2013年《中国药学杂志》继教栏目部分试题答案

第1期:A;A、B;B;D;A、E;C;D;E;E;C第3期:B;A、E;E;缺血预处理;心血管;靶分子;植物雌激素;注射液;进行比较;避免发生第5期:C;E;E;A;E;改性;亲脂性;减少钙;消化道;根除第7期:多晶型现象;溶解度,溶出速率,体内吸收;基因多态性;仿垂体;吉非替尼;生物学数据;纤维蛋白原;诱导,抑制;预防;近30%第9期:外排;相互作用;P-gp;不同性别;差异大;溶解性;第一责任;较高,较高;长,弱,少;我国第11期:质量源于设计;分泌,进入;光活性;最初,最轻;布洛芬,吲哚美辛;降低;减少,增加;肥胖,糖尿病;信号转移;计划、实施、检查、处理     

南烛化学成分研究

对药食两用植物南烛的化学成分进行了研究。利用大孔吸附树脂、反相硅胶柱色谱和制备型HPLC等色谱技术从南烛枝叶中分离得到11个糖苷类化合物,运用质谱、核磁等波谱技术鉴定其结构分别为10-O-反式对羟基桂皮酰-6α-羟基-二氢水晶兰苷（10-O-trans-p-coumaroyl-6α-hydroxyl-dihydromonotropein,1）,10-O-顺式对羟基桂皮酰-6α-羟基-二氢水晶兰苷（10-O-cis-p-coumaroyl-6α-hydroxyl-dihydromonotropein,2）,乌饭树苷（vaccinoside,3）,10-O-顺式对羟基桂皮酰-水晶兰苷（10-O-cis-p-coumaroyl monotropein,4）,异落叶松脂素-9-O-木糖苷（isolariciresinol-9-O-β-D-xyloside,5）,鸢尾苷（tectoridin,6）,vicenin-3（7）,槲皮素-3-O-鼠李糖苷（quercetin-3-O-α-L-rhamnoside,8）,槲皮素-3-O-阿拉伯糖苷（quercetin-3-O-α-L-arabinopyranoside,9）,槲皮素-3-O-半乳糖苷（quercetin-3-O-β-D-galactopyranoside,10）,槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷（quercetin-3-O-β-D-glucuronide,11）。其中化合物 1和2为新化合物 ,4,6,7为首次从该属植物中分离得到的已知化合物。     

合欢花乙酸乙酯部位化学成分研究

该文对合欢Albizzia julibrissin干燥花序的乙酸乙酯萃取部位进行化学成分研究,采用硅胶,Sephadex LH-20,MCI GEL CHP-20P等柱色谱技术分离纯化,利用波谱数据 （¹H,¹³C-NMR,MS） 进行结构鉴定,共分离和鉴定29个化合物,分别为8-hydroxy-2,6-dimethyl-2E,6Z-octadienoic acid （1）,8-O-formyl-2,6-dimethyl-2E,6Z-octadienoic acid （1a）,8-hydroxy-2,6-dimethyl-2E,6E-octadienoic acid （2）,8-O-formyl-2,6-dimethyl-2E,6E-octadienoic acid （2a）,（2E,6S）-2,6-二甲基-6-O-β-D-吡喃木糖基-2,7-辛二烯酸 （3）,clovan-2β,9α-diol （4）,2β-O-formyl-clovan-9α-ol （4a）,2β,9α-O-diformyl-clovan （4b）,吐叶醇 （5）,（6S,9R）-roseoside （6）,香草醛 （7）,4-O-乙基没食子酸 （8）,3-乙氧基-4-羟基苯甲酸 （9）,对-羟基苯甲醛 （10）,没食子酸 （11）,原儿茶酸 （12）,硬脂酸 （13）,软脂酸 （14）,2,3-dihydroxypropyl hexadecanoate （15）,亚油酸 （16）,东莨菪内酯 （17）,3-吲哚甲醛 （18）,2-呋喃甲酸 （19）,5-羟甲基糠醛 （20）,（22E,24R）-5α,8α-epidioxy-ergosta-6,22-dien-3β-ol （21）,（22E,24R）-5α,8α-epidioxy-ergosta-6,9,22-trien-3β-ol （22）,（+）-lariciresinol 9’-stearate （23）,芒柄花素 （24） 和尿苷 （25）。其中,化合物 1a,2a,4a,4b 为分离过程中产生新的人工产物,其他25个化合物均为首次从该植物中分离得到。     

