卡铂-乳酸/羟基乙酸共聚物微球的制备和体外性质

目的制备卡铂-乳酸/羟基乙酸共聚物(PLGA)微球,比较不同方法所得微球的形态、载药量和体外释药特点。方法采用相分离法和溶剂挥发法制备卡铂-PLGA微球,显微镜下测定微球的粒径和粒径分布,电子扫描显微镜观察微球表面形态。用电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-AES)测定微球含药量,计算包封率,考察微球体外释药行为。结果两种方法所得微球球形较好,相分离法制得的卡铂-PLGA微球,平均粒径为22~31μm,含药量为42~61μg·mg-1、包封率21%~31%;体外释放试验中药物于24h完全溶出。溶剂挥发法所得微球平均粒径为38~54μm,含药量为7.2μg·mg-1、包封率约为20%;体外药物突释率约为39%,缓释期药物释放符合Higuchi模型,PLGA75/25、η=0.19和PLGA50/50、η=0.18的微球药物释放速度常数分别为2.40h-1/2和0.85h-1/2;体外14d累计释药分别达到71%和54%。结论相分离法制备卡铂-PLGA微球含药量高,但体外释药快,没有缓释作用;溶剂挥发法所得微球药物突释率较低,体外能控制药物缓慢释放。     

重组人骨形态发生蛋白-2缓释凝胶微球的研制及其溶胀、降解、载药、释药特征

目的制备载人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)的甲基丙烯酸缩水甘油酯右旋糖酐(dex-GMA)凝胶微球并初步考察其体外溶胀、降解、载药与释药特征。方法以液体石蜡为油相,Span-80为乳化剂,采用乳化化学交联技术制备载rhBMP-2的凝胶微球(BMP-HMs)并通过正交设计法优化其制备工艺;观察BMP-HMs形态和粒径,测定其包封率与载药量;用微球的吸水能力表示微球的溶胀率(Rs),扫描电镜观察微球的体外降解,动态观察体外释药特征及其与微球溶胀、降解的关系。结果所制备的BMP-HMs形态规整,粒径40～50μm,分布均匀;rhBMP-2载药量(10.6±4.8)%,包封率(88.9±1.0)%,BMP-HMs冻干剂4℃以下存放6个月性能稳定,但在磷酸盐缓冲液(PBS)中20～40d内可以完全降解。微球Rs随反应促进剂四甲基乙二胺(TEMED)用量的增大而减小,0.3mlTEMED制备的BMP-HMs体外释药实验表明80%的rhBMP-2在前20d左右释放。结论BMP-HMs对rhBMP-2具有确定的缓释作用,并可以通过制备工艺的改变控制其释药。     

盐酸多西环素牙周用微球温敏性凝胶的制剂学研究简

目的构建盐酸多西环素牙周用微球温敏性凝胶缓释系统。方法通过乳化一交联固化法制备盐酸多西环素羧甲基壳聚糖微球（DXY-CMCTS-MS）。采用壳聚糖和卢．甘油磷酸钠（β-GP）制备凝胶。用扫描电镜和光学显微镜观察微球表面形态;体外动态透析法测定释药性能。结果制备的DXY—CMCTS—MS形态圆整,粒径分布较为均匀,平均粒径约25μm,载药量18．9％,包封率64．6％。DXY微球凝胶在室温下为自由流动的液体,37℃的平均凝胶时间为（1．1±0．3）min,明显低于凝胶剂的凝胶时间。微球凝胶复合载体的释药速度明显低于微球剂,体外释药曲线符合Higuchi拟合方程。结论盐酸多西环素微球温敏凝胶复合载体的处方和制备工艺可行,作为牙周用缓释制剂值得进一步研究。     

