莪术种质资源的RAPD-PCR分析

目的探讨不同品种莪术的亲缘关系和遗传多样性,对其进行分子标记鉴定。方法采用RAPD-PCR标记方法研究来源于不同地域的4个种42个样本的莪术种质资源。采用POPGEN32分析其遗传相似系数和遗传距离,UPGMA方法聚类。结果 90个随机引物中筛选出10个引物,共扩增出83个位点,其中多样性位点64个,占77.5%,遗传距离变化范围0.22~0.58,获得清晰的RAPD-PCR图谱,建立了不同种莪术亲缘关系的树状结构图。结论莪术群体中存在较丰富的遗传多样性,具有明显的遗传分化,这些遗传分化是莪术种质资源筛选的关键,是莪术高效育种和生物技术开发的基础。     

青钱柳叶的化学成分研究

目的 研究青钱柳叶的化学成分。方法 将青钱柳叶乙醇提取物用正丁醇、石油醚、乙酸乙酯分别萃取3次;采用D101型大孔吸附树脂、硅胶、ODS、Sephadex LH-20和制备高效液相色谱等柱色谱方法对青钱柳叶的正丁醇萃取部位进行分离纯化,利用核磁共振（NMR）对分离得到的化合物进行结构鉴定。结果 从青钱柳叶中分离得到10个化合物,分别是山柰酚（1）、杜仲树脂酚（2）、（+）-松脂醇（3）、（+）-表松脂醇（4）、积雪草酸（5）、山楂酸（6）、熊果酸（7）、1α,3β-二羟基-12-齐墩果烯-28-酸（8）、石榴萜酮（9）、青钱柳苷Ⅰ（10）。结论 化合物2~4、8均为首次从青钱柳属植物中分离得到。     

温郁金萜类合成酶基因CwTPS05、CwTPS10的克隆与表达分析

目的克隆温郁金Curcuma wenyujin萜类合成酶基因(CwTPS05 CwTPS10)并进行生物信息学及表达分析,为今后利用代谢工程生产温郁金萜类成分提供依据。方法根据前期温郁金转录组测序数据,利用PCR技术从根茎cDNA文库中克隆CwTPS05和CwTPS10序列;生物信息学分析其核苷酸和氨基酸序列特征;qRT-PCR检测基因在不同组织中的表达水平。结果克隆获得CwTPS05 (GenBank登入号:MT814867)基因,开放阅读框全长1446 bp,编码481个氨基酸,预测相对分子质量为55 990;CwTPS10 (GenBank登入号:MT814863)基因,开放阅读框全长1494 bp,编码497个氨基酸,预测相对分子质量为58 550。CwTPS05和CwTPS10均属于酸性、非跨膜、无转运肽的亲水性蛋白。同源进化树分析表明,CwTPS05和CwTPS10基因被归类为植物萜类合成酶TPSa亚家族。qRT-PCR分析表明,CwTPS05在根茎中特异性表达,CwTPS10在根茎和块根中特异性表达。结论成功克隆获得温郁金CwTPS05和CwTPS10基因并进行生物信息分...     

姜黄素类似物抑制炎症反应缓解1型糖尿病肾损伤实验研究

目的研究单羰基姜黄素类似物(WZ35)对1型糖尿病小鼠糖尿病肾病(DN)的缓解作用。方法采用ip链脲佐菌素(STZ)100 mg/kg方法制备1型糖尿病小鼠模型,模型成功后分别ig给予姜黄素及WZ35(20 mg/kg),连续给药9周。每周检测各组小鼠体质量和血糖,实验结束时生化分析仪检测血清中肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平,HE染色观察肾组织病理性损伤,采用RT-qPCR检测肾脏组织中炎症因子和趋化因子基因表达;CD68免疫组化染色检测肾脏组织巨噬细胞浸润情况。结果与对照组比较,模型组小鼠体质量明显下降,血糖明显升高,肾脏指数明显增加,血清中Cr和BUN水平明显升高,肾脏病理性损伤明显,肾脏组织中炎症因子和趋化因子基因表达明显增加,肾脏组织巨噬细胞浸润增加。姜黄素及其类似物WZ35对模型小鼠体质量、血糖和肾脏指数无明显影响,显著降低模型小鼠血清中Cr和BUN水平,明显缓解糖尿病引起的肾组织损伤;显著抑制肾脏组织中炎症因子和趋化因子的基因表达及巨噬细胞浸润,且WZ35作用更显著。结论姜黄素类似物WZ35能够通过抑制炎症反应缓解1型糖尿病小鼠DN进程。     

黄精产业发展存在的问题及对策研究

黄精产业作为我国中医药产业的重要组成部分,在资源、种植、加工、市场各个环节中都存在问题,只有找到解决这些问题的对策,才能保证黄精的产业化、规模化和国际化.通过相关文献的查阅分析,以及各个黄精产区的实地调研对影响黄精产业发展的问题进行总结,并对相关对策进行研究.对黄精进行规范化种植以及相关产品的综合研究与开发是解决黄精产业发展问题的最佳手段,是黄精产业未来的发展之路.     

