茶多酚乳膏治疗麻风顽固性溃疡疗效观察

麻风后遗症所致神经血管功能障碍性溃疡,是一种顽固性难治的皮肤顽症.目前临床上对溃疡这类疾病尚无理想的治疗药物,从天然中草药中寻找新型、安全、高效无毒的药物,是今后麻风病溃疡治疗的一个重要途径.鉴于此,笔者研发配制成6%的茶多酚乳膏剂.自2009年1～12月,对其治疗麻风病所致溃疡的疗效进行了临床观察,取得了较满意的疗效,现报道如下.     

猕猴B病毒gC蛋白特异性抗原表位的合成和表达

目的获得B病毒gC蛋白的特异性表位抗原。方法利用长片段基因合成的方法,合成B病毒C蛋白的特性抗原表位基因,将该基因连接到pMAL-5x载体,转化到BL21受体菌进行表达,并纯化表达产物。结果成功的获得了B病毒gC蛋白的特异性抗原蛋白,该蛋白以可溶的形式表达。结论利用原核表达系统,可以产生B病毒gC蛋白的可溶性抗原,可以作为B病毒的检测抗原。     

实验动物CAR杆菌16SrRNA基因PCR监测方法的建立

目的 建立CAR杆菌的PCR监测方法,筛查国内部分实验动物样本中CAR杆菌携带状况.方法 利用CAR杆菌的特有16SrRNA基因序列片段267bp设计引物,通过从日本实验动物中央研究所获取的CAR标准株DNA,建立实验动物CAR杆菌16SrRNA基因PCR监测方法.结果 利用建立的CAR杆菌16SrRNA基因PCR监测方法对国内455份实验动物样本进行筛查,未检出CAR杆菌感染.结论 建立了敏感性好,特异性高的实验动物CAR杆菌PCR监测方法,未见动物携带CAR杆菌.     

甘草黄酮中药祛斑膏对黄褐斑及炎症后色素的治疗

目的:观察自制甘草黄酮中药祛斑膏治疗黄褐斑及炎症后色素的疗效。方法:140例黄褐斑及炎症后色素患者,按照就诊顺序分两组,两组间年龄及病程无显著差异。(1)治疗组患者外用自制甘草黄酮中药祛斑膏日2次,3个月为1疗程;对照组患者外用氢醌乳膏日2次,3个月为1疗程。(2)两组患者的皮肤黑色素情况分别于治疗前和治疗后观察。结果:治疗组70例患者总有效率为94.28%;对照组70例患者总有效率为84.29%,相比较总有效率有显著性差异(χ~2=4.516,P0.05)。结论:自制甘草黄酮中药祛斑膏治疗黄褐斑及炎症后色素能显著改善,治疗总体疗效好,且未见明显不良反应,适于临床应用。     

人乳头瘤病毒基因工程疫苗的基础实验研究

人乳头瘤病毒(HPV)16型感染与宫颈癌的发生、发展密切相关,故研制HPW16型基因工程疫苗对预防HPV感染、控制宫颈癌的发生有重要意义。本研究构建HPV16 L1基因工程菌并进行了基础实验研究。首先采用PCR技术从3例宫颈癌组织中扩增和克隆了HPV16L1基因片段并进行测序。进而构建了pPIC3.5～HPV16L1真核表达工程菌、pQE31～HPV16L1和pGEX4T-HPV16LI原核表达工程菌及杆状病毒-昆虫细胞表达系统。经SDS-PAGE、Westem blot和电镜等手段证明了工程菌表达HPV16 L1蛋白的分子特性和免疫原性,而且,重组菌表达的HPV16 L1可以形成类病毒颗粒(VLP)。经免疫BALB/C小鼠可获得高效价特异血清,证实重组HPV16 L1蛋白具有良好的免疫原性。为进一步研制临床应用疫苗及血清学诊断试剂提供了实验基础。     

