多种单抗联合检测HIV抗原

目的 建立多种单抗联合早期检测HIV抗原的夹心ELISA方法.方法 以SAS盐析沉淀法和亲和层析法纯化抗HIV-1 p24、gp41、gp120及抗HIV-2 gp36的腹水型单克隆抗体(McAb),用高碘酸钠法将纯化的McAb以HRP进行标记.建立针对单个抗原的双抗体夹心ELISA法,对其灵敏度及特异性进行检测.将筛选得到的4株捕获McAb按比例混合作为捕获抗体,4株酶标McAb按比例混合作为检测抗体,建立多种单抗联合检测HIV抗原的夹心ELISA方法,检测混合HIV抗原.结果 按确定的最优反应条件建立的多种McAb联合夹心ELISA方法,检测到的最高稀释度的HIV混合抗原中各抗原的终浓度分别为:重组HIV-1 p24:0.625 pg/ml,gp41:6.25 ng/ml,gp120:6.25 ng/ml;HIV-2 gp36:9.25 ng/ml.结论 建立了具有高度敏感性的鸡尾酒式多种单抗联合检测HIV抗原的夹心ELISA法,为早期榆测HIV抗原提供了新的思路,为后续的研究奠定了一定基础.     

抗HIV-1 gp41单克隆抗体的制备及意义

目的为HIV-1感染的检测和研究提供依据。方法以基因工程重组抗原HIV-1 gp41蛋白免疫BALB／c小鼠，利用常规杂交瘤技术和间接ELISA法制备抗gp41蛋白的单克隆抗体（mAb），用ELISA法鉴定所得mAb的Ig亚类、效价及特异性。单抗经饱和硫酸铵（SAS）纯化和HRP标记后，利用双抗体夹心ELISA筛选检测gp41蛋白的最佳配伍单抗，分别包被ELISA板及作为酶标mAb，建立双mAb夹心ELISA法。结果经细胞融合、筛选、克隆化，获得了12株可分泌高效价mAb的杂交瘤细胞。纯化的腹水mAb经配对试验，选出2株mAb：7D4和9G2-HRP建立了双mAb夹心ELISA法，检测HIV-1 gp41抗原的灵敏度是1μg/L。结论获得12株效价高的抗HIV-1 gp41的mAb，建立了特异性强、灵敏度较高的检测HIV-1 gp41抗原的双抗体夹心ELISA法。     

烧伤小鼠巨噬细胞功能变化及中药黄芪对其影响的研究

目的观察烧伤后120h内小鼠巨噬细胞(Mψ)功能的动态变化,并探讨中药黄芪对烧伤小鼠Mψ功能和小鼠存活率的影响.方法应用吞噬法、RT-PGR等方法分别测定了伤后不同时间及给予黄芪后Mψ各种功能的变化.结果①伤后Mψ的吞噬功能显著下降,酸性磷酸酶(AcP)活性显著减低,IL-15mRNA表达发生波动,TNF-αmRNA表达显著增高.②腹腔注射黄芪(2.5g@kg-1.d-1)连续5天后,Mψ吞噬功能和AcP显著升高(P＜0.01),对IL-15mRNA没有影响,不能降低TNF-α mRNA表达,不能提高烧伤小鼠的存活率.结论烧伤小鼠早期死亡的原因可能与TNF-α的增加有关.     

含有离散变量和连续变量的判别分析方法

本文研究了含有离散变量和连续变量的多组分层的判别分析问题,并提出了判别难则。对判别式进行了参数估计,并应用此判别准则对“七.五”攻关课题“胃癌筛选和诊断方法的研究”中的部分资料进行了实际应用。     

胃液蛋白质定量分析对胃癌的诊断价值——与胃液CEA的联合研究

本文系统测定了胃液蛋白质浓度和CEA水平,结果表明:胃癌患者胃液蛋白质浓度显著升高,敏感性65.0％,特异性86.7％,准确性81.6％。胃癌患者CEA水平升高显著,敏感性58.8％,特异性83.6％,准确性79.0％。用判别函数y=0.446·PQA+0.003·CEA将二者联合起来,使胃癌的敏感性提高为82.4％,特异性86.0％,准确性85.0％,2例早期胃癌均阳性。     

血清内源性荧光光谱在胃癌诊断中的应用

目的：研究血清荧光光谱对胃癌诊断的意义。方法：用荧光分光光度计测量了1191例各种疾病血清的内源性荧光光谱，其中早期胃癌19例，进展期胃癌74例。结果：在200nm紫外光激发下，血清荧光谱有三个发射带，峰位分别是320nm、400～500nm、700nm，胃癌血清第二个发射带荧光增强，呈锯齿状改变，620nm附近出现第四发射带。用判别函数C=1．3X1＋1．5X2＋2．OX3－1．5X4进行判别分析，胃癌阳性率88．2％，其中早期胃癌阳性率78．9％，进展期胃癌阳性率90．5％，特异性72．4％。结论：这一方法对于胃癌筛查及诊断具有实际应用价值。