双氯芬酸钠壳聚糖-海藻酸钠微球的制备和性质简

目的制备双氯芬酸钠微球,获得理想的释药行为。方法以微球的载药量、包封率及体外释药行为评价指标,采用单因素考察确立了最佳处方;结果最佳处方为：壳聚糖分子量为150kD,海藻酸钠：壳聚糖=3：1,药物：空白微球=1：4,吸附时间为12h,吸附温度为37℃,得到药物浓度为5．0mg·ml-1结论以该最佳处方制备的微球,具有均匀的粒径和理想的释药行为。     

牛血清白蛋白乳酸-羟乙酸共聚物微球的制备

目的 以牛血清白蛋白为模型蛋白,以乳酸-羟乙酸共聚物（PLGA）为包裹材料,探索粒径小于10μm的微球的制备方法并优化工艺。方法采用复乳溶剂挥发法制备蛋白质微球,以BCA法及微量BCA法测定微球的蛋白含量及蛋白从微球的释放。考察BSA浓度,内外相体积比,PLGA浓度,超声功率,匀浆转速,PVA浓度,PVA体积,PLGA分子量等因素对微球包封率、粒径、载药量及突释量的影响。结果通过控制不同的因素,可以得到较高的载药量及包封率、粒径在5μm左右的微球。结论采用复乳溶剂挥发法通过控制不同的因素,可得到粒径5μm左右不同载药量及突释量的具有较高包封率的微球。     

血管内皮生长因子长效缓释微球不同配比对体外释放行为改善的研究

目的用生物可降解聚乳酸羟基乙酸共聚物(PLGA)制备载药微球包埋血管内皮生长因子(VEGF),并探索不同配比对释放行为的影响。方法采用不同分子量的PLGA制备不同粒径的载药微球,并经载药微球的合理配比改善其体外释放行为,达到优化工艺、降低成本的目的。结果载药微球粒径约为20μm、分子量10 kU:24 kU的配比为1:2组,粒径为20μm、分子量为24 kU和分子量为10 kU、粒径为6μm的载药微球配比为2:1组的体外释放突释较低,且在14 d内呈线性的零级释放趋势,体外释放行为得到改善。结论 VEGF长效缓释PLGA微球经优化配比后的持续释放能力较传统VEGF微球明显提高。     

紫杉醇/海藻酸钠微囊/微球的缓释及抑瘤作用研究

目的：以海藻酸钠为主要材料制备紫杉醇的缓释微囊／微球，对其形态、粒径、体外释放以及抑瘤活性进行研究。方法：扫描电镜观察微球的形态和大小。HPLC法测定紫杉醇在释放介质中的浓度。MTT法测定体外抑瘤活性。结果：制备的紫杉醇／海藻酸钠微囊／微球的形态呈规则圆形，粒径相近，平均粒径256μm。冷冻干燥后呈不规则球形。颗粒长径约100μm，表面形成皱襞。微囊载药量为25％左右，而微球不足10％。微囊与微球均具有缓释作用，体外实验证明保持了抑瘤活性。结论：海藻酸钠-紫杉醇微囊／微球具有缓释作用，可以维持较长时间的有效药物浓度，达到更好的抑瘤效果。     

鼠疫耶尔森菌亚单位疫苗鼻腔免疫微球的制备与性质

目的：制备F1，V，F1-V3种鼠疫耶尔森菌亚单位疫苗鼻腔免疫微球，研究其体外释放性质、抗原活性等性质。方法：采用复乳溶剂挥发法制备鼠疫疫苗微球，以激光粒度测定仪测定微球的平均粒径，以BCA法及微量BCA法测定微球的疫苗含量及疫苗从微球的释放，以ELISA法考察从微球中释放出的鼠疫疫苗的活性。结果：鼠疫耶尔森菌亚单位疫苗微球粒径均匀，F1，V，F1-V疫苗微球平均粒径分别为4．2，4．6和5．9μm，包裹率分别为68．2％，61．3％和51．0％，载药量分别为9．7％，8．7％和6．2％，微球中包裹的疫苗与原溶液相比活性降低不明显。结论：采用复乳溶剂挥发法，通过控制一定的因素，可以得到具有较高包封率的鼠疫耶尔森菌亚单位疫苗微球。     

