LC-MS法测定人血浆中单硝酸异山梨酯

目的:建立高效液相色谱-质谱法测定人血浆中单硝酸异山梨酯浓度的方法.方法:以茶碱为内标,血浆样品经乙酸乙酯提取后,用Zorbax XDB-C18分析柱(150 mm×2.1 mm,5 μm),流动相为A:0.01%冰乙酸,流速为0.15 ml·min-1;B:甲醇,流速为0.05 ml·min-1.采用四极杆质谱检测器大气压电喷雾离子源,负离子检测,检测离子:单硝酸异山梨酯为m/z 250,内标为m/z 179.结果:血浆中单硝酸异山梨酯浓度在0.0125～1.2 mg·L-1范围内线性关系良好(r=0.999 6),最低检测浓度为0.0125 mg·L-1,平均提取回收率为86.0%,日内RSD＜8.9%,日间RSD＜4.8%.结论:该法简便、快速,灵敏度高,可用于单硝酸异山梨酯制剂的药动学研究.     

UPLC-MS/MS法测定比格犬血浆中阿司匹林、水杨酸和单硝酸异山梨酯的浓度

目的:建立灵敏的超高效液相色谱-质谱联用法测定比格犬血浆中的阿司匹林、水杨酸和单硝酸异山梨酯的浓度。方法:选用Waters BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,分别以0.5%甲酸/5 mmol.L-1醋酸铵-乙腈和2 mmol.L-1醋酸铵-乙腈为流动相,采用梯度洗脱进行分离,样品采用乙酸乙酯提取后进样,通过电喷雾电离源,以多重反应监测(MRM)方式进行负离子检测,用于定量分析的离子对分别为m/z 178.9→136.9(阿司匹林)、m/z 136.9→64.9(水杨酸)和m/z 293.7→250.0(内标,双氯酚酸钠)测定阿司匹林和水杨酸;m/z 249.6→58.9(单硝酸异山梨酯)和m/z 293.7→250.0(内标,双氯酚酸钠)测定单硝酸异山梨酯。结果:阿司匹林、水杨酸和单硝酸异山梨酯的线性范围分别为2.0～2000.0,20.0～16000.0,9.6～9557.0 ng.mL-1;定量下限分别可达2.0,20.0,9.6 ng.mL-1;日内、日间精密度(RSD)均小于15%。结论:本方法灵敏度较高,血浆用量少,适用于比格犬血浆样品中阿司匹林、水杨酸和单硝酸异山梨酯的测定和药物动力学研究。     

LC-MS／MS法测定人血浆中单硝酸异山梨酯的浓度

目的:建立高效液相色谱-质谱联用法测定人血浆中单硝酸异山梨酯浓度。方法:选用 Zorbax Eclipse XDB—C_(18)色谱柱,以甲醇-10 mmol·L~(-1)醋酸铵为流动相,采用梯度洗脱进行分离,样品用甲醇进行蛋白沉淀后进样,选用3200QTRAP 型质谱仪的多重反应监测(MRM)扫描方式进行检测。结果:单硝酸异山梨酯的线性范围为5.0～1000.0ng·mL~(-1),定量下限和最低检测限分别为5.0和0.5 ng·mL~(-1)。准确度与精密度结果显示方法日间、日内变异均小于15%,相对偏差-4.5%～4.6%,方法提取回收率大于85%,稳定性较好。结论:本研究所建立的方法快速、灵敏、专属性强、重现性高,可用于单硝酸异山梨酯人体药物动力学试验。     

复方单硝酸异山梨酯缓释片人体血药浓度测定的方法学研究

目的建立复方单硝酸异山梨酯缓释片的人体血药浓度测定方法。方法应用GC和HPLC分别测定血浆中5-单硝酸异山梨酯和水杨酸的浓度。结果本实验建立的血药浓度测定方法,血浆中内源性物质不干扰测定,线性范围5-单硝酸异山梨酯为2．72-696．50ng·mL^-1,水杨酸为0．2～20μg·mL^-1,日内和日间精密度均小于15％。结论建立的测定方法适用于复方单硝酸异山梨酯缓释片在人体的血药浓度测定及药代动力学研究。     