以成纤维细胞生长因子受体1为靶点的姜黄素类似物的抗肿瘤活性研究

目的寻找以成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)为靶点,并具有良好抗肿瘤活性的小分子抑制剂。方法通过改造单羰基姜黄素类似物3,5-双(2-氟苯亚甲基)哌啶-4-酮(EF24),合成了其类似物[3,5-双(2-溴苯亚甲基)哌啶-4-酮,B6];采用FGFR1酪氨酸激酶实验验证其靶向性;MTT法检测EF24和B6对正常人肝细胞HL7702、4种肿瘤细胞(人大细胞肺癌NCl-H460、人胃癌细胞SGC-7901、人小细胞肺癌A549、人星形胶质瘤细胞株U251)增殖的影响;Western blotting法检测B6(2.5、5、10μmol/L)对NCl-H460细胞bFGF/FGFR下游信号蛋白表达的影响;Caspase-3试剂盒检测Caspase-3因子的表达。结果 EF24类似物B6可以以FGFR1为靶点,抑制NCI-H460细胞FGFR1以及下游信号蛋白丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)和细胞外调节蛋白(ERK1/2)的磷酸化,抑制肿瘤细胞的增殖,促进细胞凋亡。结论成功改造并获得靶向FGFR1的EF24类似物B6,其具有良好的体外抗肿瘤活性,为寻找FGFR1抑制剂候选抗肿瘤药物提供新思路。     

长春新碱对人胃癌BGC细胞增殖与凋亡的影响及其机制

目的通过体内外水平研究长春新碱对人胃癌BGC细胞增殖与凋亡的影响及其机制。方法采用MTS法检测人胃癌BGC细胞的增殖情况;采用Hoechst荧光染色法、流式细胞技术检测细胞凋亡和细胞周期的情况;通过Western blotting法检测BGC细胞内增殖、周期和凋亡相关蛋白表达情况;荷瘤裸鼠实验检测长春新碱抑制胃癌生长情况。结果长春新碱明显抑制BGC细胞的生长,其抑制率与药物浓度呈剂量和时间相关性,将细胞周期阻滞于G1期,并促进其凋亡,下调了细胞增殖和周期相关蛋白p-FAK、FAK、E2F1、Cylin E2、Cyclin D2、CDK2、CDK6的表达,并激活了凋亡相关蛋白Caspase-3。荷瘤裸鼠实验显示长春新碱能明显抑制胃癌生长。结论长春新碱通过下调细胞增殖与周期相关蛋白的表达,使细胞周期在G1期阻滞,同时激活Caspase-3诱导细胞的凋亡。     

新型冠状病毒SARS-CoV-2及抗COVID-19药物研究进展

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染引发的肺炎(COVID-19)疫情严重威胁广大人民群众身体健康和生命安全,对我国的经济发展、社会稳定和对外交往产生重大影响。由于新型冠状病毒的传染性强、传播速度快、致死率较高,尚无有效疫苗和药物来防治,因此针对该病毒的疫苗与药物研发显得尤为迫切。主要围绕COVID-19的病毒来源、传播途径、临床症状和防控治疗措施,以及目前抗COVID-19药物的研究进展进行综述。     

去甲二氢愈创木酸类似物26C基于活性氧簇诱导细胞凋亡的体外抗肺癌活性研究

目的 研究去甲二氢愈创木酸（NDGA）类似物26C的抗肺癌活性与初步机制。方法 利用MTT实验评价26C对肺癌细胞NCI-H460的细胞毒性;用集落克隆、划痕实验分别检测26C对NCI-H460细胞生长、迁移的影响;流式细胞仪检测26C对NCI-H460细胞的周期阻滞及诱导凋亡情况;活性氧簇（ROS）实验探究26C引起细胞凋亡的作用机制。结果 26C对NCI-H460的IC₅₀为（4.7±0.5）μmol/L,对NCI-H460的集落形成、迁移有较强的抑制作用,其活性明显优于先导化合物NDGA;26C可将细胞周期阻滞在G₂/M期,并通过升高ROS水平的作用机制诱导NCI-H460细胞凋亡。结论 化合物26C为具有研发前景的抗肺癌候选化合物,其通过提高ROS水平、阻滞细胞周期来抑制细胞生长和诱导细胞凋亡。     

基于UPLC-MS/MS代谢组学技术分析不同栽培模式下铁皮石斛类黄酮化合物差异性

目的 研究不同栽培模式下铁皮石斛Dendrobium officinale中类黄酮化合物积累的差异,为铁皮石斛种植方式创新提供依据.方法 运用超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)广泛靶向技术对3种栽培模式(大棚栽培、林下活树附生和岩壁附生栽培)下的铁皮石斛类黄酮物质进行检测,使用主成分分析(principal...