人参皂甙Rg1对局灶性脑缺血大鼠脑组织神经元特异性烯醇化酶表达的影响及其意义

目的 探讨人参皂甙Rg1对局灶性脑缺血大鼠脑组织神经元特异性烯醇化酶(NSE)表达的影响及其意义.方法 给大鼠腹腔注射人参皂甙Rg1 20mg/kg,每日2次,连续5d;然后采用改良的线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型,观察大鼠脑缺血后不同时间段(3h、24h、48h、72h)神经功能缺损评分;应用免疫组化法检测脑组织NSE的表达;并与对照组(生理盐水)和假手术组比较.结果 人参皂甙Rg1组大鼠脑缺血后各时间点神经功能缺损评分明显低于对照组(均P＜0.05).与假手术组相比,对照组脑缺血后3h NSE表达即明显降低;人参皂甙Rg1组各时间点NSE阳性细胞数明显多于对照组(均P＜0.01).结论 人参皂甙Rg1可使缺血脑组织的NSE表达上调,这可能是其发挥脑保护作用的机制之一.     

人参皂甙Rg1对大鼠脑源性神经干细胞分化作用的实验研究

目的 探讨人参皂甙Rg1对体外培养大鼠大脑皮质神经干细胞(NSC)分化作用的影响.方法 利用无血清DMEM/F12(含20ng/mL bFGF和EGF及2% B27)体外培养技术从新生Wistar大鼠大脑皮质中培养NSC,在NSC分化过程中添加不同剂量(20mg/L、40mg/L和80mg/L)人参皂甙Rg1进行干预,以免疫荧光及细胞化学方法对NSC及其分化后的细胞进行鉴定.结果 从大脑皮质分离培养的NSC能够表达巢蛋白(Nestin),并具有分化为神经元、星形胶质细胞及少突胶质细胞的能力.在同一接种密度条件下,不同剂量人参皂甙Rg1干预组的Nestin阳性细胞表达数分别为20mg/L组(21.5±2.9);40mg/L组(18.6±2.4);80mg/L组(16.7±2.2),与对照组(24.8±3.1)比较明显减少(P＜0.05).而人参皂甙Rg1干预组表达神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、半乳糖苷酶(GalC)的阳性细胞数较对照组明显增加(P＜0.05).结论 人参皂甙Rg1可能有促进新生大鼠大脑皮质NSC的分化的作用.     

缺血再灌注对大鼠海马神经元淀粉样蛋白及其蛋白前体表达的影响及人参皂甙Rg2的干预

目的 探讨缺血再灌注对大鼠认知功能的损伤机制及人参皂甙RS2干预作用.方法 制备大鼠脑中动脉阻断法缺血再灌注模型,缺血60min后再灌注24h.用Morris水迷宫方法测定大鼠认知记忆能力变化;用免疫组织化学和图像分析方法检测脑组织β淀粉样蛋白(Aβ1-40)、其前体蛋白(APP)和NMDA受体蛋白(NR1)的表达.结果 人参皂甙Rg22.5～10ms/kg及尼莫地平50μg/kg,使逃避潜伏期明显缩短(P<0.01);Aβ1-40及APP、NR1表达减弱(P<0.05,0.01).结论 缺血再灌注可以通过上调β淀粉样蛋白(Aβ1-40)、其前体蛋白(APP)和NMDA受体蛋白(NR1)而引起认知功能障碍,人参皂甙Rg2对认知功能有保护作用.     

人参皂甙Rb1对脑缺血半影区葡萄糖转运体3表达的影响

人参皂甙是从植物根、茎、叶中提取出的主要有效成分，具有多种生物活性。除了有增强机体免疫力、抗肿瘤、抗衰老、降低血糖等作用外，对脑缺血损伤还有保护作用，可减小脑梗塞体积。我们用大鼠脑缺血再灌注模型，观察人参皂甙Rb1对脑缺血再灌注损伤后缺血半影区葡萄糖转运体3（GLUT3）mRNA、蛋白表达以及脑梗塞体积的影响，从能量代谢角度进一步探讨Rb1的神经保护机制。     

