雷公藤甲素聚乳酸纳米粒对大鼠睾丸组织的影响

目的　观察采用聚乳酸纳米粒能否减轻雷公藤甲素的大鼠睾丸毒性。方法　雄性Wistar大鼠分别ig 0 .2及 0 .6mg·kg- 1雷公藤甲素 (非纳米粒组 )及其聚乳酸纳米粒混悬液 (纳米粒组 ) ,连续给药 15d ,以ig生理盐水的大鼠为对照组 ,测定睾丸的脏器系数及其组织匀浆液中酸性磷酸酶 (ACP)活性和果糖含量 ,光镜观察睾丸组织的病理学变化。结果在 0 .6mg·kg- 1剂量下 ,非纳米粒组睾丸ACP活性和果糖的含量均明显低于纳米粒组 (P <0 .0 5 )。光镜观察显示 ,雷公藤甲素 0 .6mg·kg- 1可引起大鼠睾丸的损伤 ,非纳米粒组引起的病变程度明显重于纳米粒组 ,主要表现为睾丸萎缩 ,各级生精细胞变性、坏死、数量减少或消失 ,出现了多核巨细胞。结论以聚乳酸作为药物载体的纳米体系 ,可明显减轻雷公藤甲素对睾丸的毒性     

肾移植病人环孢素和酮康唑的联合应用

为预防排斥反应,1995～1996年环孢素和酮康唑联合用于肾移植病人56例(基本组),移植肾很快恢复功能,手术当天即开始用3种免疫抑制剂:甲泼尼松龙(30mg·d-1)、硫唑嘌呤(2～3mg·d-1)和环孢素。同时给酮康唑,剂量200mg·d-129例,100mg·d-127例。对照组30例,只用3种免疫抑制剂,未用酮康唑。研究结果表明,基本组环孢素用量减少,肾移植术后第1个月,为对照组的1/2～2/3,分别为每日7.82mg·kg-1和4.01mg·kg-1;术后6个月为对照组的1/4～1/3,分别为每日4.21mg·kg-1和1.32～2.50mg·kg-1。基本组发生急性排斥率为18%,对照组为38%。基本组平均每例共…     

钙调神经磷酸酶在大鼠甲基苯丙胺诱导的行为敏化中的作用

目的:钙调神经磷酸酶是一种丝氨酸/苏氨酸磷酸酶,此磷酸酶被激活后可去磷酸化许多底物蛋白,如钙通道、AMPA受体、NMDA受体、突触蛋白I、多巴胺和环磷酸腺苷调节磷蛋白32(DARPP32)以及环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)等,通过调节这些目标靶蛋白而参与神经元突触可塑性的调节。反复给予精神兴奋剂能够导致动物自发活动逐渐增加的现象称为行为敏化,它是用以研究药物成瘾后反复、连续的强迫性用药行为的一种动物模型,能够为临床研究成瘾者强迫性用药以及复吸提供理论基础。本文目的在于研究钙调神经磷酸酶在大鼠甲基苯丙胺诱导的行为敏化中的作用。方法:1)系统给予钙调神经磷酸酶的抑制剂环孢素A,考察钙调神经磷酸酶在大鼠甲基苯丙胺行为敏化形成中的作用。SD大鼠分为四组:生理盐水+溶媒组,生理盐水+环孢素A组,甲基苯丙胺+溶媒组,甲基苯丙胺+环孢素A组,每日给予大鼠生理盐水/甲基苯丙胺(1mg·kg-1ip)注射,注射前90min给予环孢素A(15mg·kg-1,ip)溶媒处理,注射后立即进行2h自发活动的测定,连续14d。2)考察钙调神经磷酸酶的抑制剂对于甲基苯丙胺诱导的大鼠自发活动的影响。SD大鼠分为两组:生理盐水+溶媒组,生理盐水+环孢素A组,每日给予大鼠注射生理盐水(1mg·kg-1),注射前90min给予环孢素A(15mg·kg-1,ip)/溶媒处理,注射后立即进行2h自发活动的测定,连续14d,考察系统给予环孢素A对于大鼠甲基苯丙胺诱导的行为敏化形成的影响。在d15进行甲基苯丙胺(1mg·kg-1)的challenge,考察环孢素A预处理之后,大鼠对甲基苯丙胺诱导的自发活动的影响。3)VTA微注射环孢素A,考察钙调磷酸酶对于大鼠甲基苯丙胺诱导的行为敏化的作用。SD大鼠分为四组:生理盐水+溶媒组,生理盐水+环孢素A组,甲基苯丙胺+溶媒组,甲基苯丙胺+环孢素A组,每日给予大鼠生理盐水/甲基苯丙胺(1mg·kg-1ip)注射,注射前90minVTA微注射环孢素A(1μg/侧)/溶媒(DMSO)处理(隔日微注射一次),注射后立即进行2h自发活动的测定,连续14d,考察VTA微注射环孢素A对大鼠甲基苯丙胺诱导的行为敏化形成的影响。4)VTA微注射环孢素A对于甲基苯丙胺诱导的大鼠自发活动的影响。SD大鼠分为两组:生理盐水+溶媒组,生理盐水+环孢素A组,每日给予大鼠注射生理盐水(1mg·kg-1),注射前90min VTA微注射环孢素A(15mg·kg-1,ip)/溶媒处理(隔日微注射一次),注射后立即进行2h自发活动的测定,连续14d。在d15进行甲基苯丙胺(1mg·kg-1)的challenge,考察VTA微注射环孢素A预处理之后对大鼠甲基苯丙胺诱导的自发活动的影响。结果:系统给予钙调磷酸酶的抑制剂环孢素A能够抑制大鼠甲基苯丙胺诱导的行为敏化的形成,环孢素A预处理对大鼠自发活动没有影响。d15给予甲基苯丙胺challenge能够显著增加大鼠自发活动,但环孢素A预处理对甲基苯丙胺急性处理诱导的大鼠自发活动增高没有影响。VTA微注射环孢素A亦能够抑制大鼠甲基苯丙胺诱导的行为敏化的形成,而VTA环孢素A预处理对于甲基苯丙胺急性处理诱导的大鼠自发活动增加亦没有影响。结论:钙调磷酸酶的激活,特别是在中脑腹侧被盖区(VTA),可能参与了大鼠甲基苯丙胺诱导的行为敏化过程,并且对突触可塑性的调节具有重要作用。     

