茅台酒与乙醇影响二乙基亚硝胺引发小鼠肝细胞癌的比较

目的：观察茅台酒与乙醇在协同二乙基亚硝胺（DEN）引发小鼠肝细胞癌（HCC）的差异。方法：74只雄性C57BL／6J小鼠随机分为正常对照组、茅台酒组、乙醇组、DEN组、茅台酒干预组及乙醇干预组,实验35周末检测各组小鼠血清谷氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）与肝组织匀浆中丙二醛（MDA）水平,观察肝组织病理学变化和HCC相关磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）表达。结果：肝功能检测发现,茅台酒干预组与正常对照组比较,ALT和MDA差异无统计学意义（P〉0．05）,而AST高于正常对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）;乙醇干预组ALT、AST与ADM高于正常对照组、茅台酒组、乙醇组、DEN组、茅台酒干预组,均P〈0．05;病理组织学检查发现乙醇干预组小鼠肝纤维化程度和GPC3表达明显高于其他各组,P〈0．05。茅台干预组肝脏细胞学检查未见癌前病变及HCC,仅在汇管区有少量PGC3表达。结论：乙醇可以协同DEN诱发小鼠HCC,茅台酒没有这种协同作用。     

茅台酒与乙醇影响二乙基亚硝胺致小鼠肝脏MMP2表达的差异

目的：研究茅台酒与乙醇影响二乙基亚硝胺（DEN）致小鼠肝脏金属基质蛋白酶2（MMP2）表达的影响。方法：将54只C57BL／6J小鼠随机分为正常对照组、茅台酒干预组、乙醇干预组,分别给予无菌生理盐水、茅台酒和乙醇灌胃处理,茅台酒干预组和乙醇干预组用DEN腹腔注射,35周后取小鼠肝脏,采用实时荧光定量PCR（RT—PCR）、免疫组化染色及Westernblot检测肝组织内MMP2mRNA及蛋白的表达。结果：MMP2基因在乙醇干预组中的mRNA表达显著高于正常对照组、茅台酒干预组,差异有统计学意义（P〈0．05）;MMP2mRNA水平在茅台酒干预组与正常对照组之间的差异无统计学意义（P〉0．05）;乙醇干预组MMP2蛋白表达比茅台酒干预组高,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：乙醇协同DEN致小鼠肝脏MMP2表达上调,含同样乙醇浓度的茅台酒没有这种作用。     

金属硫蛋白基因对小鼠变应性接触性皮炎的影响

目的：探讨金属硫蛋白（metallothioneins,MTs)在小鼠变应性接触性皮炎中所起的作用。方法：用二硝基氟苯（dinitrofluorobenzene,JNFB)致敏金属硫蛋白基因敲除小鼠（metallothionein-null mouse,MT-/-,不表达MT－I及MT－Ⅱ）及基因同源对照野生型鼠（MT＋／＋，正常表达MTs)，并在小鼠右耳激发变应性接触性皮炎，分别对比两组小鼠激发后耳肿胀度。结果：野生型鼠（MT＋／＋）耳肿胀度明显高于基因敲除鼠（MT－／－），统计学分析差异有显著性（P＜0．05，t检验）。结论：MTs在迟发型变态反应的炎症过程中起重要作用，MT－／－小鼠不能完全表达迟发型变态反应的炎症。     

金属硫蛋白表达在C57BL/6J小鼠肝细胞癌发生中的变化及意义

目的了解金属硫蛋白(MTs)基因表达水平在小鼠肝细胞癌(HCC)发生过程中的动态变化及其规律,探讨MTs在HCC发生中的重要意义。方法将125只5~8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组和HCC模型组。模型组小鼠于第1、2周分别腹腔注射一次二乙基亚硝胺(100 mg/kg,50 mg/kg),第3周起灌胃给予乙醇(53%,5 m L/kg,5 d/周),直至35周;正常组始终给予等量灭菌自来水灌胃。分别于实验1、3、9、13、24及35周末处死小鼠,收集肝组织样本并计算肝脏指数。采用组织病理学HE、Masson及网状纤维染色检测肝组织损伤及HCC发生情况,采用酶联免疫吸附法检测肝组织匀浆丙二醛(MDA)的活性;采用实时荧光定量PCR分析MTs转录水平。结果模型组小鼠可见进行性的肝脏病变,35周末时,肝脏质地显著变硬,表面可见大小不等结节形成,约50%小鼠可见肝细胞异常核分裂像和异常的肝板结构等HCC发生病理改变,具有显著增加的肝脏指数;不同时段均表现出增加的MDA活性;实验13周前各时段具有显著增加的MTs mRNA水平,24周后可见III级纤维化形成,且MTs mRNA水平显著下降,甚至低于正常水平。结论小鼠肝组织MTs mRNA水平从损伤初期的显著增加直至显著纤维化后的低表达变化,表明MTs表达下调与HCC发生有关。     

