滇姜花中倍半萜成分的研究

目的:研究滇姜花(Hedychium yunnanense Gangep.)的萜类成分。方法:采用柱色谱法,从滇姜花根茎中分离倍半萜成分,根据化合物的光谱数据鉴定结构。结果:从滇姜花根茎中分离得到6个化合物,分别鉴定为:γ-cadinene(1),δ-cadinene(2),α-muurolene(3),epicubenol(4),橙花叔醇(5),oplo-panone(6)。结论:所有6个化合物均为首次从该植物分离得到。     

圆瓣姜花的化学成分研究

目的 对圆瓣姜花（Hedychium forrestii Diels.）的根茎部分进行化学成分研究。方法 对圆瓣姜花根茎的95%乙醇提取物经乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯萃取物经硅胶、十八烷基硅烷键合相（ODS）、葡聚糖醚凝胶Sephadex LH-20等色谱方法进行分离纯化,并运用MS、NMR等波谱方法鉴定化合物的结构。结果 从圆瓣姜花中分离鉴定了5个化合物,分别为：5-hydroxy-3,7,4′-trimethoxyflavone（I）,3,5-dihydroxy-7,4′-dimethoxyflavone（II）,5-hydroxy-7-（4-hydroxy-3-methoxyphenyl）-1-（4-hydroxy-phenyl）-3-heptanone（III）,（5R）-5-hydroxy-1-（3,4-dihydroxyphenyl）-7-（4-hydroxy-3-methoxyphenyl）-3-heptanone（IV）,stigmast-4-en-3-one（V）。结论 5个化合物均为从该植物中首次分离得到。     

重楼地上部分与地下部分皂苷的抗肿瘤作用

［摘要］目的　探讨滇重楼地上部分和地下部分总皂苷对小鼠胃癌细胞株 （MFC）、人乳腺癌细胞株（MCF-7）和人宫颈癌细胞株（Hela）体内外生长的抑制作用．方法　采用CCK-8检测滇重楼地上部分和地下部分总皂苷对肿瘤细胞体外生长的抑制作用;将对数生长期的肿瘤细胞接种于正常小鼠左前肢腋窝皮下复制小鼠荷瘤模型．模型动物随机分为生理盐水组（NS）、环磷酰胺（30 mg/kg）组、滇重楼地上部分总皂苷高、中、低剂量（60、30、15 mg/kg）组和滇重楼地下部分总皂苷高、中、低剂量（60、30、15 mg/kg）组．分别进行腹腔注射给药,每天1次,连续15 d．观察肿瘤生长状况和小鼠生存期．结果　滇重楼地上部分总皂苷和地下部分总皂苷均可显著抑制小鼠胃癌细胞株 （MFC）、人乳腺癌细胞株（MCF-7）和人宫颈癌细胞株（Hela）的生长,并呈一定剂量和时间依赖性;滇重楼地上部分和地下部分总皂苷对模型小鼠体内肿瘤生长均有抑制作用（P＜0.01或P＜0.05）．结论　滇重楼地上部分和地下部总皂苷均有明显的抑制小鼠胃癌细胞株 （MFC） 、人乳腺癌细胞株（MCF-7）和人宫颈癌细胞株（Hela）体内外生长的作用．     

（庶虫）虫的化学成分研究

目的：从（庶虫）虫中分离出新的化合物并对其进行抑制多囊肾病活性指标 PKD1／TRPP2活性的评价。方法利用正相与反相硅胶柱色谱法及半制备液相色谱法进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据进行化合物的结构鉴定。结果从虫的70％丙酮提取物的乙酸乙酯部分共分离鉴定了8个化合物,经波谱分析分别鉴定为：1H-吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂卓1．5（2H）-六氢-二酮-3-对苯基酚（1）,5-甲基尿嘧啶（胸腺嘧啶）（2）,2-甲基-6-（2’3’4’-三羟基丁基）吡嗪（3）,3-羟基吡啶（4）,（3S,8aS）-3-丁基环己烷吡咯并[1,2-a]吡嗪-1,4-二酮（5）,3-乙基-6,8-二羟基-7-甲基-3,4-二氢异苯并吡喃-1-酮（6）,3-（4-羟基苯基）-N-甲基丙酰胺（7）,6,8-二羟基-3,7-二甲基 l-3,4-二氢-1H-异苯并吡喃-1-酮（8）。结论化合物1为新化合物,化合物2～8为首次从该生物中分离得到。对化合物1～8进行了抑制 PKD1／TRPP2活性的评价,结果化合物1具有活性。     

