黄颜木素对HSC-T6细胞增殖和胶原合成的影响

目的：研究黄颜木素对激活的永生型大鼠肝储脂细胞--HSC-T6细胞增殖和胶原合成的影响。方法：细胞增殖采用结晶紫染色法检测,胶原合成采用3H-脯氨酸掺入法分析。结果：黄颜木素（6.25-50.00μmol/L）以剂量依赖方式显著抑制血小板源生长因子(PDGF)刺激的HSC-T6细胞增殖,并抑制转化生长因子β1(TGFβ1)诱导的细胞内胶原合成。结论：黄颜木素具有抑制激活的肝储脂细胞增殖和胶原合成的作用。     

水飞蓟宾对大鼠肝贮脂细胞HSC-T6增殖和胶原合成的影响

目的：观察水飞蓟宾对大鼠肝贮脂细胞ＨＳＣ－Ｔ６增殖和胶原合成的影响,探讨其保护肝脏及抗硬化机制。方法：采用结晶紫染色法测定细胞增殖,＾３Ｈ－脯氨酸掺入法测定胶原合成。结果：水飞蓟宾（６．２５～５０μｇ／ｍｌ）以浓度依赖方式抑制血清、巨噬细胞条件培养液以及血小板源生长因子或转化生长因子β１诱导的细胞增殖和胶原合成。结论：抑制贮脂细胞增殖和胶原合成可能是水飞蓟宾保护肝脏抗硬化机制之一。     

阿魏酸钠对大鼠贮脂细胞株HSC-T6增殖及胶原合成的影响

目的：研究阿魏酸钠对大鼠贮脂细胞株ＨＳＣ－Ｔ６增殖及胶原合成的影响。方法：采用肝贮脂细胞株,以细胞增殖抑制率为指标,用噻唑蓝（ＭＴＴ）法测定药物对大鼠贮脂细胞株ＨＳＣ－Ｔ６增殖的影响;通过＾３Ｈ－脯氨酸掺入法测定药物对ＨＳＣ－Ｔ６胶原合成的影响。结果：阿魏酸钠对大鼠贮脂细胞株ＨＳＣ－Ｔ６增殖及胶原合成的抑制率随药物浓度增加（２８．９～４６２．６ｎｍｏｌ／Ｌ）而升高,呈药物浓度依赖关系。结论：阿魏酸     

转化生长因子—β1及其受体的表达与大鼠肝纤维化关系 …

探讨肝纤维化形成过程转化生长因子－β及其受体的表达对胶原合成的影响。方法：采用免疫组化和斑点杂交技术,观察实验性大鼠肝纤维化过程肝内ＴＧＦ－β１,ＴＧＦ－βＲⅡ和Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ及其蛋白表达的动态变化。结果随着肝纤维化程度的加重,肝内ＴＧＦ－β１、ＴＧＦ－βＲⅡ和Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ及其蛋白表达均明显增加,组间比较均有显著差异（Ｐ〈０．０５或Ｐ〈０．０１）。ＴＧＦ－β１与Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲ     

测定TGF—β1生物活性^3H—TdR细胞生长抑制法和MTT法比较研究

目的：探讨检测转化生长因子－β１（ＴＧＦ－１）灵敏可靠的方法。方法；用水貂肺上皮细胞（ＣＣＬ－６４）作为抑制细胞，分别采用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法和ＭＴＴ法。对照ＴＧＦ－β１标准含量，计算出细胞生长抑制剂，比较两法灵敏性和稳定性。结果：ＣＣＬ－６４细胞生长抑制与ＴＧＦ－β１是负相关；回归系数假设检验两种检验方法有显著差异；＾３Ｈ－ＴｄＲ法误差率比ＭＴＴ法小。结论：＾３Ｈ－ＴｄＲ法测定ＴＧＦ－β１活性较     