锌对甲基汞染毒大鼠肝、脑金属硫蛋白含量和超微结构的影响

目的 观察锌对甲基汞染毒大鼠肝、脑中金属硫蛋白含量和细胞超微结构的影响.方法 将大鼠随机分为硫酸锌＋甲基汞实验组、甲基汞染毒组和空白组,取大鼠部分肝、脑分别测定金属硫蛋白（MT）含量,并做细胞超微结构观察.结果 锌能增强甲基汞染毒大鼠肝、脑中金属硫蛋白含量;超微结构观察甲基汞实验组肝、脑细胞出现细胞间隙增宽,细胞质中线粒体致密、核糖体增多、内质网肿胀、有空泡化、染色质聚集等现象,而硫酸锌＋甲基汞实验组肝、脑细胞与对照组相比无明显差异.结论 锌能有效抑制甲基汞对细胞造成的损伤.     

Hsf1在DEN诱导小鼠急性肝损伤中的表达及活性变化

[目的]观察Hsf1在二乙基亚硝胺(DEN)诱导急性肝损伤组织中的表达及活性变化。[方法]选取8周龄C57BL/6J小鼠,随机分为3组:对照组、DEN损伤24 h组及DEN损伤48 h组。DEN损伤组小鼠腹腔注射二乙基亚硝胺(20mg/kg)24 h或48 h,建立急性肝损伤模型;对照组小鼠腹腔注射同体积PBS溶液。试剂盒检测小鼠血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶活性。HE染色检测小鼠肝组织病理变化。提取小鼠肝组织蛋白,Western blotting检测肝组织Hsf1及其调控蛋白Hsp70、Hsp90、Hsp25蛋白表达。[结果]DEN损伤24 h组小鼠血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶活性分别较对照组升高574.97%、86.67%、174.49%(P<0.05)。DEN损伤48 h组小鼠血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶活性分别较对照组升高665.63%、95.33%、194.90%(P<0.05)。HE染色显示,DEN损伤小鼠肝脏细胞排列紊乱、水肿,肝组织点状及灶性坏死,伴有炎性细胞浸润。Western blotting检测发现,DEN损伤24 h组及DEN损伤48 h组肝组织Hsf1表达较对照组明显增多,同时Hsf1调控蛋白Hsp70、Hsp90及Hsp25表达水平均较对照组明显增高。[结论]二乙基亚硝胺可诱导小鼠急性肝损伤组织中Hsf1表达增加,转录活性增高。     

肝细胞间隙连接通讯促进剂对小鼠肝肿瘤发生的抑制作用

目的 通过活体动物实验，探讨肝组织肿瘤发生机制是否与该组织细胞间隙连接通讯（GJIC）受阻有关，促进GJIC的药物对肿瘤发生是否具有对抗作用。方法 初生雄性ICR小鼠60只。40只腹腔注射二乙基亚硝胺（DEN）诱发肝肿瘤（肝肿瘤模型），20只注射等体积溶剂（三辛酸甘油）作为对照组。断乳后，肝肿瘤模型20只每日皮下注射异丙肾上腺素（IP）0．75μg／g＋咖啡因（CAF）1．5μg/g（DEN-IP＋CAF组），另20只注射等体积生理盐水（单纯DEN组）。所有动物均喂饲高蛋白低碳水化合物半精制饲料。采用羧基荧光素（CoF）细胞问转移法在新鲜离体的完整肝叶上测定肝GJIC能力，每组测定8只，其余在13月龄时处死，检测肝肿瘤。结果 单纯DEN组从断乳后不到半月开始至半年之后，肝GJIC能力降至正常水平的1／3（P〈0．001）并持续低水平，此时正在长大的结节出现在肝表面。DEN-IP＋CAF组，至少在断乳后头4．5月内肝GJIC能力呈现正常水平，到13月龄时与单纯DEN组相比，肝结节总体积减小98％（P〈0．001），肝细胞腺瘤发生率减少50％（P〈0．01）。对照组肝脏无异常发现。结论 在DEN诱发的小鼠肝肿瘤发生过程中，肝GJIC的早期下降是一关键性病理生理变化：促进GJIC的药物可对抗这种变化。对肝肿瘤的发生有抑制作用。     