祁连獐牙菜化学成分研究

目的 研究祁连獐牙菜Swertia przewalskii全草的化学成分。方法 采用硅胶柱层析进行分离纯化,通过波谱方法及化学关联进行结构鉴定;结果 分离纯化出15个化合物,分别鉴定为：1,7-二羟基-3,8-二甲氧基San酮（Ⅰ）,1,8-二羟基-3,7-二甲氧基San酮（Ⅱ）,1,7,8-三羟基-3-甲氧基San酮（Ⅲ）,1,3,7,8-四羟基San酮（Ⅳ）,1-O-β-D-吡喃葡萄糖基-7-羟基-3,8-二甲氧基San酮（Ⅴ）,1-O-β-D-吡喃葡萄糖基-8-羟基-3,7-二甲氧基San酮（Ⅵ）,7-O-β-D-吡喃葡萄糖基-1,8-二羟基-3-甲氧基San酮（Ⅶ）,1-O-[β-D-吡喃木糖（1→6)-β-D-吡喃葡萄糖]-7-羟基-3,8-二甲氧基San酮（Ⅷ）,1-O-[β-D-吡喃葡萄糖]-1,7-二羟基-3-甲氧基S sgmk(X),木犀草素（Ⅺ）,齐墩果酸（Ⅻ）,乌苏酸（XⅣ）和龙胆苦苷（XV）。结论 化合物Ⅳ-Ⅷ,Ⅺ,Ⅻ,XⅣ和XV均为首次从该种植物中分得。     

川西獐芽菜化学成分研究

目的 研究川西獐牙菜Swertia mussotii的化学成分。方法 采用柱色谱方法进行分离纯化,根据理化性质和波谱解析鉴定化合物结构。结果 从川西獐牙菜75%乙醇提取物中分离得到19个化合物,分别鉴定为1-羟基-3, 4, 7, 8-四甲氧基呫吨酮（1）、1, 7-二羟基-3-甲氧基呫吨酮（2）、1, 3, 7-三羟基呫吨酮（3）、1, 3, 7, 8-四羟基呫吨酮（4）、1, 3, 8-三羟基-7-甲氧基呫吨酮（5）、1, 3-二羟基-7, 8-二甲氧基呫吨酮（6）、1, 5, 8-三羟基-3, 4-二甲氧基呫吨酮（7）、1-羟基-3, 4, 5, 8-四甲氧基呫吨酮（8）、1-羟基-3, 5, 8-三甲氧基呫吨酮（9）、(S)-(+)-龙胆内酯（10a）、(R)-(?)-龙胆内酯（10b）、1, 8-二羟基-3, 7-二甲氧基呫吨酮（11）、1-羟基-3, 7, 8-三甲氧基呫吨酮（12）、1, 7-二羟基-3, 8-二甲氧基呫吨酮（13）、1, 7, 8-三羟基-3-甲氧基呫吨酮（14）、1, 3, 5, 8-四羟基呫吨酮（15）、1, 7-二羟基-3, 4, 8-三甲氧基呫吨酮（16）,芒果苷（17）、齐墩果酸（18）。结论 化合物1～9 均为首次从该种植物中分离得到,化合物10a和10b为首次从獐牙菜属植物中分离得到。     

流苏龙胆中的(口山)酮类成分研究

目的研究流苏龙胆Gentiana panthaica中的仙酮类成分。方法采用多次的硅胶柱色谱法分离纯化，并通过理化性质和光谱与波谱分析技术鉴定其化学结构。结果从流苏龙胆中分离得到6个[口山]酮类化合物，分别鉴定为：1-羟基-2，3，4，7-四甲氧基[口山]酮（Ⅰ）、1，8-二羟基-3，5-二甲氧基[口山]酮（Ⅱ）、1-羟基-2，3，4，5-四甲氧基[口山]酮（Ⅲ）、1-羟基-2，3，7-三甲氧基[口山]酮（Ⅳ）、1-羟基-2，3，5-三甲氧基[口山]酮（Ⅴ）和1，7-二羟基-2，3，5-三甲氧基[口山]酮（Ⅵ）。结论6个化合物均为首次从该植物中分离得到。     

