成体小鼠肝干细胞的长期体外培养和体内分化研究

目的：从成体小鼠肝脏中分离培养肝干细胞，并分析其分化潜能。方法：利用门静脉灌流消化法从成体小鼠肝脏中分离细胞并进行体外长期培养，通过脾结节形成实验对其增殖和分化潜能作进一步分析。结果：从成体小鼠肝脏中分离的细胞呈集落样生长，不仅可稳定传代，而且移植至经致死剂量照射的小鼠体内能够形成脾结节，结节中含有肝细胞和胆管上皮细胞特异性标志的细胞。结论：成体小鼠肝脏中存在具有多潜能性的肝干细胞，该细胞的体外成功培养为肝干细胞生物学特性的研究及干细胞的应用奠定了基础。     

肝干细胞－卵圆细胞的研究进展

卵圆细胞是肝脏干细胞的代表细胞,主要存在于幼肝及成人受损的肝脏中,是一种双潜能的肝脏干细胞,多种因素调节其分化,在此过程中动态表达一系列表面标志物。卵圆细胞的分化异常与肝癌的发生关系密切。在体外大量扩增卵圆细胞并使之分化为成熟的 有功能的肝细胞,为终末期肝病、肝脏的组织工程研究及基因治疗开辟了新的途径。      

肝干细胞的研究进展

自Wilson和Leduc等在小鼠营养性肝损伤修复机制研究中提出肝内可能存在肝干细胞的假说以来,引起人们对肝干细胞研究的极大兴趣.近年,随着发育遗传学、细胞生物学等多学科发展和研究的深入,体内外实验均对肝干细胞的存在给予肯定结论.肝干细胞并非特指某一种类的细胞,而是与肝脏发育及再生有关的各类具有干细胞特性细胞类型的总称,为便于与胚胎干细胞区别,称之为成体肝干细胞.肝干细胞具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能,同时很少涉及伦理问题,成为颇具临床应用价值的细胞来源,并取得了系列的研究进展[1],本文对近年的相关进展作一综述.     

肝干细胞的研究进展

干细胞被认为是一类具有自我更新与增殖分化能力的细胞．能产生表现型与基因型和自身完全相同的子细胞，同时还能分化为祖细胞。多种成体组织来源的干细胞可在受者（包括小鼠．大鼠和人）肝脏内分化为肝细胞和胆管上皮细胞。1956年Farber的研究揭开了对于肝干细胞研究的新篇章，他首次提出在肝内存在小上皮细胞．在由化学因素引发的肝癌的早期，这种细胞大量增殖．修复受损的肝脏，并将这种具有很强增殖和分化能力的具有卵圆形胞核的细胞命名为卵圆细胞。本文从肝干细胞的分类、分离和增殖等方面对肝干细胞的研究现状作一综述。     

肝脏干细胞研究与应用存在的问题及对策

干细胞是目前生物医学的研究热点之一.近年研究发现肝脏中存在多种具有不同标志物的干细胞,在肝脏再生中具有重要作用;自体及异体干细胞移植治疗终末期肝病也取得了一定进展.但肝干细胞的来源及标志物尚未完全阐明,肝干细胞的增殖和分化调控机制仍有待深入研究.随着谱系追踪技术、干细胞分离和培养体系的发展与成熟,肝于细胞的来源及其在肝再生中的作用将会进一步明确,肝病干细胞治疗有望成为现实.     

肝干细胞与肝癌关系的研究进展

肝干细胞是肝内具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能的成体干细胞,与肝脏发育和再生修复密切相关。近年研究表明,肝干细胞有多种来源,与肝癌的发生密切相关,支持肝癌干细胞来源于正常肝干细胞转化的假说。肝干细胞的研究可能为肝癌靶向治疗提供新的靶点。     

小鼠肝脏干细胞提取法的优化

肝脏干细胞(liver stem cell,LSC)源于前肠内胚层,近年研究表明,除肝脏外,骨髓、胰腺等组织中也存在LSC.LSC主要包括胚胎时期的干细胞样肝原始细胞(liver original cell)和成体时期的肝卵圆细胞(hepatic oval cell,HOC).HOC是成年哺乳动物肝脏中一类直径约10 μm的卵圆形细胞,存在于终末小胆管(Hering),1956年由Farber[1]在大鼠肝癌模型中首先发现并命名,具有分化为肝细胞和胆管细胞的双向潜能[2,3]并与肝脏损伤后的强大再生修复能力密切相关.     