雷公藤内酯醇抗生育作用的有效性与安全性研究

［摘要］目的探讨雷公藤内酯醇的抗生育作用部位和安全性。方法选用健康雄性Wistar大鼠，观察雷公藤内酯醇对其精子生成及对睾丸、附睾和心、肝、肾等的影响。实验分两个阶段，第一阶段给实验组大鼠喂服雷公藤内酯醇0.05 mg·kg-1·d-1［用1%二甲亚砜（DMSO）配制］，每周6 d，连续8周,对照组喂服1% DMSO 2 mL·kg-1·d-1；第二阶段给实验组大鼠分别喂服雷公藤内酯醇0.10，0.05，0.03 mg·kg-1·d-1，每周6 d，连续8周，对照组喂服1%DMSO 2 mL·kg-1·d-1。每周称量体重，取材观察睾丸生精细胞凋亡情况，附睾精子活力及对心、肝、肾、睾丸的影响。结果实验组精子活性明显下降，雷公藤内酯醇剂量≥0.05 mg·kg-1·d-1时，大鼠精子活性为0，睾丸内精曲小管生精上皮损伤，管腔内上皮脱落，对照组大鼠形态学观察未见明显异常。实验组与对照组睾丸生精细胞凋亡差异无显著性，不同剂量雷公藤内酯醇对实验组和对照组的体重影响差异无显著性。结论雷公藤内酯醇是一种有效的抗生育药，对组织器官的毒性较小，且避孕作用是可逆性的。［关键词］雷公藤内酯；生育力 ；避孕； 大鼠     

曲尼司特对环孢素A致慢性肾毒性大鼠骨形成蛋白、转化生长因子β1表达的影响

目的观察曲尼司特对环孢素A(CsA)慢性肾毒性大鼠模型肾脏病理改变和BMP-7、TGF-β1表达的影响,以探讨曲尼司特防护CsA慢性肾毒性的可能机制。方法给进低盐饮食SD大鼠灌胃20 mg·kg-1·d-1剂量的CsA制作大鼠CsA肾毒性模型,同时以400 mg·kg-1·d-1剂量的曲尼司特喂饲以预防肾毒性,以10 mg·kg-1·d-1剂量的伊贝沙坦作对照,于治疗第4周测定有关指标。结果曲尼司特能明显减少肾小管上皮细胞空泡变性和细胞坏死,减少间质炎细胞浸润及间质纤维化,免疫组化显示TGF-β1表达下调, BMP-7表达增加,两者呈负相关(P<0．05)。结论曲尼司特能减少TGF-β1表达,增加BMP-7表达,减轻CsA所致的慢性肾脏病理变化。     