高效液相色谱法同时测定人血浆中单硝酸异山梨酯、阿司匹林和水杨酸

目的:建立同时测定人血浆中单硝酸异山梨酯、阿司匹林及其代谢物水杨酸浓度的高效液相色谱法。方法:以茶碱为内标,血浆经酸化后,乙酸乙酯提取,高效液相色谱质谱检测器(MSD)和二极管阵列检测器(DAD)串联在线测定血浆中单硝酸异山梨酯、阿司匹林和水杨酸的浓度;分析柱:Zorbax DB-C18(5μm,2.1 mmx150mm),保护柱:Zorbax DB-C8(5μm,2.1mm×12.5 mm),柱温30℃;流动相为A:3 mmol·L-1乙酸铵溶液(含冰乙酸0.022％),流速为0.17 mL·min-1,B:甲醇-乙腈(85:15),流速为0.03 mL·min-1。单硝酸异山梨酯和阿司匹林用高效液相-电喷雾质谱(HPLC/ESI-MS)选择离子检测,水杨酸用DAD检测。结果:血浆中单硝酸异山梨酯、阿司匹林和水杨酸线性范围分别为0.00625-1.2 μg·mL-1,0.025-1.2μg·mL-1,0.0625-12μg·mL-1;相对回收率分别为101.3％-103.0％,99.8％-119.7％,98.4％-104.0％;提取回收率均高于80％;日内、日间精密度均小于8％。结论:方法简便、快速、重现性好,可用于临床血药浓度监测和复方制剂的药代动力学和生物利用度研究。     

HPLC法测定硝酸异山梨酯缓释片的有关物质

目的对硝酸异山梨酯缓释片有关物质进行测定。方法采用高效液相色谱,用Agilenteclipse XDB-C18柱(4.6×250mm,5μm),流动相为水-甲醇(70∶30);流速为1mL·min-1;检测波长为210nm;柱温为30℃。结果 2-单硝酸异山梨酯线性范围为0.4～20μg.mL-1(r=1.0000),平均回收率为100.3%,RSD为2.2%;单硝酸异山梨酯线性范围为0.4～20μg.mL-1(r=1.0000),平均回收率为101.6%,RSD为2.1%。结论本方法简便、准确,能够有效测定硝酸异山梨酯缓释片的有关物质。     

气相色谱-电子捕获法测定人血浆中单硝酸异山梨酯及制剂相对生物利用度研究

目的:建立测定人血浆中单硝酸异山梨酯的气相色谱-电子捕获法,研究两种单硝酸异山梨酯片的生物等效性.方法:以硝酸甘油为内标,血浆样品经乙酸乙酯提取后经Dikma-17石英毛细管柱分离后以气相色谱-电子捕获法测定.18名健康志愿者采用随机交叉方式分别单剂量口服单硝酸异山梨酯试验制剂和参比制荆40 mg后研究二者的相对生物利用度.结果:血浆中单硝酸异山梨酯与内源性杂质分离完全,在2.9～731.5μg/L浓度范围内峰面积比与浓度线性关系良好,回归方程为:Y=0.006174X+0.2403(r2=0.998),最低定量限为2.9μg/L;单硝酸异山梨酯绝对回收率为85.5%～112.9%(n=20),内标绝对回收率为85.5%～92.1%(n=20),方法回收率为90.1%～107.8%(n=15),日内精密度(RSD)小于11.4%(n=15),日阐精密度(RSD)小于11.7%(n=15).单次服用40 mg单硝酸异山梨酯片试验制剂(T)或参比制剂(R)后的AUC0→24分别为(3 642.5±731.4)和(3 658.8±832.8)μg·h·L-1;Cmax分别为(477.5±65.0)和(474.2±77.6)μg/L;Tmax分别为(1.3±0.4)和(1.1±0.3)h.与R相比,T的相对生物利用度为(100.8 ±12.1)%.结论:该法简单,准确度高,灵敏度好.方差分析表明两制剂的主要药动学参数之间差异无统计学意义,二者为生物等效制剂.     

HPLC法测定复方单硝酸异山梨酯缓释胶囊的含量

采用高效液相色谱外标法测定复方单硝酸异山梨酯缓释胶囊中单硝酸异山梨酯、阿司匹林的含量.色谱柱Kromasil C1s柱(200mm×4.6 mm,5 μm),流动相甲醇-醋酸钠缓冲液(pH 3.5)(3070),紫外检测器,检测波长254 nm.单硝酸异山梨酯进样量在0.15～15μg,阿司匹林在0.12～12μg范围内与峰面积呈良好线形关系,相关系数分别为0.9999,0.9999;回收率分别为99.26%,99.73%.本法精密度好,结果准确可靠.     