肝干细胞的研究进展

肝干细胞研究近年来已取得重要进展 ,肝干细胞的存在目前趋于肯定。肝干细胞分为肝源性和非肝源性两类。前者包括胆管源性卵圆细胞和分化肝细胞 ;后者包括胚胎干细胞 (ＥＳ细胞 )、骨髓 /血液干细胞及胰腺上皮细胞等。1　肝干细胞与肝脏生长、发育及再生成熟肝细胞和肝内胆小管细胞均系原始肝细胞(ｐｒｉｍｉｔｉｖｅｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ)生成。目前认为 ,肝再生通常通过处于增生静止期的分化肝细胞进入细胞周期完成。如果这一途径出现缺陷 ,胆管上皮细胞可从门脉汇管区移出并分化成肝细胞。这种胆管上皮细胞被称为卵圆细胞 (ｏｖａｌｃ…     

肝干细胞的研究进展和临床应用前景

1958年Wilson和Leduc在研究小鼠营养性肝损伤的修复机制中发现增殖的毛细胆管细胞(终末胆管细胞)具有干细胞样特性,可分化为具有典型形态特点的成熟肝细胞或胆管细胞,于是提出原始肝脏细胞(肝干细胞)的概念 . 随着肝干细胞在分子生物学等其他学科方面的研究,相信在不久的将来肝干细胞移植取代肝移植必将使供体肝脏缺乏问题得到解决. 本文我们主要就肝干细胞的最新研究进展和临床应用前景作一综述.     

肝干细胞在肝脏疾病中应用研究进展

肝干细胞是目前肝病基础研究的重点之一,其应用于临床仍有许多问题,如人肝干细胞建系困难,人肝于细胞生长缓慢,体外培养易分化,失去分裂增殖能力;有关肝干细胞向肝细胞癌细胞分化机制及各种癌基因、抑癌基因调控仍未明r。本文将就肝干细胞在肝脏疾病中的应用进行研究。肝于细胞（hepaticstemcellHsc）是一类具有双向分化（可同时向肝细胞和胆管细胞分化和增殖）、自我更新潜能的原始细胞。当肝实质损害尤其是肝大部分切除时,HSC发生分化和高效增殖,参与肝细胞严重损害后的再生和修复。1肝干细胞的来源及其标志物：目前认为HSC可分为肝源性和非肝源性。肝源性HSC来源于前肠内胚层,在胚胎发育过程中以胚胎肝细胞的形式存在,在成年哺乳动物中以胆管源性肝卵圆细胞形式存在,包括成熟肝细胞、肝卵圆细胞等。非肝源性HSC主要来源于胚胎干细胞、骨髓干细胞等。     

诱导多能干细胞在肝脏疾病中的研究进展

干细胞,特别是诱导多能干细胞(iPS细胞)可分化为有功能的肝细胞,同时避开了胚胎干细胞的伦理问题,为终末期肝病的替代治疗提供了新的种子细胞.文章对iPS细胞在肝脏疾病研究中的实验方法、研究结果以及临床应用前景予以阐述,为iPS细胞在肝病治疗方面的实验和临床应用提供借鉴.     

干细胞治疗肝硬化进展

各种病因导致的肝硬化严重影响着患者的生命健康,目前尚缺乏有效治疗方法。近年来,干细胞移植治疗终末期肝病成了一种新的治疗手段,该技术过程相对简单,将制备好了的干细胞通过选择好的途径移植到患者肝脏内,分化出更多的健康肝细胞,从而改善患者肝功能。本文即对干细胞及其临床移植治疗肝硬化进展作一综述。     

肝损伤大鼠骨髓源性肝干细胞的筛选分化与扩增

目的探讨利用肝损伤早期和淤胆血清培养体系从大鼠骨髓细胞中筛选、诱导分化和扩增肝干细胞亚群,以快速、高效地获取骨髓源性肝干细胞。方法建立淤胆型肝损伤大鼠模型和制备含5%淤胆血清病理条件培养液,以促进骨髓源性肝干细胞的体内、外筛选和扩增,采用免疫细胞化学染色和RT-PCR方法检测培养2周时骨髓细胞各种肝干细胞标志表达。结果病理条件培养液培养2周的骨髓细胞形成肝细胞样集落,细胞表达胚胎期肝干细胞特征性蛋白。结论淤胆型肝损伤早期大鼠体内环境和含淤胆血清体外病理微环境可能有效地从骨髓细胞中筛选骨髓源性肝干细胞,从而为临床细胞移植治疗各种肝脏疾病提供种子细胞。     

分泌性卷曲相关蛋白3影响小鼠胚胎肝干细胞体外成熟分化的实验研究

目的 检测不同发育阶段的肝组织中Wnt信号拮抗因子分泌性卷曲相关蛋白(secreted frizzled-related protein,SFRP)的表达,并探讨SFRP3对胚胎肝干细胞体外成熟分化的影响.方法 分离胚胎12.5 d至出生后4周共9个阶段的小鼠肝组织,RT-PCR检测5种SFRPs在肝组织及胚胎肝干细胞...     

