盐酸普鲁卡因对人结肠癌HT-29细胞的作用及其机制

目的探讨盐酸普鲁卡因对人结肠癌HT-29细胞生长的抑制作用及其机制。方法 应用不同浓度（0~10mmol/L）盐酸普鲁卡因处理HT-29细胞,通过倒置显微镜观察细胞形态学改变、四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测细胞存活率、流式细胞术（FCM）观察细胞周期变化。结果倒置显微镜观察盐酸普鲁卡因处理后的HT-29细胞呈现缩小、皱缩、空泡、脱壁等增殖变慢的形态学特征;MTT结果分析表明盐酸普鲁卡因能显著抑制HT-29细胞增殖,其抑制率呈药物浓度及时间依赖性;FCM结果显示盐酸普鲁卡因可以使HT-29细胞的G0/G1期延长,S期缩短。结论盐酸普鲁卡因能够使HT-29细胞的生长阻滞在G0/G1期,从而显著抑制HT-29细胞的增殖,并且具有剂量、时间依赖效应。     

多胺类似物BENS对黑素瘤B16-F1细胞生长的影响

目的:探讨多胺类似物N1,N11-bis(ethyl)norspermine(BENS)对黑素瘤B16-F1细胞生长及凋亡的影响.方法:BENS处理B16-F1细胞,MTT法检测细胞存活率,FCM法检测细胞凋亡率,荧光染色法检测线粒体膜电位的变化,DNA片段化检测细胞凋亡,Western印迹法检测凋亡相关蛋白的含量.结果:多胺类似物BENS能显著抑制B16-F1细胞增殖,抑制率呈药物浓度依赖性.BENS可诱导DNA片段化,导致FCM分析中出现典型的亚凋亡峰,同时伴有细胞线粒体膜电位降低、细胞色素C由线粒体向细胞质释放和Bax由细胞质向线粒体转移等凋亡相关性改变.结论:多胺类似物BENS抑制黑素瘤B16-F1细胞生长,并能诱导该细胞凋亡,具有潜在的临床应用价值.     

精胺/精眯N1-乙酰基转移酶重组蛋白的原核表达及其抗体制备

目的 探讨精胺/精眯N1乙酰基转移酶(SSAT)的原核表达及抗SSAT多克隆抗体的制备.方法 RT-PCR法从人肺癌细胞总RNA中克隆SSAT cDNA后,构建SSAT原核表达质粒pET15b/SSAT并转化BL21(DE3)大肠杆茵细胞.SSAT重组蛋白经IPTG诱导表达后,利用PAGE凝胶纯化和Ni-NTA亲和层析纯化.用凝胶纯化的SSAT重组蛋白免疫家兔以制备抗SSAT多克隆抗体,所得抗体的特异性及效价用Western blot和ELISA技术检测.结果 SSAT重组蛋白可在大肠杆茵中诱导性高表达,用此蛋白免疫动物所得的SSAT抗体的效价以及特异性均较高.结论 建立了SSAT原核表达系统并成功制备出SSAT多克隆抗体.     

