通过益生芽孢杆菌TH4-2的I型α-葡萄糖苷酶合成一种新型三糖

本文评估了用地衣芽孢杆菌TH4-2的α-葡萄糖苷酶的葡萄糖转移反应合成寡糖.报道了葡萄糖苷酶催化底物的非还原末端葡萄糖的释放,这些底物包括低麦芽糖,芳基和烷基葡萄糖.除了该水解酶的活性,还显示转移酶活性(转糖苷反应).酶分为三种类型(I,II和III),I型葡萄糖苷酶水解异质底物,如芳基糖苷,蔗糖比麦芽糖更有效.     

没食子酸对α-葡萄糖苷酶的抑制作用及其降糖机制研究

目的 研究没食子酸对α-葡萄糖苷酶的抑制作用及其抑制类型,探索酚酸类化合物在治疗糖尿病方面的价值及Caco-2细胞模型在筛选降糖药方面的作用.方法 以麦芽糖为底物,采用酶-抑制剂模型和Caco-2细胞模型研究没食子酸对α-葡萄糖苷酶活力的影响,采用Caco-2细胞模型研究没食子酸对葡萄糖吸收的影响.结果 没食子酸对两种模型的α-葡萄糖苷酶均有抑制作用,半数抑制量(IC_(50))为577.5 μg/mL和182.6 μg/mL;250 μg/mL的没食子酸对α-葡萄糖苷酶抑制作用低于同浓度的阿卡波糖(P<0.05).没食子酸是α-葡萄糖苷酶的竞争型抑制剂.没食子酸对葡萄糖吸收有抑制作用.结论 没食子酸对α-葡萄糖苷酶和葡萄糖吸收有一定抑制作用.Caco-2细胞模型在筛选降糖药方面具有重要意义.     

β-葡萄糖苷酶酶解淫羊藿苷制备宝藿苷Ⅰ的工艺研究

目的:研究用β-葡萄糖苷酶酶解淫羊藿苷制备宝藿苷Ⅰ的工艺。方法:采用β-葡萄糖苷酶酶解淫羊藿苷制备宝藿苷Ⅰ,以转化率为指标,通过单因素试验考察温度、pH值、酶与底物质量比、底物浓度和反应时间对转化率的影响。结果:酶解反应的优化条件为温度50℃、pH=5.0的枸橼酸-枸橼酸三钠缓冲液、酶与底物质量比1:2、底物浓度1mg·mL-1、反应时间90min。结论:β-葡萄糖苷酶酶解淫羊藿苷制备宝藿苷Ⅰ,转化率高,工艺简单、可靠,反应条件温和。     

固定化β-葡萄糖苷酶制备人参皂苷F_1的研究

本文探讨了β-葡萄糖苷酶的固定化方法,及利用固定化β-葡萄糖苷酶转化人参皂苷Rg1为人参皂苷F1的转化工艺。确定交联-包埋法为最佳固定化方法,应用正交实验得出最佳制备条件为:交联时间3h,戊二醛浓度0.1%,海藻酸钠浓度1%,CaCl2浓度2%。固定化酶与游离酶在热稳定性和pH值稳定性方面显示出不同的性质,其中固定化β-葡萄糖苷酶的最适反应温度为70℃,最适反应pH值为5.5。固定化β-葡萄糖苷酶在15℃环境中保存30d后,酶活回收率为68.82%。固定化β-葡萄糖苷酶转化人参皂苷Rg1为人参皂苷F1的转化条件为:固定化酶承载量为3.76U/g固定化酶载体,底物浓度为0.2mg/mL,转化温度为40℃,转化周期为2d,转化次数为4次,平均转化率为80.49%。     

苦杏仁中β-葡萄糖苷酶活性测定条件的研究

目的建立苦杏仁中β-葡萄糖苷酶活性测定的最优条件,为进一步阐明苦杏仁炮制原理及储藏养护条件研究提供依据。方法采用比色法,以对硝基苯-β-D-葡萄糖苷为底物,考察苦杏仁中β-葡萄糖苷酶活性测定的最佳条件。结果苦杏仁中β-葡萄糖苷酶活性测定的最佳条件为p H=5.0柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液,反应温度50℃,底物浓度50 mmol·L~(-1),反应时间30 min,于400 nm波长条件下检测β-葡萄糖苷酶活性。结论确定了测定苦杏仁中β-葡萄糖苷酶活性的最佳条件,为进一步研究苦杏仁"杀酶保苷"炮制原理、储藏养护条件及储藏期奠定基础。     

