维生素E影响肿瘤坏死因子-α对贮脂细胞增殖及胶原合成的作用

目的：研究维生素Ｅ（ＶｉｔＥ）对大鼠贮脂细胞增殖及胶原合成的影响。方法：以链酶蛋白酶和胶原酶液原位循环灌注法分离大鼠贮脂细胞,以肿瘤坏死因子－α作为刺激因素,采用３Ｈ－胸腺嘧啶核苷（３Ｈ－ＴｄＲ）和３Ｈ－脯氨酸（３Ｈ－ｐｒｏｌｉｎｅ）掺入法分别测定ＶｉｔＥ对贮脂细胞增殖和胶原合成的影响,并在倒置显微镜下观察贮脂细胞的形态。结果：（１）肿瘤坏死因子－α能明显促进贮脂细胞增殖,并能明显抑制其胶原合成;（２）ＶｉｔＥ能显著抑制肿瘤坏死因子－α引起的贮脂细胞增殖,并能增强肿瘤坏死因子－α对贮脂细胞胶原合成的抑制作用。结论：ＶｉｔＥ对贮脂细胞增殖及胶原合成具有抑制作用,这可能是ＶｉｔＥ抗肝纤维化作用的重要机制之一。     

阿魏酸钠对大鼠贮脂细胞株HSC-T6增殖及胶原合成的影响

目的：研究阿魏酸钠对大鼠贮脂细胞株ＨＳＣ－Ｔ６增殖及胶原合成的影响。方法：采用肝贮脂细胞株,以细胞增殖抑制率为指标,用噻唑蓝（ＭＴＴ）法测定药物对大鼠贮脂细胞株ＨＳＣ－Ｔ６增殖的影响;通过＾３Ｈ－脯氨酸掺入法测定药物对ＨＳＣ－Ｔ６胶原合成的影响。结果：阿魏酸钠对大鼠贮脂细胞株ＨＳＣ－Ｔ６增殖及胶原合成的抑制率随药物浓度增加（２８．９～４６２．６ｎｍｏｌ／Ｌ）而升高,呈药物浓度依赖关系。结论：阿魏酸     

黄颜木素对HSC—T6细胞增殖和胶原合成的影响

目的：研究黄颜木素对激活的永生型大鼠肝腑 脂细胞－－ＨＳＣ－Ｔ６细胞增殖和胶原合成的影响。方法：细胞增殖采用结晶紫染色法检测,胶原合成采用＾３Ｈ－酸掺入法分析。结果：黄颜木素（６．２５－５０．００μｍｏｌ／Ｌ）以剂量依赖方式显著抑制血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）刺激的ＨＳＣ－Ｔ６细胞增殖,并抑制生长因子因子β１（ＴＧＦβ１）诱导的细胞内胶原合成,结论：黄颜木还给具有抑制激活的肝储脂细胞增殖和胶原合成     

水飞蓟宾对大鼠肝贮脂细胞HSC-T6增殖和胶原合成的影响

目的：观察水飞蓟宾对大鼠肝贮脂细胞ＨＳＣ－Ｔ６增殖和胶原合成的影响,探讨其保护肝脏及抗硬化机制。方法：采用结晶紫染色法测定细胞增殖,＾３Ｈ－脯氨酸掺入法测定胶原合成。结果：水飞蓟宾（６．２５～５０μｇ／ｍｌ）以浓度依赖方式抑制血清、巨噬细胞条件培养液以及血小板源生长因子或转化生长因子β１诱导的细胞增殖和胶原合成。结论：抑制贮脂细胞增殖和胶原合成可能是水飞蓟宾保护肝脏抗硬化机制之一。     

肾上腺髓质素抑制内皮素1,血管紧张素Ⅱ刺激的肺动脉平滑？…

目的：研究肾上腺髓素（ＡＭ）对内皮素１（ＥＴ－１）、血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）促肺动脉平滑肌细胞增殖的影响。方法：体外增减兔肺动脉平滑肌细胞,采用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法观察不同剂量ＡＭ对ＥＴ－１,ＡｎｇⅡ促肺动脉平滑肌细胞蛋白质合成的影响。结果：１×１０＾－９ｍｏｌ／Ｌ的ＥＴ－１,１×１０＾－８ｍｏｌ／Ｌ的ＡｎｇⅡ明显增加培养的平滑肌细胞＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量。１×１０＾－７￣２×１０＾－８ｍｏｌ／Ｌ深     