当归多糖对小鼠免疫功能的影响

目的　研究当归多糖对小鼠免疫功能的影响。方法　sc环磷酰胺复制免疫抑制模型 ;测定胸腺、脾脏重量并计算脏器系数 ;碳粒廓清法测定单核巨噬细胞吞噬功能 ;比色法测定血清溶血素IgG、IgM含量 ;MTT法测定混合淋巴细胞培养反应。结果　在 1 0～ 1 0 0mg·kg- 1 剂量范围内 ,当归多糖能对抗环磷酰胺引起的小鼠脾萎缩 ,增加正常小鼠脾重 ,而对于正常及免疫抑制小鼠胸腺影响不大 ;促进正常及免疫抑制小鼠碳粒廓清率 ;而对小鼠血清溶血素IgG、IgM的生成有较强的抑制作用 ;在 30～ 30 0mg·L- 1 剂量范围内能促进同种异型抗原激活的小鼠脾细胞的增殖。结论　当归多糖能增强正常及免疫抑制小鼠的非特异性免疫功能 ,而对正常小鼠的体液免疫功能有抑制作用     

蛇葡萄素与苯并芘合用对大鼠肝组织内CYP和GST基因表达的影响

目的观察蛇葡萄素与苯并芘合用对♂SD大鼠肝组织内CYP(cytochrome P450,CYP)和GST(glutathione S-transferase,GST)基因表达的影响。方法♂SD大鼠,蛇葡萄素(二氢杨梅素)250、500mg·kg-1,每日1次连续灌胃15d,d15模型组和2个给药组分别腹腔注射(ip)苯并芘100mg·kg-1。用逆转录-实时荧光定量PCR法检测肝组织内的CYP基因CYP1A1、CYP1A2、CYP1B1和GST基因GST-m1、GST-pi的表达情况。结果与空白组相比,苯并芘组(模型组)可明显诱导肝组织内的CYP1A1、CYP1A2、CYP1B1基因表达(P<0.01),分别是空白对照组的121倍、11倍、684倍,对谷胱甘肽-S转移酶基因GST-m1和GST-pi的表达有抑制趋势,分别是空白对照组的0.79倍和0.82倍;蛇葡萄素(二氢杨梅素)组+苯并芘组可明显诱导肝组织内的CYP1A1、CYP1A2、CYP1B1基因表达(P<0.01),分别是空白对照组的189和289倍、16.9和44.5倍、914和804倍,蛇葡萄素500mg.kg-1+苯并芘组明显诱导谷胱甘肽-S转移酶基因GST-m1和GST-pi的表达,分别是空白对照组的2.18倍(P<0.01)和2.12倍(P<0.05)。与苯并芘组(模型组)相比,蛇葡萄素250mg·kg-1+苯并芘组和蛇葡萄素500mg·kg-1+苯并芘组不影响CYP1B1的基因表达,但明显诱导CYP1A1的基因表达,分别是苯并芘组(模型组)的1.56倍(P>0.05)和2.39倍(P<0.05);明显诱导CYP1A2的基因表达,分别是苯并芘组(模型组)的1.53倍(P<0.05)和4.04倍(P<0.05);蛇葡萄素500mg.kg-1+苯并芘组明显诱导谷胱甘肽-S转移酶基因GST-m1和GST-pi的表达,分别是苯并芘组(模型组)的2.78倍(P<0.01)和2.57倍(P<0.05)。结论与苯并芘合用,蛇葡萄素(二氢杨梅素)可明显诱导CYP1A1、CYP1A2基因和谷胱甘肽-S转移酶基因GST-m1和GST-pi的表达。对CYP1B1基因无影响。表明蛇葡萄素与苯并芘合用可加速苯并芘代谢形成非致癌物而解毒和加速排泄。提示蛇葡萄素可对抗苯并芘的致癌作用。     

雷公藤甲素对大鼠肾上腺皮质毒性作用的时间节律性研究

目的观察雷公藤甲素对大鼠肾上腺皮质的毒性作用并探讨其时间节律性,为临床合理用药、降低毒副反应提供实验依据。方法♂SD大鼠30只随机分为3组,包括空白对照组;雷公藤甲素早上用药组40μg.kg-1,qd,8am;雷公藤甲素晚上用药组40μg.kg-1,qd,8pm。连续灌胃7周后断头处死,测定大鼠血浆皮质醇含量,大鼠肾上腺HE染色和透射电镜观察,从功能和形态两方面探讨较长期和不同时辰服用雷公藤甲素对大鼠肾上腺皮质分泌功能的影响、中毒病理改变及其毒性机制。结果早上用药组大鼠血浆皮质醇含量明显低于空白对照组(P<0.05);晚上用药组大鼠血浆皮质醇含量与空白对照组比较无差异,与早上用药组比较差异有显著性(P<0.05)。HE染色观察:早上用药组肾上腺皮质较空白对照组变薄、结构不清、脂质空泡减少,晚上用药组肾上腺皮质较空白对照组略微增厚,束状带增宽,脂质空泡多。电镜观察:早上用药组皮质束状带细胞质中线粒体空泡变性,脂滴少,粗面内质网扩张,周边有核糖体;晚上用药组肾上腺皮质束状带细胞质中线粒体、脂滴、核糖体均较多。结论较长期服用雷公藤甲素对大鼠肾上腺皮质具有毒性作用,且其毒性作用具有时间节律性。     

