血管内皮生长因子长效缓释微球不同配比对体外释放行为改善的研究

目的用生物可降解聚乳酸羟基乙酸共聚物(PLGA)制备载药微球包埋血管内皮生长因子(VEGF),并探索不同配比对释放行为的影响。方法采用不同分子量的PLGA制备不同粒径的载药微球,并经载药微球的合理配比改善其体外释放行为,达到优化工艺、降低成本的目的。结果载药微球粒径约为20μm、分子量10 kU:24 kU的配比为1:2组,粒径为20μm、分子量为24 kU和分子量为10 kU、粒径为6μm的载药微球配比为2:1组的体外释放突释较低,且在14 d内呈线性的零级释放趋势,体外释放行为得到改善。结论 VEGF长效缓释PLGA微球经优化配比后的持续释放能力较传统VEGF微球明显提高。     

紫杉醇长效缓释微球的制备与评价

目的：制备包含肉豆蔻酸异丙酯(IPM)的紫杉醇长效缓释微球，并对制备工艺及体内外缓释效果进行评价。方法：使用改良的单乳溶剂蒸发法制备紫杉醇长效缓释微球。通过分析粒径分布、突释、体外释放及体内的抑瘤效果等指标，对其进行评价。结果：所得微球平均粒径小于10μm，外观圆整，具有良好的体外释放曲线。含有30％IPM的微球体内抑瘤效果明显。结论：使用改良的单乳溶剂蒸发法制备的微球，可以达到缓释效果，体外释放4周的微球对小鼠体内的固体肿瘤有良好的抑制效果。     

卡铂-乳酸/羟基乙酸共聚物微球的制备和体外性质

目的制备卡铂-乳酸/羟基乙酸共聚物(PLGA)微球,比较不同方法所得微球的形态、载药量和体外释药特点。方法采用相分离法和溶剂挥发法制备卡铂-PLGA微球,显微镜下测定微球的粒径和粒径分布,电子扫描显微镜观察微球表面形态。用电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-AES)测定微球含药量,计算包封率,考察微球体外释药行为。结果两种方法所得微球球形较好,相分离法制得的卡铂-PLGA微球,平均粒径为22~31μm,含药量为42~61μg·mg-1、包封率21%~31%;体外释放试验中药物于24h完全溶出。溶剂挥发法所得微球平均粒径为38~54μm,含药量为7.2μg·mg-1、包封率约为20%;体外药物突释率约为39%,缓释期药物释放符合Higuchi模型,PLGA75/25、η=0.19和PLGA50/50、η=0.18的微球药物释放速度常数分别为2.40h-1/2和0.85h-1/2;体外14d累计释药分别达到71%和54%。结论相分离法制备卡铂-PLGA微球含药量高,但体外释药快,没有缓释作用;溶剂挥发法所得微球药物突释率较低,体外能控制药物缓慢释放。     

尼索地平微球体外释药的研究

 目的研究尼索地平缓释微球的体外释药行为.方法建立检测尼索地平微球释药量的高效液相色谱法(HPLC),考察自制微球在3种释放条件下的释药情况.结果动态透析法能较好地反映微球的实际释药行为.微球的体外释药行为的拟合方程为:1-Q=0.7610(1-t/too)3+0.1901(r=0.9983).结论微球释药缓慢而平稳.     

重组人骨形态发生蛋白-2缓释凝胶微球的研制及其溶胀、降解、载药、释药特征

目的制备载人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)的甲基丙烯酸缩水甘油酯右旋糖酐(dex-GMA)凝胶微球并初步考察其体外溶胀、降解、载药与释药特征。方法以液体石蜡为油相,Span-80为乳化剂,采用乳化化学交联技术制备载rhBMP-2的凝胶微球(BMP-HMs)并通过正交设计法优化其制备工艺;观察BMP-HMs形态和粒径,测定其包封率与载药量;用微球的吸水能力表示微球的溶胀率(Rs),扫描电镜观察微球的体外降解,动态观察体外释药特征及其与微球溶胀、降解的关系。结果所制备的BMP-HMs形态规整,粒径40～50μm,分布均匀;rhBMP-2载药量(10.6±4.8)%,包封率(88.9±1.0)%,BMP-HMs冻干剂4℃以下存放6个月性能稳定,但在磷酸盐缓冲液(PBS)中20～40d内可以完全降解。微球Rs随反应促进剂四甲基乙二胺(TEMED)用量的增大而减小,0.3mlTEMED制备的BMP-HMs体外释药实验表明80%的rhBMP-2在前20d左右释放。结论BMP-HMs对rhBMP-2具有确定的缓释作用,并可以通过制备工艺的改变控制其释药。     

环胞素A植入微球的体外释放研究

目的:研究长效环胞素A(CyA)/PLA微球的体外释药特性.方法:以聚乳酸(PEA)为基质,采用乳化-挥发法制备CyA/PLA微球,采用HPLC法测定CyA/PLA微球中的含量,考察微球的体外释药性能.结果:CyA在5～80μg·mL<'-1>范围内呈线性,平均回收率为99.6%,RSD=1.12%(n=9).28 d的体外释药百分率为(65.32.4)%.结论:CyA/PLA微球体系具有一定的缓释性能.     

