晚期糖基化终末产物对表皮角质形成细胞功能的影响及其机制

目的研究晚期糖基化终末产物（AGEs）对表皮角质形成细胞（KCs）功能的影响及其生物学机制。方法分离培养正常SD大鼠KCs，加入不同浓度AGEs干预48h，选择细胞反应敏感，差异显著的100μg／ml AGEs干预组进行以下实验：用二甲基噻唑二苯基四唑溴盐（MTT）法测定细胞增殖速度；检测KCs周期和凋亡，观察细胞核中NF—κB的活化状态；检测KCs迁移能力。结果100μg／ml AGEs可以明显抑制KCs的增殖和分裂；诱导细胞进入早期凋亡状态；促进KCs迁移。抑制NF—κB的活性后，部分恢复细胞的增殖能力；逆转细胞的早期凋亡；使细胞的迁移能力趋于正常。结论AGEs可以通过NF—κB途径影响KCs迁移、增殖和凋亡。     

核因子NF-κB对气道平滑肌细胞增殖的影响

目的：研究核因子-κB（NF-κB）对大鼠气道平滑肌细胞（ASMC）增殖活性的影响。方法：体外培养ASMCs，采用EMSA法直接检测ASMC中NF-κB的活性，MTT法、细胞周期检测及细胞核增殖抗原（PCNA）的免疫细胞化学染色法观察细胞增殖情况。结果：血小板活化因子刺激后ASMC中NF-κB明显活化，各细胞增殖指标均显著增高（P〈0．05），NAC可显著抑制上述效应（P〈0．05）。结论：NF-κB的活化能直接参与ASMC的增殖。     

NF-κB在肝细胞生长因子介导的肝脏干细胞增殖效应中的作用

目的 研究NF-κB途径在肝细胞生长因子(HGF)介导的肝脏WB F-344细胞增殖信号转导调控中的作用.方法 用不同浓度的HGF(0,20,40,80,100ng/ml)刺激、WB F-344细胞,24h后用3H-TdR掺人法检测细胞的增殖效应.采用脂质体转染方法用位点阴性的IκBa蛋白突变体质粒转染WB F-344细胞,阻断NF-κB活性.用HGF(40ng/ml)刺激0、15、30、60、120min后提取核蛋白,通过凝胶阻滞实验(EMSA)检测NF-κB的结合活性.采用脂质体转染法将NF-κB报告基因质粒BD Great EscA PeSEAPvector瞬时转染WB F-344细胞后用不同浓度的HGF(0、10、20、40ng/m1)刺激8h,通过BD Great EscA PeTM SEAP荧光检测系统检测NF-κB的转录活性.用NF-κB抑制剂如BAY-11-7082和ASA预处理WB F-344细胞,再用HGF(40ng/ml)刺激24h,通过3H掺入法检测细胞增殖效应.结果 HGF具有促进WB-F344细胞增殖的作用,且呈剂量效应正相关趋势.HGF能够明显提高NF-κB DNA的结合活性,NF-κB复合物在HGF作用15min后即出现,并在30～60min时达到高峰,以后逐渐减退.HGF能够显著促进NF-κB的转录活性,呈剂量效应相关趋势.用NF-κB抑制剂BAY-11-7082或ASA阻断NF-κB后,HGF诱导的WB F-344细胞增殖能够被明显抑制;在转染NF-κB抑制质粒的细胞,HGF介导的WBF-344细胞增殖效应被完全阻断.结论 HGF可促进WBF-344细胞增殖,且呈剂量效应正相关趋势.HGF介导的WB F-344细胞增殖效应依赖NF-κB的活化,NF-κB的激活对于HGF介导的WB F-344细胞增殖效应是必须的.     