急性低氧条件下复氧后大鼠脑HIF-1α蛋白的表达与药物干预研究

目的 观察大鼠脑缺氧状态下HIF-1α蛋白的表达规律及低氧状态下人参皂甙Rd干预对其影响并探讨机理。方法 将成年Wistar大鼠随机分为常氧对照组、急性低氧对照组、低氧预处理干预组、人参皂甙Rd干预组，分别观察各组大鼠海马锥体细胞层神经元形态的变化及HIF-1α蛋白的表达规律。结果 在缺氧后复氧即刻，我们可以发现HIF-1α蛋白的少量表达，主要存在于海马细胞，多在细胞质中表达；随着时间的推移，在复氧后4小时，HIF-1α表达逐渐达高峰，至9小时HIF-1α表达又明显减少。低氧预处理干预组及人参皂甙Rd干预组的实验结果发现HIF-1α表达较非干预组减少，与非干预组各时间点相比，均有统计学意义（P=0.009＜0.05）。两个干预组之间比较无统计学差异(P＞0.05)。结论 急性低氧可以促使HIF-1α在大鼠海马神经细胞的表达，具有时间依赖性；同时，低氧预处理干预及人参皂甙Rd干预均可促使大鼠脑组织HIF-1α表达减少，可能对急性缺氧性脑损伤产生保护作用，抑制氧自由基的产生及调节钙离子内流可能是低氧预处理及人参皂甙Rd的作用途径之一，其具体机理有待进一步阐明。     

急性低氧条件下复氧后大鼠脑HIF—1α蛋白的表达与人参皂甙Rd干预研究

摘要：目的观察大鼠脑缺氧状态下缺氧诱导因子1α（HIF-1α）蛋白的表达及低氧状态下人参皂甙Rd干预对其影响。方法将成年Wistar大鼠90只随机分为急性低氧对照组、低氧预处理干预组、人参皂甙Rd预处理干预组,每组按缺氧后不同时间点（复氧后0h、4h、9h）再分为3亚组,每组10只大鼠。采用免疫组化法检测HIF-1α蛋白的表达。结果在缺氧后复氧即刻,HIF-1α蛋白少量表达,主要存在于海马细胞;随着时间的推移,在复氧后4h,HIF-1α表达逐渐达高峰,至9h时HIF-1α表达又明显减少。低氧预处理干预组及人参皂甙Rd干预组的实验结果发现HIF-1α表达较急性低氧对照组减少,与急性低氧对照组各时间点相比,差异均有显著性（P〈0．05）。两个干预组之间比较无统计学差异。结论急性低氧可以促使HIF-1α在大鼠海马神经细胞的表达,具有时间依赖性,低氧预处理干预及人参皂甙Rd干预均可促使大鼠脑组织HIF-1α表达减少。     

β-七叶皂甙钠对大鼠局灶性脑缺血再灌注后NF-κB、ICAM-1、VCAM-1表达的影响

目的探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注脑组织缺血区不同时间点NF-кB、ICAM-1、VCAM-1蛋白表达的变化,及β-七叶皂甙钠干预效果。方法采用大鼠大脑中动脉闭塞法(MCAO)制作局灶性脑缺血再灌注模型,用免疫组织化学方法观察大鼠脑缺血再灌注不同时间段,NF-кB、ICAM-1、VCAM-1蛋白的表达。并在大鼠于脑缺血前24h、1h及再灌注即刻分别腹腔给予β-七叶皂甙钠5mg/kg,2h MCAO,再灌注24h、48h后取脑,运用TTC染色测算脑梗死体积,免疫组化染色检测NF-кB、ICAM-1、VCAM-1蛋白表达,分析β-七叶皂甙钠的干预效应。结果(1)脑缺血后缺血区脑组织NF-кB及ICAM-1、VCAM-1表达均增加,NF-kB于再灌注后12～24h表达达高峰,Ⅰ- CAM-1于再灌注后24h表达达高峰,VCAM-1于再灌注后24～48h表达达高峰。(2)NF-кB的表达与血管内皮I- CAM-1、VCAM-1的表达呈正相关。(3)β-七叶皂甙钠能显著降低脑缺血再灌注后24h和48h缺血区NF-кB、ICAM- 1及VCAM-1的表达增加。(4)β-七叶皂甙钠能明显减轻脑缺血再灌注后的脑组织损伤,再灌注24h脑梗死体积减少41.8%。结论(1)脑缺血再灌注后NF-кB、ICAM-1、VCAM-1大量表达,这可能是脑缺血再灌注损伤机制之一。(2)脑缺血后NF-кB的活化可能与微血管内皮细胞ICAM-1、VCAM-1蛋白表达调控有关。(3)β-七叶皂甙钠能够减轻脑缺血后的脑组织损伤,有神经保护作用。     