小鼠急性肝坏死模型锌指蛋白A20的变化及意义

目的探讨锌指蛋白A20在小鼠急性肝坏死模型中的表达变化规律及意义。方法用D-氨基半乳糖（D-GalN）＋内毒素（LPS）联合制备小鼠急性肝坏死模型。将BalB/C小鼠随机分为正常对照组和模型组,于不同时间点取肝组织,采用苏木素-伊红（HE）染色光镜下观察肝组织病理学变化,免疫组化SP法检测肝细胞A20的表达情况。结果A20在正常对照组小鼠肝细胞中无表达。模型组小鼠在注射D-GalN和LPS后1h肝细胞开始表达A20;2h时表达水平迅速上升达峰值,Constantine半定量评分为4.33分,A20染色阳性肝细胞达20%～45%,主要分布在小叶间静脉周围;3h时A20表达下降;7h时降至难以检测水平。在肝坏死期,A20染色阳性肝细胞仍部分存活,而A20染色阴性肝细胞则大片坏死。结论在小鼠急性肝坏死模型出现大量肝细胞坏死前,A20在肝细胞中表达水平快速上升至高峰;当肝细胞大量坏死时,A20表达水平降至极低。A20在控制炎症反应、保护肝细胞免受损伤方面发挥了作用。     

芦根乙醇提取物对糖尿病小鼠肝脏线粒体氧化应激的干预作用

[目的]探讨芦根乙醇提取物对糖尿病小鼠肝脏线粒体氧化应激的影响.[方法]采用链脲佐菌素腹腔注射方法制作糖尿病小鼠模型,将实验小鼠分为正常对照组、模型对照组、芦根乙醇提取物大、中、小剂量组.芦根乙醇提取物大、中、小剂量组小鼠分别灌胃给予5.00,2.50,1.25g/kg芦根乙醇提取物,每日1次,5周后检测各组小鼠肝脏线粒体丙二醛（MDA）及超氧化物歧化酶（SOD）水平及Na＋-K＋-ATPase,Ca2＋-Mg2＋-ATPase活性.[结果]模型对照组MDA水平明显高于正常对照组（P〈0.01）,而模型对照组SOD水平及Na＋-K＋-ATPase,Ca2＋-Mg2＋-ATPase活性则显著低于正常对照组（P〈0.05）;芦根乙醇提取物大、中剂量组MDA水平较模型对照组明显下降（P〈0.05,P〈0.01）,SOD及Na＋-K＋-ATPase,Ca2＋-Mg2＋-ATPase活性明显升高（P〈0.05,P〈0.01）.[结论]糖尿病小鼠肝脏出现线粒体氧化应激变化,芦根乙醇提取物对此变化具有一定的改善作用.     