肝星形细胞表达转化生长因子α与成纤维细胞生长因子

目的 研究肝星形细胞（ＨＳＣ）转化生长因子α（ＦＧＦα）与成纤维细胞生长因子（ａＦＧＦ）的表达。方法 分别从正常与ＣＣＬ４肝纤维化大鼠肝脏分离ＨＳＣ,提取ＲＮＡ,用ＲＴ－ＰＣＲ测定ＴＧＦα和ａＦＧＦｍＲＮＡ。结果 正常ＨＳＣ表达ＴＧＦα和ａＦＧＦ,肝纤维化时ＴＧＦα与ａＦＧＦｍＲＮＡ水平均显著升高（Ｐ〈０．０５）。结论 ＨＳＣ自分泌ＴＧＦα和ａＦＧＦ,对肝纤维化具有重要促进作用。     

汉防己甲素对血小板衍生生长因子促细胞增殖效应的阻断作用

目的研究血小板衍生生长因子（ｐｌａｔｅｌｅｔ－ｄｅｒｉｖｅｄｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＰＤＧＦ）对人成纤维细胞（ＨＬＦ）、大鼠肝贮脂细胞（Ｉｔｏ细胞）增殖活性和胶原合成的影响及汉防己甲素（Ｔｅｔ）对ＰＤＧＦ促细胞增殖效应的阻断作用。方法采用胶原酶灌流、密度梯度离心方法分离大鼠肝Ｉｔｏ细胞，并以Ｈ－ＴｄＲ、Ｈ－Ｌ－脯氨酸掺入法观察细胞增殖效应。结果在１％血清存在下，ＰＤＧＦ对ＨＬＦ、Ｉｔｏ细胞具有显著的促进ＤＮＡ合成和细胞增殖的作用，并随ＰＤＧＦ浓度的升高而作用增强；对无血清培养的ＨＬＦ、Ｉｔｏ细胞并无明显的促进增殖作用，但与胰岛素样生长因子（ＩＧＦ）等联合应用时，则可促进细胞的增殖，并证实ＰＤＧＦ具有促进ＨＬＦ、Ｉｔｏ细胞胶原合成的作用。Ｔｅｔ在不抑制细胞ＤＮＡ合成的剂量范围内，即可拮抗ＰＤＧＦ的促细胞增殖及胶原合成作用。结论ＰＤＧＦ对肝纤维化相关细胞ＨＬＦ、Ｉｔｏ细胞增殖活性及胶原合成具有促进作用，Ｔｅｔ对ＰＤＧＦ促细胞增殖效应具有阻断作用。     

转化生长因子β1对鼠造血祖细胞产生树突状细胞的调控作用

目的 研究转化生长因子－β１（ＴＧＦ－β１）对造血祖细胞（ＨＰＣ）产生树突状细胞（ＤＣ）的调控作用及其分子机理。方法 分离高纯度小鼠骨髓Ｌｉｎ,Ｃ－ｋｉｔ,ＨＰＣ经粒细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）干细胞因子（ＳＣＦ）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）培养,诱导产生ＤＣ。采用流式细胞仪,逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和同种异基因混合淋巴细胞反应（Ａｌｌｏ－ＭＬＲ）分析ＴＧＦ－β１对ＤＣ产生的调节作用及     

PDGF与肝素对动脉SMCI,Ⅲ型前胶原mRNA表达及胶原蛋白合成？…

目的 研究,探讨血小板源生长因子（ｐｌａｔｅｌｅｔｄｅｒｉｖｅｄｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＰＤＧＦ）和肝素对人主动脉平滑肌细胞（ｈｕｍａｎａｏｒｔａａｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅ,ｃｅｌｌ,ｈＡＳＭＣ）增殖,胶原蛋白的合成,分泌以及Ｉ,Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达和转移生长因子β（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒβ－ＴＧＦ－β）ｍＲＮＡ表达的调节作用,方法＾３Ｈ－ＴｄＲ,＾３Ｈ－脯氨酸掺入及Ｎ     

低密度脂蛋白对肾小珠系膜细胞,TGF—β和FN mRNA表达的影响

目的：观察低密度脂蛋白（ＬＤＬ）对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞（ＭＳＣ）生长及转化生长因子β（ＴＧＦ－β）和纤维连接蛋白（ＦＮ）基因表达的影响。方法：体外培养的ＭＳＣ培养液中加入ＬＤＬ共同孵育,采用＾３Ｈ－ＴｄＲ渗入法检测ＭＳＣ增殖情况,应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ检测ＴＧＦ－β ｍＲＮＡ、ＦＮ ｍＲＮＡ的表达,应用斑点杂交法检测抗ＴＧＦ－抗体对ＦＮ ｍＲＮＡ表达的影响。结果（１）ＬＤＬ刺激ＭＳ     

