不同消融功率致兔骨骼肌急性微波热损伤修复的超声影像演变特征

目的建立兔骨骼肌急性微波热损伤模型,观察兔骨骼肌因不同消融功率所致损伤修复不同时期肌肉组织的超声影像特征,并探讨其病理组织学、血清标志物的变化。 方法根据不同消融功率,40只新西兰白兔随机分为30 W组与50 W组。高频超声引导下采用2450 MHz的微波治疗仪电针插入兔双侧股内侧肌肉,2组分别启动30 W或50 W微波热凝右侧肌肉3 min。于损伤前和损伤后1 h、1 d、2 d、7 d、28 d行二维超声、彩色多普勒血流显像、超声造影检查。在每个时间节点每组各处死4只兔,切取右侧损伤肌肉组织进行光镜病理组织学观察,抽取耳缘静脉血,检测损伤前后血清肌酸肌酶（CK）,乳酸脱氢酶（LDH）,肌钙蛋白（TnT）的含量。 结果（1）超声影像改变：损伤后1 h消融区域回声一过性增高,而后减低,1 d时达最低回声,2组1 d、2 d时损伤区内肌纹理消失,损伤最大径线值依次增大,与1 h时比较均增大[30 W组：（23.1±5.8 vs 10.0±3.1）mm,50 W组：（32.4±4.6 vs 16.0±4.1）mm,t=-7.72、-8.31,P均<0.01],30 W组2 d时达最大值,与1 d比增大[（25.7±1.8 vs 23.1±5.8）mm,t=-2.35,P<0.05],50 W组1 d时达最大值,7 d、28 d时2组损伤区最大径线值依次变小,30 W组7 d较2 d时变小[（20.8±3.4 vs 25.7±1.8）mm,t=-2.23,P<0.05],50 W组28 d较7 d时变小[（23.6±2.6 vs 28.5±4.6）mm,t=-4.32,P<0.01]。在不同时间节点50 W组的损伤区最大径线值,均大于30 W组,2组比较,差异有统计学意义[（16.0±4.1 vs 10.0±3.1）mm,（32.4±4.6 vs 23.1±5.8）mm,（31.0±5.0 vs 25.7±1.8）mm,（28.5±4.6 vs 20.8±3.4）mm,（23.6±2.6 vs 18.2±1.5）mm,t=-3.23、-3.59、-2.99、-6.53、-2.17,P均<0.05]。损伤后肌肉内彩色多普勒血流信号0级,超声造影显示消融区域无造影剂充填,与30 W组相比,彩色多普勒血流信号消失及超声造影无灌注区所显示的范围更大,持续时间长。随着肌纤维的修复,损伤后7~28 d 2组声像图上回声逐渐增高,肌纹理逐渐清晰,在消融区域周边出现Ⅱ~Ⅲ级血流信号,超声造影显示造影剂包绕消融区,无造影剂充填区逐渐缩小,但50 W组晚于30 W组。（2）HE染色光镜下可见由炭化坏死、浊肿变性区逐渐向正常肌纤维组织过渡,50 W组变性坏死区域较大,修复期损伤交界处大量新生血管和胶原纤维形成,28 d时多于7 d,肌纤维凝固性坏死、浊肿等较损伤2 d少。（3）血清标志物检测：与损伤前比较,损伤后1 h,2组血清CK含量均升高[30 W组：（1.58±0.67 vs 0.64±0.31）kU/L,50 W组：（1.84±1.19 vs 0.64±0.31）kU/L,t=-4.623、-4.768,P均<0.01];50 W组血清LDH含量升高[（7049.60±3328.60 vs 4155.80±1745.80）U/L,t=-2.594,P<0.05];损伤后1 d,2组血清LDH与TnT含量均升高[LDH 30 W组：（8486.82±2438.90 vs 4155.8±1745.8）U/L,LDH 50 W组：（9091.86±1068.50 vs 4155.8±1745.8）U/L,t=-4.762、-6.515,P均<0.05];TnT 30 W组：（21.67±8.80 vs 12.37±4.34）μg/L,TnT 50 W组：（25.64±4.19 vs 12.37±4.34）μg/L,t=-3.306、-5.194,P均<0.01）;损伤后2 d,2组血清LDH含量均升高[30 W组：（7116.2±1887.2 vs 4155.8±1745.8）U/L,50 W组：（8494.57.86±1199.30 vs 4155.8±1745.8）U/L,t=-3.283、-5.910,P均<0.01）,差异均有统计学意义。 结论兔骨骼肌急性损伤在微波热消融后1~2 d进行性加重,7~28 d呈修复趋势,消融功率50 W组修复晚于30 W组。超声成像可动态观察受损后肌肉相应的组织结构、血流分布的超声影像演变特征,与病理组织学、血清生化指标变化趋势也较为一致,从而形象直观地反映骨骼肌损伤修复过程。     