β-七叶皂甙钠对大鼠局灶性脑缺血再灌注后NF-κB、ICAM-1、VCAM-1表达的影响

目的 探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注脑组织缺血区不同时间点NF-κB、ICAM-1、VCAM-1蛋白表达的变化,及β-七叶皂甙钠干预效果.方法 采用大鼠大脑中动脉闭塞法(MCAO)制作局灶性脑缺血再灌注模型,用免疫组织化学方法观察大鼠脑缺血再灌注不同时间段,NF-κB、ICAM-1、VCAM-1蛋白的表达.并在大鼠于脑缺血前24h、1h及再灌注即刻分别腹腔给予β-七叶皂甙钠5mg/kg,2h MCAO,再灌注24h、48h后取脑,运用TTC染色测算脑梗死体积,免疫组化染色检测NF-κB、ICAM-1、VCAM-1蛋白表达,分析β-七叶皂甙钠的干预效应.结果 (1)脑缺血后缺血区脑组织NF-κB及ICAM-1、VCAM-1表达均增加,NF-κB于再灌注后12～24h表达达高峰,ICAM-1于再灌注后24h表达达高峰,VCAM-1于再灌注后24～48h表达达高峰.(2)NF-κB的表达与血管内皮ICAM-1、VCAM-1的表达呈正相关.(3)β-七叶皂甙钠能显著降低脑缺血再灌注后24h和48h缺血区NF-κB、ICAM-1及VCAM-1的表达增加.(4)β-七叶皂甙钠能明显减轻脑缺血再灌注后的脑组织损伤,再灌注24h脑梗死体积减少41.8%.结论 (1)脑缺血再灌注后NF-κB、ICAM-1、VCAM-1大量表达,这可能是脑缺血再灌注损伤机制之一.(2)脑缺血后NF-κB的活化可能与微血管内皮细胞ICAM-1、VCAM-1蛋白表达调控有关.(3)β-七叶皂甙钠能够减轻脑缺血后的脑组织损伤,有神经保护作用.     

小檗碱对大鼠脑缺血后MCP-1表达的影响

目的探讨小檗碱处理对大鼠脑缺血后单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）表达的影响及小檗碱对脑缺血的神经保护作用。方法建立大鼠短暂性全脑缺血模型，采用尼氏体亚甲蓝染色观察脑缺血后大鼠脑海马CA1区神经元存活情况；采用免疫荧光染色方法检测脑缺血后大鼠缺血脑组织中MCP-1的表达情况。结果（1）与假手术组比较，脑缺血组大鼠脑海马CA1区神经元明显缺失，而小檗碱处理组大鼠脑海马CA1区神经元存活数明显多于缺血对照组；（2）与假手术组比较，脑缺血组大鼠脑缺血区MCP-1表达显著增多，而小檗碱处理显著降低了大鼠脑缺血区MCP-1的阳性表达。结论脑缺血引起MCP-1表达上调，提示MCP-1可能参与脑缺血损伤。小檗碱可抑制缺血脑组织MCP-1的表达，推测其可能经此途径减轻脑缺血的炎症反应而发挥一定的神经保护作用。     

