不同浓度的葡萄糖对SW480肿瘤细胞分泌IGF-1、TGF-β1的影响

目的研究不同浓度葡萄糖对SW480肿瘤细胞胰岛素样生长因子1（IGF—1）、转化生长因子β1（TGF-β1）表达的影响,探讨糖尿病发生结直肠癌的相关因素。方法体外常规培养SW480肿瘤细胞。根据所用培养液外加葡萄糖浓度的不同,将实验所用细胞共分6组：0组（对照组）为RPMI1640培养液;1组为RPMI1640培养液＋5mmol／L葡萄糖;2组为RPMI1640培养液＋10mmol／L葡萄糖;3组为RPMI1640培养液＋15mmol／L葡萄糖;4组为RPMI1640培养液＋20mmol／L葡萄糖;5组为RPMI1640培养液＋25mmol／L葡萄糖。每组设3个复孔,置于37℃、5％CO2饱和湿度的培养箱内培养48h,培养结束后收集细胞培养上清,ELISA法检测IGF-1、TGF—β1的浓度。结果①不同浓度的葡萄糖组IGF-1的表达无显著性差异（F=0．192,P均〉0．05）。②4组、5组TGF—β1的浓度明显高于0组,有显著性差异（F=26．036,P均〈0．01）。结论葡萄糖不能够上调SW480肿瘤细胞IGF-1的表达,但高浓度的葡萄糖能够上调SW480肿瘤细胞TGF—β1的表达。     

半边旗二萜类化合物5F对人翼状胬肉成纤维细胞增殖的抑制作用

目的：观察中药半边旗二萜类化合物5F对体外培养人翼状胬肉成纤维细胞（human pterygium fibroblasts,HPF)增殖的影响。方法：用噻唑蓝比色法（MTT）观察不同浓度梯度，（4、8、16、32、64、128μg/ml)的5F在不同作用时间内（24，48，72，96小时）对HPF增殖的抑制作用。结果：用药24小时浓度16μg/ml开始明显抑制（P＜0．05），48小时8μg/ml抑制作用更强（P＜0．01），50％抑制率（IC50）浓度32μg/ml，同一浓度各时间组抑制率（IR）与对照组更强（P＜0．01），50％抑制率（IC50）浓度32μg/ml，同一浓度各时间组抑制率（IR）与对照组比较，在4μg/ml作用24、48及72小时IR与对照组比较差异均无显著性（P＞0．05），持续作用96小时差异有显著性（P＜0．01）；16μg/ml以上24－96小时各时间组IR与对照组比较差异均有显著性（P＜0．01），结论：体外培养HPF具较强增殖能力，5F对HPE的增殖具明显抑制作用。并与用药剂量和持续时间有相关性。     

肾安提取液对3T3细胞增殖及α-肌动蛋白表达影响的实验研究

目的：从细胞学方面探讨肾安提取液阻缓肾纤雏化的作用及其机理。方法：采用3T3细胞系作为成纤维细胞模型，以碱性成纤维细胞因子（bFGF）为刺激因子，分别进行细胞增殖和免疫组化实验。结果：肾安提取液对3T3细胞的抑制作用呈显著的剂量依赖关系；48h6．25mg／ml，12．5mg／ml，25mg／ml组、72h3．12mg／ml，6．25mg／ml，12．5mg／ml，25mg／ml组与对照组对细胞增殖的影响比较，差异有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）；其中25mg／ml组72h与48h比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；但与尿毒清组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。肾安提取液对bFGF刺激的α-肌动蛋白（α—actin）表达的抑制作用随剂量增加而增强。结论：提示肾安提取液可能通过抑制bFGF刺激的成纤维细胞的增殖及α—actin表达，从而减缓肾纤维化。     

苦参碱对体外培养人翼状胬肉成纤维细胞增殖的影响

目的观察苦参碱(matrine)对体外培养人翼状胬肉成纤维细胞(human pterygium fibrob-lasts,HPF)增殖的影响。方法用噻唑蓝比色法(MTT)观察不同浓度(0.1、0.2、0.4、0.8、1.6、3.2、6.4、12.8 mg/ml)的苦参碱在不同作用时间(24、48小时)对HPF增殖的影响。结果0.4~12.8 mg/ml浓度范围内,作用24~48小时,苦参碱呈剂量依赖性的抑制HPF增生(P<0.05)。结论苦参碱对HPF的增殖有明显抑制作用,并与用药剂量和持续时间有关。     