开心散对APP/PS1小鼠学习记忆能力和突触功能的机制

目的 探讨开心散对APP/PS1小鼠学习记忆和突触功能的潜在保护机制。方法 将60只APP/PS1小鼠随机分为模型组,多奈哌齐（2 mg·kg^-1·d^-1）组,开心散低、中、高剂量（0.7,1.4,2.8 g·kg^-1·d^-1）组,同月龄同窝野生型小鼠为正常组,每组12只。连续灌胃给药2个月后进行Morris水迷宫实验。采用透射电镜观察海马神经元超微结构。采用比色法检测血清乙酰胆碱（ACh）,乙酰胆碱转移酶（ChAT）,乙酰胆碱酯酶（AChE）含量和海马活性氧（ROS）,丙二醛（MDA）,超氧化物歧化酶（SOD）,谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平。采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real time-PCR）检测海马脑源性神经营养因子（BDNF）,β-神经生长因子（NGFB）,discs大同源物（DLG）2,DLG4,突触素（SYP）mRNA的表达。结果 与正常组比较,模型组小鼠逃避潜伏期明显延长,穿越平台次数,目标象限停留时间显著减少（P<0.01）,线粒体数量明显减少,形态各异,排列不规则,部分线粒体明显肿胀,变形,线粒体嵴断裂,胞浆溶解,呈空泡状,细胞碎片较多,血清ACh,ChAT含量显著降低,AChE水平显著升高（P<0.01）,海马ROS,MDA明显升高（P<0.05,P<0.01）,SOD,GSH-Px显著下降（P<0.01）,海马BDNF,NGFB,DLG2,DLG4,SYP mRNA水平明显下降（P<0.05,P<0.01）。与模型组比较,多奈哌齐组和开心散中、高剂量组逃避潜伏期明显缩短,穿越平台次数明显增加,目标象限停留时间明显延长（P<0.05,P<0.01）,线粒体损伤改善,形态规则,多呈椭圆形,线粒体肿胀、变形减少,线粒体嵴清晰,血清ACh,ChAT水平明显升高（P<0.05,P<0.01）,AChE活性明显下降（P<0.05）,海马ROS水平明显降低（P<0.05,P<0.01）,MDA水平明显降低（P<0.05）,SOD,GSH-Px活性明显增加,海马BDNF,NGFB,DLG2,DLG4,SYP mRNA水平明显升高（P<0.05,P<0.01）,开心散低剂量组目标象限停留时间明显延长,海马SYP mRNA水平明显增加（P<0.05）,各组间的游泳速度比较,差异无统计学意义。结论 开心散通过提高突触可塑性相关蛋白表达、减轻海马神经元超微结构损伤、抗氧化应激、调节胆碱能神经递质,改善APP/PS1小鼠学习记忆能力,从而发挥神经保护作用。     

基于Wnt/β-catenin调控EMT探讨益肾化瘀方对糖尿病肾病大鼠肾小球足细胞损伤的干预机制

目的 探讨基于Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）调控上皮-间充质细胞转化（EMT）途径益肾化瘀方对糖尿病肾病（DN）肾小球足细胞损伤的干预机制。方法 60只SD大鼠分为正常组,模型组,Wnt-C59组（Wnt/β-catenin通路抑制剂,0.03 g·kg^-1）,低、中、高剂量益肾化瘀方组（8,16,32 g·kg^-1）,12周后,比较各组一般体征变化及血肌酐（SCr）,尿素氮（BUN）,肾指数,尿蛋白量,血糖,肾脏病理改变,足细胞和肾小球基底膜损伤情况及足细胞损伤相关蛋白［去氧肾上腺素（nephrin）,肾小球蛋白（synaptopodin）］,Wnt/β-catenin通路相关蛋白（Wnt1,β-catenin）,足细胞EMT相关蛋白［α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）,E-钙黏蛋白（E-cadherin）］表达水平。结果 与正常组比较,模型组肾组织出现明显病理改变,肾小球系膜基质弥漫性增厚,足突融合较为严重,SCr,BUN,肾指数,尿蛋白量,血糖及Wnt1,β-catenin,α-SMA表达水平明显升高（P<0.05）,nephrin,synaptopodin,E-cadherin表达水平明显下降（P<0.05）;与模型组比较,各干预组SCr,BUN,肾指数,尿蛋白量,血糖及Wnt1,β-catenin,α-SMA表达水平明显下降（P<0.05）,nephrin,synaptopodin,E-cadherin表达水平明显升高（P<0.05）;各干预组中,高剂量益肾化瘀方组对于上述指标的改善程度明显优于低、中剂量益肾化瘀方组（P<0.05）,与Wnt-C59组比较无显著差异。结论 益肾化瘀方通过抑制Wnt/β-catenin通路阻止足细胞EMT,从而修复DN大鼠肾小球足细胞损伤。     