盐知母化学成分α-葡萄糖苷酶抑制作用研究

目的对盐知母化学成分α-葡萄糖苷酶抑制作用进行比较研究,以探讨盐知母降血糖作用的增效原理,为后期研发提供科学依据。方法采用高效液相色谱法,以PNPG(对硝基苯基α-D-吡喃葡萄糖苷)为底物比较盐知母化学成分对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。结果从盐知母氯仿层中分离得到的顺-扁柏树脂酚,对α-葡萄糖苷酶具有良好的抑制作用,且优于阿卡波糖的作用。同时芒果苷、知母皂苷AⅢ等盐知母的增量成分对α-葡萄糖苷酶抑制作用也相对较强。结论盐知母活性部位氯仿层分离物,顺-扁柏树脂酚对α-葡萄糖苷酶具有较高的抑制活性,提示盐知母活性部位分离物顺-扁柏树脂酚在抗糖尿病产品开发方面具有很好的应用前景。     

α-葡萄糖苷酶抑制剂微量筛选模型的正交法构建和筛选

目的为新药发现阶段α-葡萄糖苷酶抑制剂的筛选提供实用的微量筛选方法。方法以α-葡萄糖苷酶为酶源,96孔板为载体,在生理pH值和温度的条件下,用正交试验法研究酶浓度、底物浓度、反应时间对酶活力的影响,确定酶反应最佳条件。在确定筛选模型运行条件后,对阳性药物和492种贵州民族药植物提取物进行筛选研究。结果采用正交试验法成功构建了实用灵敏的α-葡萄糖苷酶抑制剂微量筛选模型。492种植物提取物筛选结果表明,有145种提取物的抑制率达到了50%以上。结论本研究构建的α-葡萄糖苷酶抑制剂微量筛选模型具备了简便、快速、灵敏、高效、经济的优点,适用于大规模筛选α-葡萄糖苷酶抑制剂。     

芝麻叶多酚对α-葡萄糖苷酶的抑制作用研究

目的探讨芝麻叶多酚在体外对糖代谢相关的α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用及机理。方法以4-硝基酚-α-D一吡喃葡萄糖苷（PNPG）为底物,利用酶一抑制剂模型及酶抑制动力学分析,考察芝麻叶多酚对α-葡萄糖苷酶的抑制活性及抑制类型。色谱柱为HypersilODSCl8（250mm×4．6mm,5m）,流动相为2％（v／v）乙酸溶液（A）和2％（v／v）乙酸甲醇溶液（B）,梯度洗脱,流速1．0mlMmin,检测波长280nm,进样量20L,高效液相色谱法分析SLP的化学成分。结果SLP能显著抑制α-葡萄糖苷酶活性,半数抑制量（IC50）为1．00mg／mL,抑制类型为可逆性非竞争抑制,抑制常数Ki为14．93mg／L。色谱分析结果：SLP中主要含没食子酸,绿原酸,芹菜素,咖啡酸,对一香豆酸,柚皮苷,木犀草素和山奈酚等8种酚类化合物。结论芝麻叶多酚对仅一葡萄糖苷酶活有明显抑制作用,可作为潜在的预防糖尿病的膳食功能因子。     

葛根-黄连药对提取物对α-葡萄糖苷酶活性及大鼠餐后高血糖的抑制作用

目的研究葛根-黄连药对提取物对α-葡萄糖苷酶活性及大鼠餐后高血糖的抑制作用。方法提取大鼠小肠α-葡萄糖苷酶,以蔗糖为底物,用葡萄糖氧化酶法研究葛根-黄连药对、葛根和黄连单味药材提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性。以蔗糖诱导的餐后高血糖大鼠为模型,测定灌胃给予葛根-黄连药对提取物后的血糖值,研究葛根-黄连药对对大鼠餐后高血糖的抑制作用。结果葛根-黄连药对、葛根和黄连提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用呈剂量依赖性,IC50分别为2.439、3.700和5.730 g·L~(-1),葛根-黄连药对提取物对该酶的抑制作用最强;高剂量组的葛根-黄连药对提取物(400 mg·kg~(-1))可显著降低大鼠进食蔗糖后的血糖值。结论葛根-黄连药对提取物对α葡萄糖苷酶的抑制作用显著强于单味药材提取物,并可显著缓解大鼠餐后血糖升高。     

α-葡萄糖苷酶抑制剂类药物的研究与开发

目的介绍α-葡萄糖苷酶抑制剂类药物的研究开发状况。方法根据国内外的文献资料，简述了α-葡萄糖苷酶抑制剂类药物的应用、研究与开发以及从井冈霉素出发制备α葡萄糖苷酶抑制剂。结论α-葡萄糖苷酶抑制剂类药物通过调节体内α-葡萄糖苷酶的活性，可以治疗很多疾病，具有广阔的应用前景。     

α-葡萄糖苷酶抑制剂类药物的研究与开发

目的介绍α-葡萄糖苷酶抑制剂类药物的研究开发状况.方法根据国内外的文献资料,简述了α-葡萄糖苷酶抑制剂类药物的应用、研究与开发以及从井冈霉素出发制备α葡萄糖苷酶抑制剂.结论α-葡萄糖苷酶抑制剂类药物通过调节体内α-葡萄糖苷酶的活性,可以治疗很多疾病,具有广阔的应用前景.     

