磷酸化肌球蛋白轻链在大鼠慢性移植肾肾病早期病变中的作用及其机制

目的 探讨磷酸化肌球蛋白轻链(pMLC)在慢性移植肾肾病(CAN)中的作用与机制.方法 依照标准的CAN大鼠模型进行左肾原位移植,受者为LEW大鼠,供者为F344大鼠,另取雄性F344大鼠和LEW大鼠仅行单肾切除术,分别作为对照.分别于术后4、8及12周时,收集各组大鼠的24 h尿量,并检测其尿肌酐水平,计算肌酐清除率.然后取各组大鼠血液标本,测定血清肌酐水平.采用Banff分级标准评定各组肾小球肾病、肾小管萎缩、间质纤维化及血管内膜增厚程度.采用免疫组织化学法和采用蛋白质印迹法检测肾组织中磷酸化MLC(pMLC)和整合素连接激酶(ILK)的表达部位及表达水平.结果 移植组大鼠术后4周时肾间质可见单个核细胞浸润,12周时可见血管平滑肌细胞的移行与增殖.移植组大鼠各时相肾组织pMLC和ILK表达水平显著高于Lewis对照组及F344对照组,且随着移植时间的延长有逐渐增高趋势.大鼠移植肾组织中pMLC表达水平与24 h尿蛋白定量、血清肌酐水平、肾间质单个核细胞浸润、肾小动脉血管平滑肌细胞数量、Banff评分等呈显著正相关,相关系数(r)分别为0.273(P＜0.05)、0.434(P＜0.01)、0.525(P＜0.01)、0.676(P＜0.01)、0.570(P＜0.01),在移植后4周时,pMLC表达水平与肾小管间质ILK表达水平呈显著正相关,r=0.778(P＜0.01).结论 pMLC在慢性移植肾病早期病理变化中发挥重要作用,移植肾肾小管间质及肾小动脉中pMLC表达上调与ILK的作用机制相关.

Abstract：

Objective To investigate the role and mechanism of phosphate myosin light chain (pMLC) in the rat kidney of chronic allograft nephropathy (CAN) model. Methods The left donor kidneys from Fisher (F344) rats were orthotopically transplanted into Lewis recipients. Meanwhile, the F344 rats and LEW rats with resection of the right kidney served as control groups. Animals were harvested respectively at the 4th, 8th and 12th week after transplantation. The creatinine clearance rate (CCr) was calculated by urine creatinine of 24-h urine. Blood samples were collected from rats for determination of serum creatinine. The expression of pMLC was detected by using Western blotting and immunohistochernistry, and that of integrin-linked kinase (ILK) by using immunohistochemistry. Results Mononuclear cells infiltration of allografts was markedly aggravated as compared to the controls. Allografts got severe interstitial fibrosis and tubular atrophy at 12th week after transplantation. The expression of pMILC and ILK was up-regulated in the kidney of CAN rats after transplantation, and increased more significantly as the time went on. The expression of pMILC was significantly correlated with 24-h urine protein excretion (r= 0. 273, P＜0. 05), serum creatinine levels (r = 0. 434, P＜0. 01 ), the number of tubulointerstitial infiltrated mononuclear cells (r = 0. 525, P＜0. 01 ), the number of smooth muscle cells (SMC) in vascular wall (r= 0. 676, P＜0. 01 ) and the extent of interstitial fibrosis (r= 0. 570, P＜0. 01 ).There was a significantly positive correlation between ILK and pMLC in CAN rats at the 4th week after transplantation (r= 0. 778, P＜0. 01 ). Conclusion pMLC might play an key role in CAN, and the over-expression of ILK might be involve in the pathogenesis of CAN.     

高尿酸血症相关肾病研究新进展

随着经济的发展和生活水平的提高,高尿酸血症发病率显著增加,其中多数是无痛风发作的轻到中等程度的高尿酸血症。近十年来,国际上许多流行病学、动物实验或体外细胞生物学研究结果显示长期轻度高尿酸尿症(mild hyperuricemia)也可能引起慢性肾脏病。最近已有不少研究发现,基础尿酸水平升高与高血压、全身炎症反应、内皮细胞功能不良、病理性血     

HMG-CoA还原酶抑制剂对肾病综合征大鼠肝脏低密度脂蛋白受体表达的影响

目的观察在大鼠肾病综合征模型中使用3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A（HMG-CoA）还原酶抑制剂洛伐他汀（Lovastatin）治疗对肝脏低密度脂蛋白（LDL）受体表达的影响，探讨他汀类药治疗肾病综合征高脂血症的机制。方法大鼠2次尾静脉注射阿霉素建立肾病综合征大鼠模型；采用灌胃法给予大鼠洛伐他汀治疗2周。采用Western blot和RT-PCR技术分别检测LDL受体蛋白和其mRNA在肝脏的表达，同时检测大鼠相关血生化指标。结果肾病综合征大鼠洛伐他汀治疗2周后，血清总胆固醇、LDL胆固醇和三酰甘油以及尿蛋白均显著降低（均P〈0．05），血清白蛋白显著升高（P〈0．05），血肌酐在各组间差异无显著性意义（P〉0．05）；肝脏LDL受体蛋白较肾病综合征组显著增加（P〈0．01）；肝脏LDL受体mRNA水平在各组间差异无显著性意义。结论肾病综合征大鼠经洛伐他汀治疗后，其肝脏LDL受体缺乏得到明显改善，伴随的高脂血症也得到明显改善。     