盐酸多西环素牙周用微球温敏性凝胶的制剂学研究简

目的构建盐酸多西环素牙周用微球温敏性凝胶缓释系统。方法通过乳化一交联固化法制备盐酸多西环素羧甲基壳聚糖微球（DXY-CMCTS-MS）。采用壳聚糖和卢．甘油磷酸钠（β-GP）制备凝胶。用扫描电镜和光学显微镜观察微球表面形态;体外动态透析法测定释药性能。结果制备的DXY—CMCTS—MS形态圆整,粒径分布较为均匀,平均粒径约25μm,载药量18．9％,包封率64．6％。DXY微球凝胶在室温下为自由流动的液体,37℃的平均凝胶时间为（1．1±0．3）min,明显低于凝胶剂的凝胶时间。微球凝胶复合载体的释药速度明显低于微球剂,体外释药曲线符合Higuchi拟合方程。结论盐酸多西环素微球温敏凝胶复合载体的处方和制备工艺可行,作为牙周用缓释制剂值得进一步研究。     

阿霉素明胶微球的制备及对周围神经阻滞的实验研究

目的 制备阿霉素明胶微球并检测其特性,探讨将其用于周围神经阻滞的可行性.方法 采用乳化-交联法制备阿霉素明胶微球,考察其理化性状.30只雄性SD大鼠随机均分为对照组(N组)、阿霉素组(A组)、阿霉素明胶微球组(M组),于右侧坐骨神经表面分别滴注0.1%吐温盐水、0.5%阿霉素、阿霉素明胶微球混悬液.观察每组右后肢的痛阈、坐骨神经功能指数(SFI)及病理改变.结果 制备的阿霉素明胶微球最佳投料比为1∶10.微球外形圆整,分散性好.阿霉素240min释放90%以上.A组和M组痛阈明显升高(P＜0.01),SFI明显减小(P＜0.01),A组60天恢复,M组持续90天仍未恢复,两组坐骨神经损毁明显.结论 制备的阿霉素明胶微球外观好,有明显缓释作用,能损毁周围神经,可作为长效神经损毁剂.     

毛冬青缓释胶囊的制备

目的 制备膜控释毛冬青缓释微丸胶囊并研究其体外释药性能。方法 用乙基纤维素等辅料包衣材料,以PEG1000为致孔剂,经薄膜包衣制备毛冬青缓释微丸胶囊,并以体外释放度试验来评价。结果 实验表明体外释药符合Higuchi方程,Q=18．415t^1/2 29．649(r=0．9874)。结论 毛冬青缓释微丸具有较好的释药性能,为一种较理想的口服缓释剂型,制备工艺可行。     

血管内皮细胞生长因子-海藻酸钙缓/控释微球的制备及其对人脐静脉血管内皮细胞增殖的影响

目的研制血管内皮细胞生长因子(VEGF)-海藻酸钙微球缓/控释系统并观察其对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)增殖的影响,为VEGF缓/控释促进组织工程骨血管化提供理论依据。方法应用锐孔挤出-离子交联法制备微球,检测其理化及体外释药性质；培养HUVEC,依据培养基添加物不同,设空白对照组、空白微球组、单用VEGF组及VEGF-海藻酸钙微球组,通过细胞计数法、四甲基偶氮唑盐比色法、流式细胞仪测细胞周期考察细胞增殖情况。结果微球球形圆整,粒径(560±50)μm,载药量0．72ng/mg,包封率54%,体外释药平稳,达10d以上。细胞培养初期,VEGF组的促分裂增殖作用最强,中后期,VEGF微球组的促分裂增殖作用最强,差异有统计学意义(P＜0．05),空白微球组与空白对照组间在细胞计数、细胞活性、细胞周期的各时相点差异均无统计学意义。结论海藻酸钙微球可以保存VEGF活性并持续释放VEGF 10d以上,在较长时期内促进HUVEC的增殖。     