肉桂提取物对α-葡萄糖苷酶活性及糖尿病模型大鼠餐后高血糖的抑制作用

目的：研究肉桂提取物对α-葡萄糖苷酶活性及糖尿病模型大鼠餐后高血糖的抑制作用。方法：采用大鼠肠α-葡萄糖苷酶体外活性抑制实验观察肉桂提取物的抑制作用,并采用酶动力学分析模块法对肉桂提取物抑制α-葡萄糖苷酶动力学进行研究。采用腹腔注射链脲佐菌素以复制大鼠糖尿病模型,观察肉桂提取物对麦芽糖和蔗糖负荷餐后高血糖的抑制效果。结果：体外实验表明,肉桂提取物对大鼠肠α-葡萄糖苷酶的抑制作用呈剂量依赖性,其半数抑制浓度值为529μg／ml,酶动力学数据符合竞争性抑制的特征。在体实验表明,300、600mg／kg的肉桂提取物能明显缓解糖尿病模型大鼠麦芽糖和蔗糖负荷餐后血糖的升高,但不能缓解葡萄糖负荷餐后血糖的升高。结论：肉桂提取物可缓解餐后血糖升高,其机制可能与抑制α-葡萄糖苷酶的活性有关。     

夏枯草提取物对Caco-2细胞α-葡萄糖苷酶、SGLT-1、GLUT-2、Na~+-K~+-ATP酶mRNA表达的影响

目的探讨夏枯草提取物对碳水化合物水解和葡萄糖吸收影响的作用机制。方法以Caco-2细胞为研究对象,分设对照组、阳性药阿卡波糖组(25μg/mL)、夏枯草水提物组(0.75μg/mL)、浸膏(0.25μg/mL)组、多糖(0.5μg/mL)组。采用RT-PCR法测定Caco-2细胞的α-葡萄糖苷酶、SGLT-1、GLUT-2、Na+-K+-ATP酶mRNA表达。结果夏枯草提取物对Caco-2细胞α-葡萄糖苷酶、SGLT-1、GLUT-2、Na+-K+-ATP酶mRNA表达,与对照组比较均有显著性差异,阿卡波糖也有类似的抑制作用。结论夏枯草提取物通过抑制Caco-2细胞α-葡萄糖苷酶、SGLT-1、GLUT-2、Na+-K+-ATP酶mRNA表达作用,来延缓对碳水化合物水解和影响葡萄糖吸收,可能与降低餐后血糖水平有关。     

自拟芪麦汤对糖尿病小鼠糖耐量及α-糖苷酶的影响

目的观察自拟芪麦汤对糖尿病模型小鼠葡萄糖耐量的影响,体外对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。方法四氧嘧啶高血糖模型小鼠随机分为芪麦汤低、中、高剂量组,芪麦汤低、中、高剂量联合二甲双胍组,二甲双胍组,模型对照组及正常对照组。给药30 d,结束后取血测空腹血糖,接着各组动物灌胃葡萄糖2.0 g.kg?1,测给糖后0.5,2 h血糖值,计算糖耐受量。选用芪麦汤水煎液及水煎醇提液为材料,采用体外比色法分别测定不同浓度芪麦汤药液对α-葡萄糖苷酶的抑制率。结果中、高剂量芪麦汤对糖尿病模型小鼠葡萄糖耐受量均有明显的降低作用,中、高剂量芪麦汤与二甲双胍合用均可明显降低模型小鼠葡萄糖耐受量,与单用二甲双胍比较有显著性差异。芪麦汤水煎液及水煎醇提液对α-葡萄糖苷酶均有较好的抑制作用,并有良好的量效关系,而相同剂量的水煎醇提液比水煎液的抑制率效果更好。结论自拟芪麦汤具有提高模型小鼠葡萄糖耐受量的作用。自拟芪麦汤对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,提示了该方降糖作用的可能机制之一。     

酶解淫羊藿总黄酮制备宝藿苷Ⅰ

目的:研究酶解淫羊藿总黄酮制备宝藿苷Ⅰ的工艺。方法:采用β-葡萄糖苷酶酶解淫羊藿总黄酮制备宝藿苷Ⅰ,以宝藿苷Ⅰ得率为指标,通过单因素考察pH值、温度、反应时间及酶与底物质量比对宝藿苷Ⅰ得率的影响。结果:酶解反应的最适条件为温度50℃、pH5.0～5.5、反应时间7 h、酶与底物质量比为1∶20;以淫羊藿总黄酮计,宝藿苷Ⅰ收率为9.25%。结论:β-葡萄糖苷酶酶解淫羊藿总黄酮制备宝藿苷Ⅰ,得率高、工艺简便可靠、反应条件温和,适合工业化生产。     

