双特异性抗体对LAK细胞增殖和细胞毒作用影响的体…

将抗ＣＤ１３与抗ＨＢｓ的单克隆抗体经化学偶联得到的双特异性抗体，观察该双特异性抗体对ＬＡＫ细胞增殖和增强细胞毒性的作用。结果显示双特异性抗体显著提高ＬＡＫ细胞与２．２．１５细胞结合率；促进淋巴细胞增殖．＾１２５Ｉ－ＵｄＲ释放试验检测发现双特异性抗体增强ＬＡＫ细胞对２．２．１５细胞的细胞毒性且与抗体浓度呈正相关 。     

马桑内酯诱导惊厥发作海马结构内神经元损伤的观察

目的：观察国产中药制剂马桑内酯诱导惊厥发作后，海马结构内神经元损害的范围和特征。方法：采用SD大鼠，马桑内酯单次腹腔内注射诱发惊厥，在发作后不同时间点取脑，行H＆E染色和GFAP免疫组化染色观察海马结构内神经元和神经胶质细胞的改变。结果：海马结构内有显著的神经元损伤。其损伤次序表现为：齿状回、门区和CA3区、CA1区，损伤区周围有反应性星形胶质细胞增生。结论：马桑内酯致惊厥发作后海马神经元的损害与兴奋性细胞毒制剂海仁酸致惊厥具有相似的病理学改变特征，提示国产中药制剂马桑内酯致惊厥与兴奋性细胞毒有关。     

体外大量扩增CIK细胞的研究

目的：探讨影响CIK细胞体外增殖的因素（如共刺激、培养时间和血清等），以及其进行无血清培养。方法：用乳酸脱氢酶分析细胞毒活性，用流式细胞术分析细胞表型。结果：培养至第14d，在胎牛血清、自身血浆或无血清3种培养条件下，CIK细胞的纯度分别为：21．68％、28．28％和29．50％；增殖倍数分别为：31．7、33．3和27．1倍。培养21d后，CIK细胞的纯度分别为：36．73％、37．29％和29．7％，增殖倍数分别为：58．2、67．4和52．7倍。3种培养条件来源的CIK细胞，对K562细胞的细胞毒活性分别为：63．4％、72．3％和53．6％；而对Raji细胞的细胞毒活性分别为：47．6％、56．2％和43．4％。效应细胞：靶细胞为10：1时，培养14d和21d的CIK细胞，对K562细胞的细胞毒活性分别为68．13％和56．4％；而对Raji细胞的细胞毒活性分别为49．9％和39．2％。在共刺激或无共刺激信号存在的条件下，效应细胞：靶细胞为10：1时，对K562细胞的细胞毒活性分别为69．7％和41．9％；而对Raji细胞的细胞毒活性分别为42．6％和37．8％。结论：共刺激和培养时间的延长，有利于增强CIK细胞的细胞毒活性。用无血清培养基可促进CIK细胞体外增殖。     

检测体内异种II型胶原异体移植引起的细胞毒反应

检测用猪II型胶原免疫新西兰大白兔的异种异体细胞免疫反应。用II型胶原免疫新西兰大白兔60 d,定期抽取血浆检测抗II型胶原抗体;第60 d取兔的外周血淋巴细胞、兔脾细胞、淋巴结分别分离淋巴细胞,进行体外二次II型胶原刺激,检测由此引起的反应性的细胞增殖规律。实验分为二组,第一组加入不同浓度植物血凝素(PHA)作阳性对照,并测定非特异性免疫;第二组加入不同浓度II型胶原,检测特异性免疫。正常兔的淋巴细胞在PHA剌激下发生增殖,但对II型胶原的第一次剌激不发生增殖,而免疫兔对PHA和II型胶原的剌激均能发生显著的增殖。表明异种II型胶原在一定浓度下,可以引起免疫兔的抗II型胶原抗体的升高,并可引起兔脾、外周血淋巴细胞增殖,异种II型胶原能在体内引起细胞免疫反应。     

流式细胞术检测细胞毒方法的建立

目的：建立一种用流式细胞仪测定细胞介导细胞毒活性的方法。方法：用羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记靶细胞，再用碘化丙碇(PI)标记DNA筛选细胞膜已破坏的靶细胞。效靶比为100：1—6．25：1，共孵育时间为1-6小时，流式细胞仪收集1000个靶细胞并测定被杀细胞的百分率。结果：CFSE是合适的标记靶细胞的荧光染料，18小时后也能很好地区分效靶细胞；靶细胞的自然死亡率低于5％；杀伤百分率随着效靶比和共孵育时间的增加而增加。最佳效靶比为50：1—25：1，共孵育时间为2—4小时。结论：CFSE／PI双荧光染料标记的流式细胞分析检测细胞毒具有多个优点：避免放射性试剂的应用，敏感性增强，单细胞水平的分析。     