蛇床子素对新生大鼠颅盖骨成骨细胞的作用

目的：研究蛇床子素（ｏｓｔｈｌｅ）在体外对新生大鼠颅盖骨成骨细胞增殖及成骨作用的影响。方法：酶消化法分离培养新生大鼠颅盖骨成骨细胞;改良Ｇｏｍｏｒｉ钙钴法染色鉴定,＾３Ｈ－胸腺嘧啶和＾３Ｈ－脯氨酸掺入法分别测定细胞增殖和胶原合成;磷酸苯二钠法测定细胞内骨碱性磷酸酶（ＡＬＰ）活性;并以抗骨质疏松症药物依普黄酮（ｉｐｒｉｆｌａｖｏｎｅ,ＩＰ）作为阳性对照药物。结果：蛇床子素对新生大鼠颅盖骨成骨细胞的增殖、ＡＬＰ的活性和胶原合成都有促进作用。其对成骨细胞的增殖作用比ＩＰ强,但对胶原合成的促进作用弱于ＩＰ。结论：蛇床子素通过增加成骨细胞数量、促进细胞胶原蛋白及ＡＬＰ的合成而促进成骨作用。     

干扰素α对肝纤维化鼠星状细胞I和Ⅲ型前胶原mRNA表达及胶原？…

目的 观察干扰素α对大鼠纤维化时星状细胞增殖,Ｉ,Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达和肝脏胶原沉积的影响。方法 以ＣＣｌ４制造肝纤维化模型,培养肝星状细胞,抽提ＲＮＡ,用地高辛标记Ｉ,Ⅲ型前胶原和胶原酶ｃＤｎＡ探针,Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析Ｉ,Ⅲ型前胶原和胶原酶ｍＲＮＡ表达,Ｄｏｔｂｌｏｔ测定大鼠肝Ｉ,Ⅲ型胶原沉积,分别用＾３Ｈ－ＴｄＲ和＾３Ｈ－脯氨酸掺入观察干扰素α对星状细胞增殖和胶原合成的影响。结果 干扰     

汉防己甲素对血小板衍生生长因子促细胞增殖效应的阻断作用

目的研究血小板衍生生长因子（ｐｌａｔｅｌｅｔ－ｄｅｒｉｖｅｄｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＰＤＧＦ）对人成纤维细胞（ＨＬＦ）、大鼠肝贮脂细胞（Ｉｔｏ细胞）增殖活性和胶原合成的影响及汉防己甲素（Ｔｅｔ）对ＰＤＧＦ促细胞增殖效应的阻断作用。方法采用胶原酶灌流、密度梯度离心方法分离大鼠肝Ｉｔｏ细胞，并以Ｈ－ＴｄＲ、Ｈ－Ｌ－脯氨酸掺入法观察细胞增殖效应。结果在１％血清存在下，ＰＤＧＦ对ＨＬＦ、Ｉｔｏ细胞具有显著的促进ＤＮＡ合成和细胞增殖的作用，并随ＰＤＧＦ浓度的升高而作用增强；对无血清培养的ＨＬＦ、Ｉｔｏ细胞并无明显的促进增殖作用，但与胰岛素样生长因子（ＩＧＦ）等联合应用时，则可促进细胞的增殖，并证实ＰＤＧＦ具有促进ＨＬＦ、Ｉｔｏ细胞胶原合成的作用。Ｔｅｔ在不抑制细胞ＤＮＡ合成的剂量范围内，即可拮抗ＰＤＧＦ的促细胞增殖及胶原合成作用。结论ＰＤＧＦ对肝纤维化相关细胞ＨＬＦ、Ｉｔｏ细胞增殖活性及胶原合成具有促进作用，Ｔｅｔ对ＰＤＧＦ促细胞增殖效应具有阻断作用。     

