基于网络药理学研究小儿升麻方对流感病毒性肺炎小鼠的治疗作用机制

目的研究小儿升麻方对流感病毒性肺炎小鼠的治疗作用,并通过网络药理学方法探究其抗流感病毒性肺炎的作用机制。方法小鼠随机分为对照组,模型组,小儿升麻方低、中、高剂量(1.75、3.50、7.00g/kg)组和生理盐水组,给药第2天,经鼻滴入0.03 m L FM1流感病毒尿囊液建立流感病毒性肺炎模型,第7天测定小鼠肺指数。采用网络药理学方法在TCMIP数据库查找小儿升麻方各药材化学成分和靶点信息,在Genecards数据库中查找流感病毒性肺炎相关靶点,通过韦恩图筛选小儿升麻方与流感病毒性肺炎的共同靶点,借助Omicsbean分析系统与STRING数据库对共同靶点进行基因本体(gene ontology,GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)信号通路分析。结合STRING数据库与Cytoscape 3.7.0软件将共同靶点进行可视化处理,筛选核心靶点,构建"药材-成分-靶点-通路"网络。结果小儿升麻方高剂量组显著降低流感病毒性肺炎小鼠的肺指数(P<0.05)。小儿升麻方与流感病毒性肺炎有69个共同靶点,通过蛋白相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络筛选出24个核心靶点,对应29个化学成分,86条主要通路。结论小儿升麻方对流感病毒性肺炎小鼠有潜在的治疗作用,可通过多成分、多靶点、多通路发挥治疗流感病毒性肺炎作用。     

基于血清药物化学和网络药理学的广藿香干预病毒性肺炎药效物质基础和作用机制研究

目的 基于血清药物化学与网络药理学探究广藿香干预病毒性肺炎的药效物质基础和作用机制。方法 利用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法（UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS）对广藿香水煎液、大鼠空白血清及含药血清样品中的成分进行分析，应用Compound Discoverer 3.1化合物预测软件，结合二级谱图及已有文献，鉴定广藿香的入血成分。利用SwissTargetPrediction数据库获取广藿香入血成分的作用靶点，将关键词“viral pneumonia”输入GeneCards、DisGeNET、OMIM数据库检索得到病毒性肺炎的靶点基因，利用Cytoscape 3.9.1软件构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络，筛选关键靶点。利用DAVID数据库对成分-疾病交集靶点进行基因本体（GO）功能富集分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。结果 从大鼠血清中鉴定出12个入血成分，包括7个原型成分和5个代谢产物，原型成分分别是木犀草素-7-葡萄糖醛酸苷、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷、圣草酚-7,3′-二甲醚、芫花素、广藿香酮、4′,7-二甲基柚皮素、邻苯二甲酸二丁酯；丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B1（Akt1）、肿瘤坏死因子（TNF）、表皮生长因子受体（EGFR）、半胱氨酸蛋白酶3（CASP3）为PPI中的核心靶点；富集分析显示，广藿香入血成分可能通过调控磷脂酰肌醇3-激酶/Akt（PI3K-Akt）信号通路、卡波西肉瘤相关疱疹病毒感染、人类免疫缺陷病毒1型感染、TNF信号通路、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路、Janus激酶-信号转导与转录（JAK-STAT）信号通路、白细胞介素-17（IL-17）信号通路等发挥抗病毒、抗炎作用。结论 广藿香中入血成分可能通过抗病毒、抗炎、细胞增殖和凋亡等相关的蛋白及通路发挥干预病毒性肺炎的作用。     