阿托伐他汀钙对大鼠脑缺血再灌后NF-kBp56表达的影响

目的探讨阿托伐他汀钙对大鼠脑缺血再灌后脑组织中NF-kBp56rnRNA及蛋白表达的影响。方法采用大脑中动脉线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型，参考Longa的5分制法在大鼠麻醉清醒后进行评分，应用原位杂交和免疫组化法检测NF-kBp56mRNA及蛋白表达。结果大鼠脑缺血再灌注后缺血脑组织中NF-kBp56mRNA和蛋白表达增加（P〈0．01），24h达高峰；给予阿托伐他汀钙干预后能减少缺血脑组织中NF-kBp56mRNA和蛋白表达（P〈0．05），降低神经功能缺损评分（P〈0．05）。结论阿托伐他汀钙能抑制大鼠脑缺血再灌注后脑组织中NF-kBp56mRNA及蛋白表达，减轻缺血再灌损伤。     

脑缺血再灌注大鼠细胞间黏附分子-1、血管细胞间黏附分子-1的表达及β-七叶皂甙钠的干预作用

目的研究局灶性脑缺血再灌注过程中脑缺血区细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞间黏附分子-1(VCAM-1)的表达规律,并探讨β-七叶皂甙钠对其干预的脑保护作用。方法采用线栓法建立大鼠脑缺血再灌注模型,同时应用β-七叶皂甙钠予以干预。用HE染色和免疫组化染色观察大鼠脑缺血后再灌注不同时点组织学改变和ICAM-1、VCAM-1的阳性表达。结果(1)β-七叶皂甙钠明显减轻缺血再灌注后的脑组织损伤;(2)脑缺血再灌注后缺血区微血管内皮细胞ICAM-1、VCAM-1表达增加,ICAM-1于再灌注后24h表达达高峰,VCAM-1.于再灌注后24～48h表达达高峰,随后降低,但再灌注后72h两者表达仍高于正常水平;(3)β-七叶皂甙钠可以显著降低脑缺血再灌注后24h、48h缺血区ICAM-1、VCAM-1的表达。结论脑缺血再灌注后ICAM-1、VCAM—1大量表达,可能是脑缺血再灌注损伤的机制之一;β-七叶皂甙钠能降低ICAM-1和VCAM-1的表达及减轻脑组织损伤,有脑保护作用。     

人参皂苷Rg1对痴呆大鼠脑匀浆中BMSCs的神经性分化作用

目的 研究人参皂苷Rgl对痴呆大鼠脑匀浆中BMSCs的神经性分化作用.方法 通过贴壁法分离大鼠骨髓间充质干细胞,体外培养扩增,观察人参皂苷Rg1及痴呆大鼠脑匀浆对其分化影响,光镜下观察细胞形态,免疫细胞化学检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达.结果 痴呆大鼠脑匀浆中BMSCs的神经性分化作用受到抑制,人参皂苷Rg1加入72h后,神经元样分化明显,免疫细胞化学染色NSE呈阳性.结论 加入人参皂苷Rg1后,BMSCs在痴呆大鼠脑组织匀浆液中NSE阳性表达率提高.     

4000/人参皂甙Rb1、Rg1对许旺细胞NGF表达的影响(英文他译）

背景：人参皂甙可以促智抗衰老,保护大脑皮质运动神经元,具有抗细胞凋亡作用,但作用机制不清。 目的：观察人参皂甙Rb1和Rg1对许旺细胞神经生长因子表达的影响。 设计、时间及地点：细胞学体外观察,于2004-03/06在深圳市第二人民医院完成。 材料：成人新鲜离体神经取自创伤离断无法再植的肢体,由深圳市第二人民医院提供。人参皂甙Rb1、Rg1由长春白求恩医科大学提供。 方法：剥去神经外膜,剪成1.0~2.0 mm碎块,采用酶消化法分离许旺细胞,双30 min差速黏附法去除成纤维细胞,获得纯净度达95%以上的许旺细胞。将纯化的许旺细胞按每孔10万个细胞接种在预先涂有多聚赖氨酸的96孔细胞培养板上,设立3组：人参皂甙Rb1组分别加入含量为10,20,40,60,80 μg的人参皂甙Rb1 20 μL;人参皂甙Rg1组分别加入含量为10,20,40,60,80 μg的人参皂甙Rg1 20 μL;对照组加入PBS液20 μL。 主要观察指标：流式细胞仪检测许旺细胞神经生长因子的表达率。 结果：与对照组比较,培养48 h后人参皂甙Rb1组、人参皂甙Rg1组许旺细胞神经生长因子表达率均明显升高(P < 0.05),且呈剂量依赖性增加,当人参皂甙Rb1和Rg1质量浓度达 60 mg/L时许旺细胞神经生长因子表达率最高。人参皂甙Rb1及Rg1相同剂量组之间比较,许旺细胞神经生长因子表达率差异无显著性意义(P > 0.05)。 结论：人参皂甙Rb1和Rg1可以通过促进许旺细胞分泌神经生长因子而具有潜在加速周围神经损伤修复的作用。     