桂花果实的化学成分研究

采用硅胶、Sephadex LH-20等多种材料进行分离纯化,通过理化方法和波谱分析进行结构鉴定,从桂花果实醇提溶液的乙酸乙酯萃取部分,分离并鉴定了23个化合物,分别为尼克酰胺（1）,D-阿洛醇（2）,5-羟甲基-2-呋喃甲醛（3）,乙酰氧基齐墩果酸（4）,苯甲酸（5）,麦角甾-7,22-二烯-3-酮（6）,β-谷甾醇（7）,borreriagenin（8）,麦角甾-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇（9）,C-veratroylglycol（10）,甲基-2-O-β-吡喃葡糖基苯甲酸（11）,3’,7-二羟基-4’-甲氧基异黄酮（12）,7-羟基香豆素（13）,咖啡酸甲酯（14）,齐墩果酸（15）,（-）-襄五脂素（16）,莳萝油脑（17）,3β,5α,9α-三羟基-麦角甾-7,22-二烯-6-酮（18）,2α-羟基齐墩果酸（19）,桦木酸（20）,白桦脂醇（21）,3,3’-Bisdemethylpinoresinol（22）,羽扇豆醇（23）。所有化合物在桂花果实中均为首次分离;除化合物 4,7,15,19,23外,其余化合物在此种植物中为首次分离。     

PLGA-吉西他滨缓释微球在荷胰腺癌裸鼠体内的药动学研究

 目的 研究PLGA（乳酸-羟基乙酸共聚物）-吉西他滨缓释微球在荷胰腺癌裸鼠体内的药动学特点,为该药的临床合理应用提供理论和实验依据。方法 对荷胰腺癌裸鼠分别进行PLGA-吉西他滨缓释微球间质化疗（A组,8.64 mg·kg-1）,吉西他滨全身化疗（B组,8.64 mg·kg-1）和瘤体内给药化疗（C组,8.64 mg·kg-1）后,采集不同时间静脉血及恶性肿瘤、肝脏和肾脏组织,应用HPLC测定血浆和组织中的药物浓度,WinNolin4.0.1药动学软件计算主要药动学参数,t检验进行统计学分析。结果 血浆中A,B,C 3组的ρ_max分别为（0.18±0.06）,（1.765±0.329）,（0.127±0.042）mg·L-1,A组与B组相比,P<0.05,t1/2分别为（120±10.6）,（4.28±1.07）,（6.32±1.25）h, tmax分别为（72±2.5）,（0.33±0.09）,（0.50±0.21）h,MRT分别为（56.8±10.9）,（0.43±0.14）,（0.19±0.04）h,AUC分别为（10.2±2.7）,（0.13±0.03）,（0.56±0.18）mg·h·L-1;肿瘤组织中A、B、C 3组的ρ_max分别为（1.329±0.381）,（0.462±0.150）,（0.753±0.166）mg·L-1,A组与B、C组相比,P<0.05,t1/2分别为（97.39±8.93）,（5.97±1.65）,（2.15±0.58）h,tmax分别为（24±3.2）,（4.0±1.2）,（0.00±0.02）h,MRT分别为（399.8±20.8）,（126.9±15.4）,（117.8±10.7）h,AUC分别为（383.7±25.2）,（56.83±6.73）,（71.60±18.52）mg·h·L-1;肝脏中A、B、C 3组的ρ_max分别为（0.734±0.152）,（0.578±0.083）,（0.85±0.19）mg·L-1,A组与B、C组相比,P>0.05,tmax分别为（72±6.2）,（24±3.9）,（72±4.5）h,MRT分别为（520.5±20.2）,（111.7±19.4）,（112.9±9.6）h,AUC分别为（1 325.9±86.5）,（216.4±32.6）,（108.8±29.1）mg·h·L-1;肾脏组织中A、B、C 3组的ρ_max分别为（0.55±0.16）,（0.458±0.137）,（0.687±0.232）mg·L-1,A组与B、C组相比,P>0.05,tmax分别为（2.0±0.6）,（8.0±2.3）,（120±10.4）h,MRT分别为（462.1±28.6）,（111.1±20.1）,（119.6±18.6）h,AUC分别为（378.1±38.5）,（29.42±10.64）,（97.57±16.72）μg·h·mL-1。结论 PLGA-吉西他滨缓释微球间质化疗能够显著提高肿瘤局部的药物浓度,延长药物作用时间,减少化疗药物的全身毒副作用。     