外源试剂对滇重楼种子萌发的影响

目的探讨外源试剂对药用植物滇重楼种子萌发特性的影响,为其种子育苗提供理论依据。方法分别用不同浓度的赤霉素（GA3）、萘乙酸（NAA）、吲哚乙酸（IAA）、6-苄氨基嘌呤（6-BA）、硝酸钾（KNO3）与硼酸（H3BO3）对滇重楼种子进行浸种处理,观察种子萌发情况。结果高浓度（200、500mg/L）的赤霉素、20mg/L的吲哚乙酸与低浓度下（10、20mg/L）的硝酸钾均能显著促进种子发芽;6-苄氨基嘌呤在低浓度（10mg/L）下显著促进种子发芽,高浓度下（50、100mg/L）抑制其发芽;萘乙酸与高浓度（500mg/L）下的的硼酸显著抑制了其种子发芽。结论各试剂对滇重楼种子发芽的影响与其使用浓度关系密切。     

滇细辛水提取物小鼠灌胃给药毒性和体内抗炎活性研究

目的 考查滇细辛水提取物小鼠灌胃给药急性毒性和体内抗炎作用。方法 采用近似最小致死量联合最大耐受量法测定小鼠灌胃给药急性毒性反应;采用巴豆油致小鼠耳廓肿胀实验、角叉菜胶致大鼠足趾肿胀实验、以及大鼠植入性棉球肉芽生成实验,评价滇细辛水提取物体内抗炎效应。结果 小鼠急性毒性实验结果表明：①滇细辛水提取物小鼠灌胃给药最小致死量为15.12g/kg（折算为77.62g生药/kg）,最大耐受量为13.62g/kg（折算为69.92g生药/kg）;②给药后3、7、14d,与溶媒组比较,滇细辛水提取物各给药组动物体重无明显差异;③实验结束后解剖发现,滇细辛水提取物各给药组部分动物肾脏颜色变浅。体内抗炎实验结果表明：①与溶媒组比较,滇细辛（0.84g/kg,折算为4.31g生药/kg）明显降低巴豆油致炎小鼠耳廓肿胀度。②角叉菜胶致炎60、120、240、360min时,滇细辛（0.84g/kg,折算为4.31g生药/kg）明显降低角叉菜胶致炎大鼠足趾肿胀度。③与溶媒组比较,滇细辛（0.42、0.84g/kg,折算为2.16g生药/kg、4.31g生药/kg）对大鼠植入性棉球肉芽重量无明显影响。结论 滇细辛水提取物存在一定毒性,且其主要毒性靶器官为肾脏。滇细辛水提取物对巴豆油所致小鼠耳廓肿胀、角叉菜胶致大鼠足趾肿胀等急性、亚急性炎症具有明显抑制作用,而对大鼠植入性棉球肉芽所致慢性炎症无明显抑制作用。     

链霉菌 I06A-03304 产生的二酮哌嗪类化合物的纯化及结构鉴定

目的分离鉴定链霉菌106A-03304发酵液中具血管内皮细胞生长因子受体-2胞内酪氨酸激酶（VEGFR2-CD）抑制活性的次生代谢产物。方法采用大孔吸附树脂、羟丙基葡聚糖凝胶（SephadexLH-20）、C-18反相色谱（ODS）、高压液相色谱（HPLC）等分离手段对次生代谢产物进行分离纯化;通过二级质谱（ESI＋-MS2）、紫外光谱（UV）、红外光谱（IR）、核磁共振波谱（NMR）对其结构进行鉴定,以酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测其次生代谢产物对VEGFR2-CD的抑制活性。结果分离得到两个二酮哌嗪类化合物：3304A和3304C;化合物3304A的化学结构与环（脯氨酸-亮氨酸）一致,化合物3304C的化学结构与环（脯氨酸-苯丙氨酸）一致,均对VEGFR2-CD表现出-定的抑制活性。结论化合物3304A和3304C是具有VEGFR2-CD抑制活性的二酮哌嗪类次生代谢产物,并为本研究首次报道。     