α-硫辛酸对高糖诱导的系膜细胞核因子-κB活性的抑制作用

目的探讨α-硫辛酸对高糖诱导的大鼠系膜细胞增殖及核因子-κB(NF-κB)活性的影响。方法在体外条件下采用正常糖(NG)、高糖(HG)及HG 不同浓度α-硫辛酸处理大鼠系膜细胞;噻唑蓝法(MTT)测定系膜细胞增殖;采用凝胶电泳迁移率改变法检测NF-κB的活性。结果50~300μmol/L的α-硫辛酸可抑制系膜细胞增殖。HG刺激系膜细胞1h可引起NF-κB活性增强2·2倍(P<0·01),高糖诱导的NF-κB的活化可被α-硫辛酸(200μmol/L)所抑制(0·6±0·3vs2·2±0·2,P<0·01)。结论一定浓度的α-硫辛酸可抑制高糖诱导的系膜细胞增殖,并可降低NF-κB的DNA结合活性。     

核因子-κB/p65 siRNA对舌鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖、细胞周期及迁移能力的影响

目的 研究下调核因子-κB(NF-κB)/p65的表达对舌鳞状细胞癌Tca8113细胞的增殖、周期及迁移能力的影响,并探讨其相关的分子机制.方法 应用脂质体2000将NF-κB/p65 siRNA转染舌鳞状细胞癌Tca8113细胞,用Real-time PCR和Western blotting技术分别检测p65 mRNA及其蛋白的表达,采用CCK-8试剂盒和流式细胞术分别检测NF-κB/p65 siRNA对Tca8113细胞增殖和细胞周期的影响,Boyden小室法分析其对Tca8113细胞迁移能力的影响.进一步用Real-time PCR和Western blotting技术检测细胞周期相关基因cyclin E和cdk2以及浸润转移相关因子MMP-9 mRNA和蛋白表达的变化.结果 NF-κB/p65 siRNA能有效下调舌鳞状细胞癌Tca8113细胞中NF-κB/p65 mRNA和蛋白的表达(P<0.05),明显抑制Tca8113的细胞增殖(P<0.05),诱导细胞静止在G0/G1期,并降低Tca8113细胞的迁移能力.NF-κB/p65转染Tca8113后的48h,cyclin E、cdk2及MMP-9的表达均显著降低(P<0.05).结论 NF-κB/p65在舌鳞状细胞癌细胞周期及浸润转移中起重要作用,这可能与相关基因表达的改变有关.     

Bortezomib对非小细胞肺癌细胞系增殖、细胞周期及核转录因子活性的影响

目的探讨Bortezomib对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞周期、增殖、凋亡及核转录因子(NF-κB)的影响。方法采用MTT法检测Bortezomib对细胞生长的抑制作用,流式细胞仪分析Bortezomib对细胞周期及凋亡的影响,Western blotting检测Borte-zomib对NF-κB、IκB和Bcl-2表达的影响。结果随着作用时间和药物浓度的增加,Bortezomib对NSCLC细胞的生长抑制作用越明显。25nmol/L的Bortezomib作用48h可以使细胞周期阻滞在G2/M期。6种NSCLC细胞中均有NF-κB的基础性表达,且胞核中NF-κB的表达水平与胞质IκB的表达水平呈反比。Bortezomib对细胞中NF-κB的基础表达水平没有影响,但能明显抑制TNF-α诱导的NF-κB的核转位,并下调抗凋亡蛋白Bcl-2的水平,且这种抑制作用呈时间和剂量依赖趋势。结论Bortezomib能够抑制NSCLC细胞增殖,并诱导凋亡发生,可能是通过NF-κB通路发挥作用。     