雷公藤甲素单次及多次给药对大鼠肝药酶活性的影响

目的:研究雷公藤甲素对大鼠肝药酶活性的影响。方法:对SD大鼠以雷公藤甲素(150、300、450μg·kg-1)灌胃给药,每天1次,给药1d或14d,分别测定细胞色素P450、细胞色素b5含量及红霉素N-去甲基酶(ERD)、二甲基亚硝胺脱甲基酶(NDMA)、甲氧基异唑脱甲基酶(MROD)、乙氧基异唑脱乙基酶(EROD)和戊氧基异唑脱烷基酶(PROD)活性;CYP3A和CYP2E1蛋白含量采用Westernblotting法分析。结果:单次灌胃雷公藤甲素对肝药酶活性及CYP2E1、CYP3A蛋白表达基本无影响;多次给予雷公藤甲素(450μg·kg-1,14d)能诱导NDMA活性,抑制ERD活性,轻度升高CYP2E1蛋白表达,显著降低CYP3A蛋白表达。结论:长期较高剂量给予雷公藤甲素能抑制CYP3A活性,轻度诱导CYP2E1活性。     

丹参素和泮托拉唑对肝硬化大鼠肝部分切除术后肝再生的影响研究

目的以肝硬化大鼠为动物模型,研究药物对肝硬化大鼠肝部分切除术后肝再生的影响。方法取健康的Wistar雄性大鼠64只,以60%CCl4油溶液0.3ml/100g皮下注射,同时饮用5%酒精溶液,45d后制成肝硬化动物模型。模型大鼠随机分为4组,16只/组。全麻下均行左、中叶肝切除术。术后各组按以下方案处理:对照组皮下注射生理盐水1mg·kg-1·d-1,丹参素组腹腔注射18mg·kg-1·d-1,泮托拉唑组皮下注射0.2mg·kg-1·d-1,两药合用组同时给予丹参素(tanshinol)腹腔注射18mg·kg-1·d-1,泮托拉唑(pantoprazole)皮下注射0.2mg·kg-1·d-1,连续给药2周,抽取静脉血样,取肝脏组织,检测肝功能、有丝分裂指数(MI)、增生细胞核抗原(PCNA)、细胞核DNA含量。结果丹参素组、泮托拉唑组及两药合用组MI、PCNA阳性染色细胞量、细胞核DNA含量均高于对照组(P<0.05),两药合用组MI、PCNA阳性染色细胞量、细胞核DNA含量均高于丹参素组、泮托拉唑组(P<0.05),但各组间肝功能变化无明显差异。结论丹参素、泮托拉唑及两药合用均对肝硬化大鼠肝部分切除术后肝细胞再生有促进作用。     

新型γ-环糊精衍生物Aom0498-1和Aom0498-3的肌松拮抗作用(英文)