脐血干细胞移植与肝再生增强因子联合治疗急性肝衰竭的实验研究

目的：观察脐血干细胞移植与肝再生增强因子联合治疗急性肝衰竭大鼠的疗效,以期为肝脏组织工程修复提供依据。方法建立肝衰竭大鼠模型40只,按照随机数表法将大鼠随机分为对照组(采用腹腔注射生理盐水)、脐血干细胞移植组(移植组,采用腹腔移植2×107脐血干细胞)、脐血干细胞移植联合肝再生增强因子组(联合组,采用腹腔移植2×107脐血干细胞联合注射肝再生增强因子50μg·kg-1·d-1)和肝再生增强因子组(增强因子组,采用腹腔注射肝再生增强因子50μg·kg-1·d-1),每组各10只。用DAPI标记肝细胞。大鼠肝衰竭造模成功后,经治疗一个月后分别取四组大鼠的肝组织制作冰冻切片,并于荧光显微镜下观察肝组织中DAPI标记的细胞计数。结果移植组肝脏归巢及定植的干细胞为(12.6±2.0)个细胞/100倍视野,多于增强因子组的(8.1±3.4)个细胞/100倍视野,差异有统计学意义(P<0.05),增强因子组到肝脏归巢及定植的干细胞又多于对照组的(3.1±3.4)个细胞/100倍视野,差异有统计学意义(P<0.05),而联合组肝脏归巢及定植的干细胞为(18.1±3.4)个细胞/100倍视野,多于以上各组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论不同干预手段对脐血干细胞归巢、定植于肝脏有一定影响,联合组的干细胞归巢率优于单行移植组和增强因子组。因此脐血干细胞移植联合肝再生增强因子是一种较为理想的急性肝衰竭治疗手段。     

脐血干细胞移植结合常规药物治疗终末期肝硬化的临床研究

目的观察脐血干细胞移植结合常规药物治疗终末期肝硬化的临床疗效。方法选取湖北医药学院附属太和医院于2012年1～7月收治的50例自愿接受脐血干细胞移植患者为肝硬化失代偿期(Child C级),全部患者均给予静脉输注及股动脉介入脐血干细胞,同时进行常规药物治疗。定期观察术后3、6、9、12周肝功能、血清白蛋白(ALB)及凝血酶原时间(PT)的变化。结果治疗第3周开始多数患者的临床症状、体征得到明显改善,其中腹水减少30例(60%),双下肢水肿减轻40例(80%),乏力好转35例(70%),食欲改善30例(60%)。经脐带干细胞治疗后3周,各指标较治疗前未见明显改善;治疗后6周,谷氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、ALB、PT改善不明显,治疗9周时,所有指标均有明显改善(P<0.05),12周时,各指标改善更为明显(P<0.05)。结论脐血干细胞移植结合常规药物治疗终末期肝硬化是一种简便、安全、有效的治疗方法,其治疗疗效显著,可避免肝移植供体紧缺及免疫排异反应,明显改善患者的生活质量。     

干细胞治疗终末期肝病的进展

许多致病因素都能导致肝功能极度减退甚至衰竭，从而进入终末期肝病阶段，常规治疗手段对于终末期 肝病的疗效始终不理想。原位肝移植虽较为有效，但是因为费用高、肝源不足、免疫排斥等因素，不能大规模应用 于临床，细胞治疗一直为临床所期待。肝疾病细胞治疗细胞来源以及利用胚胎干细胞和人诱导性多能干细胞向肝细 胞诱导的研究近年来有了长足进展。随着干细胞技术的兴起与发展以及诱导技术的逐步成熟，解决了肝细胞来源稀 缺的问题，为治疗终末期肝病提供了新的思路。     

自体骨髓干细胞移植治疗晚期肝硬化的近期临床观察

目的评价自体骨髓干细胞移植治疗肝炎后肝硬化的近期临床疗效。资料与方法回顾分析我院就诊R8例晚期肝硬化患者行自体骨髓干细胞移植后,患者乏力、纳差、腹胀等症状的改善情况及不良反应发生的情况,并于术后1月、3月复查肝功,了解肝功特别是总胆红素、白蛋白等变化情况。结果8例患者在肝动脉灌注过程中均很顺利,无明显不良不适;白蛋白较术前明显增高、总胆红素较前降低均有统计学意义。结论自体骨髓干细胞移植治疗晚期肝硬化近期效果较满意,其长期疗效有待进一步随访观察。