成纤维细胞生长因子及血管内皮生长因子在喉粘膜上皮中的分布及作用

目的：探讨成纤维细胞生长因子超家族成员（ｂＦＧＦ和ＫＧＦ）及血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）与喉粘膜上皮与间质相互作用的关系．方法：用免疫组化方法和原位杂交方法，分别观察ｂＦＧＦ，ＫＧＦ及ＶＥＧＦ在喉部正常粘膜（Ｎ）和炎症（ＩＦ）中的分布．结果：ｂＦＧＦ和ＫＧＦ的转录仅在Ｎ及ＩＦ的间质中出现，阳性反应位于血管内皮细胞和成纤维细胞，此外巨噬细胞也见阳性反应，上皮细胞均未见阳性表达．而ＶＥＧＦ不仅在上皮细胞中表达，部分血管内皮细胞及慢性炎性细胞亦表达ＶＥＧＦ．在ＩＦ中，ｂＦＧＦ，ＫＧＦ及ＶＥＧＦ的阳性率和反应程度较Ｎ均有所提高．结论：ｂＦＧＦ，ＫＧＦ和ＶＥＧＦ通过自分泌或（和）旁分泌途径促进上皮细胞生长及间质中的血管形成，在上皮与间充质细胞的交互作用中发挥着重要的作用．     

肝细胞生长因子在子宫内膜异位症的表达及其与血管内皮生长因子的关系

目的探讨肝细胞生长因子(HGF)在子宫内膜异位症(内异症)发生发展过程中的作用及HGF与血管内皮生长因子(VEGF)的关系。方法应用免疫组织化学技术检测33例异位子宫内膜组织和10例正常子宫内膜组织中的HGF和VEGF的表达及微血管密度(MVD)。结果异位内膜HGF表达的平均光度值为0.264±0.026,正常内膜HGF表达为0.219±0.017,两者比较有显著性差异(P<0.05);异位内膜中HGF的表达与VEGF表达呈正相关(r=0.408,P<0.05)。结论HGF在异位内膜的血管生成中具有重要作用;HGF和VEGF在子宫内膜异位症的发生发展中发挥协同作用。     

表皮生长因子对TPN大鼠小肠隐窝表皮生长因子受体表达的影响

目的：研究给予外源性表皮生长因子（ＥＧＦ）对完全胃肠外营养（ＴＰＮ）大鼠小肠隐窝ＥＧＦ受体表达的影响以及与小肠粘膜细胞增殖的关系．方法：采用大鼠ＴＰＮ模型，小肠组织切片ＨＥ染色，测定隐窝细胞数及有丝分裂指数；采用免疫组织化学结合计算机图像分析的方法，测定隐窝细胞ＥＧＦ含量及ＥＧＦ受体的表达．实验共使用２００～２５０ｇ体重ＳＤ大鼠２４只，随机分组：对照组（ｎ＝８），仅行虚拟手术，即行右颈静脉结扎，每日饲以普通饲料及水；ＴＰＮ组（ｎ＝８），禁食水，输注常规ＴＰＮ；ＴＰＮ－ＥＧＦ组（ｎ＝８），输注常规ＴＰＮ溶液，并每日按０．１μｇ／（次·ｇ）皮下注射ＥＧＦ２次．各组均观察１４ｄ．结果：ＴＰＮ大鼠小肠隐窝ＥＧＦ含量及ＥＧＦ受体表达显著减少（Ｐ＜０．０１），隐窝细胞数和有丝分裂指数也明显降低（Ｐ＜０．０５）；当给予外源性ＥＧＦ后，隐窝ＥＧＦ含量、ＥＧＦ受体表达以及隐窝细胞数、有丝分裂指数均未降低．结论：ＥＧＦ能预防ＴＰＮ大鼠小肠隐窝ＥＧＦ受体表达及ＥＧＦ含量下降，维持细胞生成率．     