目的寻找并筛选可选择性地逆转甾类非去极化肌松药的肌松拮抗剂。方法应用一锅法合成了2种6-脱氧-6-硫醚乙酰基甘氨酸-γ-环糊精衍生物Aom0498-1和Aom0498-3。采用3种动物模型测定Aom0498-1和Aom0498-3对罗库溴铵导致的神经-肌肉阻滞的逆转作用:①小鼠体外神经-膈肌标本模型中的肌张力恢复比率。将小鼠随机分成5组:生理盐水(正常对照组),γ-环糊精1.8,3.6,5.4μmol·L-1,Aom0498-1 1.8,3.6,5.4μmol·L-1,Aom0498-3 1.8,3.6,5.4μmol·L-1以及舒格麻坦(sugammadex)1.8,3.6,5.4μmol·L-1(阳性对照)组;②豚鼠体内模型中的4个成串刺激比恢复50%及75%的时间。将豚鼠随机分为5组:生理盐水(正常对照),γ-环糊精2 mg·kg-1,Aom0498-1 2 mg·kg-1,Aom0498-3 2 mg·kg-1以及舒格麻坦2 mg·kg-1(阳性对照)组;③家兔体内模型中的捏耳反射恢复时间。将动物随机分为5组:生理盐水(正常对照组),γ-环糊精6 mg·kg-1,Aom0498-1 6 mg·kg-1,Aom0498-3 6 mg·kg-1以及舒格麻坦6 mg·kg-1(阳性对照)组。同时,对Aom0498-1以及Aom0498-3的单次给药毒性也进行了初步的检测,并与舒格麻坦进行了比较。将小鼠随机分为生理盐水组,Aom0498-1 2,4和8 g·kg-1组,Aom0498-3 2,4和8 g·kg-1组以及舒格麻坦2,4和8 g·kg-1组。结果①在小鼠神经-膈肌标本模型中,Aom0498-1 1.8,3.6和5.4μmol·L-1组肌张力恢复比例分别为(2.5±1.0)%,(6.9±2.6)%和(24.5±9.1)%,同浓度Aom0498-3组分别为(17.4±1.7)%,(65.5±0.6)%及(100.0±8.9)%,均显著高于同浓度γ-环糊精组的(1.1±0.5)%,(2.6±0.7)%和(10.3±6.1)%(P<0.05)。Aom0498-3 1.8,3.6和5.4μmol·L-1组肌张力恢复比例显著高于相应同浓度的舒格麻坦组(P<0.05),Aom0498-1 1.8,3.6和5.4μmol·L-1组肌张力恢复比例则显著低于相同浓度的舒格麻坦组(P<0.05)。②在豚鼠模型中,Aom0498-3 2 mg·kg-1组4个成串刺激比恢复至50%及75%的时间显著低于γ-环糊精2 mg·kg-1组(P<0.05),与舒格麻坦2 mg·kg-1组相当;Aom0498-1 2 mg·kg-1组恢复至50%时间显著低于γ-环糊精2 mg·kg-1组,Aom0498-1 2 mg·kg-1组恢复至75%时间显著高于舒格麻坦2 mg·kg-1组。③在家兔模型中,Aom0498-1 6 mg·kg-1组和Aom0498-36 mg·kg-1组恢复时间显著低于γ-环糊精6 mg·kg-1组(P<0.05)。Aom0498-3 6 mg·kg-1组恢复时间显著低于舒格麻坦6 mg·kg-1组。单次给药毒性检测结果显示,舒格麻坦2,4及8 g·kg-1组中出现一过性或中等程度副作用的小鼠数多于Aom0498-1以及Aom0498-3对应浓度组。结论合成的Aom0498-1和Aom0498-3具有较高的逆转罗库溴铵活性的作用,提示该系列γ-环糊精衍生物可作为候选药物用于选择性肌松拮抗剂的开发。     

应用基准剂量法探讨氯蜱硫磷的参考剂量

目的应用基准剂量(BMD)法探讨氯蜱硫磷(毒死蜱)的参考剂量。方法 80只清洁级成年雌性SD大鼠,ig给予氯蜱硫磷0.25,0.5,1,2,4,8和16 mg.kg-1,每天1次,连续21 d。21 d后处死大鼠测定大鼠大脑皮质、海马和血清中乙酰胆碱酯酶(AChE)活性,观察氯蜱硫磷的未观察到损害作用剂量。采用R语言的PROAST28.1软件包计算BMD及其下限值,将BMD下限值除以安全系数100得到氯蜱硫磷的参考剂量。结果 与正常对照组相比,氯蜱硫磷4,8和16 mg.kg-1使大鼠海马中AChE活性明显降低(P<0.01);氯蜱硫磷2,4,8和16 mg.kg-1使大鼠皮质中AChE活性明显降低(P<0.01);而氯蜱硫磷1,2,4,8和16 mg.kg-1使大鼠血清中AChE活性明显降低(P<0.01)。随着氯蜱硫磷染毒剂量的增加,大鼠海马、皮质和血清中的AChE活性表现出下降趋势。以AChE活性作为指标,海马、皮质和血清中氯蜱硫磷的未观察到损害作用剂量分别为低于2.0,1.0,0.5 mg.kg-1的剂量,BMD分别为0.81,0.90和0.41 mg.kg-1,参考剂量分别为5.5,4.6和3.6μg.kg-1;为人类膳食安全,将氯蜱硫磷的参考剂量定为3.6μg.kg-1。结论 BMD法可制定比未观察到损害作用剂量法更加安全的参考剂量,并可以进一步应用于膳食暴露风险评估。     

增殖诱导配体-siRNA/类脂质体复合体的临床前安全性评价

目的考察增殖诱导配体(APRIL)-小干扰RNA(siRNA)/类脂质体复合物的毒性。方法①小鼠iv给予APRIL-siRNA/类脂质体复合物500 mg·kg-1,连续14 d称量小鼠体质量及观察死亡情况;②每只豚鼠分别于第0,7和14天左侧涂抹0.2 ml APRIL-siRNA/类脂质体复合物130 g.L-1,2,4-二硝基氯代苯10 g.L-1(阳性对照),末次接触后14 d,将各受试物0.2 ml涂于右侧,持续6 h,观察24和48 h皮肤致敏情况;③小鼠分别iv给予APRIL-siRNA/类脂质体复合物125,250和500 mg·kg-1、环磷酰胺40 mg·kg-1(阳性对照)组。间隔24 h,第2次注射后6 h处死小鼠,检测小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率;④小鼠分别iv给予APRIL-siRNA/类脂质体复合物125,250和500 mg·kg-1、环磷酰胺(阳性对照),每天1次,连续5 d,检测小鼠精子畸形率。结果与正常对照组相比,APRIL-siRNA/类脂质体复合物500 mg·kg-1组小鼠体质量和各组织无明显变化,没有小鼠死亡,未表现急性中毒现象。APRIL-siRNA/类脂质体脂质体复合物对豚鼠皮肤无致敏性。该脂质体复合物125,250和500 mg·kg-1组小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率分别为(1.8±1.0)‰,(1.6±0.9)‰和(2.4±1.1)‰;精子畸形率分别为(1.98±0.27)%,(1.96±0.15)%和(2.04±0.16)%,与对照组微核率(2.2±1.3)‰和精子畸形率(1.96±0.29)%无明显差异。结论在本实验剂量范围内,APRIL-siRNA/类脂质体复合物对小鼠无明显毒性。     