重组人表皮生长因子凝胶在Ⅲ期压疮护理中的应用研究

 目的 观察重组人表皮生长因子(recombinant human epidermal growth factor,rhEGF)凝胶在Ⅲ期压疮护理中的疗效.方法 38例Ⅲ期压疮入院患者随机分为治疗组和对照组.治疗组以rhEGF凝胶均匀涂布于创面;对照组仅以3%过氧化氢液冲洗.观察两组创面愈合率、组织学改变、创面羟脯氨酸(HYP)含量及Ⅰ型/Ⅲ型胶原比例.结果 治疗组的创面愈合速度较对照组明显加快,其Ⅲ期压疮平均愈合时间为(10±2.5)d,对照组为(35±8.7)d(P＜0.01).在治疗后第3、6、9天,治疗组可见创面肉芽组织灶明显增生,富含血管及细胞,同时创面中HYP含量增加,Ⅰ型/Ⅲ型胶原比例降低(P＜0.01).结论 rhEGF治疗Ⅲ期压疮可以缩短创面愈合时间,增加肉芽组织及HYP含量,降低Ⅰ/Ⅲ型胶原比例,明显促进压疮创面的修复.     

重组人表皮生长因子不同剂型作用于糖尿病溃疡动物模型的疗效比较

目的比较重组人表皮生长因子（rhEGF）不同剂型作用于糖尿病溃疡动物模型创面的疗效差别。方法建立糖尿病溃疡动物模型,将模型随机分为重组人表皮生长因子水剂组和重组人表皮生长因子凝胶组,动态观察重组人表皮生长因子水剂组和重组人表皮生长因子凝胶组对溃疡面积、愈合时间及动态愈合率的影响。结果重组人表皮生长因子凝胶组在溃疡的面积变化、愈合时间及动态愈合率方面均较重组人表皮生长因子水剂组差异有显著性意义（P〈0.01）。结论重组人表皮生长因子凝胶比重组人表皮生长因子水剂更能促进糖尿病溃疡创面的愈合。     

重组人表皮生长因子对宫颈高频电刀环切术后创面愈合的影响

目的观察宫颈高频电刀环切术(LEEP术)后重组人表皮生长因子(rhEGF)凝胶对宫颈创面愈合的影响及安全性。方法将80例LEEP术后患者分为LEEP+rhEGF凝胶组和LEEP组。观察创面愈合情况及愈合时间,阴道流液、流血量及持续时间。结果LEEP+rhEGF凝胶组,创面愈合时间明显缩短,而且阴道流液量明显减少,持续时间缩短。结论rhEGF凝胶可明显促进LEEP术后宫颈创面的愈合。     

重组人表皮细胞生长因子促进慢性创面的愈合

目的观察重组人表皮生长因子（ｒｈＥＧＦ）对慢性创面愈合的影响。方法应用国产ｒｈＥＧＦ，采用自身对照法（对照药物：１％磺胺嘧啶银霜），对６１例慢性创面（烧伤残留肉芽创面３７例，溃疡创面２４例）进行局部治疗。以创面愈合为指标，与对照组平行比较，判读创面愈合时间。结果ｒｈＥＧＦ用于慢性创面的治疗，明显缩短创面愈合时间。肉芽创面愈合时间较对照组缩短约１５天，具有显著性差异（Ｐ＜０．００１）；溃疡创面愈合时间亦有缩短。结论ｒｈＥＧＦ有促进慢性创面愈合的作用     

表皮细胞生长因子和碱性成纤维细胞生长因子促进烧伤创面愈合的疗效比较

目的　比较外源性重组人表皮细胞生长因子 (rhEGF)与重组人碱性成纤维细胞生长因子 (rhFGF)促进创面愈合的临床疗效。方法　选择浅Ⅱ度烧伤创面、深Ⅱ度烧伤创面和刃厚皮供皮区创面共 90例患者 2 70个创面为研究对象 ,所有创面分别为rhEGF治疗组、rhFGF治疗组和自身对照组 ,选择自体相应部位、相似深度创面进行对照。分别观察创面愈合时间和在不同时间内创面的愈合率。结果　rhEGF的促再上皮化作用明显 ,对浅Ⅱ度烧伤创面及刃厚皮供皮区创面比rhFGF组和对照组愈合时间缩短 (P <0 .0 1) ,rhEGF对深Ⅱ度烧伤创面与对照组愈合时间无明显差异 (P >0 .0 5 ) ;而rhFGF对肉芽组织生长有特殊的作用 ,rbFGF对深Ⅱ度烧伤创面比rhEGF组和对照组愈合时间明显缩短 (P <0 .0 1) ,对浅Ⅱ度烧伤创面及刃厚皮供皮区创面比对照组愈合时间无明显差异 (P >0 .0 5 ) ;动态愈合率在不同的烧伤创面也明显加快 ,组间具有显著性差异。结论　rhEGF和rhFGF修复创面效果的差异取决于它们不同的生物学特性以及作用机制 ,组织缺损较大 ,组织损伤层次深 ,早期需要内芽组织填充的创面使用rhFGF为宜 ,而浅度创面需要以再上皮化修复为主的则选择rhEGF为佳     