秘灵王提取物对人免疫细胞增殖的影响

探究中药秘灵王对人体免疫细胞增殖的效应。采用＾３Ｈ－ＴｄＲ、＾３Ｈ－ＵＲ及＾３Ｈ－Ｌｅｕ掺入的方法，对秘灵王提取物（ＭＬＷＥ）对人免疫细胞增殖反应的影响进行研究。结果表明：ＭＬＷＥ可促进人外周血全血及单个核细胞ＤＮＡ合成；可促进人外周血单个核细胞ＲＮＡ及蛋白质的合成；可促进人胚胎胸腺细胞与脾细胞的增殖。提示ＭＬＷＥ可增强人体免疫功能。     

出血热病毒R22株感染对培养的脐静脉内皮细胞细胞周期及DNA …

方法：采用流式细胞术和＾３Ｈ－ＴｄＲ渗入法。目的：分析肾综合征出血热病毒Ｒ２２株感染对人血管内皮细胞（ＨＥＣｓ）的细胞周期和细胞ＤＮＡ合成率的影响。结果：病毒感染可明显延缓ＨＥＣｓ细胞周期进程，降低细胞ＤＮＡ合成率，细胞增殖受到明显的抑制。结论：ＨＦＲＳ病毒对ＨＥＣｓ有直接致病作用。     

低密度脂蛋白活化人肾小管上皮细胞促进肾间质成纤维细胞生？…

目的 观察低密度脂蛋白（ＬＤＬ）对近曲肾小管上皮细胞（ＨＫ－２）的作用;探讨经ＬＤＬ活化的ＨＫ－２对肾间质成纤维细胞（ＲＩＦＢ）生物学表型的影响。方法 用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入和细胞计数法评价细胞增殖：Ｎｏｒｔｈｅｒｎ和Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交方法检测α－平滑肌肌动蛋白（α－ＳＭ－ａｃｔｉｎ）;间接竞争抑制酶联免疫吸附法测定纤粘连蛋白和蛋粘连蛋白含量;＾３Ｈ－脯氨酸掺入法测定细胞总胶原成分的合成;逆转录聚合     

血流切应力变化对血管壁平滑肌细胞合成胶原的影响

目的：观察血流切应力变化对血管壁胶原含量的以探讨循环血管局部血流环境变化对血管结构的影响。方法：体外培养内皮细胞（ＥＣ）和平滑肌细胞（ＳＭＣ）,建立平行平板流动腔模型模拟产生切应力作用于ＥＣ,测定不同大小切应力作用后的内皮细胞条件培养液（ＥＣ－ＣＭ）中ＳＭＣ的胶原合成量。结果：在０,０．１０,０．１５,０．２５ｍＮ／ｃｍ＾２切应力作用后的ＥＣ－ＣＭ中培养２４ｈ后,每１０＾３ＳＭＣ合成２,３－＾３Ｈ     

IL-1β对人视网膜色素上皮细胞胶原合成的作用

目的：观察白介素－１β（ＩＬ－１β）对培养的人视网膜色素上皮细胞（ＲＰＥＣ）胶原合成的作用,方法：用＾３Ｈ－脯氨酸参入和免疫细胞化学方法观察ＩＬ－１β对培养的人ＲＦＥＣ胶原合成活性的影响。     

VP—16诱导前列腺癌细胞PC—3凋亡的研究

为研究ＶＰ－１６对雄激素非依赖性前列腺癌细胞ＰＣ－３凋亡的诱导作用,应用ＨＥ染色观察细胞的形态学改变,以ＤＮＡ凝胶电流和流式细胞术（ＦＣＭ）分析细胞凋亡和细胞周期分布,同时应用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法研究ＶＰ－１６对ＰＣ－３细胞ＤＮＡ合成的影响。结果表明,（１）凋亡的ＰＣ－３细胞呈明显的形态学改变;（２）ＤＮＡ断裂呈梯形变化;（３）ＰＣ－３细胞凋亡率随ＶＰ－１６作用浓度增加和时间延长逐渐增高;（４）Ｖ     

猪肺动脉缺氧内皮细胞条件培养液和DDPH对肺动脉平滑肌细…

用＾３Ｈ－胸腺嘧啶核苷和＾３Ｈ－尿嘧啶核苷掺入法及流式细胞术。观察猪肺动脉缺氧仙皮细胞条件培养液（ＨＥＣＣＭ）和１－（２，６－二甲基苯氧基）－２－（３，４－二氧基苯乙氨基）丙烷盐酸盐（ＤＤＰＨ）对猪肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣｓ）ＤＮＡ、蛋白合成及细胞周期的影响。     