三氧化二砷对结肠癌小鼠移植瘤淋巴管形成与MMP-9表达的影响

目的探讨三氧化二砷（As：O,）对结肠癌淋巴管形成与MMP-9表达的影响。方法建立结肠癌小鼠移植瘤模型,分为1mg／（kg·d）As2O3,组、2mg／（kg·d）As：0,组和生理盐水组（注射等体积生理盐水）。应用免疫组织化学方法检测肾小球足突细胞黏蛋白（podoplanin）、血管内皮生长因子C（VEGF—C）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）的表达并计数微淋巴管密度（MLD）。结果As2O3处理组VEGF—C和MMP-9的表达均较生理盐水组明显减弱,2mg／（kg·d）As2O3组VEGF—C和MMP-9的表达明显弱于1mg／（kg·d）As2O3组;As2O3处理组MLD较生理盐水组明显减少,2ms／（kg·d）As2O3组MLD明显少于1mg／（kg·d）As2O3组;以上差异均具有统计学意义。结论As2O3对小鼠结肠癌移植瘤的淋巴管形成与MMP-9表达均有抑制作用。     

围绝经期综合征患者血清IL-18、IL-8、IFN-γ水平的变化及临床意义

目的 探讨白介素-18（IL-18）、白介素-8（IL-8）、干扰素-γ（IFN-γ）在围绝经期综合征患者血清中的变化及临床意义.方法 采集50例围绝经期综合征患者（实验组）治疗前、治疗3月后及50例处于绝经期的健康女性（对照组）血清,采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清IL-18、IL-8、IFN-γ水平,通过放射免疫分析法测定血清雌二醇（E2）、促卵泡刺激素（FSH）水平,对治疗前实验组血清E2、FSH与IL-18、IL-8、IFN-γ相关性进行分析,并对实验组治疗前后进行改良 Kupperman 评分.结果 治疗前实验组血清IL-18、IL-8、IFN-γ、FSH水平明显高于对照组,而血清E2水平低于对照组（P〈0.01）.治疗前实验组血清E2与IL-18、IL-8、IFN-γ呈负相关（P〈0.05）,FSH与IL-18、IL-8、IFN-γ呈正相关性（P〈0.05）.治疗3月后实验组改良Kupperman 评分及血清IL-18、IL-8、IFN-γ水平较治疗前明显降低（P〈0.01）.结论 IL-18、IL-8、IFN-γ可能参与围绝经期综合征发病的免疫过程,血清IL-18、IL-8、IFN-γ水平可作为病情判断及疗效的观察指标.     

吉西他滨对体外乳腺肿瘤细胞抑制及其MTA1 mRNA表达的影响

目的：探讨吉西他滨对体外培养的乳腺肿瘤MCF－7细胞株抑制作用及其作用机制。方法 将浓度为25 mg／mL、50 mg／mL、100 mg／mL、200 mg／mL和400 mg／mL吉西他滨培养液分为5组：A组、B组、C组、D组和E组。 A组、B组、C组、D组和E组均作用于体外传代培养对数生长期乳腺肿瘤细胞株MCF－7细胞24 h;使用四甲基偶氮唑盐（ MTT）法检测5组各对乳腺肿瘤细胞株MCF－7的生长抑制率;用实时定量聚合酶链反应（ PCR）检测5组各对乳腺肿瘤MCF－7细胞株肿瘤转移相关基因1（MTA1）mRNA的相对表达量。结果 A组、B组、C组、D组和E组对乳腺肿瘤MCF－7细胞株抑制率A组＜B组＜C组＜D组＜E组,差异均有统计学意义（P＜0．05）;C组、D组和E组MTA1 mRNA的相对表达量均人低于空白对照组,且这3组的MTA1 mR－NA的相对表达量依次降低,差异均有统计学意义（P＜0．01）。结论 吉西他滨能抑制乳腺肿瘤MCF－7细胞株增殖,且有剂量依赖性,其主要作用机制是通过下调MTA1 mRNA的表达,从而发挥抑制乳腺肿瘤MCF－7细胞株转移与抗乳腺肿瘤作用。     