温肺化纤颗粒抗小鼠特发性肺纤维化的代谢组学分析

目的：探讨硫酸博莱霉素（BLM）诱导肺纤维化形成不同阶段和给药小鼠血清中差异代谢物的变化,以及温肺化纤颗粒抗特发性肺纤维化的作用机制。方法：小鼠随机分为空白组、14 d空白组、模型组、14 d模型组及温肺化纤颗粒低、高剂量组。模型组、14 d模型组和温肺化纤颗粒低、高剂量组气管注入BLM(0.04 U/只)造模,空白组和14 d空白组气管注入等量无菌生理盐水;温肺化纤颗粒低、高剂量组气管注入BLM次日起每天分别灌胃给予不同剂量温肺化纤颗粒,空白组、14 d空白组、模型组和14 d模型组每天灌胃给予等量无菌水;14 d空白组和14 d模型组小鼠气管注入BLM后14 d取外周血制备血清,其余各组小鼠连续给药28 d后取外周血制备血清并取材。采集小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）进行白细胞分类计数;小鼠肺组织进行病理学检测及羟脯氨酸（HYP）含量测定;采用超高效液相色谱-质谱法（UHPLC-MS）分析各组小鼠血清样本小分子代谢产物,通过主成分分析（PCA）、正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）等筛选差异代谢物并进行代谢通路分析。结果：与空白组比较,模型组小鼠肺组织出现大量连续纤维化病灶...     

基于血清药物化学和网络药理学的藏族药七十味珍珠丸安全性评价

采用血清药物化学和网络药理学探讨七十味珍珠丸入血活性成分抑制复方中佐太组分肝肾毒性的相关机制,为七十味珍珠丸的临床安全应用提供依据。通过色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)鉴定小鼠七十味珍珠丸含药血清中的小分子化合物。综合运用TCMSP、HERB、PubChem、GeneCards、SuperPred等多个数据库,检索七十味珍珠丸入血活性成分,预测其作用靶点,并与数据库检索到的汞毒性肝肾损伤相关靶点交集比对,筛选出七十味珍珠丸抑制佐太组分潜在汞毒性的作用靶点。采用Cytoscape软件构建七十味珍珠丸入血活性成分-靶点网络,使用STRING数据库构建交集靶点蛋白蛋白互作(PPI)网络,通过DAVID数据库对靶点基因进行GO功能与KEGG通路富集分析,构建活性成分-靶点-通路网络,并筛选出关键成分和靶点进行分子对接验证。结果显示,七十味珍珠丸含药血清中共鉴定出活性成分44种,其中13种可能是原型药物成分,作用于肝肾汞毒性的潜在靶点70个。通过PPI网络拓扑分析,得到12个关键靶点基因(HSP90AA1、MAPK3、STAT3、EGFR、MAPK1、APP、MMP9、NOS3、PRKCA、...     

基于GC-MS代谢组学的胆木糖浆抗H1N1甲型流感病毒性肺炎研究

目的 采用非靶标代谢组学方法探讨胆木糖浆干预H1N1甲型流感病毒性肺炎相关代谢网络变化及可能的作用机制。方法 随机将ICR小鼠分成四组：正常组、H1N1肺炎模型组、阳性药达菲组、胆木糖浆组。模型组以HIN1病毒滴鼻造模，给药组以胆木糖浆灌胃治疗，正常组以生理盐水灌胃作为对照。实验结束后取肺组织样本，采用GC-MS代谢组学技术分析小鼠肺组织中的差异性代谢产物(FDR<0.05,Fold Change>1.5)并寻找其潜在的代谢通路。结果 主成分分析(PCA)结果显示各组间小鼠肺组织的代谢轮廓可明显区分，筛选出21种潜在差异性代谢产物在模型组出现不同趋势改变，胆木糖浆组具有明显回调作用。代谢通路富集分析进一步提示胆木糖浆主要影响了嘌呤、嘧啶及磷酸戊糖途径等代谢相关通路发挥治疗HIN1肺炎的作用。结论 胆木糖浆主要可通过调节机体嘌呤、嘧啶及磷酸戊糖代谢途径及其相关的代谢产物发挥治疗H1N1肺炎的作用。     

