高效液相色谱法测定环孢素 A 血药浓度

采用高效液相色谱法测定环孢素 A(CsA)的血药浓度。色谱条件:国产 YWG-C_(18)柱,流动相为乙腈:水(80:20,V/V),流速1.0ml/min,柱温60℃,紫外检测波长214nm,内标法定量。结果显示,简化的血样抽提方法回收率较高,平均76.3±1.7%,最低检测限达20μg/L。此法应用于肾移植病人的血药浓度监测,发现我国人群 CsA 的有效血药浓度范围较大。     

心衰的分子生物学与演进中的治疗策略

心衰是冠心病、高血压病、心肌病、心肌炎、糖尿病、瓣膜性心脏病和先天性心脏病等许多主要心血管病的共同归宿。近年来，国际上尤其是美国国立心肺血管研究所（NHLBI）对心衰的研究高度关注，认为是最难、最坏的临床问题，最迫切的任务，同时又是最好的研究机遇[1]。1心衰的分子生物学1．l肾上腺素受体及其转导系统的改变【‘1：。C肌细胞膜上不仅存在已受体，还有＆受体、。；受体等，这三者的激活均产生正性肌力作用。正常心肌以闯受体为主，其与＆受体数量之比为孤：刀。。C衰时交感神经系统兴风作浪，血中儿茶酚胺浓度增高，刺激。u…     

从基础走向临床——国际心脏研究会第十九届世界大会简介

国际心脏研究会（International Society for Heart Research，ISHR）第十九届世界大会于2007年6月22-25日在意大利历史名城博洛尼亚（Bologna）举行。本刊特别邀请亲临此次会议的余细勇教授带来此次大会的精彩内容。[编者按]     

转化生长因子β1反义RNA对肾小球系膜细胞基质合成及分泌的影响

目的：观察转化生长因子beta1(TGF-β1）反义RNA对系膜细胞基质合成的影响。方法：构建含TGF－β1反义RNA的重组腺病毒，将重组腺病毒转染系膜细胞，用Northern blot检测转染系膜细胞TGF－β1及ColIV mRNA的含量，用免疫组化半定量分析转染的系膜细胞中TGF－β1，纤连蛋白（FN）及胶原（Col)IV蛋白水平，并与无转染的系膜细胞对照组比较其表达的变化。结果：构建了含TGF－β1反义RNA的重组腺病，重组反义TGF－β1腺病毒转染系膜细胞后，与对照组相比，在第24hTGF-β1及Col IV的mRNA无明显抑制，在48hTGF－β1及Col IV mRNA抑制率分别为22．5％，18．2％，72h TGF-β1及Col IV mRNA抑制率分别为29．5％，27．3％，免疫组织化学半定时结果显示；与对照组相比，在48h始转系膜细胞TGF－β1，FN及ColIV蛋白含量开始下降，48h TGF-β1，FN及Col IV蛋白抑制率分别为16．5％，18．2％及14．6％，72h TGF－β1，FN及ColⅣ蛋白抑制率分别为23．5％，27．3％，26．8％。结论：重组反义TGF－β1可抑制系膜细胞合成细胞外基质，在肾小球肾炎及肾小球硬化的研究及治疗中有潜在的应用价值。     

导向药物转化生长因子α-Sporin对增殖平滑肌细胞生长的抑制作用

为证实生物导向药物对平滑肌细胞增殖的作用,用SPDP化学联结法合成了转化生长因子α-Saporin,通过MTS比色法观察了转化生长因子α-Saporin对培养中的增殖平滑肌细胞的细胞毒性作用,并用氟标胸腺脱氧嘧啶核苷掺入法进一步探讨了转化生长因子α－Saporin对平滑肌细胞的DNA合成的影响以及过量转化生长因子α-对转化生长因子α-Saporin的受体竞争抑制作用。结果发现,联结后的转化生长因子α－Saporin可明显抑制平滑肌细胞的增殖,而Saporin的抑制作用却很弱,转化生长因子α－Saporin对培养的平滑肌细胞氘标胸腺脱氧嘧啶核苷掺入量有明显抑制作用。与对照组比较氘标胸腺脱氧嘧啶苷掺入量降低了39．1％（P＝0．0017）,而在加入表皮生长因子受体的配体转化生长因子α后可明显竞争抑制转化生长因子α－Saporin对平滑肌细胞增殖的细胞毒性作用。实验结果提示：转化生长因子α－Saporin通过表皮生长因子受体介导已具有较Saporin明显增强的细胞毒性作用。本实验为转化生长因子α－saporin在经皮腔内冠状动脉成形术术后再狭窄的临床防治中的应用的研究提供初步的实验依据。αα     