芦荟凝胶外涂对大鼠浅度烫伤创面愈合及其相关因子表达的影响

目的:研究芦荟对大鼠浅度烫伤创面愈合及表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响。方法:建立大鼠浅度烫伤模型,制备芦荟凝胶。实验动物分两组:自然愈合组(对照组);芦荟凝胶组(试验组)。通过免疫组化染色及图像分析,测定伤后2、6、10、18、24d的创面愈合率及创面组织中EGF、bFGF的表达。结果:1创面愈合率:芦荟凝胶组在10、18、24d各时相点的创面愈合率较自然愈合组高,差异有显著性(P<0.05)。尤以24d时相点更明显(P<0.01)。2EGF的表达:芦荟凝胶组总体的EGF表达量高于自然愈合组,差异有显著性(P<0.05)。芦荟凝胶组伤后10、18d时EGF表达高于自然愈合组,差异有显著性意义(P<0.05)。3bFGF的表达:芦荟凝胶组总体的bFGF表达量高于自然愈合组,差异有显著性(P<0.05)。芦荟凝胶组伤后18、24d时bFGF表达高于自然愈合组,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:芦荟凝胶外涂对大鼠浅度烫伤的愈合有促进作用,其机制可能与促进EGF、bFGF的表达有关。     

感觉神经肽P物质对肉芽组织成纤维细胞表达表皮生长因子与成纤维细胞生长因子-2及受体的调控作用

目的 从基因水平探讨感觉神经肽SP对肉芽组织成纤维细胞表达表皮生长因子（EGF）、成纤维细胞生长因子-2（FGF-2）及受体的调控作用。方法 由在体和离体实验两部分组成。在体实验采用Wistar大鼠50只,随机分为辣椒素组和对照组。辣椒素组大鼠皮下注射辣椒素50mg/kg毁损感觉神经,1周后行皮肤全层切割伤,采用免疫组化结合图像分析,观察伤后3-12d伤口肉芽组织内神经肽P物质（SP）含量。采用原位杂交方法观察EGF、表皮生长因子受体（EGFR）、FGF-2、成纤维细胞生长因子受体-1（FGFR-1）的基因表达,对照组除不化学毁损感觉神经外,余处理同辣椒素组。离体实验采用RT-CPR技术观察不同浓度（10^-9～10^-5mol/L)SP作用于培养肉芽组织成纤维细胞后,上述生长因子及受体的表达。结果 在体实验示,肉芽组织SP免疫阳性染色与EGF、FGF-2及其受体表达有关,化学毁损感觉神经,肉芽组织SP免疫阳性染色减弱,上述因子及受体的表达也明显抑制。离体实验发现,上调培养肉芽组织成纤维细胞内源性EGF和EGFR mRNA表达的SP浓度为10^-8～10^-6mol/L和10^-6～10^-5mol/L,上调FGF-2和FGFR-1 mRNA表达的SP浓度分别为10^-9～10^-5mol/L和10^-6～10^-5mol/L。结论 伤口愈合中,感觉神经释放的SP参与肉芽组织成纤维细胞表达EGF、FGF-2及受体mRNA的调控。     

体外贮存对人富血小板血浆生物学活性的影响

目的:探索各种贮存条件对人富血小板血浆(human platelet-rich plasma,hPRP)生物学活性的影响,研究hPRP释放生长因子的浓度作为评价hPRP生物学活性指标的可行性,为最终确定一整套应用hPRP的标准化方法奠定基础.方法:制备健康志愿者的hPRP,记录血小板计数.将每份hPRP释放生长因子分为3组,分别贮存在4 ℃,-20 ℃和-70 ℃,在制备后0,2,4,6,8,10 d测定3组标本中转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)和血小板衍生生长因子AB(platelet-derived growth factor AB,PDGF-AB)的浓度.同时,应用不同温度(4 ℃,-20 ℃,-70 ℃)贮存10 d的hPRP释放生长因子培养人脂肪基质细胞,以MTT法比较各组标本促进细胞增殖的生物学活性.结果:在体外贮存过程中,hPRP释放生长因子TGF-β1和PDGF-AB的浓度下降很快.低温是保存hPRP释放生长因子相对适宜的环境.当贮存10 d后,在-20 ℃和-70 ℃贮存的标本其TGF-β1的浓度分别为(238.55±36.00)μg/L和(261.12±55.10)μg/L,PDGF-AB的浓度分别为(46.03±17.67)μg/L和(50.78±18.70)μg/L,显著高于贮存在4 ℃时两种生长因子的浓度[(113.03±16.29)μg/L和(23.27±8.22)μg/L(P＜0.01)].MTT实验结果显示,不同温度贮存hPRP,其生物学活性也有显著差异,且与生长因子浓度差异基本一致.结论:hPRP释放生长因子只能在低温环境中短时间贮存,生长因子定量分析是评价hPRP生物学活性较为可靠的指标.     