卡托普利缓释微球的制备及其性能研究

目的制备卡托普利／壳聚糖-明胶网络多聚物缓释微球(captopril／chitosan-gelatin net-polymer microspheres,Cap／CGNPMs),为改善Cap治疗效果,降低不良反应,并为开发理想的水溶性药物缓释系统提供实验依据和理论基础。方法以壳聚糖和明胶为载体材料,采用乳化分散法制备Cap／CGNPMs,紫外分光光度法和光学显微镜及电子显微镜对其性能进行研究。结果Cap／CGNPMs外观完整致密,表面可看到许多微孔,无粘连,流动性很好,粒径分布范围主要在220～280μm。体外释药试验证明,Cap／CGNPMs与Cap普通片比较具有明显延缓Cap释放作用。微球的包封率、载药量和溶胀度及体外释药行为受工艺条件如投料比、交联剂组成等因素的影响。其中,投料比为1：4,交联剂配方：For FPP,添加0．75％微晶纤维素是Cap/CGNPMs制备最佳条件。结论Cap／CGNPMs性能良好,制备工艺简单稳定,有望成为水溶性药物的理想缓释系统。     

小粒径盐酸阿霉素白蛋白微球的研制及其含量测定

目的　研制出适宜于静脉注射的小粒径盐酸阿霉素白蛋白微球。方法　采用常温乳化 -化学交联法 ,用正交实验筛选出最佳工艺 ,并对影响因素进行考察 ;建立HPLC -UV法测定其含量及包封率 ,用动态透析法研究其释放度。结果　用该工艺制备出的盐酸阿霉素微球粒径小 ,方法简便 ,反应条件容易控制。制备的微球均匀圆整 ,平均粒径约为 2 μm ,包封率为 82 .87% ,载药量为 9.2 5 %。体外释放表明其具有明显的缓释功能。HPLC -UV法检测盐酸阿霉素含量方法简便、准确 ,含量测定线性范围为 0 .5～ 5 .0 μg·ml-1(r =0 .9992 ) ,平均回收率为 99.16 %± 0 .97%。结论　采用常温乳化 -化学交联法可制备出适宜于静脉注射的小粒径微球 ,从而解决了一般方法制备的微球粒径过大的问题     

不同制备工艺对胶质细胞源性神经营养因子微球理化性质及生物活性的影响

目的 评价不同制备工艺对胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)缓释微球的影响及微球所包裹的GDNF生物学活性.方法 以聚乳酸-羟基乙酸共聚物(polylactide-co-glycolide,PLGA)为包裹材料,采用复乳法(W1/O/W2)制备GDNF-PLGA微球,通过两因素析因设计方差分析,研究PLGA中乳酸(LA)与羟基乙酸(GA)单体组成比例和复乳搅拌速度对GDNF微球的粒径、包封率、突释率和体外释放行为的影响,并用PC-12细胞检测微球所释放的GDNF生物学活性,确定最佳制备工艺.结果 PLGA的单体组成比例可影响微球的突释率(P＜0.05),对粒径和包封率的影响无统计学意义,随着GA比例的增加,微球中GDNF释放速度加快.复乳搅拌速度由1 000 r/min增加到3 000 r/min后,微球的粒径显著减小(P＜0.01),突释率显著增加(P＜0.01),体外释放更为快速.微球中的GDNF在37℃下活性有效期可达20 d左右,较单独存放的GDNF活性有效期延长10 d以上.结论 复乳法可制备具有较高包封率和适宜体外释放时间的GDNF缓释微球,且活性有效期延长.