美托洛尔联合氯吡格雷对心肌缺血再灌注损伤小鼠的作用机制

目的 探讨美托洛尔联合氯吡格雷对心肌缺血再灌注（MI/R）损伤小鼠的效果及机制。方法 10周龄SPF级雄性C57BL/6小鼠75只被随机分为假手术组、模型组、美托洛尔组、氯吡格雷组及联合组,每组15只。分别术前给予假手术组和模型组生理盐水灌胃、美托洛尔组小鼠美托洛尔（10 mg/kg）灌胃、氯吡格雷组小鼠氯吡格雷（20 mg/kg）灌胃、联合组小鼠美托洛尔（10 mg/kg）和氯吡格雷（20 mg/kg）灌胃。再灌注24 h后,超声检测各组小鼠左心室射血分数（EF）和左心室缩短分数（FS）;麻醉后取小鼠心脏组织,染色后计算各组小鼠缺血再灌注区心肌梗死面积;取小鼠外周血,采用流式细胞仪检测外周血血小板活化水平;对小鼠心脏组织进行免疫荧光检测缺血再灌注区血小板、中性粒细胞沉积水平;通过TUNEL染色检测缺血再灌注区心肌细胞凋亡水平;采用Western blot检测缺血再灌注区心肌组织的胱天蛋白酶3（Caspase 3）和多聚ADP核糖聚合酶（PARP1）水平。结果 相较于假手术组,模型组小鼠左心室EF、FS水平显著降低,缺血区心肌梗死面积显著增加（P＜0.05）;美托洛尔组、氯吡格雷组及联合组小鼠左心室EF、FS水平显著高于模型组,缺血区心肌梗死面积显著少于模型组,且联合组上述指标水平均显著优于美托洛尔组或氯吡格雷组（P＜0.05）。模型组小鼠外周血血小板活化水平,缺血区心肌组织的血小板、中性粒细胞沉积及心肌细胞凋亡数量、剪切的Caspase 3和PARP1水平显著高于假手术组（P＜0.05）;美托洛尔组、氯吡格雷组及联合组小鼠缺血区心肌细胞凋亡数量、剪切的Caspase 3和PARP1水平显著低于模型组（P＜0.05）;氯吡格雷组及联合组小鼠外周血血小板活化及缺血区心肌组织血小板、中性粒细胞沉积显著低于模型组（P＜0.05）;联合组上述指标水平均显著优于氯吡格雷组和美托洛尔组（P＜0.05）。结论 美托洛尔联合氯吡格雷治疗心肌缺血再灌注损伤效果优于美托洛尔或氯吡格雷单独治疗,其机制与抑制心肌细胞凋亡及血小板激活有关     

二甲双胍调节系统性效应T细胞/调节性T细胞平衡对博来霉素诱导系统性硬化病小鼠模型的影响

目的:研究不同浓度二甲双胍对博来霉素（BLM）诱导SSc小鼠模型的影响及机制。方法:C57BL/6小鼠按照随机分配原则分为正常组、模型组、高、中、低剂量二甲双胍治疗组,经博来霉素、二甲双胍干预4周末处死小鼠。局部皮肤采用组织病理染色法测量真皮和胶原厚度,免疫组织化学法和实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测IL-17...     

枳椇子抗脂质过氧化作用的实验研究

40％枳子匀浆灌胃能显著降低小鼠血清和肝、脑组织中MAD含量，升高肝、肾、脑组织中SOD活性，增强小鼠的耐寒、耐热机能，延长小鼠游泳时间，提示有抗脂质过氧化和抗衰老作用。     

5种抗肿瘤药对小鼠脂质过氧化作用的影响

研究抗肿瘤药甲氨蝶呤、阿糖胞苷、环磷酰胺、5—氟尿嘧啶和丝裂霉素C对小鼠脂质过氧化作用的影响、结果显示:5种抗肿瘤药使小鼠血清和肝、脑中MDA含量显著升高.但对肝组织体外生成MDA的速度无明显影响。提示这些药物对过氧化脂质的代谢有严重干扰。     

枳Ju子抗脂过氧化作用的实验研究

４０％枳Ｊｕ子匀浆灌胃能显著降低小鼠血清和肝、脑组织中ＭＡＤ含量，升高肝、肾、脑组织中ＳＯＤ活性，增强小鼠的耐寒，耐热机能，延长小鼠游泳时间，提示有抗脂质过氧化和抗衰老作用。     

血浆载脂蛋白B水平对红细胞膜巯基含量的影响

红细胞膜巯基(SH)来源于膜上的多种含SH蛋白,这些蛋白结合在膜的内外表面,或掩埋在膜的内部。红细胞膜SH对维持红细胞结构和功能的完整性有重要意义。有文献报道,某些病态下红细胞膜SH数发生明显改变,所以研究病态下红细胞膜SH数的变化有一定的理论意义和临床意义。本研究工作表明,高载脂蛋白B(apoB)血症患者红细胞膜SH数显著性低于对照者,现报道如下。