EGFR单链抗体-力达霉素融合蛋白抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖与侵袭的研究

目的 研究EGFR单链抗体-力达霉素融合蛋白ER（Fv-LDP-AE）对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和侵袭的抑制作用,探讨其作用机制.方法 采用噻唑蓝（MTT）法测定ER（Fv-LDP-AE）对MCF-7细胞增殖的影响.流式细胞术、Hoechst 染色和Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞周期的变化以及细胞凋亡.Transwell实验测定ER（Fv-LDP-AE）对MCF-7细胞迁移和侵袭的影响.采用RT-PCR检测细胞EGFR mRNA的表达水平,Western blot分析ER（Fv-LDP-AE）对EGFR细胞信号通路的影响.明胶酶谱实验测定细胞基质金属蛋白酶（MMPs）的活性.结果 ER（Fv-LDP-AE）能显著抑制MCF-7细胞的体外增殖,其半数抑制浓度（IC50）为1.5 x10-12 mol/L.ER（Fv-LDP-AE）可引起细胞周期G2/M期阻滞,诱导细胞凋亡,抑制细胞的迁移和侵袭,阻碍EGFR的表达,干扰EGFR细胞信号通路,降低MMPs的活性.结论 ER（Fv-LDP-AE）通过抑制EGFR及其细胞信号通路、干扰细胞周期循环和诱导细胞凋亡,抑制乳腺癌MCF-7细胞的体外增殖,通过降低迁移能力和调节MMPs活性,阻碍肿瘤细胞的侵袭转移.     

糖尿病患者急性心肌梗死后炎性因子的变化及其意义

①目的 探讨糖尿病患者在心肌梗死后炎性因子的变化及其意义.②方法 87例急性心肌梗死患者分为血糖正常组（64例）及糖尿病组（23例）,另选健康对照组（25例）.采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定各组患者入院即刻、第24小时、第48小时、第5天,第7天、第14天血清白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）,白介素-8（IL-8）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、干扰素-γ（IFN-γ）含量;健康对照组测1次上述各项指标.③结果 与对照组相比,心肌梗死患者的炎性因子浓度于发病2周内明显升高（P＜0.01）,存在动态变化;炎性因子含量除糖尿病组的血清IL-1第24小时～第14天、IL-6第5～14天及IL-8第5～7天数值较血糖正常组有明显升高外（P＜0.05）,其它数值两组无明显差异（P＞0.05）.④结论 炎症参与了急性心肌梗死全过程,在急性心肌梗死早期的炎性反应中糖尿病起到了一定的促进作用,且主要影响白介素系统,而对肿瘤坏死因子及干扰素无明显影响.     

藏药青鹏胶囊抗病毒、抑菌作用实验研究

目的观察青鹏胶囊对流行性感冒病毒的抑制作用和对感染FM1病毒小鼠的保护作用。方法 1.应用细胞培养技术,在传代细胞上进行青鹏胶囊抗流感甲3和乙型病毒的抑制试验;2.观察青鹏胶囊对感染FM1病毒小鼠的保护作用;3.采用试管液体稀释法测定青鹏胶囊对51株常见致病菌的抑菌作用。结果 1.青鹏胶囊对流感甲3型病毒有明显的中和、治疗作用,对乙型病毒中和、治疗作用不明显;2.中剂量青鹏胶囊能降低感染FM1动物的死亡率（P〈0.05）,延长生存时间（P〈0.05）,能降低大、中、小剂量组病毒感染小鼠肺指数,与模型组比较差异非常显著（P〈0.01）;3.青鹏胶囊提取液对金黄色葡萄球菌（10/10）、表皮葡萄球菌（10/10）、甲型链球菌（2/6）、乙型链球菌（5/5）、双歧杆菌（2/3）、肺炎杆菌（6/6）、绿脓杆菌（3/4）、致病性大肠杆菌（7/7）等革兰氏阳性球菌、阴性杆菌抑菌作用较好,其多数菌株的最低抑菌浓度在（6.25~100）mg/mL之间。尤其对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肺炎杆菌、致病性大肠杆菌的抑菌效果明显。结论青鹏胶囊对流感甲3病毒型具有明显的抑制作用。     

