基于僵住行为评价葛根素抗创伤后应激障碍的实验研究

目的使用不可逃避电足刺激建立创伤后应激障碍(PTSD)小鼠模型,观察葛根素对创伤后应激障碍(PTSD)模型小鼠的僵住行为影响。方法选择60只ICR小鼠为研究对象,将小鼠分为对照组、模型组、舍曲林组、葛根素组4组,给予模型组、舍曲林组、葛根素组小鼠PTSD造模,造模后均灌胃给药,观察4组第5天、第10天、第17天僵住时间百分比,并对数据作以分析统计。结果第5天舍曲林组无抗PTSD样效应,葛根素可有效逆转小鼠PTSD时间,第10天和第17天舍曲林组、葛根素组均可有效逆转小鼠PTSD时间(P <0.05)。结论葛根素对不可逃避电足刺激建立创伤后应激障碍(PTSD)模型僵住行为有明显抑制作用,具体机制有待进一步研究。     

葛根素降低糖尿病大鼠血清糖基化终产物水平和单核细胞趋化蛋白1含量

目的　研究葛根素对糖尿病大鼠糖基化终产物 (AGEs)水平和单核细胞趋化蛋白 1(MCP 1)表达的影响。方法　将大鼠随机分为正常对照组 (CON)、糖尿病组 (DM )、糖尿病氨基胍治疗组 (AG )和糖尿病葛根素治疗组 (PU )。腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病模型 ,检测血清中AGEs(荧光法 )和MCP 1(ELISA)水平 ;病理切片PAS染色及电镜观察肾组织的病理改变。免疫组化检测肾皮质MCP 1的蛋白表达水平。结果　DM组血清AGEs和MCP 1水平较PU组和AG组明显增高 (均P <0 .0 5 ) ;电镜发现两个治疗组的肾小球基底膜和心肌细胞病理改变程度比糖尿病组轻 ;肾小球内皮细胞和系膜区MCP 1免疫组化染色阳性细胞数明显比糖尿病组少。结论　葛根素能降低糖尿病大鼠血清AGEs和MCP 1水平 ,减少肾皮质中MCP 1的表达 ,减轻肾脏和心肌的病变程度     

葛根素对大鼠海马CA1区锥体细胞L-型钙通道的影响

目的观察不同浓度葛根素对大鼠海马CA1区锥体细胞L-型钙离子通道的作用。方法采用酶加机械分离法,急性分离出成年大鼠海马CA1区锥体细胞后,将含有锥体细胞的细胞悬液滴加于盖玻片上,待贴壁后选取符合实验条件的细胞,运用膜片钳单通道技术记录同一钳制电压下离子通道活动情况。结果低浓度葛根素(1.2mmol/L、2.4mmol/L)对L-型钙离子通道的活动无明显影响;浓度达到4.8mmol/L、9.6mmol/L时,L-型钙离子通道平均开放时间对照组由(11.77±4.84)ms缩短到(7.95±2.51)ms和(4.53±0.83)ms(P<0.05),浓度进一步增加到19.2mmol/L时,通道开放时间降至(3.042±0.792)ms。当葛根素达到一定浓度(4.8mmol/L,9.6mmol/L)时,通道开放概率对照组由(1.1×10-3±1.0×10-4)%降低到(5.3×10-4±1.8×10-4)%和(3.2×10-4±1.3×10-4)%,随着浓度的进一步增加(19.2mmol/L),开放概率降至(2.1×10-3±9.0×10-5)%。结论葛根素可以抑制单个大鼠海马CA1区锥体细胞L-型钙离子通道活动,减少通道开放时间,降低通道开放概率。     

前列地尔联合葛根素治疗后循环缺血疗效观察

目的观察前列地尔联合葛根素治疗后循环缺血的疗效。方法63例后循环缺血的患者随机分为前列地尔联合葛根素治疗组和单一药物对照组。治疗组给予前列地尔和葛根素治疗;对照一组单用前列地尔,对照二组单用葛根素,14d为一疗程。14d后评定疗效。结果治疗组总有效率90．9％,对照一组71．4％,对照二组70．O％。治疗组疗效高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论前列地尔联合葛根素治疗后循环缺血疗效可靠,可临床推广应用。     

