2003-2013年哈尔滨市医疗机构预防性消毒质量监测结果分析

目的通过对哈尔滨市医疗机构消毒质量监测结果的分析,探讨存在的问题及对策,有效预防和控制医院感染的发生。方法于2003-2013年对哈尔滨市334家医疗机构重点环境的空气、物体表面、医护人员手等样品和压力蒸汽灭菌器、紫外线灯等消毒灭菌器械进行消毒灭菌质量和性能监测,并对监测结果进行统计学分析。结果共监测样品5358份,检测合格4697份,总合格率为87.66%,其中2003年合格率最高,为95.57%,2008年合格率最低,为84.25%。不同级别医疗机构监测合格率由高到低分别为三级（89.33%）、二级（85.75%）、一级（83.75%）,一级以下（77.66%）。哈尔滨市八个区平均合格率为88.12%,十个县平均合格率为82.63%。所检样品中使用中消毒剂微生物检测合格率最高为98.93%、污水余氯合格率最低为60.00%。结论医疗机构消毒质量主要与消毒灭菌意识、专业的人才、规范的管理、设备药械的保障密切相关。     

流感病毒RNA聚合酶的结构和功能研究进展

流行性感冒病毒(influenzavirus) ,简称流感病毒,是引起流行性感冒(简称流感)的病原体。在2 0世纪人类遭受了4次流感大流行,致使数千万人失去了生命[1] 。近几年来禽流感等跨越种属障碍给人类健康和安全带来了更大的威胁,使人们清楚地认识到加强和完善对流感这类经呼吸道传播并有可能来源于动物的传染性疾病的预防、控制和治疗具有重大科学意义和实际应用价值[2 ] 。流感病毒表面抗原容易变异的特性导致使用疫苗预防流感效果欠佳[3 ] ,因而在不断跟踪抗原变化,加强新疫苗研制的同时,更应加大抗流感病毒药物的研制[4] 。目前应用抗流感药物主…     

HPV16L1晚期基因诱导表达的实验研究

目的：可为ＨＰＶ１６Ｌ１重组蛋白疫苗及诊断试剂盒的研制打下基础。方法：含有ＨＰＶ１６Ｌ１ｐＰＩＣ３．５重组质粒的ＧＳ１１５阳性菌株，经甲醇诱导在甲醇营养型酵母菌中表达ＨＰＶ１６Ｌ１蛋白，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳，对所表达蛋白进行分析、鉴定。结果：ＨＰＶ１６Ｌ１－ｐＰＩＣ３．５重组质粒经甲醇诱导产生５５ＫＤ大小的Ｌ１靶蛋白，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳表明，诱导第四天Ｌ１蛋白表达量最大。结论：甲醇可诱导ＨＰＶ１６Ｌ１靶蛋白的表达，并且在第四天表达量最大。     

人7型腺病毒的分离与鉴定

目的对哈尔滨医科大学附属第二医院呼吸道感染患者的痰或咽拭子标本进行检测、分离鉴定和分型。方法应用直接免疫荧光法对标本进行初步筛检,将筛检得到的腺病毒阳性标本接种到A549细胞进行病毒培养,并用空斑法进行纯化。采用PCR技术扩增腺病毒五邻体、六邻体基因,将扩增的PCR产物进行基因测序,并将测序结果BLAST比对,初步判断其型别。结果从采集的标本中分离到1株人腺病毒毒株。 BLAST比对五邻体、六邻体测序结果,表明该毒株与人7型腺病毒五邻体、六邻体的同源性为100％,初步判定该毒株为人7型腺病毒。结论从哈尔滨医科大学附属第二医院呼吸道感染患者的痰或咽拭子标本中分离到1株人7型腺病毒。     

流感病毒RNA聚合酶PB1-1亚基片段的克隆及表达

目的 将流感病毒RNA聚合酶PB1-1亚基进行亚克隆、表达，获得重组的亚克隆多肽，为进一步研究PBl亚基功能奠定基础。方法 以FB1亚基cDNA为模板，用PCR方法扩增出PB1-1片段，应用定向克隆策略将扩增后片段与高效表达载体pQE30重组，阳性克隆重组质粒经酶切及测序鉴定，IPTG诱导各亚克隆系高效表达；优化表达条件。结果 PCR法扩增出487bp的片段，酶切及测序鉴定获得正确的重组质粒，在E．coli M15中表达得到相对分子量约为20KD的重组蛋白，获得蚕组多肽。结论 成功地亚克降及表达了流感病毒RNA聚合酶PB1-1亚基。     