不同浓度的葡萄糖对SW480肿瘤细胞分泌IGF-1、TGF-β_1的影响

目的研究不同浓度葡萄糖对SW480肿瘤细胞胰岛素样生长因子1(IGF-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响,探讨糖尿病发生结直肠癌的相关因素。方法体外常规培养SW480肿瘤细胞。根据所用培养液外加葡萄糖浓度的不同,将实验所用细胞共分6组:0组(对照组)为RPMI1640培养液;1组为RPMI1640培养液+5 mmol/L葡萄糖;2组为RPMI1640培养液+10 mmol/L葡萄糖;3组为RPMI1640培养液+15 mmol/L葡萄糖;4组为RPMI1640培养液+20 mmol/L葡萄糖;5组为RPMI1640培养液+25 mmol/L葡萄糖。每组设3个复孔,置于37℃、5%CO2饱和湿度的培养箱内培养48 h,培养结束后收集细胞培养上清,ELISA法检测IGF-1、TGF-β1的浓度。结果①不同浓度的葡萄糖组IGF-1的表达无显著性差异(F=0.192,P均0.05)。②4组、5组TGF-β1的浓度明显高于0组,有显著性差异(F=26.036,P均0.01)。结论葡萄糖不能够上调SW480肿瘤细胞IGF-1的表达,但高浓度的葡萄糖能够上调SW480肿瘤细胞TGF-β1的表达。     

玉竹对体外培养乳鼠心肌细胞缺氧缺糖性损伤的保护作用

本文运用血清药理学方法,观察了玉竹对体外培养乳鼠心肌细胞缺氧缺糖性损伤的保护作用,报告如下。1 实验材料 玉竹:玉竹水煎醇沉液,文火浓缩成2g/ml生药浓度,备用。RPMI1640培养基;每1000ml培养液含日产1640粉10.4g,谷胺酰氨0.292g,Hepes6.02g,NaH-     

铁牛七抗肿瘤作用的实验研究

铁牛七水提浸膏对小鼠移植瘤：S_180（多形细胞性肉瘤）、H_22（肝细胞瘤）和S_37（未分化肉瘤）有明显抑制作用。在剂量0．06g／kg和0．12g／kg，对S_180、H_22及S_37抑制作用明显。对S_37瘤细胞生长抑制率达80％；体外抑瘤实验结果对人肝癌（Ca7721）0．1mg／20μl杀伤率为100％，对胃癌（Ca7901）0．1mg／20μl杀伤率为100％，对食管癌（E_Ca－109）浓度为1．1mg／20μl，0．05mg／20μl杀伤率为100％，且杀伤率与剂量呈线性关系。     

小檗碱抑制体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞迁移能力的机制研究

目的:探讨小檗碱抑制体外培养翼状胬肉成纤维细胞迁移的药理机制。方法:通过培养临床获取的翼状胬肉组织获得翼状胬肉成纤维细胞,采用终浓度0、20、40、80μmol/L的小檗碱对细胞进行处理,检测细胞迁移相关因子及AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)途径关键因子(MMP-1、MMP-2、MMP-9、α-SMA、AMPK、ACC)mRNA及蛋白表达水平变化。结果:随着小檗碱终浓度的提高,AMPK、ACC mRNA表达水平及蛋白表达水平上调;细胞迁移能力降低;MMP-1、MMP-2、MMP-9及α-SMA等因子mRNA表达水平及蛋白表达水平显著降低。结论:小檗碱可通过激活AMPK信号通路抑制体外培养翼状胬肉细胞的迁移能力。     

耐青霉素淋球菌对10种中草药敏感性实验研究

目的：探讨10种中草药体外对耐青霉素淋球菌（PPNG）的抑制作用。方法：采用平板打孔法、微量稀释法检测中草药对耐青霉素淋球菌的抑菌效果。结果：生大蒜汁抗菌效能强，其最低抑菌浓度（MIC）为0．625mg／ml；黄连、千里光、七叶一枝花也有较强的抑菌作用，其MIC为1．25mg／ml；苦参、一口钟、地榆、黄芩抑菌作用较好，其MIC为2．50mg／ml；金银花、马齿苋抑菌作用较低，其MIC为5．00～10．00mg／ml。对11株耐青霉素淋球菌（PPNG）和三株标准淋球菌作抑菌作用比较，发现中草药对淋球菌标准株与PPNG株的抑菌效能基本一致。结论：耐青霉素淋球菌（PPNG）株对敏感的中草药仍然有效果，中草药具有治疗淋球菌所致的感染，但需进行药物配剂与临床研究。     

