人源性同种异体去细胞外周神经材料标准制备方法的研究

目的 对目前文献报道使用的5种不同方法制备的人源性同种异体去细胞外周神经材料进行综合分析比较其优劣,以确定可供临床使用的标准的制备流程.方法 将人源性神经按5种不同方法进行化学萃取,制备的外周神经支架材料分别行苏木精-伊红(HE)染色、免疫组化(S-100、Col I)和透射电镜、氮含量测定等检测,观察5种方法去除许旺细胞、髓鞘和轴突等抗原成分以及基底膜保存完好的情况.结果 分别萃取2次持续24 h组神经的HE染色显示去除细胞和轴突彻底,纵切片上未见任何细胞,红染的神经内膜呈波浪状纵形排列,轴突、髓鞘结构消失而形成管柱状空隙;S-100染色呈阴性;Col I染色结果可以看出其结构呈松散不规则的棕黄色结构,而其它处理组则结构相对整齐的纵向带状结构.透射电镜显示该组与各处理之间髓鞘去除差异无统计学意义.氮含量测定显示该组蛋白含量比值最低.结论 使用Triton X-100处理24 h再分别脱氧胆酸钠24 h持续萃取2次,可作为供临床使用的制备人源性去细胞同种异体神经支架材料的标准流程.     

肝细胞癌患者血浆中PTEN基因启动子甲基化的检测及临床意义

目的检测肝细胞癌患者血浆中PTEN基因启动子的甲基化状态，探讨它与该肿瘤相关临床特征间的关系。方法应用甲基化特异性聚合酶链（MSP）技术，检测40例肝细胞癌患者血浆中PTEN基因启动子的甲基化状态。结果在肝细胞癌患者血浆中，PTEN启动子甲基化率为32．5％（13／40），而在正常健康人的血浆中未检测到其启动子的甲基化（0／10）（P〈0．01）；且PTEN启动子甲基化率在不同大小肿瘤间差异也有统计学意义（P〈0．05）。结论PTEN基因启动子的异常甲基化可能在肝细胞癌的发生及进展过程中起着重要作用，并对该肿瘤的生物学行为产生较大影响；血浆中PTEN基因甲基化的检测有助于肝细胞癌的诊断和预后判断。     

儿童NK/T细胞淋巴瘤的免疫表型及其与EB病毒的关系

目的探讨儿童NK/T细胞淋巴瘤的免疫表型特征及其与EB病毒（EBV）感染的关系。方法NK/T细胞淋巴瘤5例标本,采用免疫组织化学链霉素抗生物素-过氧化酶连接法（SP法）检测CD45RO、CD3ε、CD56、CD20、T细胞内抗原（TIA-1）、丝氨酸蛋白酶-粒酶B（Granzyme B）确定肿瘤细胞免疫表型及EBV潜伏膜蛋白（LMP-1）,原位杂交技术检测EBV编码的RNA（EBER1/2）。结果NK/T细胞淋巴瘤5例CD45RO、CD3ε、TIA-1和Granzyme B全部阳性,CD56阳性2例,CD20全部阴性。EBER1/2阳性4例,LMP-1阳性3例。结论EBV感染与儿童NK/T细胞淋巴瘤关系密切,EBV感染在儿童NK/T细胞淋巴瘤的发生发展中可能起重要作用。     

人源性同种异体去细胞外周神经材料标准制备方法的研究

目的 对目前文献报道使用的5种不同方法制备的人源性同种异体去细胞外周神经材料进行综合分析比较其优劣,以确定可供临床使用的标准的制备流程.方法 将人源性神经按5种不同方法进行化学萃取,制备的外周神经支架材料分别行苏木精-伊红(HE)染色、免疫组化(S-100、Col I)和透射电镜、氮含量测定等检测,观察5种方法去除许旺细胞、髓鞘和轴突等抗原成分以及基底膜保存完好的情况.结果 分别萃取2次持续24 h组神经的HE染色显示去除细胞和轴突彻底,纵切片上未见任何细胞,红染的神经内膜呈波浪状纵形排列,轴突、髓鞘结构消失而形成管柱状空隙;S-100染色呈阴性;Col I染色结果可以看出其结构呈松散不规则的棕黄色结构,而其它处理组则结构相对整齐的纵向带状结构.透射电镜显示该组与各处理之间髓鞘去除差异无统计学意义.氮含量测定显示该组蛋白含量比值最低.结论 使用Triton X-100处理24 h再分别脱氧胆酸钠24 h持续萃取2次,可作为供临床使用的制备人源性去细胞同种异体神经支架材料的标准流程.     

发酵法生产L-亮氨酸工业性试验研究

基于中科院微生物研究所的L-亮氨酸发酵法生产研究小试基础上的中试工作,通过2m2罐规模的中试鉴定的基础上采用5m3罐发酵装置及与之匹配的提取设备进行了扩大试验,历时10个月,试验结果:连续3批产酸率达1.5%以上,最高达1.81%.     