Medline(PubMed)免疫学杂志文献搜索引擎开发研究

为了方便免疫学和相关学科工作者方便快捷、准确地查阅免疫学杂志文献,开发和利用NCBI的Medline数据库的免疫学杂志文献资源。从Medline(PubMed)中检索并列出160种有关免疫学的杂志名录,制作了每种杂志及部分杂志年份相应的超级链接,组成一个有关免疫学杂志文献的搜索引擎。此搜索引擎能快捷、准确、动态地检索160种免疫学杂志全部文献题录及部分杂志各年的文献题录,并可在PubMed中进一步检索出文献的摘要和部分全文。     

流感病毒RNA聚合酶亚基PA6片断的克隆及表达

目的 将流感病毒RNA聚合酶PA6亚基片段进行亚克隆、表达，获得重组的亚克隆多肽，为进一步研究PA6亚基功能奠定基础。方法 以PA亚基cDNA为模板，用PCR方法扩增出PA6片段，应用定向克隆策略将扩增后片段与高效表达载体pQE32重组，阳性克隆重组质粒经酶切及测序鉴定，IPTG诱导各亚克隆系高效表达，优化表达条件。结果 PCR法扩增出402bp的片段，酶切及测序鉴定获得正确的重组质粒，在E．coli M15中表达得到相对分子量约为17KD的重组蛋白，获得重组多肽。结论 成功地亚克隆及表达了流感病毒RNA聚合酶PA6亚基。     

流感病毒RNA聚合酶PA亚基重组质粒pQE32-PA-2转化效率的实验研究

目的　将甲型流感病毒RNA聚合酶PA亚基的基因工程重组质粒pQE3 2 -PA - 2转化入受体菌 ,并优化转化条件 ,以建立其高效、快速的转化体系。方法　以大肠杆菌DH5α菌株为受体菌 ,研究了氯化钙溶液浓度 ( 0、2 5、5 0、75、10 0、15 0mmol/L) ,热休克温度 ( 0、3 0、3 7、42、5 0℃ ) ,转化时间 ( 7、15、3 0、45、60、75、90、10 5、12 0min)及转化后的温浴时间 ( 0、0 .5、1、1.5、2hr)对基因工程重组质粒pQE3 2 -PA - 2转化效率的影响。 结果　氯化钙溶液浓度及热休克温度对转化效率的影响极为显著 ,转化时间在一定范围内对转化效率有明显的影响 ,而转化后的温浴时间对转化效率的影响不明显。结论　在本实验条件下 ,以 75mmol/L氯化钙制备感受态细胞 ,转化 3 0分钟 ,经 42℃热休克作用 90秒后直接涂平板选择转化子 ,可获得高效、快速的转化效果     

用生物素标记CVB_3 cDNA制备探针检测病毒核酸

本文报道用含CVB_3 cDNA PstI酶切片段(530bp)的重组质粒pGP_(51)B转化大肠菌;经扩增后提取,纯化重组质粒DNA;用生物素标记制备探针。通过原位杂交技术检测不同的肠道病毒和非肠道病毒感染的HeLa细胞。实验结果表明,该探针只与肠道病毒RNA杂交,而不与非肠道病毒核酸杂交,且可检测出病毒感染后3h,5h(CPE-)的病毒核酸。可见该探针具有良好的特异性和敏感性,且可用于肠道病毒感染引起的心脏疾病的活检标本诊断。     

N40:一种新近发现的由流感病毒PB1节段编码的蛋白

N40蛋白是一种新发现的甲型流感病毒表达产物,该蛋白由流感病毒基因组PBl节段编码,是流感病毒PBl蛋白的变体,同PB1蛋白相比在N末端有40个氨基酸残基的缺失.N40蛋白和PB1节段编码的另外两种产物(PB1蛋白、PB1-F2蛋白)在表达水平上相互关联.2009年甲型H1N1亚型流感病毒的基阗组中存在N40蛋白的开放阅读框.N40蛋白的生物学意义以及同流感病毒毒力的关系尚有待于深入研究.