阿司匹林单硝酸异山梨酯复方缓释片含量测定方法的研究

目的建立阿司匹林单硝酸异山梨酯复方缓释片中阿司匹林和单硝酸异山梨酯含量及有关物质检测的高效液相色谱法。方法采用Thermo ODS-2 Hypersil(4.6 mm×200 mm,5μm)色谱柱,以0.02 mol.L-1的磷酸二氢钾溶液-甲醇-磷酸(70∶30∶0.1)为流动相,流速1.0 mL.min-1,柱温为40℃,检测波长为225 nm。结果阿司匹林和单硝酸异山梨酯分别为浓度在15.06～120.48μg.mL-1和12.09～96.72μg.mL-1范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.55%和99.12%,RSD分别为0.58%和0.54%。结论建立的高效液相色谱法可以同时测定复方缓释片中阿司匹林和单硝酸异山梨酯的含量和有关物质,该方法准确度和精密度高,适合应用于该制剂的质量控制。     

高效液相色谱-质谱联用测定人血浆中单硝酸异山梨酯

目的:建立高效液相色谱-质谱联用法测定人血浆中单硝酸异山梨酯浓度.方法:应用Zorbax DB-C18柱(5 μm,2.1 mm×150 mm),流动相A为3 mmol·L-1醋酸铵溶液(含冰醋酸0.022%),流速0.17 mL·min-1,流动相B为甲醇-乙腈(85∶15),流速0.03 mL·min-1.采用四极杆质谱检测器大气压电喷雾离子源(ESI),负离子检测.结果:线性范围为6.25～1 200 μg·L-1,相对回收率接近100%,日内、日间RSD均小于6%.结论:方法灵敏、快速、重现性好,可用于临床血药浓度监测和药动学研究.     

尼索地平对单硝酸异山梨酯在大鼠体内药动学的影响

目的：考察尼索地平对单硝酸异山梨酯在大鼠体内药动学的影响。方法：将大鼠随机均分为单用（单硝酸异山梨酯5.4mg·kg-1）组和联用（单硝酸异山梨酯5.4mg·kg-1＋尼索地平5.4mg·kg-1）组,每组6只,灌胃给药。于给药前和给药后8.0h内眼球后静脉丛取血,用高效液相色谱法测定血浆中单硝酸异山梨酯的浓度,以DAS软件处理,并用非房室模型统计矩方法计算和比较药动学参数。结果：单用组与联用组单硝酸异山梨酯的药动学参数为：t1/2分别为（2.309±0.916）、（1.324±0.500）h,cmax分别为（2.292±0.700）、（2.735±0.439）mg·L-1,AUC0～8h分别为（3.339±0.663）、（4.152±0.719）mg·h·L-1,Vd分别为（0.881±0.378）、（0.462±0.202）L,均符合二室模型;其中与单用组比较,联用组t1/2、Vd明显减小（P〈0.05）,其他参数无明显变化。结论：尼索地平可加快单硝酸异山梨酯在大鼠体内的消除。     

LC-MS/MS方法同时检测人血浆中异烟肼、乙胺丁醇和吡嗪酰胺的浓度

目的:建立同时检测人血浆中3种抗结核药物异烟肼、乙胺丁醇和吡嗪酰胺浓度的LC-MS/MS方法,用于肺结核患者及临床试验中三药血药浓度的测定。方法:以对乙酰氨基酚为内标,血浆样品经乙腈沉淀蛋白等处理后检测。采用AgilentZORBAX SB-Aq色谱柱(2.1 mm×100 mm,3.5μm)为分析柱,ZORBAX SB-Aq柱(2.1 mm×12.5 mm,5μm)为保护柱,以乙腈-5 mmol·L-1甲酸铵水溶液(含0.1%甲酸)(8:92,v/v)为流动相,使用电喷雾离子源(ESI),以正离子多反应监测(MRM)方式进行检测,异烟肼m/z 138.2→121.0,乙胺丁醇m/z 205.2→116.1,吡嗪酰胺m/z 124.1→81.1,对乙酰氨基酚m/z152.0→110.0。分析时间为5 min。结果:血浆中内源性物质对测定无干扰,异烟肼线性范围为0.1～6.0μg.mL-1,定量下限(LLOQ)为0.1μg.mL-1,乙胺丁醇线性范围为0.1～5.0μg.mL-1,定量下限(LLOQ)为0.1μg.mL-1,吡嗪酰胺线性范围为1.0～50.0μg.mL-1,定量下限(LLOQ)为1.0μg.mL-1。日内、日间精密度(RSD)均小于10%,准确率为90.4%～108.7%。结论:本方法特异性强,灵敏度高,测定结果可靠,适用于临床血浆样品的高通量分析。     