曲尼司特对糖尿病大鼠肾单核细胞趋化蛋白1表达的抑制作用

目的研究曲尼司特对糖尿病大鼠肾纤维化及单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)表达的影响。方法健康SD大鼠一次性尾静脉注射链脲佐菌素30 mg.kg-1制备糖尿病大鼠模型,72 h后每天分别ig给予曲尼司特100和200 mg.kg-1,每天1次,连续12周。测定空腹血糖(FBG)、24 h尿蛋白(UP)和血清尿素氮(BUN)含量及肾指数;Masson染色观察肾形态,免疫组化法和Western印迹法检测肾组织MCP-1蛋白表达。结果 与正常对照组相比,模型对照组FBG、BUN、24 h UP含量和肾指数均明显升高(P<0.01);与模型对照组相比,曲尼司特100和200 mg.kg-1组BUN、24 h UP含量、肾指数均显著降低(P<0.01),BUN由(21.0±3.5)mmol.L-1分别降低到14.5±2.6和(10.1±3.7)mmol.L-1,24 h UP由(39.3±6.6)mg分别降低到27.0±4.5和(23.7±6.0)mg(P<0.01)。与正常对照组相比,模型对照组肾小球体积增大,系膜区增宽,间质胶原纤维明显增多,肾MCP-1蛋白表达显著增加(P<0.05)。与模型对照组相比,曲尼司特100和200 mg.kg-1组间质胶原纤维明显减少,肾MCP-1表达明显下降(P<0.05)。其中曲尼司特200 mg.kg-1组效果更为明显(P<0.01)。结论 曲尼司特可能通过减少MCP-1表达,从而延缓肾间质纤维化的发展。     

浙贝母总生物碱对人肺腺癌A549/顺铂细胞耐药性的逆转作用(英文)

目的研究浙贝母总生物碱(TAF)对人肺腺癌A549/顺铂(DDP)细胞DDP耐药性的逆转作用。方法①离体实验:采用MTT法观察TAF(12.5～200mg·L-1)对A549和A549/DDP细胞的毒性作用;采用MTT法检测TAF 9mg·L-1对A549/DDP细胞耐药的逆转作用,同时设环孢菌素A(Cys A)1mg·L-1和汉防己甲素(Tet)1mg·L-1为阳性对照;实时荧光定量PCR检测A549/DDP细胞多药耐药基因1(MDR1)mRNA相对表达;Western蛋白免疫印迹法检测A549/DDP细胞P-糖蛋白(P-gp)相对表达。②在体实验:制备BALB/c裸鼠A549/DDP移植瘤模型,随机分为模型对照、DDP 5mg·kg-1、TAF2 mg·kg-1、DDP 5 mg·kg-1+TAF 0.5,1和2 mg·kg-1联用组,每两天ip给予DDP,每天ig给予TAF,持续13d,检测移植瘤体积和质量的变化。结果 TAF作用72 h抑制A549和A549/DDP细胞存活的IC50值分别为141±5和(298±22)mg·L-1;IC10值分别为15.3±1.9和(9.0±1.2)mg·L-1。DDP 0.01～100mg·L-1与TAF 9 mg·L-1合用后,DDP抑制A549/DDP细胞存活的IC50值由(14.06±3.72)mg·L-1降至(0.79±0.14)mg·L-1,抑制A549细胞存活的IC50值无明显变化;TAF对A549/DDP细胞DDP耐药性的逆转倍数为17.80倍,高于Cys A(10.16倍)和Tet(14.05倍)。TAF可明显降低A549/DDP细胞MDR1 mRNA及P-gp相对表达(P<0.01)。DDP 5mg·kg-1体内抑瘤率为49.9%,与TAF 2mg·kg-1合用后抑瘤率增至67.4%(P<0.01)。结论 TAF在体内外均可逆转A549/DDP细胞对DDP的耐药性,可降低MDR1 mRNA和P-gp蛋白表达。     

