周以斜板试验观察实验动物的运动功能 ,并按计划处死动物 ,对实验节段颈椎进行组织学观察。结果　A组术后 8周起出现运动功能减退 ;B组和C组动物术后各期运动功能无改变。组织学观察 ,A组术后 4周起出现椎体后缘骨质增生 ,占据椎管 ,并出现不同程度的脊髓受压变形和脱髓鞘、神经元脱失等改变 ;B、C组术后各期椎管形态、脊髓等无改变。结论　植入颈椎间盘后缘的BMP可诱导椎间盘及韧带组织骨化、椎体后缘骨质增生 ,并对颈脊髓造成恒定的慢性压迫 ,为开展脊髓型颈椎病的实验研究提供了重要的动物模型。     

Study on chondrogenic differentiation of canine mesenchymal stem cells induced by Type 2 recombinant adeno-associated viral mediated transfer of hTGF-β1

Objective To investigate the potential application of human transforming growth factor-beta-1 (hTGF-β1) gene mediated by type 2 recombinant adeno-associated virus (rAAV2) vector inducing chondrogenic differentiation of canine mesenchymal stem cells (MSCs) in vitro. Methods Canine MSCs from bone marrow were isolated and cultured in vitro by density gradient centrifngation and adherence screening methods. The morphology of MSCs was observed by inverted phase contrast microscope and Giemsa stain. Flow eytometry was used to detect surface antigens of MSCs, The third generation of MSCs were transfected by rAAV2-hTGF-β1 with or without MOI of 1 ×105 v.g./cell or 5×105 v.g./cell. The expression of hTGF-β1 was detected by Western blot after 10 days, and TGF-β1 synthesis was determined by ELISA at 3, 6 and 9 day, respectively. After 2 weeks of culturing, mRNA expressions of type Ⅱ collagen and aggrecan were determined by RT-PCR and the collagen Ⅱ protein was detected by immunocytochemistry. Results The MSCs appeared to be morphologically spindle-shaped and showed active capability of proliferation both in primary and passage generations. Flow cytometry analysis indicated that MSCs were universally positive for CD29, CD44 and CD105, but negative for CD34 and CD45. TGF-β1 expression can be observed by Western blot after 10 days in two transfection groups, MOI of 5 × 105 group and MOI of 1× 105 group. With the extension of time, the contents of hTGF-β1 increased in the two groups detected by ELISA, while there was a significant difference between them two (P < 0.01). After 2 weeks of transfection of MSCs by rAAV2-hTGF-β1, the expression of collagen Ⅱ and Aggreacan mRNAs were positive. It also showed positive of collagen Ⅱ detected by immunocytochemistry. Conclusion Canine MSCs show chondrogenesis differentiation after induction by Type 2 rAAV mediated transfer of TGF-β1 gene. The process is a potential application for cartilage tissue engineering.     

应用微创内固定系统治疗股骨Vancouver C型骨折

目的 分析采用有限切开复位微创内固定系统(LISS)固定治疗Vancouver C型股骨骨折的临床疗效. 方法 对2002年3月至2006年11月收治的8例Vancouver C型股骨骨折患者采用LISS治疗,其中男3例,女5例,骨折发生时平均年龄为67岁.骨折发生在髋关节置换术后8个月～5年,对这些患者进行临床评估. 结果 随访时间为8～38个月,平均17个月.8例骨折愈合时间平均为4.3个月,Harris评分平均83分(76～92分).所有患者没有使用同种异体骨条或自体骨植骨,无并发症出现. 结论 LISS钢板在治疗Vancouver C型股骨骨折时显示出相对于其他类型钢板的优势,尽可能保护了骨水泥壳,在此型骨折中锁钉显示出良好的固定能力,治疗效果良好.     

不同体位下肘关节镜常用入路与周围神经的解剖关系

目的 比较不同体位下各种肘关节镜入路与毗邻神经血管的解剖关系,评价肘关节镜操作中各种标准入路的安全性及应用价值.方法 选用新鲜尸体肘关节10个进行解剖,测量9种标准肘关节镜入路与毗邻神经血管的最近距离,并根据各入路下关节镜检的镜下视野及操作灵活性评价其应用价值. 结果肘关节镜人路与毗邻神经距离受注水膨胀关节、肘关节伸直或屈曲及前臂旋前或旋后体位变化影响.肘关节屈曲90°前臂旋后、中立、旋前位,前外侧入路关节镜套管与桡神经距离分别为(2.9±1.1)mm、(4.5±1.5)mm、(5.8 ±1.7)mm,穿刺造成神经损伤风险大;肘关节伸直前臂旋后位2例肘关节中套管与桡神经直接接触.近端前内侧或近端前外侧人路观察肘关节前间室、后正中人路观察后间室视野良好且穿刺风险小.后方入路均安全. 结论近端前内侧或近端前外侧入路优于前内侧或前外侧人路,与后正中入路结合应用可基本满足多数肘关节镜手术的要求,是一组安全、有效的人路点.     

高频超声在膝关节侧副韧带急性损伤中的应用价值

目的探讨高频超声在膝关节内、外侧副韧带急性损伤诊断中的价值。方法与核磁共振检查、临床表现及手术结果比较，分析31例35条膝关节侧副韧带不同类型损伤的声像图表现。结果31例患者（35条损伤的侧副韧带）的MRI和超声均诊断为侧副韧带损伤，其中超声诊断韧带挫伤的有27条，部分撕裂伤有5条，完全撕裂伤有3条；核磁共振诊断韧带挫伤有27条，部分撕裂伤有4条，完全撕裂伤有4条。结论超声是诊断膝关节侧副韧带急性损伤的一种简便、可靠的方法，对治疗方法的选择具有一定的指导作用。