兔气管移植组织一氧化氮浓度测定及意义

目的 探讨移植气管组织中一氧化氮浓度与管腔狭窄的相关性,以及应用免疫抑制剂对两因素的影响。方法 将48只雄性大白兔随机分为A、B两组,每组24只。A组常规行气管移植术;B组气管移植术后给予免疫抑制剂环磷酰胺。两组兔分别于术后第3天、第7天、第14天取8只兔子处死。分别测定术后不同时间两组移植气管标本中的NO浓度,并测定移植气管的通畅度。结果 B组兔移植气管狭窄较A组轻,术后第7天、第14天两组间差别显著(P＜0.01)。B组术后不同时间移植段气管NO水平与A组比较均明显降低(P＜0.05)。结论 移植气管组织中一氧化氮浓度与管腔狭窄的程度有相关性;免疫抑制剂能减少NO的产生,对减轻移植段气管术后狭窄有帮助。     

VEGF在脱细胞骨基质复合富血小板血浆修复颅骨缺损中的表达

目的：研究血管内皮生长因子（VEGF）在脱细胞骨基质（acellular bone matrix,ABM）复合富血小板血浆（platelet-rich plasma,PRP）修复兔颅骨缺损时的表达及分布,探讨富血小板血浆促进成骨的机制。方法：雄性新西兰大白兔24只,体质量1.5～2.0kg。在兔颅骨两侧分别建立一个1cm×0.5cm全层骨缺损区,同时去除该区骨膜,注意勿伤及硬脑膜。随机选择一侧骨缺损作实验侧,植入复合PRP的ABM;另一侧为对照侧,仅植入ABM。术后第2、4、8、12周末分别处死6只兔取材。免疫组织化学法测定骨缺损修复区血管内皮细胞生长因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF）的表达;应用Image-proplus 5.0图像分析软件测量VEGF表达强度的灰度值。采用SSPS16.0软件包进行t检验。结果：术后2周,实验组VEGF呈强阳性表达,随后急剧下降,以后趋于平缓。对照组在术后2、4周呈阳性表达,以后平缓下降。两组相比,在第2、4周时差异均有显著性（P〈0.05）。第8、12周时,2组表达差异无显著性。结论：VEGF在实验组早期阶段的强阳性表达,说明血管形成活跃。PRP促进骨修复的作用发生在植入后早期,启动了早期活跃的成骨。     