四逆散冻干粉改善睡眠作用的药效物质基础

目的探讨四逆散改善睡眠作用的药效物质基础,为阐明其改善睡眠的作用机制提供依据。方法 Wistar大鼠随机分为正常对照、四逆散冻干粉12 g·kg-1、芍药苷87 mg·kg-1、甘草次酸39 mg·kg-1、昔奈福林38 mg·kg-1、柴胡皂苷C 42 mg·kg-1、血清移行成分配伍(昔奈福林∶芍药苷∶柴胡皂苷C∶甘草次酸=8.5∶1∶1.5∶6.5)206 mg·kg-1组,给药组ig给药,每天1次,连续7 d,于末次给药后5 h制备血清或抽取脑脊液,用HPLC测定血清和脑脊液中四逆散移行成分;或者连续ig给药7 d后,ip给予戊巴比妥钠50 mg·kg-1,用翻正反射法测定小鼠睡眠时间。结果①四逆散冻干粉连续给药7 d后血清样品中有14种移行成分,经来源认定研究认为,其中2号成分为昔奈福林,4号成分为芍药苷,12号成分为柴胡皂苷C,14号成分为甘草次酸。②四逆散冻干粉、芍药苷、甘草次酸、昔奈福林和柴胡皂苷C均可以使脑脊液中内源性物质峰面积增加,其中四逆散冻干粉组是正常脑脊液峰面积的12.5倍;血清移行成分配伍组脑脊液中内源性物质峰面积高于四逆散冻干粉组,是四逆散冻干粉组的3.2倍。③昔奈福林、芍药苷、柴胡皂苷C和甘草次酸单用对戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间无明显影响,四逆散冻干粉和血清移行成分配伍均延长小鼠睡眠时间(P<0.01),且血清移行成分配伍组优于四逆散冻干粉组(P<0.01)。结论芍药苷、甘草次酸、昔奈福林和柴胡皂苷C是四逆散冻干粉给药后血清主要移行成分,可能是四逆散改善睡眠作用的物质基础。     

番荔枝总内酯对大鼠心、肝和肾的毒性及其作用机制

目的观察番荔枝总内酯对大鼠的毒性作用,初步探讨其毒性机制。方法将雄性SD大鼠随机分为溶剂对照、番荔枝总内酯7和14 mg·kg-1组,分别ig给药,每天1次,连续4周,末次给药1h后取血,处死大鼠。HE染色观察大鼠心、肝和肾组织病理变化;全自动生化分析仪检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)和肌酸激酶(CK)水平;BCA法、分光光度法和荧光素法分别测定心、肝和肾线粒体中蛋白质浓度、线粒体复合物Ⅰ活性和ATP含量;荧光探针法检测组织中Ca2+和活性氧类(ROS)浓度。结果番荔枝总内酯14mg·kg-1组大鼠肝组织中央静脉周围细胞轻微肿胀;与溶剂对照组比较,血清ALT,AST,BUN和CK水平显著升高,分别由溶剂对照组的(50.0±1.4)U.L-1,(126±11)U.L-1,(6.13±0.15)mmol·L-1和(293±13)U.L-1升高到(59.0±2.6)U.L-1(P<0.05),(176±12)U.L-1(P<0.05),(12.9±2.05)mmol·L-1(P<0.01)和(480±97)U.L-1(P<0.05),血清Cr水平无明显变化。心、肝和肾组织线粒体复合物Ⅰ活性分别由溶剂对照组的(22.6±4.9),(72±10)和(34±4)μmo.lg-1蛋白.min-1降低到(7.5±1.7),(54±10)和(26±6)μmo.lg-1蛋白.min-1(P<0.05,P<0.01);心、肝和肾组织ATP含量由溶剂对照组的(10.4±2.1),(6.8±1.6)和(12.5±3.4)nmo.l L-1降低至(2.2±3.4),(3.4±1.2)和(5.5±1.1)nmol·L-1(P<0.05,P<0.01);心肌细胞中Ca2+和ROS浓度增加,荧光强度分别由7.37±0.64和14.8±4.1增加到9.06±0.08和110.0±19.0(P<0.05,P<0.01),肝和肾细胞内Ca2+和ROS浓度无明显变化。番荔枝总内酯7mg·kg-1组上述指标无明显变化。结论番荔枝总内酯对大鼠心、肝和肾具有一定的毒性,其作用机制可能是降低心、肝和肾组织中线粒体复合物I的活性和ATP含量,升高组织细胞内Ca2+和ROS浓度,引起组织细胞损伤。     