基于血清药物化学的花椒温中止痛的质量标志物研究

目的 基于中药质量标志物（quality marker,Q-Marker）概念,在验证花椒温中止痛功效的基础上,分析花椒提取物在正常大鼠及模型大鼠的血中移行成分。方法 采用ig冰水结合冰浴方式建立寒邪犯胃型胃脘痛大鼠模型,并连续ig花椒提取物2周,观察大鼠一般情况,并对全血血细胞计数、脏器指数和胃组织病理变化进行检测。应用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱对对照组、模型组、空白给药组、花椒高剂量组大鼠的血清样本数据进行采集,通过主成分分析和正交偏最小二乘判别法分析花椒温中止痛的潜在物质基础。通过Pharm Mapper反向对接筛选入血成分的作用靶点,并进行京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）通路富集分析;构建成分-靶点-通路网络图;应用分子对接技术对主要作用通路进行验证。结果 与模型组比较,花椒组大鼠耳廓颜色明显变红,全血白细胞、淋巴细胞及单核巨噬细胞计数明显升高（P<0.05）,胸腺指数明显增加（P<0.01）;胃组织局部坏死脱落和变性细胞减少。从空白给药组、花椒高剂量组大鼠血清中...     

三仁汤对湿热证型病毒性肺炎小鼠模型的多靶点干预作用

目的:探讨三仁汤对湿热证型病毒性肺炎小鼠模型的多靶点干预作用。方法:通过肥甘饮食、湿热环境、流感病毒感染三因素合并,构建湿热证型病毒性肺炎动物模型。随机分为模型组、三仁汤组、利巴韦林组和空白组。滴鼻感染病毒2 h后灌胃给药,2次/d,连续给药6 d后处死动物。生化法检测血清中CHOL、LDL-C、HDL-C含量;HE染色观察小鼠肺组织病理变化;免疫组化法检测NF-κB、AQP1、AQP5蛋白的表达;RT-PCR法检测病毒核酸mRNA表达。结果:与模型组相比,三仁汤组小鼠血清中CHOL、LDL-C、HDL-C无明显变化(P0.05);肺组织HE染色示肺部组织炎性浸润情况减轻;肺组织NF-κB光密度降低(P0.05);病毒核酸mRNA表达降低(P0.05)。结论:三仁汤能通过影响炎性相关的NF-κB,抑制湿热证病毒性肺炎模型的炎性反应,同时抑制病毒核酸mRNA表达,为临床治疗湿热证型病毒性肺炎提供现代药理学依据。     

甘露消毒丹对湿热证型病毒性肺炎小鼠模型的多靶点干预作用

目的探讨甘露消毒丹对湿热证型病毒性肺炎小鼠模型的多靶点干预作用。方法通过肥甘饮食、湿热环境、流感病毒感染三因素合并,构建湿热证型病毒性肺炎动物模型。随机分为模型组、甘露消毒丹组、利巴韦林组和空白组。滴鼻感染病毒2h后灌胃给药,2次/d,连续给药6d,观察并记录小鼠肛温、体重;实验结束后处死小鼠,生化法检测血清中CHOL、LDL-C、HDL-C含量;ELISA法检测血清中IL-4、TNF-α浓度;免疫组化法检测NF-κB、AQP1、AQP5蛋白的表达;HE染色观察小鼠肺组织病理变化;RT-PCR法检测病毒核酸mRNA表达。结果与模型组相比,甘露消毒丹组小鼠血清中CHOL、LDL-C、HDL-C无明显变化(P0.05);血清中IL-4水平降低(P0.05);肺组织AQP1光密度降低(P0.01);肺组织HE染色示肺部组织炎性浸润情况减轻;病毒核酸mRNA表达明显降低(P0.05)。结论甘露消毒丹对湿热型病毒性肺炎的治疗可能是通过影响炎性因子含量及炎性相关的AQP1的表达,抑制湿热证病毒性肺炎模型的炎性反应,同时抑制病毒核酸mRNA表达,为临床治疗湿热证型病毒性肺炎提供现代药理学依据。     