骨髓间充质干细胞移植下调MODS兔心、脾、肾组织中细胞凋亡因子Apaf-1 mRNA表达

目的观察骨髓间充质干细胞（MSC）移植对多器官功能不全综合症（MODS）兔受累器官组织细胞凋亡蛋白酶活化因子-1 mRNA（Apaf-1 mRNA）表达及影响,探讨应用于MODS治疗的可能性和应用前景.方法体外培养、扩增、鉴定兔MSC,慢病毒转基因标记GFP,经股动脉移植,观察MSC移植后,在MODS动物模型宿主内的存活情况.RT-PCR测定MSC移植前后Apaf-1 mRNA在心、脾、肾脏器中的表达变化.结果光镜观察MSC符合MSC细胞形态学的特征;激光共聚焦显微镜观察,移植MSC兔的心、脾、肾脏器组织内有慢病毒转基因标记GFP的MSC存在;流式细胞检测分析MSC不表达血细胞表面标记如CD34、CD45,但表达CD73、CD105;RT-PCR检测结果显示正常心、脾、肾组织中均有Apaf-1 mRNA的表达,模型组心、脾、肾Apaf-1 mRNA的表达较正常组明显增加（P〈0.01）,而移植组Apaf-1 mRNA的表达低于模型组（P〈0.01）.结论体外培养获得的兔MSC表现MSC形态学特征;移植后的MSC能够定植在MODS兔的受损脏器组织内;MSC能够下调Apaf-1 mRNA在MODS的心、脾、肾组织中的表达,提示MSC移植有望为MODS提供新的治疗方法.     

白藜芦醇对兔动脉粥样硬化基质金属蛋白酶表达的影响

目的探讨白藜芦醇对实验性动脉粥样硬化兔基质金属蛋白酶（MMP）表达的影响。方法选择新西兰纯种雄性大白兔50只随机分为三组,正常对照组10只,模型组20只,白藜芦醇组20只。采用液氮冻伤术建立动脉硬化模型,造模2个月后采用液氮冻伤术激发动脉硬化斑块破裂,模后2个月及激发试验后48h后分别对三组动物测定MMP-1、9的浓度。结果模型组造模后2个月MMP-1、9的浓度分别为（50.74±5.49）ng/ml和（337.69±8.98）ng/ml,同期白藜芦醇组MMP-1、9的浓度分别为（41.33±9.58）ng/ml和（309.83±10.59）ng/ml（P〈0.01）,激发试验48h后模型组MMP-1、9的浓度分别为（100.35±6.58）ng/ml和（869.56±12.37）ng/ml,同期白藜芦醇组MMP-1、9的浓度分别为（61.68±11.69）ng/ml和（411.24±15.74）ng/ml（P〈0.01）。结论白藜芦醇能够降低MMP-1、9的浓度,从而预防和延缓动脉硬化的发生。     

激素诱发兔股骨头坏死发生过程中组织学和影像学动态对比研究

目的 研究兔激素性股骨头坏死发生、发展过程中组织学改变和影像学表现之间的相关关系.方法 健康成年日本大白兔46只,随机分为实验组30只,肌内注射甲基泼尼松龙(20mg/kg,1次/d,连续3 d);对照组16只,肌内注射相同剂量生理盐水.分别于注射后2、4、8、12周行X线、CT、MRI与股骨头血管动脉造影检查,并于处死动物前股骨头血管墨汁灌注后进行组织学检查,常规HE染色以及微血栓染色.结果 组织学:实验组2周时出现骨髓细胞碎片集聚,骨小梁出现空骨陷窝,骨髓造血组织消失,大量脂肪细胞堆积,墨汁灌注,血管数量减少;4-12周时骨髓内脂肪细胞增大,骨小梁开始萎缩、变细,骨细胞核边聚、固缩,空骨陷窝数增多,骨髓造血组织几乎完全消失,被脂肪组织、脂肪细胞替代填充,墨汁灌注血管消失.影像学:2-12周X线、CT均未见异常,在应用激素2周双侧股骨头MR T_1加权像显示信号强度明显降低,低信号区呈线样,T_2和准T_2加权像呈不均匀高信号,高信号区呈线样,并延续至12周.动脉介入造影,2周后即出现股骨头血管管腔变细,4、8周时血管数量减少,尚存在的血管变细.各时间点股骨头坏死组织学改变与MRI异常表现密切相关.对照组均未见明显异常.结论 糖皮质激素诱发兔股骨头坏死发生、发展过程中,骨坏死组织学变化和股骨头MRI异常表现密切相关;MRI异常表现在一定程度上可以反映股骨头坏死后的组织学改变;MRI是早期诊断股骨头坏死最具灵敏度、特异性,并能反映骨坏死真实情况的非侵入性检查方法.     