吲达帕胺、硫氮酮对缺血/再灌注心肌的保护作用

目的　采用离体大鼠心脏灌注模型 ,探讨吲达帕胺 (Indapamide)、硫氮酮 (Diltiazem)在心肌缺血 /再灌注过程中对心肌的保护作用。方法　SD大鼠 45只 ,随机分为吲达帕胺组、硫氮酮组、对照组 (灌注液中不含药物 )。比较三组动物在心肌缺血 30min及再灌注 30min后心电图、心肌酶 (CK、LDH) ,同时监测心功能指标的变化。结果　①对照组在心肌缺血 /再灌注后CK、LDH含量较缺血前明显升高 (P<0 0 5 )。吲达帕胺组、硫氮酮组在心肌缺血 /再灌注后心肌CK、LDH含量较对照组明显降低 (P <0 0 1)。②吲达帕胺组、硫氮酮组于再灌注 15、30min两时点 ,冠脉流量、心肌收缩力恢复百分比显著高于对照组 (P <0 0 5 )。结论　吲达帕胺、硫氮酮对缺血 /再灌注的心肌具有保护作用     

粉防己碱对高血压心肌肥厚大鼠心肌胶原含量和肌球蛋白ATP酶活性的影响(英文)

观察粉防己碱对高血压心肌肥厚大鼠心肌胶原含量和肌球蛋白ATP酶活性的影响 .采用二肾一夹肾血管性高血压造成大鼠左心室肥厚模型 ,自术后第 9周起按粉防己碱 50mg·kg- 1,依那普利 6mg·g- 1灌胃给药 ,每日 1次 ,连续 8周 .用分光光度法测定心肌羟脯氨酸含量及肌球蛋白ATP酶活性 .结果表明左心室肥厚组心肌羟脯氨酸为 (5.9± 0 .3)mg·g- 1干重 ,明显高于假手术对照组〔(3.6± 0 .4 )mg·g- 1干重〕 ,粉防己碱组和依那普利组心肌羟脯氨酸含量分别较左心室肥厚组低 2 8.2 %和 39.0 % .左心室肥厚组肌球蛋白ATP酶活性仅为 (0 .4 3± 0 .0 9)mmolPi·min- 1·g- 1蛋白质 ,较假手术对照组〔(0 .97±0 .0 6 )mmolPi·min- 1·g- 1蛋白质〕明显降低 ,而粉防己碱组和依那普利组则分别比左心室肥厚组高 6 0 .5%和 118.6 % .实验结果表明粉防己碱可部分逆转肾血管性高血压所致的大鼠左心室肥厚 ,降低心肌胶原含量 ,升高肌球蛋白ATP酶活性     

腺病毒表达载体对骨髓间充质干细胞分化能力的影响

目的 研究腺病毒感染骨髓间充质干细胞(MSC)对MSC分化潜能的影响.方法 利用表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒感染传至3代的人MSC,分别在感染后第2、4、8和16天收集细胞,提取总RNA,利用RT-PCR检测感染前后MSC中内胚层标志基因CYP51、中胚层标志基因SM22α、外胚层标志基因槽蛋白(nestin)、多分化潜能标志基因OCT4和可变剪切因子基因nPTB的表达.在腺病毒感染MSC 7 d后,利用成脂肪诱导剂继续诱导培养14 d,用油红O染色观察MSC向脂肪细胞分化情况.结果 RT-PCR检测显示,MSC中CYP51、SM22α、nestin、OCT4和nPTB在腺病毒感染后2、4、8和16 d时仍有表达.腺病毒感染7 d后的MSC仍可向脂肪细胞分化,且分化效率同正常MSC一致.结论 腺病毒载体感染MSC后,不会影响MSC的分化能力,可以作为MSC诱导分化机制研究的基因表达载体.     

广州管圆线虫中间纤维蛋白的体外表达和初步免疫学鉴定

目的对广州管圆线虫中间纤维蛋白(intermediate filament,IF)基因进行体外表达、纯化、鉴定和抗原性质分析。方法将IF基因的重组表达载体pET-IF在大肠杆菌中表达,表达产物经组氨酸亲和层析纯化,SDS-PAGE鉴定蛋白质分子量,质谱分析氨基酸序列,生物信息学分析蛋白质结构,Western blot鉴定与人、大鼠和小鼠感染血清及人IgG4亚类的抗原反应性。结果SDS-PAGE、质谱分析和Western blot证明本研究获得的纯化蛋白为预期蛋白IF,其分子量为47.8kDa,肽指纹图谱与秀丽杆线虫IF蛋白家族具有高度同源性,并具有典型的IF结构特征,且IF结构的尾部存在抗原决定簇,融合蛋白IF能与大鼠感染血清、小鼠感染血清和患者血清IgG结合,也能与患者IgG4亚类结合。结论体外获得了抗原IF纯化蛋白,研究显示其可用于人类外周血检测并有助于检测现症感染和疗效考核。