双重PCR技术同时检测母婴乳头瘤病毒和巨细胞病毒方法的建立

建立双重ＰＣＲ技术同时检测人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）和巨细胞病毒（ＨＣＭＶ），并将该方法应用于临床１７３例产妇和新生儿感染的检测，总阳性率达２０．２３％，结果证明该双重ＰＣＲ技术检测方法确实有效可行。     

重点学科开放性实验室软环境建设探析

重点学科开放性实验室软环境对学科建设与发展具有深刻的影响，开拓创新的学术梯队、科学严谨的运行机制、健康和谐的学术氛围、积极向上的行为方式是构成良好实验室软环境的主要图景。我们在以人为本，设计更高效益的具体目标、建立强有力的制度保证体系、制度与环境相容的良性机制、科学应用现代管理手段以及提高管理效率等方面需进一步努力。     

流式细胞仪检测rhTNF-α对人正常精子线粒体功能和质膜完整性影响的实验研究

目的观察rhTNF-α在体外对人正常精子线粒体功能和质膜完整性的影响.方法56例健康成年男性手淫法获得精液,按照WHO精液标准分析,合格40例.Peroll梯度离心法得到的精子为精子模型,将精子密度调整为10×106/ml,与终浓度30 pg/ml、60 pg/ml、90 pg/ml、270 pg/ml的rhTNF-α分别在37℃、5% CO2的环境中孵育,同时设立对照组.在0.5 h、1 h、2 h、3 h、4 h时间段取样,用终浓度为10 μg/ml 的Rh123和PI双染色精子,流式细胞仪检测精子线粒体膜电位及质膜完整性的变化.结果与对照组相比较,60 pg/ml、90 pg/ml、270 pg/ml各组的线粒体功能良好的精子明显减少,这种变化趋势与TNF-α浓度和孵育时间呈正相关(P﹤0.01).30pg/ml组的精子线粒体功能与对照组相比较无统计学差异(P>0.05);30pg/ml、60 pg/ml、90 pg/ml、270 pg/ml各组的PI染色阳性而Rh123染色阳性的精子数量较对照组多,并且与rhTNF-α浓度和孵育时间呈正相关(P﹤0.01).结论rhTNF-α对人精子线粒体功能有一定的影响,提示有可能干扰精子的能量代谢,降低精子受精能力,并有可能通过线粒体凋亡途径,促进精子凋亡;同时影响精子质膜的完整性.     

高压输变电工频电磁场对人群免疫功能影响的调查研究

目的了解高压输变电线路产生的工频电磁场是否对居民免疫学相关指标产生影响。方法按居住地距高压输变电线路垂直距离远近分为暴露组和对照组,检测其血清IgG、IgM、淋巴细胞、NK细胞、CD3+细胞含量等相关免疫学指标及抗精子抗体,对比分析。结果两组人群IgG含量无统计学差异(P>0.05);IgM的含量则有统计学差异(P<0.01);淋巴细胞、NK细胞、CD3+细胞含量及抗精子抗体等指标均无统计学差异(P>0.05)。结论高压输变电线路产生的工频电磁场可能使居民血清IgM的含量增加。     

优化免疫学实验教学体系，培养探究与创新能力

实验教学是培养和提高学生的综合素质、探究与创新能力的重要途径。在医学免疫学实验教学中优化实验教学的形式和内容,在综合性实验的基础上开设设计性实验,教师引导学生质疑、提供信息,启发思路,学生主动、富有个性探究,潜能得到发挥,新的思维、新的能力、新的素质涌现,能使学生掌握基本实验技能操作和基本研究方法,也能获取相应的感性知识,培养学生观察问题,分析、解决问题的能力,寻找解决办法、探究其中规律的严谨科学态度,同时将理论知识、实验技能与科学实践、临床实践有机联系,“授鱼”与“授渔”融合,探究与创新并举。     

