实验动物微生物、寄生虫抽样调查及分析

目的 监控实验动物微生物、寄生虫质量.方法 细菌检测:常规培养、生化鉴定,免疫荧光试验(IFA)查抗体.病毒检测:酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫酶试验(IEA)、免疫荧光试验(IFA)、血凝试验(HA)、血凝抑制试验(HAI)方法检测抗体.真菌检测:常规培养、镜检.寄生虫检测:涂片镜检、间接血凝试验(IHA)方法查抗体.结果 五年来,SPF级动物检出了绿脓杆菌、嗜肺巴斯德菌、金黄色葡萄球菌、鞭毛虫,另外,泰泽病原体、小鼠细小病毒(MVM),小鼠仙台病毒(M-SC)抗体阳性.清洁级动物检出了蠕虫,且泰泽病原体、大鼠仙台病毒(R-SC)、小鼠仙台病毒(M-SV)、小鼠肝炎病毒(MHV)抗体阳性.普通级动物检出了志贺菌、皮肤病原真菌、体外寄生虫、弓形虫,同时检出兔出血症病毒(RHDV)、犬细小病毒(CPV)、犬瘟热病毒(CDV)、犬肝炎病毒(ICHV)未达抗体保护效价,犬布鲁杆菌、猕猴疱疹病毒Ⅰ型(BV)抗体阳性.不同生产企业动物质量差异很大,有的动物合格率达100%,有的则同一动物有多种病原感染.结论 实验动物微生物、寄生虫质量控制有待加强.     

清洁级SD大鼠血液生理生化指标的测定

目的建立清洁级SD大鼠血液生理生化参考值。方法应用动物芯片血球计数仪测试常规血细胞计数;采用全自动生化测定仪对清洁级SD大鼠的血液28项生化指标进行测定,并进行统计分析雌雄差异显著性检验。结果建立了清洁级SD大鼠血液生理和28项血液生化参考值,ALB、AST/ALT、AG雌雄之间差异显著;血液血球计数雌雄差异不显著。结论比较详细的建立了清洁级SD大鼠的血液生理生化指标参考值,为其应用提供基础数据。     

卵巢癌p14ARF、mdm2蛋白表达及临床意义

目的 探讨p14ARF和mdm2与卵巢癌的发生、发展的关系及其临床意义.方法 采用免疫组化S-P法检测69例卵巢癌、16例卵巢交界性肿瘤及34例卵巢良性肿瘤组织中p14ARF、mdm2的表达水平.结果 在卵巢癌、卵巢交界性肿瘤和良性卵巢肿瘤中,p14ARF的表达阳性率分别为52.2%(36/69)、68.8%(11/16)和85.3%(29/34);mdm2的表达阳性率分别为46.4%(32/69)、31.3%(5/16)和20.6%(7/34).3组中p14ARF表达的阳性率有统计学意义(P＜0.05),mdm2表达的阳性率无统计学意义(P＞0.05).结论 p14ARF的低表达可能与卵巢癌的发生、发展有关.     

肿瘤抑素抗血管活性相关肽对宫颈癌Hela细胞生长和转移抑制作用的实验研究

目的研究改造后的血管生成抑制相关肽（21肽）抗血管生成活性及对人宫颈癌Hela细胞皮下移植裸鼠模型的抑制作用,探讨其抑瘤作用机制。方法2005年8月至2006年2月哈尔滨医科大学第一临床医学院进行Hela细胞株皮下接种裸鼠造模,21肽治疗3周后,处死动物剥离肿瘤,称重并计算抑瘤率。免疫组化方法检测21肽对肿瘤组织的微血管密度（MVD）、增殖细胞核抗原（PCNA）和血管内皮生长因子（VEGF）的影响。结果21肽组平均抑瘤率可达51.89%,肿瘤组织微血管密度明显降低,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;21肽组肿瘤组织的PCNA、VEGF呈低表达,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论21肽具有显著的抗血管生成活性,可明显地抑制裸鼠宫颈癌细胞的生长,其抑制宫颈癌的作用机制可能与其降低新生血管形成和调解血管生成相关因子的表达有关。     

小鼠IL-12基因转染对人卵巢癌Skov3细胞的生长及细胞因子的表达

目的:观察含小鼠IL-12全长基因的质粒转染到Skov3人卵巢癌细胞中,在脾细胞存在的情况下对肿瘤细胞的影响及相关细胞因子的表达. 方法:脂质体转染技术将基因转染至Skov3人卵巢癌细胞中,ELISA方法检测IL-12及INF-γ的表达,MTT方法检测对Skov3卵巢癌细胞增殖的影响. 结果:转染后48 h检测到IL-12的高表达,约(473±38) ng/L;而未转染组约13～17 ng/L,两者比较差异有统计学意义(P＜0.05). 在脾细胞作用下产生INF-γ,以作用后24 h表达量高,约(173±18) ng/L,较未转染组高,比较有统计学意义(P＜0.05). 转染后癌细胞免疫组化可见IL-12表达,在脾细胞的作用下,IL-12对Skov3卵巢癌细胞有抑制其增殖的作用(P＜0.05). 结论:可以将IL-12基因转染至Skov3人卵巢癌细胞中并表达IL-12,脾细胞检测其活性并有相应的细胞因子产生,对Skov3细胞有抑制其增殖作用,从而杀伤卵巢癌细胞,具有抗肿瘤作用.     