糖基化终末产物对人表皮角质形成细胞周期调控的影响机制

目的通过体外试验探讨糖基化终末产物（AGEs）对表皮角质形成细胞周期调控的影响机制。方法体外培养的人表皮角质形成细胞经AGEs（150mg／m1）作用后,用噻唑兰（MTT）法研究其增殖活力、流式细胞仪研究细胞周期和凋亡率。用小片断RNA干扰（siRNA）的方法阻断细胞中AGEs受体（receptor of AGEs,RAGE）mRNA的表达,realtime PCR鉴定其阻断效率。RT-PCR法检测RAGE阻断前后各组细胞内RAF-1、黏着斑激酶（FAK）、周期素（cyclin）D1、cyclinBl、周期表依赖性激酶4（CDK4）的核酸水平表达差异。结果经AGEs干预后表皮角质形成细胞增殖活性下降,凋亡率升高,细胞周期G2期的比例显著增高,而细胞周期调控相关因子及信号因子RAF．1、cyclinDl、cyelinBl、CDK4的核酸表达较对照组却明显升高,用RAGE阻断以上因子后表达则与对照组相比无差异。结论在上述体外模型下,表皮角质形成细胞的周期调控因子升高,而增殖却下降且凋亡增加,可能是AGEs干预后细胞内启动内源性代偿调控机制,且这种调控机制与其受体（RAGE）途径相关;AGEs也可能还通过以上细胞周期调控因子以外的其他途径或机制影响细胞生物学功能。     

CPNE5对NF-κB转录调控活性的影响

目的:研究CPNE5对TNF-α诱导的NF-κB转录激活活性的影响,并探讨其作用机制.方法:用10 ng/mlTNF-α处理转染了pcDNA3.1或pcDNA3.1-CPNE5的HEK293细胞,用双荧光素酶报告基因实验检测不同转染组NF-κB的转录激活活性;Western印迹和细胞免疫荧光技术检测CPNE5表达上调对NF-κB入核的影响;凝胶阻滞实验研究CPNE5表达上调对NF-κB DNA结合能力的影响.结果:CPNE5可以显著抑制TNF-α对NF-κB的转录激活活性(P<0.0001);CPNE5不影响TNF-α诱导的NF-κB(P65)入核;CPEN5过表达降低了TNF-α诱导的NF-κB与DNA结合的能力.结论:CPNE5通过抑制NF-κB的DNA结合活性抑制TNF-α诱导的NF-κB转录激活活性.     

血管生成素通过ERK信号通路促进HeLa细胞的增殖

目的通过细胞外信号调节激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)通路及NF-кB信号途径探讨血管生成素(angiogenin,Ang)对HeLa细胞的促增殖及抗凋亡作用机制。方法用不同浓度的重组人Ang刺激HeLa细胞,MTT法分析Ang对HeLa细胞的促增殖作用,蛋白质印迹实验检测ERK信号通路相关分子的表达情况。U0126抑制ERK信号通路,检测Ang诱导的ERK1/2的磷酸化及c-myc的表达情况,同时检测Ang对细胞增殖的影响。敲低Ang的表达,检测细胞的凋亡情况。双荧光素酶报告基因检测Ang对NF-κB报告基因的激活。蛋白水平检测Ang刺激的HeLa细胞后,NF-κB通路相关分子的表达。结果 Ang能促进HeLa细胞增殖,ERK1/2的磷酸化水平及c-myc的表达随重组人Ang浓度的升高而增加。U0126能抑制Ang诱导的ERK1/2的磷酸化、c-myc的上调及细胞的增殖。Ang的低表达促进HeLa细胞的凋亡,但不影响NF-κB报告基因的激活及NF-κB通路上相关分子的表达。结论 Ang能够促进HeLa细胞增殖,并通过活化ERK通路促进细胞的增殖,但其抑凋亡作用与NF-κB通路无关。     