Abstract：

Objective To evaluate the effect of different preparation processes on preparation of the glial cell line-derived neurotrophic factor(GDNF)loaded microspheres and observe the biological activity of GDNF.Methods With polylactide-co-glycolide(PLGA)as the coating material,the GDNF-loaded microspheres were prepared by using double emulsion(W1/O/W2).Two-factor factorial design variance analysis was done to analyze the effects of the composition proportion of lactic acid(LA)and glycolic acid(GA)in PLGA and the stirring speed of multiple emulsion on particle size,entrapment efficiency,burst release and in vitro release characteristics of the GDNF-loaded microspheres.PC-12 bioassay was employed to detect the biological activity of the released GDNF so as to determine the optimal preparation process.Results The composition proportion of PLGA could affect the microspheres'burst release(P ＜ 0.05),with no effect on particle size and entrapment efficiency.with the higher.With higher proportion of GA,the release speed of GDNF in the microspheres was increased.When the stirring speed of multiple emulsion was increased from 1 000 r/min to 3 000 r/min,the particle size of the microspheres was decrease significantly(P ＜ 0.01),the burst release was increased markedly(P ＜ 0.01)and the in vitro release rate was accelerated.The activity of GDNF in the microspheres could last for about 20 days at 37℃,which was 10 days longer than that of single GDNF.Conclusions Double emulsioncan prepare the GDNF-loaded microspheres with high entrapment efficiency and suitable in vitro release time.In the meantime,the microspheres can extend the validity of GDNF.     

依他硝唑纳米粒对乏氧肿瘤细胞辐射增敏作用的研究

目的 制备出具有生物活性并可控制释放的依他硝唑纳米粒,探讨其对乏氧人乳腺癌细胞(MCF-7)和人子宫颈癌细胞(HeLa)的辐射增敏作用。方法 采用复乳溶剂挥发法制备聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物(PLGA)包裹的依他硝唑纳米粒,高效液相色谱分析纳米粒的载药率、包封率和模拟体外释药,透射电镜研究纳米粒的形态,激光衍射粒度分析仪检测纳米粒的粒径分布。经乏氧处理的MCF-7和HeLa细胞与依他硝唑纳米粒和药物单体共培养,采用平板克隆形成实验检验其辐射增敏作用。结果 成功制备依他硝唑纳米粒,呈光滑球形,粒径分布在90～190 nm之间,载药率为1.66％,包封率为18.02％,模拟体外释药曲线呈双相,即在爆发释放之后为缓慢释放。同依他硝唑纳米粒和药物单体共培养的乏氧MCF-7和HeLa细胞克隆形成能力照射后明显降低,依他硝唑纳米粒作用更为显著。结论 具有生物活性的依他硝唑从纳米粒中以可控的方式被释放,有效地增加了乏氧肿瘤细胞的辐射敏感性,为辐射增敏剂的临床应用提供了一种新的给药方式。     

尼索地平微球体外释药的研究

 目的研究尼索地平缓释微球的体外释药行为.方法建立检测尼索地平微球释药量的高效液相色谱法(HPLC),考察自制微球在3种释放条件下的释药情况.结果动态透析法能较好地反映微球的实际释药行为.微球的体外释药行为的拟合方程为:1-Q=0.7610(1-t/too)3+0.1901(r=0.9983).结论微球释药缓慢而平稳.     

紫杉醇纳米粒对乏氧MCF-7细胞的辐射增敏作用

目的 制备出具有生物活性并可控制释放的紫杉醇纳米粒,探讨其对乏氧人乳腺癌细胞(MCF-7)的辐射增敏作用。方法 采用单乳溶剂挥发法制备聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物［Poly (D,L- lactide-co-glycolide),PLGA］包裹的紫杉醇纳米粒,高效液相色谱分析纳米粒的载药率、包封率和模拟体外释药,扫描电镜研究纳米粒的形态。经乏氧处理的MCF-7细胞与紫杉醇纳米粒共培养,通过细胞形态和细胞周期变化来分析从纳米粒中释放出来的紫杉醇的生物活性,采用平板克隆形成实验检验其辐射增敏作用。结果 成功制备出的紫杉醇纳米粒呈光滑球形,粒径分布为200～800 nm,载药率为4.5%,包封率为85.5%,模拟体外释药曲线呈双相,即在暴发释放之后为缓慢释放。同紫杉醇纳米粒共培养的乏氧MCF-7细胞形态发生改变,极性增加,呈梭形,并且G₂期细胞比例升高,克隆形成能力明显降低。结论 本研究证实具有生物活性的紫杉醇从纳米粒中以可控的方式被释放,有效地增加了乏氧MCF-7细胞的辐射敏感性,为辐射增敏剂的临床应用提供了一种新的给药方式。     

