BRAFV600E突变基因沉默可抑制甲状腺乳头状癌细胞增殖

目的 :通过RNA干扰技术使v-raf鼠类肉瘤滤过性病毒致癌基因同源体B1(v-raf murine sarcoma viral oncogene homolog B1,BRAF)的突变基因BRAFV600E表达沉默,探讨该基因沉默在甲状腺乳头状癌细胞体外增殖中的作用。方法:将携带靶向BRAFV600E基因的短发夹RNA(short hairpin RNA,sh RNA)的质粒载体(命名为BRAFV600E-sh RNA)转染甲状腺乳头状癌CGTHW3细胞株,然后采用半定量RT-PCR和蛋白质印迹法检测BRAFV600E-sh RNA转染对BRAFV600E突变基因表达的抑制作用,以及丝裂原细胞外激酶/细胞外信号调节激酶(mitogen extracellular kinase/extracellular signal-regulated kinase,MEK/ERK)信号通路相关蛋白表达水平的变化;采用MTT法检测BRAFV600E突变基因沉默后甲状腺乳头状癌细胞体外增殖能力的变化;采用FCM法检测细胞周期分布的变化。结果 :特异性BRAFV600E-sh RNA转染可明显抑制甲状腺乳头状癌细胞中BRAFV600E突变基因的m RNA和蛋白表达,且使MEK/ERK信号通路中Ras、磷酸化MEK(phospho-MEK,p-MEK)和p-ERK蛋白的表达量明显减少(P值均<0.05)。与未转染的空白对照组相比,BRAFV600E-sh RNA转染后72 h时CGTHW3细胞的增殖活性明显降低(P<0.05);转染组中G0/G1期细胞所占比例明显高于空白对照组,而S期细胞所占比例明显降低(P值均<0.05)。结论 :BRAFV600E突变基因沉默可能通过阻断MEK/ERK信号通路,有效抑制甲状腺乳头状癌细胞的体外增殖。     

双片法修补完全性房室隔缺损6例

1999年 4月～ 2 0 0 1年 4月笔者共收治 6例完全性房室隔缺损的患者。均采用双片法矫治畸形取得了良好的手术疗效 ,全组无一例手术死亡。现总结如下。1 　 对象与方法6例中 ,男 3例 ,女 3例 ;年龄 3～ 1 5岁。其中5例年龄 5岁。 5例有明显紫绀。心电图 :电轴左偏 3例 ,右偏 3例。Ⅰ度房室传导阻滞及左前半束支传导阻滞各 1例。胸部Ｘ线片示 ,均有不同程度肺充血 ,肺动脉段明显膨出 5例 ,平直 1例。均经彩色多普勒超声心动图检查确诊。 3例行右心导管检查。取胸部正中切口 ,常规建立体外循环 ,阻断升主动脉 ,主动脉根部灌注含血心脏停搏液 ,…     

经内镜氩离子凝固术治疗消化道息肉280例临床分析

目前,经内镜切除是治疗消化道息肉的首选方法,其方法主要有高频电凝切除法、激光及微波灼除法、氩离子凝固法（APC）等。我院主要采用APC进行息肉治疗。该方法具有非接触性,损伤小、痛苦少、花费低,安全性好等优点。我院2010年1月至2012年7月应用APC对280例消化道息肉病变患者进行治疗,取得良好的治疗效果。现分析总结如下。     

小鼠心肌内转基因后压力超负荷模型的建立

目的建立成年小鼠心肌内转基因后压力超负荷模型,探讨手术中关键性技术问题,为以后利用此模型研究相关心脏疾病提供可靠的实验方法。方法20只C57／BL6小鼠分成两组,分别是Lacz组和PBS组,用乙醚麻醉后,剪断右侧第一、二肋骨,打开胸腔,分离主动脉,用自制的弯钩在升主动脉下穿线,用带31G针头注射器从左心室部位进针,分别把携带Lacz基因的腺病毒载体100μl和PBS100μl注射入左心室,同时提起主动脉下的线暂时阻断主动脉血流5s、10 s、20 s、30 s后,关闭胸腔,饲养第2天,打开胸腔用26G的针头缩窄升主动脉70％,术后饲养1周,从右测颈动脉用27G针头穿刺测量血压后,取出心脏,用X-Gal染色,制成冰冻切片,显微镜下观察心脏的染色情况,用H-E染色观察心脏肥厚情况．以不缩窄升主动脉但做手术过程的假手术组做对照组。结果①术后1周成活率95％。②缩窄升主动脉的实验组比对照组的血压明显升高(P<0．05)。③H-E染色显示缩窄升主动脉1周后心室壁厚度增加。④肉眼和显微镜下都可以观察到同正常小鼠心脏比较,转染Lacz基因后阻断5 s或者更长时间主动脉血流的小鼠,心脏开始有蓝染,随时间延长颜色逐渐加深,但是阻断10 s、20 s和40 s主动脉血流的小鼠心脏蓝染无明显区别。结论①该方法简单有效,重复性好,可用来制作心肌内基因和心脏压力超负荷模型。②左心室心腔直接注射转染腺病毒携带的基因后,同时阻断升主动脉血流10 s以上可以使心脏基因有较好的表达,并且小鼠成活率高。     