玉液合剂质量标准研究

目的建立玉液合剂的质量标准。方法采用薄层色谱法鉴别处方中的粉葛、黄芪;采用高效液相色谱法测定粉葛中葛根素的含量,色谱柱为Hypersil C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(22∶78),流速1.0 mL/min,检测波长250 nm,柱温30℃。结果薄层色谱鉴别特征斑点明显。葛根素进样量在0.009 6~0.480 0μg范围内与峰面积有良好的线性关系,r=1.000 0;平均加样回收率为100.21%,RSD=1.03%(n=6)。结论所建立的薄层色谱鉴别和含量测定方法专属性强、重复性好,可用于玉液合剂的质量控制。     

反相高效液相色谱法测定护肝胶囊中葛根素含量

目的建立测定护肝胶囊中葛根素含量的反相高效液相色谱（RP-HPLC）法。方法采用Kroasil C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为水-甲醇（92∶8）,检测波长为245 nm,流速1.0 m L/min。结果葛根素进样质量浓度在0.112-2.24 g/L范围内与峰面积积分分值线性关系良好,平均加样回收率为96.18%,RSD=1.09%（n=6）。结论该方法简便、准确、重复性好,适于护肝胶囊的质量控制。     

主动脉阻断后经主动脉根部注射葛根素注射液对二尖瓣置换术患者心肌损伤的影响

目的：评价主动脉阻断后经主动脉根部注射葛根素注射液对二尖瓣置换术患者心肌损伤的影响。方法：拟行二尖瓣置换术患者60例,性别不限,年龄〈60岁,ASA分级Ⅱ或Ⅲ级,采用随机数字表法,将患者随机分为C组和P组,每组30例。在体外循环下,P组于阻断升主动脉后,立即经升主动脉根部注射葛根素注射液5mg/kg,随后灌注4℃高钾（K＋浓度22 mmol/L）含血心脏停搏液20 mL/kg;C组注射等容量生理盐水,随后灌注4℃高钾（K＋浓度22 mmol/L）含血心脏停搏液20 mL/kg,两组患者每30 min复灌不含葛根素的相同成分含血心脏停搏液10 mL/kg。分别于主动脉阻断前即刻（T1）、主动脉阻断后4 h（T2）和术后24 h（T3）时,采集中心静脉血样8 mL,测定血浆心肌肌钙蛋白I（cTnI）浓度、肌酸激酶（CK）和肌酸激酶同功酶（CK-MB）的活性。记录阻断升主动脉至心脏停搏所用时间、心脏自动复跳率、心脏复跳期间利多卡因使用剂量及术后2h多巴胺用量。结果：与C组比较,P组心脏复跳期间利多卡因用量和术后2 h多巴胺用量减少,两组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。与C组比较,P组T2~T3时血浆cTnI、CK和CK-MB的活性降低,两组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论：主动脉阻断后经主动脉根部注射葛根素注射液可减轻二尖瓣置换术患者心肌损伤。     

葛根素通过TLR4/NF-κB诱导结肠癌sw480细胞死亡的作用机制

目的探讨葛根素(puerarin,Pue)通过TLR4/NF-κB信号通路诱导结肠癌sw480细胞死亡的作用机制。方法结肠癌sw480细胞给予50μmol/L Pue培养24 h,48 h和72 h后,细胞计数CCK-8法检测结肠癌sw480细胞的存活率;TUNEL法检测结肠癌sw480细胞凋亡;Real-Time PCR法和Western blot法检测结肠癌sw480细胞中TLR4、NF-κB和Caspase 3的基因和蛋白表达水平。结果与对照组相比,葛根素组中sw480细胞存活率显著降低,细胞凋亡显著增加,差异有统计学意义(P0.05);与对照组相比,葛根素组中TLR4、NF-κB和Caspase 3 m RNA水平和蛋白表达含量均明显增加,差异有统计学意义(P0.05)。结论葛根素可以显著抑制结肠癌sw480细胞生长,诱导细胞凋亡的发生,且TLR4/NF-κB信号通路在此过程中起到重要作用。     

津力糖平片对照品溶液稳定性的研究

目的：探讨津力糖平片检验用葛根素对照品溶液的保存条件和有效期,规范中药检验对照品的管理。方法：按照《中华人民共和国药典：一部》中药的薄层色谱法对葛根素对照品溶液进行薄层成像实验,比较不同时间、不同保存条件下不同质量浓度对照品溶液的成像效果。结果：葛根素溶液最佳保存时间为配制后270d内,高浓度对照品溶液（10mg/ml）成像效果更好,常温和冷藏（2—8℃）保存对实验结果无影响。结论：本研究为中药对照品保存期限设定和标准化管理提供了一定依据,有利于减少葛根素对照品的损耗、节约药品检验成本。