一枝黄花煎剂及其提取物体外抑菌作用的初步研究

目的：观察一枝黄花煎剂及其提取物的抗菌试验效果。方法：采用微量琼脂稀释法在体外分别测定一枝黄花煎剂及其提取物（总皂苷、总黄酮）对革兰阳性菌如金黄色葡萄球菌（Sa）标准菌株及Sa临床菌株、枯草杆菌和革兰阴性菌如大肠埃希菌、福氏志贺菌、伤寒沙门菌、奇异变形杆菌和铜绿假单胞菌标准菌株的抗菌效应。结果：一枝黄花总皂苷（浓度≤16mg／ml）对试验菌均未显示出抑菌作用；一枝黄花煎荆对金黄色葡萄球菌有较强的抑制作用，但对其他试验菌株的抑制作用很弱（MIC≥100mg／ml生药浓度）；一枝黄花总黄酮对试验菌株均有不同程度的抗菌活性（MIC范围为0．25mg／ml-4．0mg／ml）。一枝黄花煎剂、一枝黄花总黄酮对Sa标准菌袜的最低抑菌浓度（MIC）分别为12．5mg／ml和0．5mg／ml；对15株Sa临床菌株的MIC范围分别为6．2．5mg／ml-50．0mg／ml和0．25mg／ml～4．0mg／ml，MIC均数分别为22．083mg／ml和1．283mg／nd，MIC50分别为12．5mg／ml和1．0mg／ml，MIC90分别为50．0mg／ml和2．0mg／ml，经统计学处理两者差异有显著性（t=5．252，P〈0．01）。结论：一枝黄花具有较强的抗菌作用，不同提取方法的抗菌效果存在一定的差异，以黄酮类化舍物抗菌效果最好，且对革兰阳性菌的抑菌作用比对革兰阴性菌的抑菌作用要强。     

黄芪多糖、桂皮醛、川芎嗪对实验性糖尿病大鼠创面成纤维细胞增殖作用的影响

目的:探讨黄芪多糖(astragalus polysaccharides,AP)、桂皮醛(japanese cinnamon bark aldehyde,JA)、川芎嗪(ligustrazine,LZ)对实验性糖尿病大鼠创面成纤维细胞增殖的影响.方法:利用MTT法观察不同浓度黄芪多糖、桂皮醛、川芎嗪单体及药物有效浓度之间的不同配伍,在不同时间点上对实验性糖尿病大鼠创面成纤维细胞增殖的影响.结果:发现黄芪多糖浓度为625μg/ml、2.44μg/ml,川芎嗪浓度为50 0μg/ml、125μg/ml时可抑制体外培养成纤维细胞的生长,而桂皮醛浓度在2.8μg/ml、1 .4μg/ml时无明显促进或抑制作用.黄芪多糖浓度为39μg/ml、9.75μg/ml、2.44μg/m l,桂皮醛浓度为22.4μg/ml、11.2μg/ml、5.6μg/ml,川芎嗪浓度为31μg/ml、7.75 μg/ml、1.94μg/ml时可促进成纤维细胞的增殖,并且其增殖作用随时间的延长而增强. 黄芪多糖、桂皮醛、川芎嗪三种单体有效浓度之间配伍,在黄芪多糖和川芎嗪的配伍浓度为 187μg/ml、46.75μg/ml、11.69μg/ml,川芎嗪和桂皮醛的配伍浓度为53.4μg/ml、18 .95μg/ml、7.54μg/ml,黄芪多糖和桂皮醛的配伍浓度为178.4μg/ml、50.2μg/ml、15.35μg/ml,黄芪多糖、桂皮醛和川芎嗪三者配伍浓度为209.4μg/ml、57.95μg/ml、 17.29μg/ml时可促进成纤维细胞的增殖,并且其增殖作用随时间的延长而增强.结论:黄芪多糖、桂皮醛和川芎嗪三种单体联合应用时,对实验性糖尿病大鼠创面成纤维细胞增殖作用优于黄芪多糖、桂皮醛和川芎嗪单独应用(P<0.01)及两种单体联合应用(P<0.05).     