负压引流下重组人表皮生长因子结合银离子敷料治疗糖尿病足溃疡疗效

 目的 研究重组人表皮生长因子结合银离子敷料在负压封闭引流(vacuum sealing drainage,VSD)环境下对糖尿病足溃疡创面的治疗效果。方法 选取2型糖尿病足感染患者129例,随机分为3组,每组各43例,A组单纯使用银离子敷料治疗,B组在银离子敷料治疗基础上添加重组人表皮生长因子(rhEGF)治疗,C组在A和B组基础上增加VSD负压引流,观察治疗28 d后三组患者创面治疗效果。结果 三组治疗总有效率分别为:A组88.4％(38/43)、B组93.0％(40/43)、C组97.7％(42/43),差异有统计学意义(P<0.05),治疗后疼痛效果评分(VAS):C组(银离子敷料+ rhEGF+VSD)的疼痛分值明显低于B组(银离子敷料+ rhEGF)和A组(银离子敷料),差异有统计学意义(P<0.05);从创面修复情况、换药次数和抗生素使用情况对比发现,C组明显优于A组和B组。结论 重组人表皮生长因子(rhEGF)结合银离子敷料在负压封闭引流下(VSD)治疗糖尿病足,创面愈合时间短、肉芽生长速度快、疗效显著,值得临床推广应用。     

高压氧联合超声清创术对糖尿病足溃疡创面细菌清除及微循环的影响

目的探讨超声清创术联合高压氧对糖尿病足溃疡创面细菌清除及微循环的影响。方法选取2017年1月至2020年1月龙口市人民医院血管外科收治的采取保守治疗的糖尿病足溃疡患者98例作为研究对象,按照治疗方法分为3组,A组32例,采用标准治疗;B组30例,采用标准治疗+高压氧治疗;C组36例,标准治疗+超声清创术+高压氧治疗。第0、7、14、21天采用毫米(mm)方格纸法计算溃疡创面面积的变化,并计算创面愈合率。采用表面细菌定量培养法计算溃疡创面细菌清除率。多普勒激光血流灌注成像仪测定溃疡创面微循环状况。采用肢体疼痛评分和间歇性跛行评分法评价治疗前后肢体疼痛水平。结果治疗3个疗程后,3组患者经皮氧分压和创面血流量明显高于治疗前,且C组患者治疗后经皮氧分压和创面血流量显著高于A、B组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗14、21 d后,C组患者溃疡面积均明显小于A、B组,而C组溃疡愈合率明显高于A、B组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗7、14、21 d后,C组患者溃疡组织内细菌定量均明显低于A、B组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗3个疗程后,3组患者间歇性跛行和肢体疼痛评分明显低于治疗前,且C组患者治疗后肢体疼痛和间歇性跛行评分显著低于A、B组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论高压氧联合超声清创术能较好的清除糖尿病足溃疡创面细菌,促进微循环,有利于溃疡创面愈合,值得临床推广应用。     

大鼠皮肤急性深Ⅱ度β射线损伤创面愈合过程中的对比观察

目的观察大鼠皮肤急性深Ⅱ度β射线损伤创面自然愈合过程中β_1整合素表达阳性细胞的动态变化,探讨急性β射线皮肤损伤创面的难愈机制。方法将96只SD大鼠随机分为实验组(48只)与对照组(48只),实验组建立大鼠皮肤急性深Ⅱ度β射线损伤创面模型;对照组建立大鼠皮肤深Ⅱ度热力烫伤创面模型。分别于伤后1 d、3 d、7 d、14 d、21d、28 d、35 d记录创面变化,并取创面组织标本,行HE染色和免疫组化染色,观察创面愈合过程中的组织变化和β_1整合素阳性细胞的变化。结果实验组大鼠创面愈合时间较对照组长,经统计学分析,差异有统计学意义(P0.01);通过对β_1整合素的检测发现,照射及烫伤后1 d、3 d、7 d、14 d、21 d的β_1整合素阳性细胞IOD值比较,差异有统计学意义(P0.05),对照射及烫伤后28 d、35d的β_1整合素阳性细胞IOD值进行比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论皮肤急性深Ⅱ度β射线损伤创面愈合时间相对缓慢,且在愈合过程中β_1整合素阳性细胞增殖分化延迟,可能是皮肤急性深Ⅱ度β射线损伤创面延迟愈合的原因之一     