离子色谱法测定栀子中Cl-, Br-, NO3-, SO42-, PO43-5种阴离子的含量

目的: 建立一种同时测定中药栀子药材中Cl^-,Br^-,NO₃^-,SO₄^2-,PO₄^3-阴离子的含量测定方法。 方法: 采用离子色谱法,IonPac AS11-HC阴离子色谱柱,氢氧化钾梯度淋洗,电导检测栀子中5种无机阴离子。 结果: Cl^-,Br^-,NO₃^-,SO₄^2-,PO₄^3-的线性范围良好,加样回收率介于97%~102%,栀子中Cl^-,Br^-,NO₃^-,SO₄^2-,PO₄^3-重复性良好,含量分别为0.084%,0.063%,0.070%,0.30%,0.12%。 结论: 离子色谱法可以同时检测栀子中5种阴离子,灵敏度高,结果准确可行,为栀子的质量控制提供了一种简便快速的方法。     

拉米夫定与原儿茶酸在大鼠体内的药动学相互作用

 目的 研究拉米夫定与原儿茶酸联合使用对各自在大鼠体内药动学的影响。方法 将wistar大鼠随机分为拉米夫定组（100 mg·kg-1,原儿茶酸组（100 mg·kg-1,拉米夫定+原儿茶酸组（100+100 mg·kg-1,每组6只,单次灌胃给药后,于不同时间点采集血样。用HPLC测定大鼠血药中拉米夫定与原儿茶酸的浓度,血药浓度-时间数据采用3P97软件进行药动学分析。结果 与两种药物单独使用相比,联用后拉米夫定的V/F显著减小,AUC_0-t显著增大,t1/2ka极显著增大,tpeak显著增大,CL/F极显著减小;原儿茶酸的t1/2β显著增大,t1/2ka、tpeak极显著增大。结论 两药联用使用后,存在明显的药动学相互作用。     

土荆芥化学成分的研究

从土荆芥Chenopodium ambrosioides的全草中分离得到12个化合物,通过波谱解析,化合物结构分别鉴定为山柰酚-7-O-α-L-鼠李糖苷（kaempferol-7-O-α-L-rhamnopyranoside,1）,山柰酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷（kaempferol-3,7-di-O-α-L-rhamnopyranoside,2）,万寿菊素（patuletin,3）,槲皮素-7-O-α-L-鼠李糖苷（quercetin-7-O-α-L-rhamnopyranoside,4）,蚱蜢酮（grasshopper ketone,5）,4-hydroxy-4-methyl-2-cyclohexen-1-one（6）,丁香脂素（syringaresinol,7）,苄基-β-D-葡萄糖苷（benzyl β-D-glucopyranoside,8）,dendranthemoside B（9）,反式阿魏酸酰对羟基苯乙胺（N-trans-feruloyl tyramine,10）,N-3-羟基-4-甲氧基苯乙基反式阿魏酸酰胺（N-trans-feruloyl 4’-O-methyl dopamine,11）,N-p-香豆酰酪胺｛4-hydroxy-N-[2-（4-4-hydroxyphenyl）-ethyl]benzamide,12｝。其中化合物 3,6~8,10,12 为首次从该属中分离得到。化合物2~12 为首次从该植物中分离得到。     