血浆盐酸二甲双胍的检测及药物动力学研究

目的建立高效液相色谱法测定人血浆中盐酸二甲双胍浓度的方法。方法血浆样品用10％高氯酸沉淀血浆蛋白后,以苯乙双胍为内标物,高速离心后取上清液进行分析。色谱柱为lunaC8（4．3mm×280mm,6μm）,柱温为37℃,流动相为乙腈一磷酸盐缓冲液治（含0．1％十二烷基硫酸钠和0．1％三乙胺,pH6．5）-乙腈（62：38）流速为0．9ml／min,检测波长：287nm。结果盐酸二甲双胍的浓度在0．08～6．00mg／L范围内线性关系良好,回归方程为Y=0．7002C＋0．0008（r=O．9698）,日内和日间精密度（RsD）均小于10％;检测限为0．6ng;检出浓度为45ng／ml～1150ng／ml。结论本方法操作简便,适用于盐酸二甲双胍血药浓度的测定及药物动力学研究。     

葛根素对人胚肺成纤维细胞增殖及细胞外基质合成的影响

目的观察葛根素对体外培养人胚肺成纤维细胞增生和凋亡以及细胞外基质形成的影响。方法用0～400gg／mL浓度的葛根素作用于体外培养的人胚肺成纤维细胞，24～96h后观察不同浓度的葛根素对成纤维细胞增殖活性及其功能的影响。MTT法观察成纤维细胞的生长活性，天狼猩红染色观察胶原生成情况。流式细胞仪测定细胞周期时相变化。结果80～400gg／mL浓度作用下24～72h范围内，葛根素可剂量和时间依赖性地抑制人胚肺成纤维细胞的增生（P〈0．05）。流式细胞仪检测结果发现，随着浓度的增大，G0／G1期细胞百分比逐渐上升，S期细胞百分比逐渐下降，说明细胞阻滞于G0／G1期。结论葛根素可在一定程度上抑制人胚肺成纤维细胞的增生，并诱导其凋亡，降低胶原的合成，作用呈时间和剂量依赖性。     

家兔眼球组织中高三尖杉酯碱的高效液相色谱分析

高三尖杉酯碱（ｈｏｍｏｈａｒｉｎｇｔｏｎｉｎｅ，ＨＨ）是一种有效的抗急性非淋巴细胞白血病药物。研究发现ＨＨ可抑制体外培养的人眼翼状胬肉成纤维细胞的生长，对增殖性玻璃体视网膜病变（ＰＶＲ）可能具有防治作用。本研究试图建立一种测定眼球组织ＨＨ含量的方法，...     

羟基喜树碱对人胚肺成纤维细胞HFLl生长的影响

目的观察羟基喜树碱（HCPT）对体外培养的人胚秭成纤维细胞（HFLI）的增殖抑制和促凋亡作用。,方法采川四甲块偶氮唑蓝法（MTT）检测不同浓度的HCVF对HFI．1细胞作用24h、48h、72h的增殖抑制效果,计算细胞生长抑制率和半数抑制量（IC50）,确定HCPT抑制HFL1细胞增殖的最佳给药浓度和最佳作用时间;姬姆萨染色观察细胞形念学变化;流式细胞仪分析细胞周期;琼脂糖凝胶电泳观察捌亡细胞的DNA梯度。对所得数据用SPSS15．0软件进行统计分析。结果HCPT对HFL1细胞增殖有明显的抑制作用,在0．008-32mg／L范围内呈时间和剂量依赖性;与对照组比较,各实验组24h、48h、72hA值及细胞生长抑制率差异有统计学意义（P〈0．05,P〈0．01）HCPT作用HFL1细胞48h时的IC50为0．466mg／L,故确定48h、0．5mg／L为最佳作用时间和最佳给药浓度;0．5mg／I．HCPT作用HFL1细胞24h后,Cu,／G．期细胞所占比例为（50．46±3．91）％;作用72h后,G0／G．期细胞所占比例为（88．19±2．13）％,怀对照组比较,其余各组各期细胞所占比例差异均有统计学意义（P〈0．05,P〈0．01）;姬姆萨染色显示,HFLI细胞形态发生明显变化;琼脂糖凝胶电泳可见明显的DNA梯度带形成。结论HCVF对体外培养的HLI细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用,可能是一种潜在的抗肺纤维化的药物。     

6种天然药物对乳酸杆菌体外抑菌作用的研究

目的研究6种天然药物对乳酸杆菌体外的抑菌作用。方法以乳酸杆菌作为实验菌株，测定五倍子、大黄、黄连、黄芩、三七和川芎6种天然药物的最小抑菌浓度（MIC）。结果大黄MIC4．0mg/ml，五倍子和黄连均为8．0mg/ml。而黄芩、川芎和三七对乳酸杆菌的生长无明显的抑制作用。结论五倍子、黄连和大黄对乳酸杆菌的生长均有抑制作用，而川芎、黄芩和三七对乳酸杆菌无明显的抑制作用。     