Concentrations of isosorbide dinitrate,isosorbide-2-mononitrate and isosorbide-5-mononitrate in human vascular and muscle tissue under steady-state conditions

Summary The concentrations of isosorbide dinitrate (ISDN), isosorbide-5-mononitrate (IS-5-MN) and isosorbide-2-mononitrate (IS-2-MN) were determined in plasma (PL), saphenous vein wall (SV) and pectoral muscle (PM) from 8 patients undergoing coronary bypass surgery.The patients were pretreated for 2 days with ISDN 240 mg per day (standard release formulation) in 4 doses of 40 mg and one dose of 80 mg. The plasma and tissue samples were obtained during the operation, 10–12 h after the last dose.Isosorbide-2-mononitrate and isosorbide-5-mononitrate were present in plasma and tissues in the same concentration ranges with molar concentration ratios of 0.88 (IS-2-MN: PM/PL), 0.85 (IS-5-MN: PM/PL), 0.99 (IS-2-MN: SV/PL) and 1.06 (IS-5-MN: SV/PL). Mean ISDN concentrations in tissue were considerably higher than in plasma; the molar concentration ratios were 4.9 (SM/PL) and 7.21 (SV/PL).The accumulation of ISDN in vessel walls may contribute to its greater vascular action compared to the mononitrates, but it may also facilitate the development of tolerance during long-term treatment.     

高效液相色谱法测定人血浆中茴拉西坦活性代谢产物ABA及其在生物等效性研究中的应用

目的建立人血浆中茴拉西坦代谢产物N-对甲氧基苯甲酰胺基丁酸（ABA）的高效液相色谱法,并研究其在健康人体的生物等效性。方法以氢氯噻嗪为内标,血浆样品用液液-萃取处理。分析柱为SymmetryShield RP18C18（3.9 mm×150 mm,5μm）,柱温：30℃。流动相：20 mmol.L-1甲酸胺-甲醇（83∶17,v/v）,流速：1.0 mL.min-1,进样量：20μL,紫外检测波长250 nm。结果茴拉西坦活性代谢产物ABA的线性范围为53.313 640μg.L-1,最低定量下限为53.3μg.L-1;日内、日间RSD不超过11%;平均回收率为96.9%103.3%。结论该方法专属性强,快速、灵敏,适合血样中茴拉西坦代谢产物ABA的浓度检测。     

LC—MS／MS法测定大鼠血浆中利巴韦林及其毒代动力学参数

目的：建立LC—MS／MS法,测定大鼠血浆中利巴韦林及其毒代动力学参数。方法：Lc条件：WatersAtlan—tis T3色谱柱（4．6mm×150mm,3μm）,柱温为40℃,流动相为0．1％甲酸水溶液-0．1％甲酸乙腈溶液（95：5）,流速为1000μL·min-1,进样量为2μL;Ms条件：电喷雾离子源,正离子电离模式,多反应离子监测的MS扫描方式。以10、40、160mg·kg-1·d-1剂量每日1次、连续28d给大鼠灌胃使用利巴韦林药液,测定其血药浓度和毒代动力学参数。结果：利巴韦林血药浓度线性范围为5～5000μg·L-1,最低定量限为5μg·L-1;日内和日间精密度良好,RSD均小于15％,准确度均在±15％以内。所测利巴韦林毒代动力学参数基本上与给药剂量成正相关,未见有明显药物蓄积现象,与毒性表现基本一致。结论：该法专属性强、灵敏度高、操作简便,适用于生物样本中利巴韦林的测定及毒代动力学研究。     

