黄瓜遗传转化体系优化及表皮毛基因Gl的转化

选用黄瓜无毛突变体gl的子叶节为材料,对芽诱导阶段及根诱导阶段潮霉素的浓度进行筛选,分别确定2和3mg/L为其最适浓度;以pCAMBIA2301-gusA为载体,农杆菌GV3101介导,筛选出Silwet L-77(表面活性剂)的最佳体积分数为0.04%,侵染液浓度以原菌液(OD600=0.6)等倍稀释最佳;另外,对快速提取黄瓜DNA方法进行了优化。结果表明,添加500μL 0.5mol/L NaOH与200μL 100mmol/L Tris-HCl的组合最好。用优化的体系对表皮毛基因Gl进行遗传转化,获得7株阳性苗,为研究Gl基因的调控机制奠定了基础。     

黄瓜(Cucumis sativus L.)果瘤基因Tu的精细定位

黄瓜果实果瘤性状是非常重要的农艺性状,以黄瓜(Cucumis sativus L.)华北有瘤品系S52(P1)和欧洲无瘤品系S06(P2)为亲本,构建826株F2(S06×S52)群体为试验材料,对黄瓜果瘤基因Tu进行精细定位研究。田间调查和遗传分析发现F2群体的果实表现型为有果瘤与无果瘤,卡方值(χ2=0.5833.84)检验表明其分离比符合3∶1,表明黄瓜果瘤性状是单基因控制的显性性状。早期研究中Tu基因被初步位于第5染色体的标记SSR16203和C_SC933之间,本研究利用公布的黄瓜基因组序列在这两标记之间设计了100对SSR引物,通过分析在两亲本的多态性,最后筛选得到4对SSR多态性标记。然后利用SSR16203和C_SC933标记和这4个多态性引物对826株F2群体进行进一步交换单株分析,最后将Tu基因定位于两翼标记SSR7和SSR18之间,剩余的交换单株分别为11株、16株,物理距离为263kb。经过FGENESH基因预测软件(http:∥www.softberry.com)分析,该区间仅含有候选基因31个。本研究为进一步果瘤基因Tu的最后克隆提供良好的研究基础。     

农杆菌介导黄瓜Tril基因转化及体系优化

采用农杆菌介导法将黄瓜表皮毛基因Tril转入黄瓜‘新泰密刺’品种,并研究了6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)和卡那霉素(Kan)分别对再生和转化苗筛选效果的影响。结果表明,在黄瓜‘新泰密刺’转化中,Kan抗性苗出芽率为9.67%,生根率为3.67%,转化株阳性率为0.33%;分化培养基中6-BA适宜浓度为0.5 mg/L,出芽率最高(76.33%),平均出芽天数最短(19.66 d);生根培养基中Kan浓度为60 mg/L时筛选效果最好。3种筛选方式的研究表明,仅在生根培养基中添加Kan(60 mg/L)筛选,其转化周期最短(45 d),阳性率最高(达4.0%)。     

甜瓜子叶节培养高效再生体系建立

对8个甜瓜品种的子叶节进行离体培养,采用3种方法进行诱导,建立了高效的再生体系。其中,启动培养基为MS+BA2.0mg·L-1+IAA1.0mg·L-1,诱导培养基为MS+BA0.5mg·L-1+IAA0.2mg·L-1,通过器官发生途径诱导形成丛生芽,伸长和生根培养基分别为MS+BA0.05mg·L-1+IAA0.02mg·L-1和1/2MS+NAA0.2mg·L-1。以上培养基均含蔗糖35g·L-1,pH5.8。此再生体系每个外植体可获得7.2～12.5个不定芽(>1cm),生根率为91%,驯化成活率大于90%。     

水果型黄瓜“申绿03”的选育及其特性

水果型黄瓜‘申绿03’是温室专用型品种,其父母本分别来自以色列和荷兰的黄瓜种质资源.经过1998-2004年杂交筛选,2004-2012年品种对比、区域试验、生产试验、抗性试验,表明它适应温室栽培,全雌型单性结实、无刺无瘤、直果型、瓜把短、耐白粉病和霜霉病、耐弱光性强,产量高,适合在保护地推广.此外,本文还简要介绍了该品种配套栽培技术.     

全雌性单性结实黄瓜主要农艺性状的遗传相关和通径分析

利用全雌性单性结实黄瓜（Cucumis sativus L.)的8个自交纯系，采用Griffing第II方案配制杂交组合，对其6个农艺性状进行相关和通径分析，相关分析表明，产量和单果重，瓜条数之间呈极显著正相关，和叶面积，株高间呈显著正相关，和茎节数不相关，通径分析表明：单果重和瓜条数对产量的直接作用较大，直接通径系数分别为0．699和0．587，株高和叶面积通过单果重对产量有间接作用，间接通径系数为0．371和0．426。     

草莓茎尖培养快繁体系研究

以草莓“丰香”品种为材料,利用匍匐茎剥取茎尖,以不同大小茎尖接种到不同配方的茎尖诱导培养基中,观察草莓茎尖在各种培养基上的生长情况。实验结果表明草莓茎尖的成活率与剥取的茎尖大小有关,与培养基配方有关。在相同的培养基上,剥取茎尖越大,成活率越高。同样以0.5mm大小茎尖,在培养基MS BA0.5mg/L上的成活率最高,达到66.7%;转接到各增殖培养基上后生长良好,并在MS BA0.5mg/L培养基上增殖系数最高,为6.05;再生芽转接到生根培养基1/2MS上,培养20d左右,生根率达100%,平均生根6.13条/株。生根苗在全蛭石的基质上驯化,成活率高达98.33%。     

黄瓜RAPD分析的影响因素

从样本取样、保存、DNA提取方法,模板DNA、TaqDNA聚合酶、Mg2 、dNTP、随机引物的浓度和适合的RAPD反应体系及操作过程中应注意的事项、产物处理等方面综述了黄瓜RAPD分析的影响因素,为RAPD技术在黄瓜育种研究中的应用提供帮助。     

黄瓜子叶节离体再生体系的研究

以6个品系的欧洲温室型全雌系黄瓜子叶节为材料,比较了不同激素组合,苗龄,切割方式和基因型,从而建立了简单快速高效的黄瓜离体再生体系。结果表明:在MS+BA1.5mg·L-1+IAA0.2mg·L-1上启动培养3d为最佳芽启动培养方式,再转入最佳芽诱导培养基MS+TDZ0.02mg·L-1。10d苗龄的子叶节出芽率最高,保留两片子叶各切除1/3为最佳切割处理方式,六种基因型均能生芽,且每外植体出芽数均较高达1.93～3.15。整个过程从种子萌发到驯化移栽,仅需8周。     

黄瓜无侧枝基因nlb 的初步定位

 以黄瓜无侧枝品系419（P1）和有侧枝品系SB-2（P2）为亲本构建的136 株F2 群体为试验材料,对黄瓜无侧枝基因nlb 进行定位研究。田间调查和遗传分析结果表明,F2 群体的表现型中有侧枝与无侧枝的分离比为3︰1。运用分离群体分组混合分析法（bulked segregant analysis,BSA）,从F2 无侧枝群体和有侧枝群体中各随机选取10 株,分别混合其DNA,构建无侧枝和有侧枝基因池,通过分析SSR分子标记在基因池间的多态性,筛选得到nlb 基因连锁标记9 个。然后利用F2 群体进行进一步验证,经MAPMAKER3.0 软件分析,将nlb 基因定位于黄瓜1 号染色体,其中距离nlb 基因较为紧密的标记是SSR19673,遗传距离为15.9 cM。