Endostatin抑制人卵巢癌细胞生长及其在裸鼠皮下移植瘤中的作用

0 引言我们采用人浆液性乳头状囊腺癌SKOV3细胞系及其荷瘤鼠为研究对象,研究Endostatin对其增殖、凋亡的影响及作用机制,为其应用于卵巢癌的临床治疗提供试验依据.     

用光敏生物素标记的HPV6，11，16，18四型探针检测宫颈癌组织中的HPV核酸序列

本文运用分子生物学方法，制备了光敏生物素标记的人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）６，１１，１６，１８四型探针。用原位杂交法检测了经临床诊断及病理证实为宫颈癌组织申的ＨＰＶＤＮＡ相关序列。在３３例宫颈癌组织中，有６例呈ＨＰＶ６阳性，阳性率为１８．１％；７例呈ＨＰＶ１１阳性，阳性率为２１．２％；２２例呈ＨＰＶ１６阳性，阳性年为６６．７％，１８例呈ＨＰＶ１８阳性，阳性率为５４．５％；１０例正常宫颈组织呈阴性。提示黑龙江地区宫颈癌的发生与ＨＰＶ有关，尤其是与ＨＰＶ１６，１８两型感染关系密切．特别是ＨＰＶ１８型感染率在本组中占有很高的比例。     

上皮性卵巢肿瘤细胞外基质的表达及意义

目的 :探讨上皮性卵巢肿瘤细胞外基质重要成分纤连蛋白、层粘蛋白和IV型胶原蛋白成分表达及改变的意义。方法 :采用免疫组化S P法分别研究在良性卵巢上皮瘤、交界性卵巢上皮瘤及上皮性卵巢癌中纤连蛋白、层粘蛋白和IV型胶原蛋白的表达。结果 :1.良性卵巢上皮瘤、交界性卵巢上皮瘤及上皮性卵巢癌中 ,这 3种成分表达呈由高向低的趋势 ,呈连续线形、间断线形、碎片状及缺失表达 (P <0 .0 5 ) ;2 .上皮性卵巢癌纤连蛋白、层粘蛋白和IV型胶原蛋白表达与临床分期、病理分级、转移及预后有关 (P <0 .0 5 ) ,三者表达与病理类型无关 (P >0 .0 5 ) ;3.上皮性卵巢癌中纤连蛋白、层粘蛋白和IV型胶原蛋白表达呈一致性 (P <0 .0 5 )。结论 :纤连蛋白、层粘蛋白和IV型胶原蛋白的改变与上皮性卵巢癌的病理分级、临床分期、转移和预后有关 ,三者对肿瘤细胞均有屏障作用 ,其阳性表达减低或缺失表达表明基膜受损严重 ,预后差 ,可作为判断预后的指标之一。     

YH-16对宫颈癌细胞及其裸鼠移植瘤抑制作用研究

目的探讨YH-16（重组内皮抑素）对宫颈癌Hela细胞及其荷瘤鼠生长抑制作用。方法用MTT法检测细胞生长;用透射电镜观察细胞凋亡、流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期;将Hela细胞移植至裸鼠皮下,观察不同浓度YH-16（0、0.4、0.75和1.5mg/kg）对荷瘤鼠皮下移植瘤生长的影响;TUNEL法观察肿瘤细胞的凋亡;免疫组化方法检测裸鼠移植瘤组织中肿瘤微血管密度（MVD）。结果YH-16抑制Hela细胞增殖（P〈0.01）;能诱导Hela细胞凋亡。YH-16能抑制裸鼠皮下移植瘤的生长（P〈0.05）;YH-1615mg/kg组的肿瘤MVD计数较对照组和其他治疗组明显降低（P〈0.05）。结论YH-16具有抑制宫颈癌Hela细胞及其皮下移植瘤生长的作用。     

VEGF和MMP-10在上皮性卵巢癌中表达及意义

[目的]研究VEGF和MMP-10在上皮性卵巢癌发生、发展中的作用及意义。[方法]采用免疫组化技术对73例上皮性卵巢癌、20例交界瘤和30例良性瘤组织进行VEGF、MMP-10表达的分析。[结果]VEGF和MMP-10在上皮性卵巢癌、交界瘤和良性瘤之间的表达差异有极显著性。VEGF和MMP-10的表达与上皮性卵巢癌的临床分期、病理分级、有无腹水均有显著性差异。VEGF的表达与预后相关;而MMP-10表达与预后无关。[结论]在上皮性卵巢癌的转移过程中,肿瘤恶性侵袭与新生血管形成存在一定的相关性。VEGF可以作为评定预后的指标。