加味丹参饮对血瘀证心肌缺血再灌注损伤家兔内皮细胞保护作用研究

目的：研究加味丹参饮对心肌缺血再灌注损伤（IRI）血瘀证兔内皮功能及内皮细胞超微结构影响,以探讨其对心肌IRI保护作用机制。方法：家兔60只,随机分为：空白组、血瘀证组、IRI组、预处理组、丹参组和加味丹参饮组,每组10只。建立血瘀证兔IRI模型,以加味丹参饮对该模型进行干预,采用放免法检测各组血浆ET-1和6-酮-PGFIa水平变化,透射电镜观察内皮细胞超微结构。结果：与空白组比较,IRI组ET-1水平明显升高,6-酮-PGFIa水平降低（P〈0．01）;与IRI组比较,加味丹参饮组可以降低ET-1水平,提高6-酮-PGFla水平（P〈0．01）。电镜观察显示加味丹参饮可以有效的改善心肌IRI时内皮的超微结构。结论：加味丹参饮能改善缺血再灌注损伤兔内皮功能,有效保护冠状动脉内皮细胞超微结构,从而对缺血再灌注损伤的心肌具保护作用。     

捏脊疗法对脾虚证家兔血清胃动素的影响

目的观察捏脊疗法对脾虚证家兔血清胃动素（motilin,MOT）的影响。方法采用腹肌注射利血平法制作家兔脾虚证模型。将32只家兔随机分为空白组、模型组、捏脊组与四君子汤组,每组8只,空白及模型组予胃管灌喂蒸馏水,捏脊组予捏脊疗法,四君子汤组予胃管灌喂四君子汤处理。采用放免分析法测定血清MOT的含量。结果造模后家兔血清MOT的含量均明显升高,与空白组比较有统计学意义（P〈0．01）;治疗后,捏脊组与四君子汤组家兔血清MOT的含量明显降低,与模型组比较有统计学意义（P〈0．05）,两组之间比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论捏脊疗法与四君子汤均可使脾虚证家兔血清MOT含量明显降低而发挥治疗作用,且作用相当;考虑小儿服药不便,小儿脾虚证可选择捏脊疗法治疗。     

兔血乳酸的测定及意义

目的：测定正常健康兔的血乳酸水平,并讨论其影响因素及意义。方法：选取健康正常日本大耳白兔100只,雌雄各50只,分别在8：00与20：00点由兔耳正中动脉、耳缘静脉各采血,用比色法测定并记录标本中血乳酸值。结果：雌兔与雄兔的动脉血乳酸,兔8：00与20：00动脉血乳酸各组内差异无统计学意义（P〉0.05）;兔的静脉血乳酸与动脉血乳酸之间差异有统计学意义（P〈0.05）。结果：兔的动脉血乳酸水平与性别、采血时间无明显相关性;静脉乳酸水平较动脉高;正常大耳白兔动静脉血乳酸的平均水平分别为（2.11±0.34）mmol/L与（2.36±0.34）mmol/L,95%可信区间分别为2.04～2.18mmol/L与2.28～2.42mmol/L。结论：兔血乳酸正常范围的确立有利于指导进一步建立组织灌注不良疾病的兔模型。     

应用E指数、M指数定量评价兔早期急性肺栓塞

目的探讨兔早期急性肺栓塞（APE）后肺动脉高压（PHT）状态下E指数、M指数的变化及意义。方法建立有PHT的兔APE模型,常规超声心动图及组织多普勒成像（TDI）检测栓塞前、后的二尖瓣舒张早期速度E峰（Em）、舒张晚期速度A峰（AM）等多项参数,计算E指数、M指数,并比较栓塞前后的变化。结果成功建立兔APE模型23只,3只兔因房颤未纳入研究。APE后肺动脉压力明显增高,EM明显减低,右心室心肌做功指数较左心室心肌做功指数增大明显。E指数明显减低,M指数明显增大。结论APE后E指数及M指数的改变可能为定量评价早期APE提供新的参考依据。