锌对小鼠组织MT-1基因转录及MT蛋白表达的影响

目的 :研究锌对小鼠各脏器金属硫蛋白 (MT)基因表达的影响。方法 :将小鼠随机分为注锌组和对照组 ,注锌后不同时间或不同剂量锌注射后 16 h断头处死动物 ,取一定量肝、脑、胸腺及脾脏组织制成匀浆 ,采用 Northern blot及 10 9Cd- hem饱和法测定组织 MT基因转录及蛋白表达的变化。结果 :时程研究表明 ,锌 10 mg/ kg腹腔注射后 2 h,小鼠肝脏及脾脏 MT- 1m RNA水平明显升高 ,4 h达峰值 ,分别为对照组的 5 .30和 2 .92倍 ,2 4 h恢复至正常水平 ;其 MT蛋白表达迟于 MT- 1m RNA水平升高 ,注锌后 8～ 2 4 h肝脏及脾脏 MT蛋白含量均比对照组明显升高 (P<0 .0 5或 P<0 .0 0 1) ,2 4 h达峰值 ,72 h恢复至正常水平。注射不同剂量锌后小鼠肝脏及脾脏 MT- 1m RNA水平 (4h)和 MT蛋白含量 (16 h)均呈剂量依赖性增加。小鼠腹腔注射锌 2 .5～ 10 mg/ kg 16 h,小鼠肝脏或脾脏 MT含量或锌5～ 10 mg/ kg注射后脾脏 MT含量均显著高于对照组 (P<0 .0 1或 P<0 .0 0 1)。但注射锌后脑及胸腺MT- 1m RNA水平及 MT蛋白含量均无明显变化经。结论 :锌诱导小鼠组织 MT合成具有明显的组织器官特异性。     

褪黑素对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的 探讨褪黑素（MT）对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及其作用机制。方法 成年Wister大鼠60只分为假手术组、手术对照组、手术＋VitC组（125mg／kg）、手术＋MT1组（0．2mg／kg）、手术＋MT2组（1mg/kg）、手术＋MT3组（5mg／kg）。测定各组大鼠肝缺血40min再灌注90min后血清中ALT、AST水平和肝组织中的丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）含量，电镜观察肝细胞线粒体的结构变化。结果 与对照组相比，MT组血清ATT和AST值上升幅度明显降低（均P〈0．01）；MT组的肝组织中MDA含量显著降低，SOD、CAT的含量明显提高（P〈0．01）；MT组肝组织HE染色光镜观察肝小叶结构保存较完整，肝细胞肿胀减轻；电镜观察肝细胞线粒体结构保存较完整。结论 MT对大鼠肝缺血再灌注致肝损伤具有保护作用。其保护机制可能是通过维持肝组织内SOD、CAT含量，清除氧自由基，抗脂质过氧化，稳定细胞膜性结构来实现的。     

金属硫蛋白和瑞舒伐他汀对小鼠动脉粥样硬化和SM22α表达的影响

目的 探讨金属硫蛋白（MT）和HMG-CoA还原酶抑制剂瑞舒伐他汀对ApoE基因缺陷小鼠动脉粥样硬化以及血管平滑肌22α蛋白（SM22α）表达的影响.方法 30只6周龄雄性ApoE基因缺陷小鼠随机分为高脂模型组、瑞舒伐他汀组、金属硫蛋白组,高脂饮食喂养13周;10只背景品系雄性C57BL/6J小鼠作为正常对照组,正常饮食喂养13周.13周后,摘眼球取血测定血浆总胆固醇（TCH）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）的水平,处死小鼠后取主动脉,剪取主动脉弓部位5 mm长主动脉用10％甲醛固定,石蜡包埋,切片,HE染色及SM22α免疫组织化学染色;其余标本-80℃保存,取100 mg主动脉组织两份,分别提取总蛋白和RNA,并做WesternBlot和RT-PCR检测,观察主动脉血管壁形态学变化,定性和定量分析主动脉组织SM22α表达强度变化.结果 与高脂模型组比较,瑞舒伐他汀组血清中TCH、TG、LDL-C水平显著降低（P＜0.05）;金属硫蛋白组与高脂高脂模型组比较,TCH、TG、LDL-C水平无统计学差异（P＞0.05）;和正常对照组相比,高脂模型组主动脉粥样硬化病变程度明显加重,免疫组织化学、Western Blot和RT-PCR方法分析主动脉SM22α蛋白和mRNA的表达均明显减少;金属硫蛋白和瑞舒伐他汀组主动脉粥样硬化病变程度减轻,SM22α蛋白和mRNA的表达均增加.结论 金属硫蛋白对血脂无明显影响,瑞舒伐他汀降低血脂作用明显;ApoE基因缺陷小鼠主动脉组织动脉粥样硬化明显且SM22α表达减少,金属硫蛋白和瑞舒伐他汀可减轻主动脉粥样硬化病变程度并可增加主动脉SM22α的表达.     