尾加压素在大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用及其机制

目的 观察近年新发现的活性肽尾加压素（Ｕｒｏｔｅｎｓｉｎ Ⅱ,ＵⅡ）在大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用及其机制。方法 （１）采用＾３Ｈ－胸腺嘧啶（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法测定ＵⅡ对原代培养的大鼠气道平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）ＤＮＡ合成的影响,应用不同阻断剂观察ＵⅡ诱导细胞ＤＮＡ合成的信号转导通路。（２）采用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ荧光探针,测定ＵⅡ对胞浆游离钙浓度的影响。结果 （１）ＵⅡ呈浓度（１０＾－１０～１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ）依赖性刺激ＡＳＭＣ＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入,１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ时,为对照组的７倍（Ｐ〈０．０１）;（２）蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）阻断剂Ｈ７、丝裂素活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）阻断剂ＰＤ９８０５９及钙通道阻断剂尼卡的平均能抑制ＵⅡ刺激的ＡＳＭＣ＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入,其抑制率分别为２９％（Ｐ〈０．０５）,４５％（Ｐ〈     

c—myc反义寡核苷酸对低氧内皮细胞条件培养液诱导的肺血管？…

应用细胞培养、核酸斑点杂交、Ｈ＾３－胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入、免疫细胞化学、图像分析等技术观察ｃ－ｍｙｃ反义寡核苷酸（ＯＤＮｓ）对低氧内皮细胞条件培养液（ＨＥＣＣＭ）诱导的大鼠肺血管周细胞ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达及＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量的影响。结果表明,ＨＥＣＣＭ显著促进周细胞ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达、ＰＣＮＡ表达（Ｐ〈０．０１）及＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量增加（     

Cmyc反义核酸对内皮素诱导的人肺动脉平滑肌细胞增殖抑制 …

应用不同浓度的Ｃ－ｍｙｃ反义寡核苷酸处理体外培养的经１０＾－８ｍｏｌ／Ｌ内皮素－１（ＥＴ－１）诱导的人肺动脉平滑肌细胞,通过细胞计数和＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入值观察该反义核酸对细胞增殖及ＮＤＡ合成的抑制作用,应用斑点杂交法检测平滑肌细胞Ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ的表达水平。结果表明,１０、２０、５０μｇ／ｍｌ反义寡核苷酸对细胞计数和＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入值与对照组相比抑制率分别为１１．９％和１２．３％     

肺微血管内皮细胞的培养液对血管平滑肌细胞的效应

目的 观察缺氧条件下培养的肺微血管内皮细胞（ＰＭＥＣ）培养液对大鼠主动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）的作用,方法 应用倒置显微镜和电镜观察细胞形态,同位素放射测定＾３Ｈ－胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）摄取量,流式细胞仪测定细胞的周期和蛋白含量。结果 单纯缺氧可使ＡＳＭＣ Ｇ０／Ｇ１期数目增多,＾３Ｈ－ＴｄＲ摄取量降低,蛋白质含量减少;缺氧的ＰＭＥＣ培养液能促进大鼠ＡＳＭＣ从Ｇ０／Ｇ１期进入Ｓ期,＾３Ｈ－     

牛磺酸对成纤维细胞增殖及功能的影响

目的观察牛磺酸对３Ｔ３细胞的增殖及产生胶原和透明质酸的影响。方法；采用「＾３Ｈ」－胸腺嘧啶（「＾３Ｈ」－ＴｄＲ）、「＾３Ｈ」－脯氨酸（「＾３Ｈ」－Ｐｒｏ）掺入和放射名单分析法分析别测定细胞增殖、胶原和透明质酸合成。结果；牛磺酸能显著抑３Ｔ３细胞的「＾３Ｈ」－ＴｄＲ和「＾３Ｈ」Ｐｒｏ掺入，并呈时间、剂量依赖关系；对透明质酸的合成亦具有剂量依赖的抑制作用。此外，牛磺酸还明显提高细胞内ｃＡＭＰ水平。结论