Twist、上皮性钙黏附素和神经性钙黏附素在肝细胞肝癌中的表达及意义

目的观察肝细胞肝癌（HCC）组织中Twist、上皮性钙黏附素（E—cadherin）、神经性钙黏附素（N—cadherin）的表达及临床意义。方法采用免疫组化法检测64例HCC组织及20例癌旁组织中Twist、E—cadherin、N—cadherin的表达,并分析其I临床病理意义。结果Twist及N—cadherin在肝细胞癌组织中的表达率均高于癌旁组织（68．8％,40．0％VS62．5％,35．0％,P〈0．05）;E—cadherin的表达率分别为51．6％、75．0％,差异有统计学意义（P〈0．05）。HCC组织中,Twist与E—cadherin的表达呈负相关（r=-0．343,P〈0．05）,与N—cadherin的表达呈正相关（r=0．329,P〈0．05）,E—cadherin及N—cadherin的表达呈负相关（r=-0．272,P〈0．05）。三者表达水平均与组织分级、肿瘤转移有关（P〈0．05）。结论Twist和N—cadherin的高表达及E—cadherin的低表达与HCC的发生、发展、浸润和转移相关。     

缺血后处理对缺血／再灌注胃黏膜自由基损伤的影响

目的研究缺血后处理（ischemic post—conditioning,I—postC）对大鼠胃缺血／再灌注（gastric ischemia／reperfusion,GI／R）损伤的影响。方法健康SD大鼠18只,随机分为3组,即对照组、缺血／再灌注组、缺血后处理组,分别检测大鼠胃黏膜损伤指数（GMDI）及胃黏膜组织抑制羟自由基能力、黄嘌呤氧化酶（XOD）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）含量。结果缺血／再灌注可造成胃黏膜明显损伤;缺血后处理明显减轻GI／R损伤,并使胃黏膜组织抑制羟自由基能力、SOD含量增加,XOD、MDA明显降低。结论缺血后处理减轻大鼠胃缺血／再灌注损伤,其保护机制与减轻缺血／再灌注胃黏膜自由基损伤有关。     

秋花独蒜兰化学成分及其生物活性研究

  目的  研究秋花独蒜兰化学成分,发现其活性成分。  方法  秋花独蒜兰经95%乙醇提取、硅胶柱层析、半制备HPLC和Sephadex LH-20柱层析进行分离纯化,波谱分析（核磁共振氢谱、碳谱、和质谱）确定结构;应用MTT法,对部分化合物进行体外抗肿瘤活性筛选。  结果  从秋花独蒜兰分离鉴定10个化合物,分别为:1,7-dihydroxy-2,5-dimethoxyphenanthrene （ 1 ）,2,7-dihydroxy-1,5-dime-thoxyphenanthrene （ 2 ）,confusarin （ 3 ）,4,7-dihydroxy-2-dimethoxy-9,10-dihydrophe-nanthrene （ 4 ）,pleionesin B （ 5 ）,pleionesin C （ 6 ）,flavanthrin （ 7 ）,2,2′-dihydroxy-5,5′,7,7′-tetramethoxy-9,9′,10,10′-tetrahydro-3,3′-biphenanthrene （ 8 ）,6,6′,7,7′-tetrahy--droxy-2,2′,4,4′-tetramethoxy -8,8′-biphenanthrene （ 9 ）,1,3′,5′,7-tetrahydroxy-4,7′-dimethoxy-9,9′,10,10′-tetrahydro-2,2′-biphenanthrene （1 0 ）;对化合物3,7～10 A549、MCF-7/S和SKOV-3进行肿瘤细胞株抑制活性测试,发现化合物10对3种细胞株活性较好。   结论  所有化合物为首次从本植物中分离得到,研究结果表明化合物10对3种肿瘤细胞株具有很好的抑制活性,其IC₅₀分别为2.45,6.83,4.23 μM。     

TAT—GluR6—9C与pMON原核表达载体重组体的构建

目的表达和纯化TAT—GluR6—9C小肽,用于脑缺血细胞信号转导的研究。方法用化学合成的方法获得TAT—GluR6—9C小肽的cDNA;与原核表达载体pMON用T4DNA连接酶连接;连接产物转化大肠杆菌JMl09进行筛选、序列测定。结果①经化学合成并退火得到了TAT—GluR6—9C的双链cDNA;②酶切鉴定能观察到TAT—GluR6—9C和pMON两条带;③TAT—GluR6—9C测序图谱与GenBank报道完全一致。结论获得了含目的基因TAT—GluR6—9C的pMON原核表达载体重组体。