含MT蛋奶粉对小鼠辐射损伤的保护作用

目的：研究含金属硫蛋白（MT）蛋奶粉对小鼠电离辐射损伤的保护作用。 方法：小鼠受2.5 Gy （12.5 mGy·min^-1）X射线照射后,灌胃给予含 MT蛋奶粉,连续14 d后检测外周血白细胞数、淋巴细胞增殖率、股骨骨髓细胞DNA含量、胸腺细胞周期进程以及肝脏和肾脏丙二醛（MDA）含量和抗氧化酶（SOD、CAT和GSH-Px）活性。 结果：受照射小鼠给予含MT蛋奶粉后,尤其是含中高剂量MT蛋奶粉组,白细胞数、淋巴细胞增殖率和股骨骨髓细胞DNA含量明显高于辐射对照组（P<0.01）; 含MT蛋奶粉加照射组胸腺细胞G0/G₁期细胞数明显低于辐射对照组（P<0.01）,S期和G₂/M期细胞数明显高于辐射对照组（P<0.01或P<0.05）;照射组小鼠肝脏和肾脏MDA含量较正常对照组显著增加（P<0.01或P<0.05）,抗氧化酶SOD、CAT和GSH-Px活性则较正常对照组显著降低（P<0.01或P<0.05）,而含MT蛋奶粉加照射组与辐射对照组比较,肝脏和肾脏MDA水平明显降低（P<0.01）,抗氧化酶SOD、CAT和GSH-Px活性显著增高（P<0.01或P<0.05）。 结论：含MT蛋奶粉可明显改善X射线照射对小鼠的损伤效应,具有保护作用。 ［关键词］ ［中图分类号］     

加减葛花解酲汤对小鼠急性乙醇中毒的干预作用

目的 观察加减葛花解酲汤对小鼠急性乙醇中毒的干预作用。方法 将40只昆明种雄性小鼠随机分为正常组,模型组,加减葛花解酲汤低、中、高剂量组,每组8只。采用白酒灌胃复制小鼠急性乙醇中毒模型。给药后处死小鼠,取全血测定乙醇含量,取肝脏组织匀浆后分别检测超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量。结果 随着加减葛花解酲汤浓度的升高,急性乙醇中毒小鼠的醉酒耐受时间逐渐延长,醒酒时间逐渐缩短。与模型组比较,加减葛花解酲汤低、中、高剂量组小鼠全血乙醇浓度明显降低（P<0.05）,加减葛花解酲汤中、高剂量组小鼠肝组织中SOD水平显著升高（P<0.05）,高剂量组MDA水平显著降低（P<0.05）。结论 加减葛花解酲汤能明显降低血液乙醇浓度和肝组织中MDA水平,升高SOD水平,具备较好的解酒功效,其解酒的机制可能与保护肝细胞的作用有关。     

吗啡依赖和戒断小鼠海马MT1、MT2基因表达的变化

【目的】探讨吗啡依赖和戒断小鼠海马金属硫蛋白（metallothionein，MT）MT1、MT2 mRNA表达的变化。【方法】剂量递增法皮下注射吗啡建立吗啡依赖小鼠模型，腹腔注射盐酸纳络酮诱发戒断症状。根据小鼠戒断反应中出现的跳跃次数、体重下降等指标评定戒断反应的强度。采用半定量逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）方法，观察实验小鼠海马MT1、MT2 mRNA的变化情况。【结果】吗啡依赖组MT1、MT2 mRNA表达水平高于对照组和吗啡戒断组（P〈0．05），吗啡戒断组MT1、MT2 mRNA表达水平高于对照组（P〈0．05）。【结论】吗啡依赖小鼠海马MT1、MT2 mRNA表达增加，纳络酮戒断能够抑制吗啡依赖引起的MT1、MT2表达增加，表明海马MT的表达变化参与了吗啡依赖和戒断过程。     