磷脂酶Cγ1在大肠癌细胞中的信号转导机制

目的研究磷脂酶Cγ1(PLCγ1)在大肠癌细胞中的信号转导机制。方法采用凝胶迁移率变动分析(EMSA),免疫细胞化学,酶谱分析及RT-PCR等技术,分析了大肠癌细胞LoVo中,PLCγ1在表皮生长因子(EGF)刺激下对相关信号分子核因子-KappaB(NF-κB)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和组织金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)的活性与表达的影响。结果与对照组相比,EGF处理组胞核阳性率显著增高,从26.91%±2.84%升高至40.83%±4.36%,而2.5μmol/LU73122处理组中胞核的阳性率则降低至12.20%±1.89%。同时,EGF刺激前若以2.5μmol/LU73122预处理,胞核阳性的细胞与只用EGF处理组相比也显著减少,从40.83%±4.36%降至18.21%±1.34%。EMSA结果显示,EGF处理细胞后可以增强NF-κB的活性,而U73122则可部分抑制其活性。RT-PCR结果表明,EGF处理细胞后,PLCγ1和NF-κB对于MMP-2与TIMP-2在mRNA水平的表达无显著影响。酶谱分析结果同时表明EGF处理细胞后,PLCγ1和NF-κB对于MMP-2酶原的表达及激活也无显著影响。结论在大肠癌细胞LoVo中,EGF可作为PLCγ1的上游刺激物,NF-κB作为其下游分子参与PLCγ1作用的发挥,而MMP-2、TIMP-2则不参与PLCγ1信号通路。     

肿块深度对乳腺超声弹性成像检查结果的影响分析

目的探究超声弹性成像(UE)中肿瘤深度对于判断乳腺肿物的良、恶性影响。方法选取本院2017年1月~2018年10月间收治的178例因乳腺肿块行手术切除患者为观察对象,纳入病灶200个。依据肿瘤深度不同分4组。对所有的患者在术前均予以常规超声检查以及超声弹性成像检查,对比不同深度肿瘤的UE成像情况、分析诊断效能(准确度、特异度、灵敏度以及阴、阳性预测值),对比良恶性乳腺肿瘤UE成像检查的阳性率。结果诊断良性病灶114个、恶性病灶86个;D组成像效果与A、B、C组相比的UE成像效果更差(P<0.05);A组特异度与B、C、D组的对比差异有统计学意义(P<0.05);A组准确度显著高于D组,差异有统计学意义(P<0.05),UE成像技术对恶性病灶的诊断阳性率显著更高(P<0.05)。结论在乳腺超声弹性成像检查中,对于乳腺肿物的良、恶性成像质量,诊断的特异度与准确度均受到肿瘤深度的影响。     

Tendinopathy of the tendon of the long head of the biceps

Pathologies of tendon of the long head of the biceps (LHB) are an important cause of shoulder pain. They include tendinopathy, rupture, superior labrum anterior and posterior lesions, pulley tears, and tendon instability. Conservative management of symptomatic LHB tendinopathy is commonly accepted as the first-line treatment. It consists of rest, nonsteroidal anti-inflammatory drugs, corticosteroid injections, and physical therapy. Biceps tenotomy and tenodesis are the most common surgical procedures to manage both isolated LHB pathology and biceps-glenoid complex tears combined with rotator cuff tears. However, controversy persists about the superiority of one of them because there is no evidence of significant differences in functional scores or patient satisfaction between the 2 techniques. This article provides an overview on biomechanical function of the LHB and current strategies for treatment of LHB disorders.     

Evaluation of the usefulness of the limited cone-beam CT (3DX) in the assessment of the thickness of the roof of the glenoid fossa of the temporomandibular joint

OBJECTIVES: The purpose of this study was to evaluate the usefulness of the limited cone-beam X-ray CT (3DX) (Morita Co., Japan) in measuring the thickness of the roof of the glenoid fossa (RGF) of the temporomandibular joint (TMJ). MATERIALS AND METHODS: Twenty-one TMJs removed at autopsy from 21 cadavers were investigated macroscopically using dissection and 3DX imaging. A Digimatic Outside Micrometer and a 3DX-image tool were used to measure the minimum thickness of the RGF. Multiple measurements were made to identify the thinnest area. Once the thinnest areas had been identified, three linear measurements were made and the average value was used for statistical analysis. RESULTS: The average macroscopic examination measurement was 1.37 mm (range 0.55-3.6 mm) and the average 3DX image measurement was 1.22 mm (range: 0.51-3.0 mm). There was no significant difference between these two groups using the Mann-Whitney U-test (P < 0.05). The Spearman's correlation coefficient by rank between these two groups was r = 0.93(P < 0.001). CONCLUSION: These results suggest that bone thickness measurements of the RGF by 3DX imaging was effective.