Bcl-2家族在阿司匹林诱导人小细胞肺癌A549细胞凋亡中的作用

摘要 目的: 研究阿司匹林对人小细胞肺癌A549细胞体外增殖抑制作用及凋亡的影响,探究Bcl-2在诱导凋亡机制中的作用。方法:运用体外细胞培养,阿司匹林以不同浓度（1,2.5,5,7.5,10mmol/L）作用于人小细胞肺癌A549细胞。采用噻唑蓝(MTT)法测定阿司匹林对细胞杀伤率;用流式细胞检测法测定细胞周期时相改变及细胞凋亡率;琼脂糖电泳法观察凋亡细胞DNA Ladder 现象;Western blot检测凋亡相关基因Bcl-2等表达;荧光染色观察细胞线粒体膜电位的改变。结果：阿司匹林对人小细胞肺癌A549细胞有较强的抑制作用,有明显的时间和剂量依赖性;可使A549细胞G0/G1期和G2/M期比例明显下降,S期比例升高;诱导细胞凋亡发生;阿司匹林作用A549细胞后,Bcl-2表达量减少,Bax表达增加,Caspase3活化,线粒体膜电位改变。结论：阿司匹林在体外可有效抑制人小细胞肺癌A549细胞增殖,可能通过影响肿瘤细胞DNA合成,改变细胞周期时相分布、诱导凋亡发挥抑制细胞增殖作用,其凋亡机制与Bcl-2表达减少,线粒体膜跨膜电位下降相关。     

小鼠PDL1胞外区的克隆、表达及生物学效应研究

目的：克隆小鼠PDL1膜外区（简称mPDL-1 IgV）基因,构建原核表达载体,检测其表达和生物学活性。方法：提取小鼠脾细胞总RNA,采用RT-PCR克隆mPDL-1 IgV基因,并将其克隆到原核表达载体pET28a（＋）中,构建原核表达质粒pET28a（＋）／mPDL-1 IgV,转化大肠杆菌DH5α,进行PCR和双酶切鉴定,并测序。筛选阳性菌落,提取质粒,转化至大肠杆菌BL21（DE3）中进行表达,对表达产物进行SDS-PAGE电泳和Western blot检测分析,同时纯化mPDL-1 IgV蛋白,进行生物学活性检测。结果：从小鼠脾细胞总RNA中成功获得mPDL-1 IgVcDNA克隆,重组质粒pET28a（＋）／mPDL-1 IgV构建正确。转化pET28a（＋）／mPDL-1 IgV的E．coli BL21（DE3）成功诱导性表达重组小鼠PDL-1胞外区蛋白,并纯化mPDL-1 IgV蛋白,对其进行了复性和浓缩,复性后的蛋白显示出良好的生物学活性。结论：成功地克隆、表达和纯化了小鼠PDL1胞外区蛋白,为进一步研究其功能提供了条件。     

细菌鞭毛标本制作方法的改进

目的：建立稳定、实用、效果良好的细菌鞭毛标本制作及染色方法。方法：本实验将多次幅菌复苏好的变形杆菌鞭毛充分舒展和菌体自由扩散后制做鞭毛标本。结果：所制标本鞭毛丰富、伸展自然、清晰易找。结论：该方法效果理想,实用性强,简单易行,对基层教学单位尤为实用。     

基于miR-124-3p/IL-6信号通路的槲皮素和表儿茶素协同调节炎症相关性结直肠癌研究

目的 基于miR-124-3p/白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)信号通路探究槲皮素与表儿茶素协同作用对炎症相关性结肠癌模型小鼠的干预作用及作用机制。方法 采用氧化偶氮甲烷（azoxymethane,AOM）/葡聚糖硫酸钠（dextran sodium sulfate,DSS）诱导小鼠建立炎症相关性结肠癌模型,同时单独或联合给予槲皮素和表儿茶素,待整个造模周期结束,测量各组小鼠结直肠长度,统计结直肠组织肿瘤数量;采用苏木素-伊红（HE）染色观察各组小鼠结肠组织病理变化;采用qRTPCR检测结直肠组织中炎症相关基因[Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、IL-1β、IL-6、IL-17]及肿瘤相关基因[c-myc、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）]和miR-124-3p的m RNA表达;采用Western blotting检测结直肠组织中磷酸化信号转导与转录活化因子3(phosphorylated signal transducer and activator of t...