钩端螺旋体外膜脂蛋白LipL32的重组表达及纯化

目的：构建L32-pQE32重组质粒，诱导表达重组钩端螺旋体外膜脂蛋白LipL32，对重组蛋白进行纯化。方法：采用PCR法从钩端螺旋体DNA中获取编码LipL32的基因片段，构建重组克隆载体pGEM-T／L32和表达载体L32-pQE32，转化受体茵E.coli DH5α和E．coli M15，IPTG诱导表达重组LipL32蛋白。Ni-NTA亲和层析纯化重组LipL32蛋白。结果：扩增出约750bp的LipL32成熟蛋白基因，LipL32基因插入pQE32表达载体，表达产物6个组氨酸与LipL32蛋白的融合蛋白相对分子质量约为31000，与预期大小一致。Western印迹显示能与钩体抗血清特异结合。结论：LipL32蛋白能在大肠杆菌中表达，Ni-NTA亲和层析可有效纯化重组LipL32蛋白，重组LipL32蛋白具有结合活性。     

酒中杂醇油测定方法的改进

对二甲胺基苯甲醛比色法是测定杂醇油的经典方法 ,由于温差悬殊 ,容易爆管、鼓塞 ,我们改用 80℃水浴加热 2 0～30ｍｉｎ的处理方法 (称新法 ) ,实验部分参照《食品卫生理化检验标准手册》。1　实验部分1 1　仪器与试剂72 2型分光光度计 ;5ｇ/ｌ对二甲胺基苯甲醛硫酸溶液 ;无杂醇油乙醇 ;杂醇油标准溶液 1.0 0ｍｌ=1.0 0ｍｇ杂醇油 ,杂醇油标准使用液 1.0 0ｍｌ=0 .1ｍｇ杂醇油。1 2　操作取 0 .1ｍｇ/ｍｌ杂醇油标准应用液制备标准系列 ,分别置于10ｍｌ具塞比色管中 ;吸取 1.0ｍｌ样品于 10ｍｌ容量瓶中 ,加水至刻度 ,混匀后吸取 0 .3ｍｌ…     

RP-HPLC法测定痒疹颗粒中芍药苷和黄芩苷

痒疹颗粒由赤芍、黄芩、金银花、土茯苓等10味中药组成,为我院协定处方,其中赤芍和黄芩分别起到活血化瘀和清热解毒作用,具止痒之功效,在本院皮肤科应用多年,证实对痒疹等疾病有效。为更好地控制产品质量,本实验建立了HPLC同时测定痒疹颗粒中芍药苷和黄芩苷的方法。经方法学考察证实该方法特异性高,回收率和精密度好,测定方法可行,完全满足质控要求。1材料Waters高效液相色谱仪,Waters1525型HPLC泵,Waters2487UV检测器,Breeze色谱工作站。痒疹颗粒(大连市皮肤病医院制剂室);芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所,批号110736—200320);…     

人乳头瘤病毒基因工程疫苗的基础实验研究

人乳头瘤病毒(HPV)16型感染与宫颈癌的发生、发展密切相关，故研制HPV16型基因工程疫苗对预防HPV感染、控制宫颈癌的发生有重要意义。本研究构建HPV16L1基因工程菌并进行了基础实验研究。首先采用PCR技术从3例宫颈癌组织中扩增和克隆了HPV161基因片段并进行测序。进而构建了pPlC3．5-HPV16L1真核表达工程菌、pQE31-HPV16L1和pGEX4T—HPV16L1原核表达工程菌及杆状病毒一昆虫细胞表达系统。经SDS—PAGE、Western blot和电镜等手段证明了工程菌表达HPV16 L1蛋白的分子特性和免疫原性，而且，重组菌表达的HPV16 L1可以形成类病毒颗粒(VIP)。经免疫BALB／C小鼠可获得高效价特异血清，证实重组HPV16 L1蛋白具有良好的免疫原性。为进一步研制临床应用疫苗及血清学诊断试剂提供了实验基础。