薯蓣皂苷对胶原性关节炎模型大鼠环氧合酶2及NF-κB的抑制作用

目的研究薯蓣皂苷对大鼠胶原性关节炎(CIA)的治疗作用并探讨其可能的作用机制。方法第1天大鼠左后足底皮内注射胶原乳剂制备CIA模型,第7天加强注射。第12天ig给予薯蓣皂苷30,60和120mg·kg-1,吲哚美辛8mg·kg-1,连续14d。给药前和给药开始,每4d测量1次右后足跖肿胀程度;处死后光镜观察右后足组织形态变化;检测CIA大鼠脏器指数;Western印迹法检测踝关节滑膜组织中NF-κB p65亚基和环氧合酶2蛋白(COX-2)表达;放射免疫法检测足爪肿瘤坏死因子α(TNF-α)及前列腺素E2(PGE2)含量。结果与正常对照组相比,CIA模型大鼠右后足跖明显肿胀(P<0.01);病理切片发现明显增生和大量炎症细胞浸润;胸腺指数和脾指数明显增高(P<0.01);踝关节滑膜组织中NF-κB p65亚基和COX-2的水平显著升高(P<0.01);足爪TNF-α及PGE2含量亦显著增高(P<0.01)。与模型组相比,薯蓣皂苷60和120mg·kg-1治疗可抑制CIA大鼠的足趾肿胀,明显改善大鼠病变关节的病理组织结构,降低大鼠胸腺指数,显著降低NF-κB p65亚基和COX-2的水平(P<0.01),降低足爪TNF-α及PGE2含量(P<0.01),对关节炎大鼠有明显的治疗作用。结论薯蓣皂苷对CIA大鼠具有较强的抗炎作用,机制可能与抑制NF-κB p65亚基和COX-2的表达有关。     

烟碱和槟榔碱对大鼠颌下腺肌醇含量的影响

急性实验中，间隔5 min反复ip N受体激动剂烟碱0.5, 1.0, 1.0, 2.0, 2.0 mg·kg^-1可显著提高大鼠颌下腺中肌醇含量，并为N受体拮抗剂美加明1.0 mg·kg^-1对抗，为肌醇磷酸酶抑制剂氯化锂69.4 mg·kg^-1 ip翻转；一次性ip M受体激动剂槟榔碱200 mg·kg^-1也可显著提高颌下腺肌醇含量，并为M受体拮抗剂阿托品2.0 mg·kg^-1对抗；反复注射烟碱后，再ip不影响肌醇含量的槟榔碱50 mg·kg^-1，两者产生协同效应，进一步提高肌醇含量. 慢性实验中，每日2次sc烟碱2.0-5.0 mg·kg^-1或槟榔碱2.0-10.0 mg·kg^-1 14 d后，均可使大鼠颌下腺中肌醇含量显著降低.     

香椿子总多酚对佐剂型关节炎大鼠的治疗作用

目的研究香椿子总多酚(TSTP)对佐剂型关节炎大鼠的治疗作用。方法 6周龄Wistar大鼠50只,SPF级,随机分为5组,每组10只:正常组、模型组、雷公藤甲素组、TSTP低剂量组和TSTP高剂量组。正常组在左后肢足垫部皮下注射0.1 mL生理盐水,其余组在左后肢足垫部皮下注射0.1 mL弗氏完全佐剂(Freund’s complete adjuvant,FCA)诱导建立大鼠佐剂型关节炎模型。大鼠致炎后第8天开始灌胃治疗,正常组和模型组均给予0.5%羧甲基纤维素钠(10 mg·kg-1)、雷公藤甲素组给予雷公藤甲素(20 mg·kg-1)、TSTP低剂量组给予TSTP(35 mg·kg-1)、TSTP高剂量组给予TSTP(70 mg·kg-1),1次·d1,连续灌胃21 d。大鼠于致炎前(d0)、致炎后第4,8,12,16,20,24,28天(d4,d8,d12,d16,d20,d24,d28)分别在足容积测量仪上测定右侧(非致炎侧)足容积,d4,d8,d12,d16,d20,d24,d28与d0足容积的差值即为该时大鼠足趾肿胀度。最后一次灌胃结束2 h后,处理大鼠,同时摘取胸腺和脾脏组织并称重,计算胸腺指数和脾脏指数。并于踝关节上方0.5 cm剪取踝关节,采用苏木精-伊红染色法制作病理组织切片,观察形态学的相关改变。结果与模型组比较,TSTP降低了脏器指数、足跖肿胀度的水平,差异有统计学意义(P<0.05)。与雷公藤组相比,TSTP高剂量组脏器指数、足跖肿胀度无明显差别;与TSTP高剂量组相比,TSTP低剂量组脏器指数、足跖肿胀度较高(P<0.05)。结论 TSTP高,低剂量各组均能够减轻佐剂关节炎大鼠的足趾肿胀度、降低脾脏指数和胸腺指数,改善踝关节病理组织形态。TSTP对佐剂型关节炎大鼠具有一定的治疗作用。