人黏蛋白1串联重复区基因真核表达载体的构建及其在动物细胞中的表达

目的构建人黏蛋白1串联重复区(MUC1 VNTR)17重复序列肿瘤抗原真核表达载体,并在COS-7、HeLa和Lewis细胞中表达。方法设计1对分别含SalⅠ和XhoⅠ酶切位点的引物,PCR法合成1重复MUC1 VNTR片段,克隆入pGEM-Teasy载体,依据SalⅠ和XhoⅠ酶切产生相同黏性末端的特性,依次连接,构建17重复MUC1 VNTR(17m),再亚克隆至VR1012真核表达载体,构建真核表达质粒VR1012-17m。分别转染COS-7、HeLa和Lewis细胞,并进行检测。结果酶切鉴定和序列分析证实,构建的重组质粒含17m序列,经转染的COS-7、HeLa和Lewis细胞,RT-PCR检测均有17m mRNA转录,Western blot检测均有17m蛋白的表达,并与MUC1 VNTR单抗产生特异性反应。结论已成功构建17m肿瘤抗原真核表达载体,并在COS-7、HeLa和Lewis细胞中得到表达,可用于MUC1疫苗和肿瘤生物学治疗的进一步研究。     

人黏蛋白1串联重复区DNA疫苗诱导小鼠的免疫应答

目的观察人黏蛋白1串联重复区(MUC1 VNTR)DNA疫苗诱导BALB/c小鼠的体液及细胞免疫应答。方法将含有33个黏蛋白1重复区序列(33m)的重组质粒pVR1012-33m,经肌肉注射免疫BALB/c小鼠,并加强免疫2次,每次100μg,间隔2周,分别以空载体pVR1012和生理盐水为对照。末次免疫后取小鼠血清及脾淋巴细胞,Western blot检测血清抗体特异性,LDH法检测CTL反应活性,MTS/PMS法检测脾淋巴细胞增殖活性。结果重组质粒免疫组小鼠血清中检出了MUC1 VNTR抗原特异性抗体。用重组质粒pVR1012-33m免疫BALB/c小鼠后,在效靶比为100:1和33:1时,可显著地诱导特异性CTL应答。在MUC1 VNTR抗原肽的刺激下,免疫小鼠脾淋巴细胞得到增殖,与空载体和生理盐水对照组相比,差异均有显著意义。结论DNA疫苗pVR1012-33m在BALB/c小鼠体内可诱导特异性细胞免疫和体液免疫应答,为预防、治疗性MUC1 VNTR疫苗的研制提供了一定的实验依据。     

南美白对虾的淡水养殖试验

针对目前普通水产养殖效益不高,大众对高档水产品需求旺盛的实际,提出了养殖南美白对虾可以获得高产高效。介绍了南美白对虾养殖材料与方法,总结了养殖南美白对虾的主要成果,并从虾苗的选择、池水的兑配、水质及饲料的管理四方面总结了南美白对虾养殖试验的体会。     

钒钼黄分光光度法检测液态特殊食品中磷含量的优化

目的建立钒钼黄分光光度法检测低磷含量液态婴幼儿配方食品、液态特殊医学用途配方食品等特殊食品中磷含量的分析方法。方法试样经消解,磷在酸性条件下与钒钼酸铵生成黄色络合物钒钼黄,于440 nm测定试样溶液中钒钼黄的吸光度值,幵与标准系列比较定量。对3种基质液态特殊食品的磷含量进行测定。结果增大称样量能满足方法准确度和精密度要求;称样量为4 g时,回收率范围为92.4%～107.0%,相对标准偏差为0.8%～3.7%;方法定量限为30 mg/100 g。结论该方法能够准确测定液态配方食品中较低含量的磷,适合液态婴幼儿配方食品、液态特殊医学用途配方食品等特殊食品中磷含量的测定。     

我国婴幼儿谷类辅助食品质量状况及监管要求

谷类辅助食品可以满足婴儿从母乳到正常饮食的过渡,随着喂养观念的转变和消费模式的改变,近年来该类产品的市场增速持续保持在20%左右。婴幼儿谷类辅助食品因食用人群特殊,其质量安全一直是食品安全监管的重点和难点。本研究就近5年我国婴幼儿谷类辅助食品国家食品安全监督抽检的整体质量状况进行汇总分析,其合栺率呈稳步上升趋势,产品的安全风险主要来自研发环节、原辅料控制环节、生产环节和检验环节。相关部门通过制定食品安全标准、提高产品许可准入门槛、出台监管要求和制定镉的临时限量等措施,对行业的健康发展起到了觃范作用。本文建议企业通过建立以风险"防""控"为核心以及以"可追溯"为目标的质量控制体系,从源头防控产品风险。     

我国食用植物油质量安全状况及监管现状分析

我国是全球3大食用植物油消费国之一,虽是消费大国但植物油料的对外依存度较高, 60%以上的油料需要进口。我国食用植物油加工区域优势明显,但与发达国家相比,在产业集中度、质量追溯方面存在一定的差距。食用植物油作为高风险产品一直是食品安全监管的重点和难点。本文就我国食用植物油的产业概况、标准体系、质量安全风险和监管措施进行介绍,幵建议在今后工作中加大企业主体责仸的落实、引导企业建立HACCP体系,完善食品安全管理体系和风险防控能力。     

基于介电频谱的枣果品种鉴别模型的建立

利用LCR测试仪在1~1 000 kHz的频率范围内,选取55个频率点,测定灵武长枣、冬枣和团枣的介电损耗因子ε"频谱和相对介电常数ε’频谱,通过主成分分析(principal component analysis,PCA)法和遗传算(genetic algorithm,GA)法提取介电频谱的有效信息,并选取偏最小二乘判别分析(partial least squares discriminant analysis,PLS-DA)、线性判别分析(linear discriminant analysis,LDA)和支持向量机(support vector machine,SVM)3种方法进行枣果品种的鉴别模型研究。结果表明,频率和品种对枣果的介电参数均有显著性影响;用PCA与GA方法提取频谱有效信息的建模效果要优于原始频谱的建模效果;SVM法的建模效果要优于PLS-DA与LDA法的建模效果;以介电损耗因子ε"建立的PCA-SVM模型优于介电常数ε’的GA-SVM模型,其预测集的鉴别准确率为100%。因此,基于介电损耗因子ε"频谱的PCA-SVM模型为枣果品种鉴别的最优模型。     

西宁城市水资源规划思路及初步成果

在西宁市水资源规划思路的基础上,针对西宁市的两个规划年(2005年、2010年)的不同保证率(P=50%、P=75%、P=95%)水资源供需作了预测分析,进行了供需水平衡预测。说明了兴建"引大济湟"工程是根本解决西宁市2010年后缺水的关键途径,从而保证城市水资源可持续利用,实现水资源对经济可持续发展的支持。     

基于果品介电特性的无损检测技术研究综述

无损检测技术已成为果品品质检测的趋势。本文对基于介电特性的果品无损检测最新研究进行了综述,比较了常用测试技术及条件,分析了影响果品介电特性参数的频率、温度、贮藏时间等外界因素,比较了果品的成熟度、硬度、成分等内在因素对果品电参数的影响,并且指出了该领域的研究动向,为今后该技术的进一步的研究应用提供了借鉴。