基于转录组学的化湿败毒方治疗流感病毒性肺炎作用机制

目的 明确化湿败毒方对甲型H1N1流感病毒致小鼠肺炎的治疗作用，基于转录组学探讨其作用机制。方法 采用甲型H1N1流感病毒滴鼻感染建立小鼠流感病毒性肺炎模型，连续给药5 d，考察小鼠一般状况、肺指数、病毒载量、肺组织病理形态、生存时间、生存时间延长率等指标，明确化湿败毒方对流感病毒性肺炎的治疗作用。采用转录组学技术检测模型组与正常组、化湿败毒方组与模型组小鼠肺组织的差异表达基因，筛选化湿败毒方治疗流感病毒性肺炎的潜在核心靶点；采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）验证化湿败毒方对核心靶点基因mRNA表达水平的影响。结果 与正常组比较，模型组小鼠肺指数及肺组织内病毒载量均明显升高（P<0.05，P<0.01）；与模型组比较，化湿败毒方高剂量组明显延长甲型流感病毒感染小鼠的生存时间（P<0.05），明显降低小鼠肺指数值（P<0.05），降低肺组织病毒载量，化湿败毒方高、中、低剂量组可明显减轻小鼠肺组织炎症、瘀血、肿胀等病变（P<0.05，P<0.01）。肺组织转录组学分析显示，化湿败毒方干预后核心基因主要富集在核转录因子-κB（NF-κB）信号通路、白细胞介素-17（IL-17）信号通路、细胞因子-细胞因子受体相互作用等通路，TNF受体相关因子6（TRAF6）、核转录因子-κB抑制因子α（NFKBIA）、趋化因子配体（CCL）2、CCL7、CXC趋化因子配体2（CXCL2）为combined score值前5的节点基因；Real-time PCR验证显示，化湿败毒方能明显下调NF-κB信号通路关键基因TRAF6、NFKBIA及趋化因子CCL2、CCL7、CXCL2 mRNA表达（P<0.05，P<0.01）。结论 化湿败毒方对流感病毒性肺炎具有治疗作用，可能通过抑制NF-κB信号通路关键节点TRAF6、NFKBIA表达，抑制趋化因子CCL2、CCL7、CXCL2的表达，减少炎症细胞的募集，降低病毒载量，发挥抗流感病毒肺炎作用。     

小儿风热清合剂（口服液）对流感病毒致小鼠病毒性肺炎的影响

目的 研究小儿风热清合剂（口服液）对流感病毒致小鼠病毒性肺炎的治疗作用。方法 将ICR小鼠按体质量随机分为对照组、模型组及小儿风热清合剂（口服液）高、中、低剂量（21.6、10.8、5.4 mL/kg）组和磷酸奥司他韦胶囊（39mg/kg）组,除对照组外,其余各组小鼠滴鼻感染甲型流感病毒鼠肺适应株FM1构建小鼠病毒性肺炎模型,测定各组小鼠体质量和肺指数;采用ELISA法检测小鼠血清中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平;采用苏木素-伊红（HE）染色考察肺组织病理变化;检测肺组织中病毒载量以及流感病毒感染致小鼠死亡的存活时间。结果 小鼠感染流感病毒后,体质量明显降低（P<0.01）,肺指数、血清中IL-6水平明显升高（P<0.01）。与模型组相比,小儿风热清合剂（口服液）组小鼠体质量明显升高（P<0.01）;肺指数明显降低（P<0.05、0.01）;肺组织、肺泡出血、水肿、肺内细支气管周围炎症等病变明显减轻;血清中IL-6水平降低（P<0.01）;肺组织病毒载量明显降低（P<0.05）;小鼠存活时间明显延长（P<0.05）。...     

珍珠母超微粉蛋白及寡肽对小鼠镇静安眠作用比较

目的比较珍珠母超微粉蛋白、寡肽对小鼠镇静安眠作用。方法利用PCPA制造小鼠失眠模型,观察小鼠的自主活动情况,ELISA法测小鼠血中ATCH含量并计算脑及脑系数。结果阳性对照组、寡肽组小鼠的自主活动次数显著降低,小鼠血中ACTH的含量增加,但脑干系数无影响。结论超微粉寡肽类成分(MCP)镇静安眠活性最强,为镇静安眠主要活性部位,调节ACTH可能是其镇静安眠机制。     

