生物化学精品课程建设的探索与实践

结合生物化学精品课程建设的实践,从教师队伍、教学内容、教学方法、教材建设和教学管理方面谈建设生物化学精品课程的体会。     

重组天花粉蛋白体外诱导宫颈癌 HeLa 细胞 p27 基因去甲基化的研究

目的 研究重组天花粉蛋白 (recombinant trichosanthin, rTCS) 对宫颈癌 HeLa 细胞中 p27 基因甲基化状态和基因表达的影响。方法 应用不同质量浓度的 rTCS (20、40、80 μg/mL) 处理体外培养的宫颈癌 HeLa 细胞后,MSP 法检测用药前后细胞中 p27 基因的甲基化状态,RealTime PCR 法检测用药前后细胞中 p27 和 DNA 甲基转移酶1 (DNMT1) mRNA 水平的变化,Westernblotting 法检测用药前后细胞中 p27 蛋白表达的变化。结果 HeLa 细胞中 p27 基因为低表达,基因启动子区 CpG 岛呈部分甲基 化状态。40 μg/mL rTCS 处理导致 p27 基因启动子区 CpG 岛去甲基化;在 20、40、80 μg/mL 的 rTCS 作用 48 h 后,p27 基因 mRNA 相对表达水平分别升高 2.22、4.00、6.03 倍,p27 蛋白水平表达也逐渐增加;宫颈癌 HeLa 细胞中 DNMT1 mRNA 高表达,40 μg/mL rTCS 处理 48 h 可至 DNMT1 mRNA 表达水平降低 78%。结论 rTCS 通过抑制 DNMT1,逆转 p27 基因启动子区 CpG 岛的甲基化状态,使宫颈癌 HeLa 细胞中 p27 基因表达活化。rTCS 能逆转宫颈癌 HeLa 细胞 p27 基因甲基化状态,调控 p27 基因和 DNMT1 的表达。     

miRNA与宫颈癌相关性的研究进展

微小RNA(miRNA)是一类机体内源性表达的小分子非编码单链RNA,广泛参与基因转录后水平的调控。其在宫颈癌的发生、侵袭、转移和复发等过程中扮演重要角色,与患者预后密切相关。miRNA可通过调控靶基因从而促进宫颈癌细胞凋亡,并能改变肿瘤细胞对药物的敏感性,且能在组织、血清和血浆等标本中稳定存在。miRNA有望成为宫颈癌诊断的新标记物和治疗的新靶点。     

注重培养医院药师药学服务能力的做法

药学服务是近年来提出的一个新概念,是指提供直接的和有责任的、以达到提高病人生命质量为目的、与药物有关的服务〔1〕。医院药学经历了三个发展阶段：调剂药学、临床药学和药学服务。药学服务除了对治疗目标参与设计治疗方案外,还应对整个用药过程进行监测（血药浓度和不良反应监测）,远远超越了日常的临床药学实践,是临床药学更高层次的发展,是21世纪医院药学发展的必然趋势。     

子宫肌瘤术后的心理评估和护理体会

目的对子宫肌瘤患者术后的心理状况进行评估，探寻适合子宫肌瘤术后患者的护理方法。方法选取我院172例子宫肌瘤术后患者，随机均分为2组，对照组采用术后一般护理；试验组采用术后一般护理加心理护理干预。并分别在术后第2天用Zung自评量表SAS评分对其心理情况进行评估。护理结束后比较患者的分值及对护理工作的满意度。结果对试验组与对照组术后第2天用Zung自评量表SAS评分进行心理评估无统计学差异（P〉0．05）；护理结束后，试验组相关分值明显低于对照组，具有统计学差异（P〈0．05）。试验组的护理工作满意度明显高于对照组，具有统计学差异（P〈0．05）。结论子宫肌瘤患者术后均有一定程度的焦虑，而心理护理干预可减轻焦虑，提高患者对护理工作的满意度，具有积极的临床意义。     

融合基因CRT/vGPCR的构建及其在真核细胞膜上的表达

目的:将人钙网蛋白(CRT)基因与病毒G蛋白偶联受体(vGPCR)基因进行基因重组融合,由此将CRT携带到肿瘤细胞膜表面。方法:从pSG5-vGPCR质粒中获得全长vG-PCR基因片段并与CRT全长编码序列的3′端连接形成融合基因,然后将融合基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中。用此质粒转染人A549肺癌细胞后,用RT-PCR检测重组融合基因的表达,用免疫荧光细胞化学和流式细胞术分析鉴定融合蛋白的表达及其在细胞膜上的定位。结果:成功获得重组融合质粒pcDNA3.1(+)-CRT/vGPCR,经DNA序列测定证实融合基因两阅读框(ORF)对接无误。将上述质粒转染A549细胞后,融合基因可在A549细胞中表达并定位到细胞膜上。结论:通过与CRT基因融合重组,具有膜定位能力的vGPCR能将CRT蛋白高效包被到肿瘤细胞膜上。     

甲状腺癌术后骨质疏松及其防治

甲状腺癌是一种较为常见的颈部肿瘤，手术切除效果良好，但甲状腺癌术后因大部分甲状腺被切除其甲状腺激素（Ｔ３、Ｔ４）和降钙素（ＣＴ）分泌均随之减少。为此作者将近１０年来因甲状腺乳头状癌而行甲状腺全切除或次全切除的病人２６例进行了随访，并测量其骨密度（ＢＭＤ）及有关的内分泌激素。结果显示：（１）术后患者ＣＴ水平都有不同程度的降低，其降低的程度与骨密度降低的程度成正相关（ｒ＝０．７８，Ｐ＜０．００５），在甲状腺次全切除后患者骨密度降低的年龄提早了１０年，据此可以推断，ＣＴ在骨质疏松的发病机制中起了重要作用。（２）术后大部分病人没有坚持长期服用甲状腺片导致了甲状腺功能低下并影响了卵巢功能。作者认为，有必要对甲状腺癌术后的病人适当给予ＣＴ治疗，并强调长期加服小剂量甲状腺片及改善雌激素水平，以防止发生骨质疏松。     

枳Bei子对实验性肝损伤的防护作用

ＣＣｌ４性肝损伤小鼠血清ＧＰＴ活性，血清和肝ＭＤＡ含量显著性升高，但血糖和白蛋白浓度显著性下降，表明肝脏结构与功能的严重损伤，用枳Ｂｅｉ我浆灌胃１４ｄ由述指标变化幅度明显变小，提示枳Ｂｅｉ对ＣＣｌ４引起的肝损伤具有防护作用。     

钙网蛋白与寄生虫感染免疫

1974年，Ostwald从兔肌细胞的肌浆网中分离出一种高亲和力Ca^2＋结合蛋白，命名为HACBP（high affinity calciumbinding protein，高亲和力Ca^2＋结合蛋白）。1989年Fliegel和Smith等人同时获得编码这种蛋白的cDNA。