In vitro release of vascular endothelial growth factor from gadolinium-doped biodegradable microspheres.

A drug delivery vehicle was constructed that could be visualized noninvasively with MRI. The biodegradable polymer poly(DL-lactic-co-glycolic acid) (PLGA) was used to fabricate microspheres containing vascular endothelial growth factor (VEGF) and the MRI contrast agent gadolinium diethylenetriamine pentaacetic acid (Gd-DTPA). The microspheres were characterized in terms of size, drug and contrast agent encapsulation, and degradation rate. The PLGA microspheres had a mean diameter of 48 +/- 18 microm. The gadolinium loading was 17 +/- 3 microg/mg polymer and the VEGF loading was 163 +/- 22 ng/mg polymer. Electron microscopy revealed that the Gd was dispersed throughout the microspheres and it was confirmed that the Gd loading was sufficient to visualize the microspheres under MRI. VEGF and Gd-DTPA were released from the microspheres in vitro over a period of approximately 6 weeks in three phases: a burst, followed by a slow steady-state, then a rapid steady-state. Biodegradable Gd-doped microspheres can be effectively used to deliver drugs in a sustained manner, while being monitored noninvasively with MRI.     

重组人表皮细胞生长因子缓释微球治疗糖尿病大鼠溃疡

目的 制备重组人表皮细胞生长因子(rhEGF)缓释微球,并对其形貌、释药行为和在体外促进细胞增殖的能力进行评价;同时比较rhEGF缓释微球与rhEGF原液对糖尿病大鼠溃疡促愈作用的差异. 方法 (1)用改进的复乳法制备rhEGF缓释微球.透射电镜检测rhEGF微粒形貌表征,激光粒度仪/Zeta电位仪分析微球粒径分布,ELISA法测定rhEGF微球释药行为.(2)以小鼠成纤维细胞L929细胞系为对象,采用MTT法鉴定rhEGF缓释微球的生物学活性.(3)制备糖尿病大鼠溃疡模型,成模后采用随机数字表法将大鼠分为4组:rhEGF缓释微球组(A组)、rhEGF原液组(B组)、空白微球组(C组)、PBS溶媒对照组(D组),每天给药1次.分别于给药后3,7,14,21 d对溃疡创面照相计算创面愈合率.创缘皮肤取材,测定羟脯氨酸含量,免疫组化检测β1整合素和角蛋白-19并测量其阳性染色面积比. 结果 (1)rhEGF缓释微球平均粒径为193.5nm,粒径分布均匀,微球之间元粘连,分散性好.释药过程符合Higuchi释放动力学模型,释放时间长达24 h.(2)不同浓度rhEGF缓释微球均有促进小鼠成纤维细胞增殖的作用,其中以10μg/L浓度促小鼠成纤维细胞增殖的作用最强.(3)从治疗第7天开始,愈合率以A组最快,A组与其他三组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).羟脯氨酸含量、β1整合素和角蛋白-19阳性染色面积比A组均高于B组. 结论 用改进的复乳法制备的rhEGF缓释微球,粒径大小分布均一,释放时间长达24 h.rhEGF缓释微球促进糖尿病大鼠溃疡创面愈合速度较rhEGF原液更快,溃疡创面愈合质量更高.     