小剂量顺铂对中晚期食管癌放疗增敏作用的近期疗效观察

目的:探讨小剂量顺铂同步放化疗对中晚期食道癌的放疗增敏作用。方法:将70例不宜手术的中晚期食道癌患者随机分为顺铂增敏放疗组35例和单纯放疗组35例,两组放射治疗方法相同,均采用常规设野,常规分割外照射,放疗增敏组在每日放疗的同时,采用小剂量顺铂静滴。结果:全组病例随访3年以上,放疗增敏组与对照组完全缓解率(CR)分别为(21/35)60%和(11/35)31.4%(P<0.05),两组1、2、3年生存率分别为71.4%、22.7%、10.6%和42.9%、8.6%、2.8%(P<0.05),放疗增敏组毒副反应可耐受。结论:小剂量顺铂作为增敏剂联合放疗治疗中晚期食道癌具有较好的疗效和较低的毒副反应。     

甘精胰岛素联合格列美脲治疗2型糖尿病60例分析

目的观察格列美脲联合甘精胰岛素治疗新诊断2型糖尿病的疗效。方法选择60例新诊断2型糖尿病患者,应用格列美脲联合甘精胰岛素治疗3个月,观察治疗前后血糖和糖化血红蛋白(HbA1c)指标。结果空腹血糖、餐后2h血糖及HbA1c均明显下降。结论格列美脲联合甘精胰岛素治疗能有效地控制新诊断2型糖尿病患者的血糖。     

多烯磷脂酰胆碱联合二甲双胍治疗非酒精性脂肪肝的临床观察

目的 探讨多烯磷脂酰胆碱联合二甲双胍治疗非酒精性脂肪肝的疗效.方法 将60例非酒精性脂肪肝患者按随机分为两组,治疗组和对照组分别30例.治疗组采用多烯磷脂酰胆碱联合二甲双胍治疗,对照组单用多烯磷脂酰胆碱治疗.观察两组患者治疗前后肝功能指标[丙氨酸转氨酶(AIT)、天冬氨酸转氨酶(AST)]、血脂指标[三酰甘油(TC)、总胆固醇(TC)]的变化及治疗后临床疗效等情况.两组治疗期间均不用其他保肝降酶和降血脂类药物.结果 治疗组肝功能、血脂各指标显著下降,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组、对照组总有效率分别为76.6%、63.3%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 多烯磷脂酰胆碱联合二甲双胍治疗非酒精性脂肪肝疗效显著.     

主动脉瓣成形术在继发性主动脉瓣脱垂治疗中的应用

目的总结主动脉瓣成形术治疗继发性主动脉瓣脱垂合并主动脉瓣关闭不全病例的临床经验和手术结果。方法对12例主动脉瓣脱垂患者行主动脉瓣成形术,同期处理合并病变,分析其手术方法及术后疗效。结果全组病例恢复良好,心功能均达到NYHAI-II级,瓣膜情况良好。结论瓣膜成形术对继发性单纯性的瓣叶／瓣尖脱垂病例是一种良好的手术方式,且近、中期疗效满意。     

骨髓间充质干细胞及其在软骨组织工程中的应用研究进展

由创伤及非创伤性病理损害如感染性关节炎以及类风湿性关节炎等所造成的关节软骨缺损是临床上常见的病症。由于软骨结构特殊（由Ⅱ型胶原交织形成的三维网状结构及内埋其中的软骨细胞和蛋白多糖所构成）。软骨组织内无血管,基质纤维网内的软骨细胞增生及迁移能力有限．使得软骨损伤后软骨自身修复的能力差。目前临床上尚无很好的方法来治疗软骨缺损。利用组织工程学方法所开展的基础和临床研究是近年来的研究热点之一。而优化种子细胞源是应用这一技术的前提和关键．而其中所应用的种子细胞主要包括自体软骨细胞和成体干细胞。