碱性成纤维细胞生长因子治疗褥疮疗效观察

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)应用于褥疮的治疗效果。方法 120例褥疮患者,分为对照组和观察组,对照组患者采用清洁创面、无菌敷料无压力包扎,早期选用足量有效抗生素,同时给予改善微循环、营养及护理支持等常规治疗;观察组患者除常规治疗外联合应用bFGF局部喷涂,治疗1个月后,观察2组患者疗效。结果观察组总有效率(93.5%)高于对照组(50.0%)(P<0.05);治疗过程中未出现不良反应。观察组患者褥疮治愈时间短于对照组,差别有统计学意义(P<0.01)。结论 bFGF应用能明显提高褥疮患者的痊愈率和缩短治愈时间。     

糖尿病视网膜病变患者血中VEGF及IGF-1的定量测定与分析

目的 检测糖尿病视网膜病变（DR）患者外周血中的VEGF和IGF-1水平,并探讨其临床意义。方法 选取30例健康者作为对照组,2型糖尿病患者120例为试验组;试验组再分为无糖尿病视网膜病变（NDR）组30例,单纯型糖尿病视网膜病变（BDR）组33例,单纯型糖尿病视网膜病变合并黄斑水肿（macular edema ME）组22例,增生型糖尿病视网膜病变（PDR）组35例。用ELISA法检测血浆VEGF和IGF-1水平。结果2型糖尿病患者外周血中VEGF及IGF-1水平明显高于正常者,差异有统计学意义（P〈0.01）。而在2型糖尿病患者中,单纯型DR组血清VEGF及IGF-1水平明显高于无DR组,差异有统计学意义（P〈0.05）;单纯型并黄斑水肿组及增生型组血清VEGF水平明显高于单纯型DR组,差异有统计学意义（P〈0.01）,而血清IGF-1水平明显高于单纯型DR组,差异有统计学意义（P〈0.05）;而单纯型并黄斑水肿组和增生型组血清VEGF及IGF-1水平差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 2型糖尿病患者血清中VEGF及IGF-1水平随着DR的发生、黄斑水肿以及DR的加重而逐渐升高,对其进行监测有利于糖尿病视网膜病变的早期诊断和治疗。     

老年高血压病患者脉压指数与胰岛素样生长因子-1相关性研究

目的探讨老年高血压病患者脉压指数(PPI)与胰岛素样生长因子1(IGF-1)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的关系。方法老年高血压病患者160例。同步检测血中IGF-1、TGF-β1;用超声心动图仪测定并计算左室重量指数(LVMI),计算出PPI并按照PPI高低分成正常PPI组和高PPI组。比较两组间IGF-1、TGF-β1的差异并用直线相关和多元线性回归分析PPI与其他指标的相关性。结果高PPI组血中IGF-1水平较正常PPI组高(P<0.05);PPI与血中IGF-1水平正相关(P<0.05),但非独立相关。结论老年高血压病患者PPI与血中IGF-1水平的关系受多种因素影响。     

胰岛素样生长因子结合蛋白-3在子宫肌瘤组织中的表达及意义

目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白-3（IGFBP-3）与子宫肌瘤生长的关系。方法采用免疫组化法检测60例患者子宫肌层和子宫肌瘤组织IGFBP-3的表达强度。结果IGFBP-3在子宫肌瘤组织中的表达较在正常肌层中的表达减弱,在多发肌瘤的肌层中的表达较单发肌瘤者减弱。结论IGFBP-3与子宫肌瘤的发生呈负相关,测定IGFBP-3在肌瘤组织中的含量对预测肌瘤的发生、发展有重要的意义。