苦参碱对人恶性黑素瘤细胞株侵袭能力及乙酰肝素酶mRNA表达的抑制作用

目的：探讨苦参碱对人恶性黑素瘤细胞株A375的侵袭能力及其乙酰肝素酶mRNA表达的影响作用。方法：A375细胞体外培养，以0．125mg／ml、0．25mg／ml和0．5mg／ml不同浓度苦参碱进行预处理48h后，采用半定量RT—PCR检测各组培养细胞HPSEmRNA表达的变化，细胞黏附实验检测细胞黏附能力的改变，Matrigel侵袭实验检测细胞侵袭能力的变化。结果：和对照组比较，各浓度苦参碱处理组A375培养细胞HPSEmRNA的表达和细胞黏附侵袭能力均受到明显的抑制（P〈0．01），其抑制效应与药物的浓度呈正相关（组问比较P〈0．01）。结沦：苦参碱可能通过下调A375细胞HPSEmRNA的表达而显著抑制细胞的黏附侵袭能力，其抑制作用呈剂量依赖性。     

VEGF、PCNA、P21、P53在翼状胬肉中的表达

目的研究血管内皮生长因子（VEGF）、增殖细胞核抗原（PCNA）、P21蛋白和P53蛋白在翼状胬肉中表达的。方法免疫组化法检测50例进行期翼状胬肉标本（翼状胬肉组）和50例正常结膜标本（正常对照组）中VEGF、PCNA、P21蛋白、P53蛋白的染色强度及染色阳性率,以免疫组化评分（IHS）表示免疫组化表达的强弱。对结果进行比较及统计学分析。结果VEGFIHS数值：翼状胬肉组4．71±1．74,正常对照组1．91±0．71（P=0．001）。PCNAIHS数值：翼状胬肉组6．24±1．32,正常对照组2．11±0．83（P=0．001）。P53蛋白IHS数值：翼状胬肉组5．21±1．02,正常对照组2．01±0．63（P=0．001）。P21蛋白IHS数值：翼状胬肉组2．14＋0．72,正常对照组6．01±1．11（P=0．001）。结论VEGF、PCNA、P21蛋白和P53蛋白均在翼状胬肉中有异常表达,VEGF、PCNA和P53蛋白为高表达,P21为低表达。     

应用体外抑菌法筛选中华大蟾蜍抗结核有效成分的研究

目的验证中华大蟾蜍具有抗结核活性，筛选抗结核活性成分。方法对中华大蟾蜍水提物进行葡聚糖凝胶分子筛分离和反相高效液相层析法（RPLC）分离，并采用微孔板Alamarblue法将分离所得12组分进行体外抑菌实验研究。结果第1、6、10组分表现出对供试结核分枝杆菌的明显抑制作用，其最低抑菌浓度（minimal inhibitory concentration，MIC）分别为339．98mg／ml、20．00mg／ml、2．95mg／ml。结论中华大蟾蜍含有抑制结核分枝杆菌的活性成分，该有效成分分子量接近14KD，并表现出弱极性的特征。     

尿路清对临床耐药菌株Uu的药敏实验

目的：探索中药复方对Uu感染的非淋菌性尿道炎（NGU）的作用机理,从多角度为中医药治疗本病提供理论依据。方法：63个Uu临床分离株采用肉汤稀释法判定临床耐红霉素和四环素（MIC≥16μg／ml,参照美国国家临床实验室标准委员会1995年标准）;经三次传代成纯培养后接种于96孔板小孔中,药液倍比稀释成250mg／ml～0．48mg／ml,37℃培养,加药组以72h后仍不出现培养基由黄→红色变化的最小药物浓度为该药的最小抑菌浓度（MIC）。结果：尿路清对63株Uu临床株MIC范围为0．48mg／ml～15．36rag／ml,MIC50≤1．95mg／ml．MIC90≤3．91mg／ml,Uu临床株对尿路清的敏感性比对四环素的敏感性高的多（Х^2=18．38,P〈0．01）,Uu临床株对尿路清的敏感性与对红霉素的敏感性之间无明显联系（Х^2=1．85,P〈0．05）。结论：中药尿路清对63株耐药（四环素、红霉素）菌株Uu显示出了较强的体外抑菌作用,值得进一步研究。