刺梨叶醇提物体外抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性研究

目的 测定刺梨叶醇提物的抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性。方法 采用DPPH和ABTS氧化自由基清除试验对刺梨叶乙醇提取物的抗氧化活性进行研究,并对刺梨叶乙醇提取物的α-葡萄糖苷酶抑制活性进行了测定。结果 刺梨叶乙醇提取物具有较强的DPPH和ABTS氧化自由基清除能力及α-葡萄糖苷酶抑制活性。结论 刺梨叶具有较好的抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性。     

染料木素与β-葡萄糖苷酶相互作用的研究

本文研究了染料木素与β-葡萄糖苷酶的相互作用。采用荧光光谱法研究了染料木素与β-葡萄糖苷酶的结合反应,二者的相互作用使β-葡萄糖苷酶发生内源荧光猝灭,属于静态猝灭机制。通过计算得到染料木素与β-葡萄糖苷酶在17、27和37℃下的结合常数分别为3.69×104、3.06×104和2.36×104 L·mol-1。同步荧光研究了染料木素对β-葡萄糖苷酶结构的影响,染料木素可使β-葡萄糖苷酶的构象发生变化、色氨酸残基所处微环境的疏水性降低。染料木素对酶活性的抑制试验结果表明其对酶的活性具有明显的抑制作用,双分子结合速率常数为1.2×103(mol·L-1)-1.min-1。结合AutoDock 4.2分子对接软件模拟研究了二者的键合模式和键合机制,表明氢键和疏水作用对染料木素与β-葡萄糖苷酶的结合起重要作用,同时还存在静电作用。     

中药提取物抑制α-葡萄糖苷酶的活性研究

目的：从中药中筛选α-葡萄糖苷酶抑制剂。方法：采用α-葡萄糖苷酶测定方法,对4种经水煮醇沉提取的常用中药进行α-葡萄糖苷酶抑制活性筛选。结果：在反应体系下,4种中药提取物均显著抑制α-葡萄糖苷酶活性,鸡血藤、五倍子、青果提取物的抑制α-葡萄糖苷酶活性明显强于拜唐苹。结论：4种中药提取物能显著抑制α-葡萄糖苷酶活性,如果对其进一步分离、纯化并提取活性部位,可望获得抑制活性更强的中药α-葡萄糖苷酶抑制剂。     

大黄多糖对α-糖苷酶活性的抑制作用

目的从大黄中提取多糖,并测定提取物粗粉中大黄多糖的含量,研究大黄多糖对酶-抑制剂模型和Caco-2细胞模型上α-葡萄糖苷酶的抑制作用,初步探索大黄多糖在治疗糖尿病方面的潜在价值。方法用水提醇沉法提取大黄多糖,用苯酚-硫酸比色法测定多糖含量。采用氧化酶比色法测定大黄多糖对α-葡萄糖苷酶（EC3.2.1.20）以及Caco-2细胞模型表达α-葡萄糖苷酶的抑制活性。结果大黄多糖粗粉中大黄多糖平均含量为（23.08&#177;0.89）%,RSD=3.87%（n=3）,方法平均回收率为97.59%,RSD=3.15%（n=6）。以麦芽糖为底物时,在酶-抑制剂模型上,浓度为125,250,500,1000μg&#183;mL-1的大黄多糖的抑制率分别为33.09%,24.43%,33.14%,31.73%,250μg&#183;mL-1的阳性药阿卡波糖的抑制率为80.45%。在Caco-2细胞模型上,浓度为125,250,500,1000μg&#183;mL-1的大黄多糖抑制率分别为23.43%,26.23%,28.24%,29.17%,250μg&#183;mL-1的阿卡波糖对Caco-2细胞的α-葡萄糖苷酶抑制率达到84.08%。结论运用水提醇沉法提取大黄多糖,用酚-硫酸比色法测定多糖含量方法简便可行,大黄多糖具有一定的抑制α-葡萄糖苷酶活性的作用,但作用不显著。     

枸杞多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

目的从21味药中筛选对α-葡萄糖苷酶具有活性的中药。方法选用对α-葡萄糖苷酶活性抑制程度较高的中药枸杞作为研究对象。采用烘干、回流脱脂、水提、乙醇沉淀和DEAE纤维素柱层析等方法进行枸杞多糖的提取,并对其活性以及在不同条件下对α-葡萄糖苷酶的影响进行研究。结果0.4 mg的枸杞多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制程度达52%,2.0 mg的抑制率高达88%。结论枸杞多糖对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制作用,抑制机理为非竞争性抑制。