不同制备工艺对胶质细胞源性神经营养因子微球理化性质及生物活性的影响

目的 评价不同制备工艺对胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)缓释微球的影响及微球所包裹的GDNF生物学活性.方法 以聚乳酸-羟基乙酸共聚物(polylactide-co-glycolide,PLGA)为包裹材料,采用复乳法(W1/O/W2)制备GDNF-PLGA微球,通过两因素析因设计方差分析,研究PLGA中乳酸(LA)与羟基乙酸(GA)单体组成比例和复乳搅拌速度对GDNF微球的粒径、包封率、突释率和体外释放行为的影响,并用PC-12细胞检测微球所释放的GDNF生物学活性,确定最佳制备工艺.结果 PLGA的单体组成比例可影响微球的突释率(P＜0.05),对粒径和包封率的影响无统计学意义,随着GA比例的增加,微球中GDNF释放速度加快.复乳搅拌速度由1 000 r/min增加到3 000 r/min后,微球的粒径显著减小(P＜0.01),突释率显著增加(P＜0.01),体外释放更为快速.微球中的GDNF在37℃下活性有效期可达20 d左右,较单独存放的GDNF活性有效期延长10 d以上.结论 复乳法可制备具有较高包封率和适宜体外释放时间的GDNF缓释微球,且活性有效期延长.

Abstract：

Objective To evaluate the effect of different preparation processes on preparation of the glial cell line-derived neurotrophic factor(GDNF)loaded microspheres and observe the biological activity of GDNF.Methods With polylactide-co-glycolide(PLGA)as the coating material,the GDNF-loaded microspheres were prepared by using double emulsion(W1/O/W2).Two-factor factorial design variance analysis was done to analyze the effects of the composition proportion of lactic acid(LA)and glycolic acid(GA)in PLGA and the stirring speed of multiple emulsion on particle size,entrapment efficiency,burst release and in vitro release characteristics of the GDNF-loaded microspheres.PC-12 bioassay was employed to detect the biological activity of the released GDNF so as to determine the optimal preparation process.Results The composition proportion of PLGA could affect the microspheres'burst release(P ＜ 0.05),with no effect on particle size and entrapment efficiency.with the higher.With higher proportion of GA,the release speed of GDNF in the microspheres was increased.When the stirring speed of multiple emulsion was increased from 1 000 r/min to 3 000 r/min,the particle size of the microspheres was decrease significantly(P ＜ 0.01),the burst release was increased markedly(P ＜ 0.01)and the in vitro release rate was accelerated.The activity of GDNF in the microspheres could last for about 20 days at 37℃,which was 10 days longer than that of single GDNF.Conclusions Double emulsioncan prepare the GDNF-loaded microspheres with high entrapment efficiency and suitable in vitro release time.In the meantime,the microspheres can extend the validity of GDNF.     

美宝湿润烧伤膏(MEBO)对皮肤溃疡修复作用的实验研究

目的：初步探讨MEBO对体表皮肤溃疡创面修复作用的机制。方法：将54只SD雄性大鼠随机分为MEBO治疗组、四环素对照组和凡士林对照组，每组18只，参照文献制成SD大鼠体表溃疡模型，次日开始用药治疗，并观察用药后各组溃疡创面愈合情况、肉芽组织生长情况，记录创面愈合时间；在造模后第7、14d及创面愈合时每组各处死大鼠6只，取创面中心肉芽组织及愈合区中心组织，采用光镜观察成纤维细胞与新生毛细血管的数量与形态。结果：MEBO组大鼠的创面愈合情况明显好于四环素与凡士林对照组，创面愈合时间明显短于四环素组及凡士林组（P〈0．05；P〈0．01）；组织病理学检测MEBO组治疗的创面，术后第7d成纤维细胞数及新生毛细血管数均明显多于四环素组及凡士林组（P〈0．05；P〈0．01）；术后第14d，MEBO组成纤纬细胞数、新生毛细血管数明显减少，与凡士林组比较，有显著性差异（P〈0．05）。结论：MEBO能明显的缩短实验性SD雄性大鼠体表皮肤溃疡模型创面修复愈合时间，具有促进创面愈合的作用，并且对于创面修复过程肉芽组织中新生毛细血管和成纤维细胞数量与形态具有良好的调节作用。