人源性同种异体去细胞外周神经材料标准制备方法的研究

目的 对目前文献报道使用的5种不同方法制备的人源性同种异体去细胞外周神经材料进行综合分析比较其优劣,以确定可供临床使用的标准的制备流程.方法 将人源性神经按5种不同方法进行化学萃取,制备的外周神经支架材料分别行苏木精-伊红(HE)染色、免疫组化(S-100、Col I)和透射电镜、氮含量测定等检测,观察5种方法去除许旺细胞、髓鞘和轴突等抗原成分以及基底膜保存完好的情况.结果 分别萃取2次持续24 h组神经的HE染色显示去除细胞和轴突彻底,纵切片上未见任何细胞,红染的神经内膜呈波浪状纵形排列,轴突、髓鞘结构消失而形成管柱状空隙;S-100染色呈阴性;Col I染色结果可以看出其结构呈松散不规则的棕黄色结构,而其它处理组则结构相对整齐的纵向带状结构.透射电镜显示该组与各处理之间髓鞘去除差异无统计学意义.氮含量测定显示该组蛋白含量比值最低.结论 使用Triton X-100处理24 h再分别脱氧胆酸钠24 h持续萃取2次,可作为供临床使用的制备人源性去细胞同种异体神经支架材料的标准流程.     

人源性同种异体去细胞外周神经材料标准制备方法的研究

目的 对目前文献报道使用的5种不同方法制备的人源性同种异体去细胞外周神经材料进行综合分析比较其优劣,以确定可供临床使用的标准的制备流程.方法 将人源性神经按5种不同方法进行化学萃取,制备的外周神经支架材料分别行苏木精-伊红(HE)染色、免疫组化(S-100、Col I)和透射电镜、氮含量测定等检测,观察5种方法去除许旺细胞、髓鞘和轴突等抗原成分以及基底膜保存完好的情况.结果 分别萃取2次持续24 h组神经的HE染色显示去除细胞和轴突彻底,纵切片上未见任何细胞,红染的神经内膜呈波浪状纵形排列,轴突、髓鞘结构消失而形成管柱状空隙;S-100染色呈阴性;Col I染色结果可以看出其结构呈松散不规则的棕黄色结构,而其它处理组则结构相对整齐的纵向带状结构.透射电镜显示该组与各处理之间髓鞘去除差异无统计学意义.氮含量测定显示该组蛋白含量比值最低.结论 使用Triton X-100处理24 h再分别脱氧胆酸钠24 h持续萃取2次,可作为供临床使用的制备人源性去细胞同种异体神经支架材料的标准流程.     

抗核抗体的检测及临床意义

以往多采用单纯化学技术检测抗核抗体 ,其识别率低 ,且特异性差 ,对临床诊断意义不确定。现利用组织化学技术 ,特别是免疫组化技术 ,使检测同时具备了免疫反应的特异性、组织化学的灵敏性和显微镜的精确性 ,其检测结果对临床诊断具有较大确定性。1　材料及方法1.1　材料大白鼠肝脏、患者血清、荧光标记兔抗人ＩｇＧ抗体、磷酸盐缓冲液、缓冲甘油、荧光显微镜。1.2　抗原制作由于抗核抗体无种属特异性及器官特异性 ,我们采用大白鼠肝脏制作抗原标本。首先杀死大白鼠 ,迅速取出肝脏组织 ,冷冻制成冰冻切片 ,组织切片厚 5μｍ ,经风吹干 ,密封…     

血管内皮细胞生长因子在大肠癌中的表达

目的 :探讨血管内皮细胞生长因子在大肠癌中的表达规律。方法 :应用VEGF抗体 ,采用免疫组化S -P法 ,对 6 2例大肠癌组织和 6 2例正常大肠上皮进行染色。结果 :大肠癌组织中VEGF的表达明显高于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ,伴有淋巴结转移或远处转移的大肠癌组织中VEGF的表达明显高于其相应无转移组 (分别为P <0 .0 5和P <0 .0 1) ,DukesC期大肠癌中VEGF的表达亦明显高于DukesA、B期大肠癌 (P <0 .0 5 )。结论 :大肠癌组织中有VEGF的高水平表达 ,VEGF与大肠癌的生长、转移有关     

丙型肝炎病毒感染外周血单个核细胞对丙型肝炎的影响

为了研究丙型肝炎病毒(HCV)感染外周血单个核细胞(PBMC)对丙型肝炎的影响,运用非同位素原位杂交法(NISH)和链酶亲和素-生物素(SABC)法分别检测20例慢性丙型肝炎患者PBMC中的HCV-RNA及其T淋巴细胞亚群,同时检测这些患者的肝功能指标。结果显示8例(40．0％)HCV患者的PBMC中的HCV-RNA呈阳性结果。HCV-RNA呈散在颗粒状或弥漫分布,主要位于胞浆中。HCV-RNA阳性组和阴性组的CD+4T细胞比例低于正常对照组,CD+8T细胞比例高于正常对照组,CD+4／CD+8比值下降;而HCV-RNA阳性组的CD+4T细胞比例则又低于阴性组,CD+8T细胞比例高于阴性组,CD+4／CD+8比值出现倒置(P<0．01)。两组的肝功能检查结果之间无显著差异(P>0．05)。提示HCV感染PBMC后引起T淋巴细胞亚群发生变化,使CD+4和CD+8T细胞功能下降或不能很好地协调作用,从而成为HCV持续感染的重要原因之一。HCV感染PBMC对肝脏炎症程度的影响可能不大。