耳鸣(肾精亏损型)临床资料研究

[目的]对2007年11月至2008年11月就诊的主观性耳鸣患者246例,排除其他中医证型,主要研究肾精亏损型耳鸣患者耳鸣的临床特征,变化规律及耳鸣产生的影响等.[方法]选择肾精亏损型耳鸣患者,记录临床症状及体征,采用电测听及耳鸣匹配、听觉脑干诱发电位(ABR)等方法检查,并将资料进行统计分析.[结果]患者年龄以51～60岁最多见,其次为61～70岁.耳鸣响度的自我评分与响度匹配值之间无关联.大多数病例的耳鸣病程在一年之内.大部分患者受耳鸣困扰的程度在中度以下.ABR测试结果听力正常者占25%,右侧和左侧听神经传导至脑干功能障碍患者分别占13%和19%,双侧听神经传导功能障碍占16%.[结论]临床耳鸣患者多数为肾精亏损型,年龄以51～60岁最多见,男女比例相当,大部分患者听神经传导障碍和脑干功能障碍,高音调耳鸣患者居多.     

《老老恒言》论老年养生

简要论述了《老老恒言》中有关老年养生的思想和方法 ,认为饮食以调理脾胃为要 ,应注意饮食有节、五味调和、清淡为补 ;起居以养静为要 ,应注意调顺四时、起居有常、静养与导引相结合 ;养性以安命为要 ,应注意清心寡欲、修心养性     

辨证与辨病相结合辨治乳腺增生病

探讨乳腺增生病中医辨证分型的客观依据,泌免疫变化与中医辨证分型的相关性进行了总结和研究,医药辨治乳腺增生病的新思路。对乳腺增生病的红外光扫描诊断、病理分类、内分以期能够使微观医学与宏观辨证相结合,以开拓中医药辨治乳腺增生病的新思路。     

往来寒热证58例辨证论治探讨

收集我院门诊自2000年10月至2003年9月接诊的往来寒热证患者58例,实验室检查排除疟疾(血涂片均未找见疟原虫),分别从少阳辨证论治33例,从膜原辨证论治25例,疗效满意。     

中药产业竞争力提升战略研究

本文运用了竞争力理论与战略理论，分析了中药产业竞争力提升的环境与条件，提出了提升中药产业竞争力的三大战略目标、三大总体战略、四条战略举措及三个实施阶段与重点任务。     

中医“治未病”理论的研究

治未病是中医学重要的防治思想,即预防疾病的发生和发展,防惠于未然的预防学思想,即未病之前,防止疾病的发生;已病之后,防止疾病的传变,强调以“预防为主”。本文从治未病的渊源;治未病思想的实质内容;“治未病”理论的应用;“治未病”临床研究进展等几方面解释治未病。     

咳嗽六经辨治初探

六经皆有咳嗽,寒热皆可致咳,治疗上不可拘于一理一方,当穷究其机,辨证施治,方能事半功倍。以六经辨证为纲,分析《伤寒杂病论》对咳嗽的有关论述,以期提高咳嗽的临床疗效。     

丁香苦苷不同给药途径的药物动力学研究

目的:研究并比较丁香苦苷单体两种给药途径在家兔体内的药物动力学过程,考察丁香苦苷单体口服后的绝对生物利用度。方法:家兔静脉注射丁香苦苷注射液和灌胃给予丁香苦苷水溶液,采集血样,固相萃取小柱活化方法处理血浆后高效液相色谱法测定丁香苦苷血浆浓度,采用药动学软件3P97进行数据处理,确定药动学参数。结果:丁香苦苷静脉给药后在体内符合二室模型分布,其主要药动学参数分别如下:T1/2α为2.41min,T1/2β为15.38min。灌胃给药后丁香苦苷的药动学行为符合一级吸收二室模型,Cmax为17.91min,T1/2(α)为9.642min,T1/2(β)31.748min。绝对生物利用度为35.9%。结论:丁香苦苷单体经口服和静脉两种给药途径给药后,吸收和消除均较快。     

老年股骨颈骨折术后的护理

股骨颈骨折是发生于老年人的常见骨科病，以女性多见。因老年人骨质疏松，有机质少，应变力差，所以只需较小扭转暴力就能引起骨折。骨折后，由于骨折部位血供差，骨折不愈合的可能性大，加之患者年老体弱、长期卧床，易发生危及生命的并发症，因此恰当的护理非常重要，现将护理体会介绍如下。