葛根素肠溶纳米粒的制备及体外释放度研究

目的制备葛根素肠溶纳米粒,并对其体外释放度进行考察。方法采用离子交联法制备葛根素肠溶纳米粒,HPLC法测定药物的包封率及体外释放度,透射电镜考察纳米粒的表面形态,激光粒度分析仪测定粒径分布。结果制备的纳米粒,粒径较小,分布均一,包封率较高,理化性质合乎要求,并在pH7.2的磷酸盐缓冲液中释放达到70%以上。结论葛根素肠溶纳米粒体外释药良好,能达到良好肠溶效果。     

Doxorubicin-Loaded QuadraSphere Microspheres: Plasma Pharmacokinetics and Intratumoral Drug Concentration in an Animal Model of Liver Cancer

The purpose of this study was to evaluate, in vitro and in vivo, doxorubicin-loaded poly (vinyl alcohol-sodium acrylate) copolymer microspheres [QuadraSphere microspheres (QSMs)] for transcatheter arterial delivery in an animal model of liver cancer. Doxorubicin loading efficiency and release profile were first tested in vitro. In vivo, 15 rabbits, implanted with a Vx-2 tumor in the liver, were divided into three groups of five rabbits each, based on the time of euthanasia. Twenty-five milligrams of QSMs was diluted in 10 ml of a 10 mg/ml doxorubicin solution and 10 ml of nonionic contrast medium for a total volume of 20 ml. One milliliter of a drug-loaded QSM solution containing 5 mg of doxorubicin was injected into the tumor feeding artery. Plasma doxorubicin and doxorubicinol concentrations, and intratumoral and peritumoral doxorubicin tissue concentrations, were measured. Tumor specimens were pathologically evaluated to record tumor necrosis. As a control, one animal was blandly embolized with plain QSMs in each group. In vitro testing of QSM doxorubicin loadability and release over time showed 82–94% doxorubicin loadability within 2 h and 6% release within the first 6 h after loading, followed by a slow release pattern. In vivo, the doxorubicin plasma concentration declined at 40 min. The peak doxorubicin intratumoral concentration was observed at 3 days and remained detectable till the study’s end point (7 days). Mean percentage tumor cell death in the doxorubicin QSM group was 90% at 7 days and 60% in the bland QSM embolization group. In conclusion, QSMs can be efficiently loaded with doxorubicin. Initial experiments with doxorubicin-loaded QSMs show a safe pharmacokinetic profile and effective tumor killing in an animal model of liver cancer.     

盐酸表柔比星长循环热敏冻干脂质体的处方工艺研究与体外释药机制探讨

目的研究盐酸表柔比星长循环热敏冻干脂质体（EPI-LTSL）的处方工艺,并探讨其体外释药机制。方法pH梯度法制备EPI-LTSL并进行冷冻干燥,正交试验优化处方,单因素试验优化工艺。通过观察不同温度下EPI在不同介质中形成沉淀的性状,探索EPI-LTSL的体外释药机制。结果最佳处方及工艺为药脂比1∶10,DPPC/MSPC为82∶8,水化介质为250mmol/L柠檬酸盐（pH4.0）。空白脂质体经15000psi（103MPa）高压均质循环5～6次,100nm聚碳酸酯膜挤压过膜3次;调节脂质体外相pH后,35℃水浴20min载药。冻干脂质体内外相乳糖浓度为9%,采用中速预冻（-65℃）及缓慢的解吸干燥可以制备较好的冻干品。EPI与柠檬酸盐形成的沉淀在42℃可以完全溶解,而在25℃成絮状或片状沉淀。结论制备的EPI-LTSL载药量和包封率较高,粒径较小。冻干脂质体外观平整,内部疏松多孔,色泽鲜亮,复水迅速且粒径变化较小。以柠檬酸盐为水化介质制备的EPI-LTSL,在25℃时包载于脂质体内相的EPI以沉淀稳定存在,而在42℃时可完全溶解释放出来。