大鼠急性脑缺血时尼莫地平对内皮衍生因子的影响

尼莫地平是一种钙离子拮抗剂，现巳用于急性脑缺血的治疗。本文通过观察大鼠急性脑缺血模型及假手术组循环中及脑组织内一氧化氮（NO）、内皮素（ET1）水平，并观察尼莫地平对大鼠脑缺血模型循环中及脑组织的NO、ET1水平的影响，发现模型组循环中的NO水平较假手术组有下降趋势，但无明显统计学差异（P＞0．05），ET1的水平较假手术组显著升高（P＞0．05）;脑组织中NO、ET1含量均较假手术组显著升高（P＜0．05）。尼莫地平具有显著升高急性脑缺血大鼠循环中NO，显著降低循环中ET1，显著降低脑组织中NO、ET1的水平，说明尼莫地平具有促进脑缺血时大鼠的脑部供血，保护由于脑缺血引起的脑组织损害。     

Celecoxib对糖尿病大鼠缺血再灌注脑组织NF-kB和ICAM-1表达的影响

目的探讨celecoxib对糖尿病大鼠脑缺血再灌注后脑组织中NF-xB和ICAM-1表达的影响。方法采用SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素（STZ）和线栓法制作糖尿病大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型;大鼠分为假手术组（S组）、脑缺血再灌注生理盐水组（NS组）、celecoxib低剂量组（LCIR组）和高剂量组（HCIR组）,分别于缺血后30rain给予生理盐水或celecoxib溶液灌胃,再灌注后6、12、24、48h将大鼠断头取脑,免疫组化法检测脑组织中NF-kB和ICAM-1的表达水平。并对大鼠进行神经功能缺损评分。结果NS组、LCIR组、HCIR组大鼠神经功能缺损评分有显著差异（P〈0．05）;NS组、LCIR组、HCIR组NF-kB阳性细胞及ICAM-1阳性微血管主要表达于缺血周边区,较S组表达明显增强（P〈0．05）,LCIR组、HCIR组NF_KB阳性细胞表达率及ICAM-1阳性微血管数较NS组减少（P〈0．05）,LCIR组、HCIR组之间未见明显差异（P〉0．05）,每组不同时间点之间NF-gB阳性细胞表达率有明显差异（P〈0．05）以及它们之间的ICAM-1阳性微血管数也有明显差异（P〈0．05）。结论celecoxib可能通过抑制糖尿病大鼠脑缺血一再灌注后脑组织中NF-kB和ICAM-1的表达而减轻神经功能缺损,从而发挥脑保护作用。     

Toll样受体2在局灶性脑缺血大鼠脑组织中的表达变化

目的探讨Toll样受体2（TLR2）在局灶性脑缺血大鼠脑组织中的表达变化。方法应用免疫组织化学方法观察大脑中动脉阻断模型大鼠脑组织中TLR2蛋白表达水平,并实时定量反转录多聚酶链反应（real time PCR）方法检测大鼠局灶性缺血脑组织中TLR2 mRNA的相对表达水平。结果局灶性脑缺血后脑组织有TLR2阳性表达,对照组无TLR2阳性表达;局灶性缺血脑组织TLR2 mRNA表达水平较对照组明显上调（P〈0.01）。结论大鼠局灶性脑缺血后脑组织中TLR2表达水平上调,提示TLR2可能参与了局灶性脑缺血的损伤过程。     