氯化镉对肝癌细胞增殖的抑制作用

目的：探讨氯化镉对肝癌细胞增殖的抑制作用,阐明氯化镉对正常组织与肿瘤组织作用效应差异的分子机制。方法：以5、10、25和50 μmol·L^-1氯化镉分别作用于人肝细胞癌细胞株HepG-2和SMMC-7721,6 h后应用MTT法检测细胞增殖;应用25μmol·L^-1氯化镉作用于肝癌细胞株,分别于3、6、12和24 h后检测细胞增殖。应用裸鼠建立荷人肝癌模型,以0.25、1.00及4.00 mg·kg^-1氯化镉及10 mg·kg^-1氯化锌联合1.0mg·kg^-1氯化镉腹腔注射荷瘤鼠,测定生存期及给药8周后肿瘤体积;采用免疫组织化学方法测定正常肝组织及肝癌组织中金属硫蛋白(MT)表达水平。结果：5、10、25及50μmol·L^-1氯化镉均可抑制HepG-2和SMMC-7721增殖,其细胞增殖抑制率高于对照组（P< 0.05）,随着剂量和作用时间的增加,肿瘤细胞增殖抑制率增加;0.25、1.00及4.00 mg·kg^-1氯化镉及锌＋镉组肿瘤细胞体积较对照组明显减小（P< 0.05）,生存期明显延长（P< 0.05）,锌＋镉组与1 mg·kg^-1氯化镉组比较肿瘤体积差异无显著性,生存期延长（P< 0.05）。免疫组织化学结果显示,肿瘤组织中MT表达明显低于正常组织,正常肝组织预先应用氯化锌组MT表达水平高于正常组,而在肿瘤组织中表达无变化。结论：氯化镉具有显著的抗肝癌作用,在应用氯化镉前给予锌可以提高正常组织中MT表达水平而起到保护作用;在肝癌组织中MT表达减低,并不能被锌诱导增加。     

褪黑素对非酒精性脂肪性肝病大鼠游离脂肪酸的影响

目的：研究褪黑素（MT）对大鼠非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的形成和游离脂肪酸（FFA）的影响,探讨MT防治NAFLD的可能机制.方法：将雄性Wistar大鼠随机分成对照组、模型组和MT低、中、高剂量组（MT1、MT2和MT3组）,每组10只.对照组给予普通饲料喂养,模型组和MT1、MT2及MT3组给予高脂饮食12周.MT各剂量组分别给予MT 2.5、5.0和10.0 mg·kg-1·d-1腹腔注射.12周末处死大鼠,进行肝脏病理学检查,检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、血清及肝脏三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）和FFA水平.结果：大鼠高脂饮食12周成功复制NAFLD模型.与模型组比,MT各剂量组大鼠肝细胞脂肪变性有不同程度的改善;模型组血清ALT水平高于对照组（P＜0.05）,而TG低于对照组（P＜0.05）,模型组大鼠肝匀浆TC、TG亦均明显高于对照组（P＜0.01）.MT1组大鼠血清ALT水平高于对照组（P＜0.05）,MT1组和MT2组血清TG水平均低于对照组（P＜0.05）;MT1组肝匀浆TC及MT1组、MT2组与MT3组TG水平均明显高于对照组（P＜0.01）;MT3组肝匀浆TC水平明显低于模型组（P＜0.01）.模型组大鼠血清FFA水平明显高于对照组（P＜0.01）;与模型组比较,MT各剂量组血清FFA均降低（P＜0.05～P＜0.01）.模型组大鼠肝匀浆FFA水平明显高于对照组（P＜0.01）;MT2、MT3组肝匀浆FFA均明显低于模型组（P＜0.01）.结论：MT对NAFLD的形成有明显防治作用,且与剂量呈正相关,可能与MT降低FFA合成而改善氧化应激和抑制脂质过氧化等有关.     