T细胞免疫功能紊乱在小儿单纯性肾病发病中的作用

Ｔ细胞免疫功能紊乱在小儿单纯性肾病发病中的作用王志敏，王韵琴，邹和群，匡裕玖ＲＯＬＥＯＦＴＨＥＣＥＬＬＩＭＭＵＮＩＴＹＡＢＮＯＲ－ＭＡＬＩＴＹＩＮＰＡＴＨＯＧＥＮＳＩＳＯＦＩＤＩＯＰＡＴＨＩＣＮＥＰＨＲＯＴＩＣＳＹＮＤＲＯＭＥ￥ＷａｎｇＺｈｉｍｉｎｇ...     

肾移植后脑血管病危险因素

有资料显示，肾移植后10年内脑卒中的患病率是7．97％，包括缺血性脑卒中和出血性脑卒中，肾移植后脑出血比一般人群发生率高，且卒中后死亡率高。高血压、脑血管异常、贫血、免疫抑制剂、感染等危险因素，参与肾移植后脑血管疾病发病机制。肾移植后脑血管病的防治是肾脏科医生应该重视的临床问题。     

甲基强的松龙冲击疗法联合肾肝宁治疗激素抵抗性肾病综合征的临床观察

激素抵抗性肾病综合征在大多数患者中 ,可进展到终末期肾病。对于激素抵抗性肾病综合征以往常采用细胞毒药物或免疫抑制剂 ,使用此类药物 ,常因其毒副作用大 ,疗效差而受限。我们对我院 2 0 0 0年 8月～ 2 0 0 1年 3月住院患者应用甲基强的松龙冲击联合肾肝宁疗法治疗激素抵抗性肾病综合征 ,观察其疗效并探讨可能的作用机理。资料与方法1　临床资料　激素抵抗性肾病综合征患者 30例 ,其中男 18例 ,女 12例 ;年龄 16岁～ 5 7岁 ,平均 38岁。所有患者均行肾活检 ,病理诊断分别为系膜增生性肾小球肾炎10例 ,膜性肾病 10例 ,ＩｇＡ肾病 8例 ,系…     

反应性小管间质肾炎

与感染相关的急性小管间质肾炎（ATIN）包括：反应性小管间质肾炎和急性感染性小管间质肾炎2种类型。肾间质感染或肾间质无感染的肾外器官组织感染均可引起小管间质肾炎。肾间质无感染的全身性感染或肾外器官组织感染引起的小管间质肾炎称为反应性小管间质肾炎，而肾间质直接感染引起的小管间质肾炎称为感染性小管间质肾炎。目前，由于全身感染或肾外器官组织感染引起的反应性小管间质肾炎日益增多。     

新型人工肝单纯白蛋白透析治疗肝衰竭的临床研究

目的 以人体白蛋白作为透析液进行血液透析，观察其对肝衰竭的疗效，并与分子吸附再循环系统（MARS）进行比较。方法 18例肝衰竭患者中12例行单纯白蛋白透析（SAD），6例行MARS，每次均为6h，根据病情，每日或隔日1次，连续治疗2～6次。SAD以4000ml白蛋白溶液（质量浓度45g／L）作为透析液，置于袋中封闭循环使用，血流量250ml／min，透析液流量10L／h。分别于治疗前后取血样，检测肝功能、肾功能、血氨、内毒素和凝血酶原活动度（PTA）；另于治疗1、3和6h时分别测定血清与白蛋白透析液中的胆红素水平，治疗的同时密切观察临床表现。结果 SAD治疗后，患者临床症状与体征改善，肝功能好转，血流动力学稳定，血压上升，并发症部分缓解，特别是肝性脑病明显改善，并且不良反应少，治疗有效率高；PTA显著提高（P〈0．05），血中尿素氮、肌酐、胆红素、胆汁酸、血氨和内毒素水平均明显下降（P均〈0．05），但胆红素清除速率随着时间延长也逐渐减缓；SAD（质量分数为4．5％的白蛋白）治疗肝衰竭的疗效与MARS组基本相同（P〉0．05），但前者操作更简便，成本更低。结论 SAD能清除蛋白结合毒素，改善临床症状和肝功能，其治疗肝衰竭的疗效肯定，简单方便，值得进一步临床研究。     

改良酶消化法体外培养人脐静脉内皮细胞

目的观察改良酶消化法分离、培养人脐静脉内皮细胞(human umbilial vein endothelial cells,HUVECs)的效果,探讨获取高纯度、高活性HUVECs的培养方法。方法采集健康新生儿脐带,应用改良的酶消化法(含0.016%EDTA的0.25%胰蛋白酶)进行HUVECs的分离培养;通过细胞形态学观察及免疫荧光化学鉴定HUVECs及其特异性抗原的表达。结果体外培养的HUVECs细胞形态呈铺路石样,Ⅷ因子相关抗原荧光染色阳性,细胞纯度可达99%。结论通过本实验改良的分离培养方法,可以在体外获得较高数量的HUVECs,在细胞形态、表面抗原标志等方面具内皮细胞特征,可以用于血管内皮细胞模型的构建。