CTLA-4-FasL融合分子的构建及其生物学特性的鉴定

文章通过特异的引物分别扩增出CTLA 4和FasL胞外区的cDNA ,将它们拼接后 ,克隆入真核表达载体pcDNA3 1( + )中 ,进行表达、纯化 ,获得CTLA 4 FasL融合蛋白。Westernblot分析显示了该融合蛋白具有CTLA4 胞外区和FasL胞外区的抗原性。体外试验表明 ,该融合蛋白可以结合Jurkat细胞表面的Fas受体和Raji细胞表面的B7分子 ,表明了该分子双特异性的特点。该融合蛋白能够直接诱导Jurkat细胞发生凋亡 ,且此凋亡效应伴随Raji细胞的参与而增强 ,初步证实了该分子的免疫抑制效应 ,从而为进一步研究该融合蛋白特性及应用奠定了基础。     

不同来源乙肝表面抗原的细胞免疫学对比研究

目的　研究不同来源乙肝表面抗原诱导CD8 抗原特异性的细胞毒T淋巴细胞反应(CTL)的差异及T细胞产生细胞因子的能力 ,从而对各种来源乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)的免疫原性有更充分的评价。方法　不同来源HBsAg分别免疫BALB c小鼠 ,于免疫后不同时间制备脾脏单个核细胞 (MNC) ,再以相应的HBsAg体外刺激 ,酶联免疫方法 (ELISA)测定细胞因子分泌水平 ;以Na2 5 1CrO4标记靶细胞 ,测定CTL反应活性 ;应用流式细胞仪分析T细胞亚群。结果　HM HBsAg免疫小鼠 10d后的脾细胞产生IFN γ水平最高 ,而在免疫后 2 0d和 2 5d ,IL 2的水平显著高于其它各组 ,CD3 分子脾淋巴细胞显著高于其它各实验组 (P <0 .0 5) ;plasma HBsAg免疫小鼠的脾淋巴细胞产生IFN γ和IL 2水平较低 ,但在免疫 2 5d对P815 HBs的杀伤性最强 ;HM HBsAg和SSC HBsAg免疫后CD4 CD8- 脾淋巴细胞比例显著增高 (P <0 .0 5) ;CD4- CD8 细胞所占百分比各组间及与空白对照组间差异无显著性 (P >0 .0 5)。结论　不同来源HBsAg诱导的细胞免疫反应类型和程度不同     

HLA-E的表达对RSA及PIH患者外周血γδT细胞细胞毒效应的影响

探索HLA-E分子的表达对习惯性流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)及妊高症(pregnancy-induced hypertension,PIH)患者外周血γδT细胞细胞毒效应的影响。通过固相抗体法体外分离并扩增外周γδT血细胞作为效应细胞,以HLA-E转染的LcL721.221细胞(.221E)及滋养层细胞JAR作为靶细胞,采用4 h乳酸脱氢酶(LDH)释放试验观察NK细胞对靶细胞的细胞毒效应。结果显示,来自RSA、PIH及正常对照组的γδ细胞均不能有效杀伤HLA-E转染的.221E细胞及JAR细胞,但未经HLA-E转染的LcL721.221细胞则被溶解;抗HLA-E单抗3D12及抗CD94单抗HP-3B1的阻断可以分别部分恢复效应细胞对靶细胞LcL721.221E的杀伤,但对JAR细胞没有影响;与正常对照组相比,RSA及PIH患者外周血γδT细胞对.221、.221E及JAR细胞的细胞毒活性没有显著性差异(P>0.05)。这说明HLA-E分子的体外表达可以保护靶细胞防止γδT细胞的杀伤,该保护机制主要是通过γδT细胞受体CD94/NKG2对靶细胞表面HLA-E分子的识别来实现的;滋养层细胞对γδT细胞杀伤的抵抗可能存在MHC I类非依赖的机制。     

胆汁酸细胞毒作用研究进展

本文介绍各种胆汁酸的细胞毒作用强度及其相互作用，以及胆汁酸细胞毒作用的机制和临床意义。细胞能量衰竭和氧自由基是细胞毒作用的重要机理。     

妊娠特异性β1糖蛋白免疫调节作用的研究

目的:探讨妊娠特异性β1糖蛋白(PSβ1G)免疫调节作用。方法:用L929细胞系作为靶细胞检测巨噬细胞的细胞毒作用。用硝酸还原酶法检测巨噬细胞分泌NO的水平。用MTT比色法检测T细胞的增殖反应。用流式细胞术分析细胞凋亡及细胞周期的变化。结果:PSβ1G能抑制单核巨噬细胞的细胞毒作用,抑制其分泌NO。部分抑制ConA刺激的T细胞增殖反应,使其受阻于G0/G1期。结论:PSβ1G抑制巨噬细胞和T细胞的免疫。