茶氨酸对大鼠局灶性脑缺血性损伤后炎性细胞因子表达的影响

目的研究茶氨酸对局灶性脑缺血性损伤后大鼠脑组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、细胞间粘附分子-1（ICAM-1）以及单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）含量的影响,以探讨其减轻脑缺血性损伤的机制。方法健康雄性SD大鼠36只,按随机数字表随机分为假手术组、脑缺血组和实验组（脑缺血前1h腹腔注射茶氨酸）,采用线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞模型。采用放射免疫法测定脑组织TNF-α、IL-6含量,酶联免疫吸附法检测脑组织ICAM-1及MCP-1含量。结果与假手术组相比,脑缺血组大鼠脑组织TNF-α、IL-6、ICAM-1及MCP-1含量明显升高（P〈0.05）,茶氨酸可以明显地抑制缺血脑组织中上述细胞因子含量的增加（P〈0.05）。结论茶氨酸可抑制大鼠局灶性脑缺血再灌注早期炎性细胞因子的表达,对缺血脑组织具有保护作用。     

大鼠脑缺血再灌注损伤后不同部位神经细胞Nestin的表达

目的研究大鼠脑缺血再灌注损伤后神经细胞巢蛋白（Nestin）的表达，为神经干细胞治疗脑损伤提供理论依据。方法成年健康雄性SD大鼠30只，随机分为实验组和对照组。线栓法建立大脑中动脉闭塞再灌注模型，应用免疫组化SABC法观察2组再灌注后各观察部位不同时间Nestin的表达情况。结果缺血再灌注6h Nestin阳性细胞少量表达；1d时数量增多；3d时明显增多，7d时变化最为显著；各实验组与对照组比较差别均极显著。结论Nestin阳性细胞在正常成年脑组织中广泛表达，损伤后各部位Nestin阳性细胞的表达呈一致性增强，各部位阳性细胞数的增加量在不同时间又有所不同。     

骨髓间充质干细胞移植对缺血再灌注大鼠脑内Nestin和GFAP表达的影响

目的研究大鼠脑缺血再灌注(IR)脑内巢蛋白(Nestin)和胶原纤维酸性蛋白(GFAP)表达变化及骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对它们的影响。方法采用微动脉夹夹闭左侧颈总动脉的方法制作大鼠脑缺血再灌注模型;MSCs治疗组于缺血再灌注后1天、4天及8天经尾静脉注射MSCs(1×106)后分别在缺血再灌注3天、7天、14天的各时间点处死动物,取前脑组织,用免疫组织化学方法检测各组大鼠脑内Nestin和GFAP的表达情况;用SPSS统计分析。结果免疫组化检测MSCs干预组在缺血10min后再灌注3d、7d、14d时,大鼠脑组织中Nestin和GFAP的表达增强,相同时间点比较有显著性差异(P0.05);结论MSCs可激活大量的星形胶质细胞,保护神经元,促进其修复,有利于功能的恢复。     

bFGF对脑缺血再灌注大鼠ICAM-1表达及脑组织含水量的影响

目的探讨bFGF对局灶性缺血再灌注大鼠脑组织含水量及脑组织ICAM-1水平的影响。方法SD大鼠48只,随机分为假手术组（n=16）、缺血再灌注组（n=16）和bFGF组（n=16）。应用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,大脑中动脉阻塞1h再灌注损伤24h,bFGF组伤后即刻一次性经腹腔注射bFGF（10g／kg）,假手术组和损伤组以相同方法给予0．9％的生理盐水。采用干湿法检测各组大鼠脑组织含水量,采用伊文思蓝（evansblue,EB）法检测脑毛细血管通透性,采用免疫组化法检测大鼠脑组织ICAM-1水平。结果与假手术组比较,缺血再灌注组脑含水量、脑皮质EB含量及ICAM-1表达显著增加（P〈0．05）,与缺血再灌注组比较,bFGF组脑含水量、脑皮质EB含量及ICAM-1表达较模型组显著性降低（P〈0．05）。结论ICMA-1表达增加是脑缺血再灌注后脑水肿形成和缺血性损伤的重要原因之一,减少ICAM-1表达和脑组织含水量推测是bFGF脑保护作用机制之一。