高脂饲料和酒精诱导大鼠肝纤维化的实验研究

目的：探讨高脂饮食与酒精对肝纤维化的形成机制，寻求新的肝纤维化动物模型。方法：采用高脂饲料喂养，同时灌服白酒，持续时间3个月，建立大鼠高脂酒精性肝纤维化模型。结果：肝脏羟脯氨酸(HYP)、丙二醛(MDA)含量较正常组显著升高，谷胱甘肽(GSH)、金属硫蛋白(MT)含量降低，模型组肝细胞呈现出不同程度纤维化变性，伴局灶性肝细胞坏死和炎症细胞浸润。结论：给予大鼠高脂饮食和酒精可以建立肝纤维化动物模型。     

郁金水煎剂对四氯化碳致急性肝损伤小鼠肝细胞p53和caspase-3表达的影响及其对肝损伤的保护作用

目的：探讨单味郁金水煎剂对四氯化碳（CCl4）致急性肝损伤小鼠肝细胞凋亡基因p53和caspase-3蛋白表达的影响,阐明郁金对肝损伤保护作用的机制。方法:ICR小鼠60只,随机分为空白对照组（等体积生理盐水）、模型组（等体积生理盐水）、郁金低剂量组（2.5 g/kg）、郁金中剂量组（5.0 g/kg）、郁金高剂量组（10.0 g/kg）和阳性药组 (甘利欣 22.5 mg/kg);连续给药7 d后,除空白对照组外各组小鼠均通过CCl4复制小鼠急性肝损伤模型。计算肝指数,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性,HE染色观察肝组织形态学变化;RT-PCR法检测肝细胞p53基因转录情况;免疫组织化学法检测肝细胞caspase-3蛋白表达。结果：与空白对照组比较,模型组小鼠肝指数明显增加（P<0.05）;与模型组比较,各给药组小鼠肝指数明显降低（P<0.05）。与空白对照组比较,模型组小鼠血清ALT增高（P<0.01）;与模型组比较,阳性药组及郁金高、中剂量组小鼠血清ALT明显降低（P<0.05）。肝脏形态学变化,肉眼观察,空白对照组小鼠肝脏呈现粉红色,质软而富有弹性,模型组小鼠肝脏明显肿大、呈微黄色,表面可见散在点状及片状黄褐色斑点,质脆,各给药组小鼠肝脏大小、颜色及质地均界于空白对照组与模型组之间,且表面无明显黄褐色斑点;镜下观察,空白对照组小鼠肝脏结构正常,模型组小鼠细胞呈明显局灶性气球样变、水样变性和死亡,而阳性药组和郁金中、高剂量组小鼠与模型组比较肝组织上述病灶数量减少。与空白对照组比较,模型组小鼠肝细胞p53基因转录明显增强（P<0.05）;与模型组比较,郁金高剂量组小鼠肝细胞p53基因转录显著减弱 （P<0.05）。与模型组比较,郁金给药组小鼠肝细胞caspase-3蛋白表达减弱。结论：郁金对CCl4致小鼠急性肝损伤有一定的拮抗作用,其机制之一可能与下调凋亡基因p53和caspase-3蛋白的表达、阻碍肝细胞凋亡有关。     

同型半胱氨酸和金属硫蛋白对血管内皮细胞的影响

目的 :观察同型半胱氨酸 (Hcy)血症时小鼠肝、心、肾组织金属硫蛋白 (MT)含量的变化 ,以及MT对Hcy损伤内皮细胞的影响。 方法 :①昆明种小鼠 12只 ,分为对照组和高Hcy组 ,高Hcy组小鼠腹腔注射Hcy(16μmol/kg) ,复制高Hcy血症模型 ,对照组同法注入等量生理盐水。以Cd 血红素饱和法测肝、心和肾组织MT水平。②培养人血管内皮细胞 ,分为空白对照组 ,单用Hcy(1mmol/L)组及MT(2× 10 -5mol/L)和Hcy(1mmol/L)同时应用组 ,孵育人血管内皮细胞 6h测定细胞存活率、培养液乳酸脱氢酶 (LDH)活性和蛋白漏出量。结果 :Hcy组小鼠肝、心和肾组织MT水平较对照组分别增加 2 10 %(P <0 .0 1)、133%(P <0 .0 5 )和 6 0 %(P <0 .0 1)。MT +Hcy组培养的内皮细胞存活率较Hcy组培养的内皮细胞升高 13.9%(P <0 .0 1) ,培养液LDH和蛋白漏出量较Hcy组分别降低 2 7.1%(P <0 .0 5 )和 31.4%(P <0 .0 1)。结论 :Hcy诱导小鼠肝、心、肾组织MT生成 ,MT拮抗Hcy的细胞损伤作用。