5-单硝酸异山梨酯血药浓度测定及其在人的药代动力学

采用气相色谱-电子捕获检测法测定 5-单硝酸异山梨酯的血药浓度。样品经乙醚—正己烷混合溶剂提取,三氟醋酐进行衍生化后,用5% SE-30硅烷化玻璃填充柱分离,以硝酸异山梨酯为内标,⁶³Ni电子捕获检测器检测。此法操作简便,日内、日间误差分别小于4%和6.5%,平均回收率为99.62%±1.19%。在20～800ng·mL^-1血浆浓度范围内呈线性关系(γ=0.9995)。最低检测浓度为2.0ng·mL^-1。应用此法研究了10名健康志愿者单次口服20mg 5-单硝酸异山梨酯片后的药代动力学。     

LC-MS/MS法测定人血浆及唾液中伏立康唑浓度

目的:采用LC-MS/MS法测定人血浆及唾液中伏立康唑的浓度。方法:血浆样品及唾液样品经氢氧化钠碱化,萃取剂萃取后进行分析。使用Agilent C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1。结果:线性范围为10～4 000 ng·mL-1,最低定量限为10 ng·mL-1,萃取回收率为81.3%～94.4%,基质效应为-5.35%～1.25%,日内和日间RSD均<7.9%。结论:所用方法快速、简便、灵敏度高,适用于人血浆伏立康唑浓度测定及药代动力学和生物利用度的研究。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中多奈哌齐及其代谢物6-O-去甲基多奈哌齐浓度

目的:建立HPLC-MS/MS法测定血浆中多奈哌齐及其代谢物6-O-去甲基多奈哌齐浓度。方法:采用HPLC-MS/MS法,加入内标后,样品用二氯甲烷为萃取剂提取后进样,以Shisheido C18(100 mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,甲醇-5 mmol·L-1醋酸铵-甲酸(80∶20∶0.05)为流动相,流速为0.2 mL·min-1,柱温为室温。离子化方式为电喷雾离子化,多反应离子监测。结果:多奈哌齐及6-O-去甲基多奈哌齐标准曲线线性范围分别为0.05～15 ng·mL-1和0.008～2.4 ng·mL-1,定量下限分别为0.05和0.008 ng·mL-1,二者日内RSD及日间RSD均<9%,方法回收率在96%～103%之间。稳定性考察试验,二者血药浓度变化率均在±15%内。结论:该方法简单,快速,可满足多奈哌齐及6-O-去甲基多奈哌齐血药浓度的测定及多奈哌齐药代动力学研究。     

Lack of effect of asymmetrical dosage timing of isosorbide-5-mononitrate on nitrate tolerance during long-term administration

Summary Isosorbide 5-mononitrate is an active metabolite of isosorbide dinitrate and possesses many theoretical advantages over its parent drug. However, the development of partial tolerance has been demonstrated when the drug is given 12 hourly or 8 hourly. We have therefore evaluated the acute and sustained (2 weeks) effects of isosorbide-5-mononitrate 40 mg given twice daily (08.00 h and 14.00 h, allowing an 18-h dose-free period) in 19 patients with stable chronic angina, using computerized exercise testing and a placebo-controlled, double-blind, randomized trial protocol. There were two phases of 2 weeks each in which patients received placebo or active isosorbide-5-mononitrate. Acute testing was performed 2 h after the first dose and chronic testing 2 h after the morning dose on Day 14. Acute testing showed an increase in exercise time from a mean (SD) of 6.7 (2.2) min to 10.1 (2.95) min (P<0.01) after a single dose of isosorbide-5-mononitrate 40 mg. The time to 1 mm of ST depression, and rest and peak exercise heart rates increased significantly during acute testing with isosorbide-5-mononitrate; resting and peak exercise systolic blood pressures fell significantly. Due to drop outs cross-over analysis was performed on 11 patients who completed both chronic phases and 13 patients were assessed for the comparison of acute isosorbide-5-mononitrate with chronic isosorbide-5-mononitrate. After 2 weeks of therapy exercise time did not show a sustained increase 8.01 (2.14) min chronic placebo to 8.58 (1.93) min chronic isosorbide-5-mononitrate. The improvement in ST segment variables seen acutely was not sustained. These data suggest that the attenuation of the effect of isosorbide-5-mononitrate due to partial tolerance is not mitigated by using an asymmetrical dose regimen.