鳖甲煎丸通过Wnt/β-catenin信号通路逆转大鼠肝卵圆细胞EMT的机制

目的 研究鳖甲煎丸对转化生长因子-β₁（TGF-β₁）诱导的大鼠肝卵圆细胞WB-F344上皮间质转化（EMT）的影响,探讨其逆转EMT改变的作用机制。方法 将WB-F344细胞随机分为空白组,TGF-β₁模型组（10 μg·L^-1TGF-β₁）,鳖甲煎丸低剂量组（10 μg·L^-1TGF-β₁+0.55 g·kg^-1鳖甲煎丸）,鳖甲煎丸中剂量组（10 μg·L^-1TGF-β₁+1.1 g·kg^-1鳖甲煎丸）,鳖甲煎丸高剂量组（10 μg·L^-1TGF-β₁+2.2 g·kg^-1鳖甲煎丸）,除空白组外,均采用TGF-β₁诱导WB-F344细胞构建EMT模型,分别加入鳖甲煎丸低、中、高剂量含药血清处理细胞,采用细胞划痕实验检测WB-F344细胞迁移能力的改变;使用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测E-钙黏蛋白（E-cadherin）,N-钙黏蛋白（N-cadherin）,波形蛋白（Vimentin）表达的变化;使用实时荧光定量PCR（Real-time PCR）检测β-连环蛋白（β-catenin）mRNA表达的改变;使用细胞免疫荧光法检测β-catenin的表达。结果 与空白组比较,TGF-β₁诱导WB-F344细胞4 d,WB-F344细胞间隙从紧密逐渐变得松散,细胞形态由鹅卵石状向成纤维样细胞转变,且E-cadherin蛋白表达降低,N-cadherin蛋白表达升高（P<0.01）,说明成功构建了WB-F344细胞EMT模型。划痕实验结果显示,与空白组比较,TGF-β₁模型组WB-F344细胞的迁移能力增强（P<0.01）;与TGF-β₁模型组比较,鳖甲煎丸中、高剂量组可以明显抑制WB-F344细胞的迁移能力（P<0.05）。Western blot结果显示,与空白组比较,TGF-β₁模型组E-cadherin蛋白表达水平降低,N-cadherin,Vimentin蛋白表达水平升高（P<0.01）;与TGF-β₁模型组比较,鳖甲煎丸中、高剂量组E-cadherin蛋白表达升高,N-cadherin,Vimentin蛋白表达降低（P<0.05,P<0.01）。Real-time PCR结果显示,与空白组比较,TGF-β₁模型组中β-catenin mRNA表达升高（P<0.01）;与TGF-β₁模型组比较,鳖甲煎丸低、中、高剂量组中β-catenin mRNA的表达降低（P<0.01）。细胞免疫荧光结果显示,与空白组比较,TGF-β₁模型组β-catenin在细胞核内荧光表达增强;与TGF-β₁模型组比较,鳖甲煎丸低、中、高剂量组β-catenin在细胞核内荧光表达减弱,且鳖甲煎丸对细胞核内β-catenin抑制作用与其浓度呈正相关。结论 鳖甲煎丸可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路,逆转TGF-β₁诱导WB-F344细胞的EMT进程,抑制WB-F344细胞的迁移能力。     

大豆异黄酮对去卵巢大鼠学习记忆和海马谷氨酸细胞及NR2B受体的影响

目的：通过建立H₂O₂诱导心肌细胞氧化应激损伤模型,观察番茄红素（lycopene）对心肌细胞的保护作用。方法：将原代培养的乳鼠心肌细胞随机分为正常组、模型组（H₂O₂）、番茄红素低剂量组（2.5 μmol·L^-1）、番茄红素中剂量组（5 μmol·L^-1）、番茄红素高剂量组（10 μmol·L^-1）。番茄红素与心肌细胞孵育4 h后,再加入H₂O₂,24 h后MTT法测定细胞存活率,比色法测定细胞培养上清液中乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）的含量和细胞超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）及丙二醛（MDA）含量,荧光电子显微镜下观察细胞核的形态变化,采用Western blot方法检测细胞凋亡相关蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）的变化。结果：与正常组比较,模型组心肌细胞存活率降低,心肌细胞LDH和CK释放量增加,SOD,CAT活性降低,MDA含量增加（P<0.01）,呈现出凋亡细胞的特征,Caspase-3的表达增高（P<0.01）。番茄红素高剂量组与模型组比较,心肌细胞的存活率增加（86.36±2.54）%,（54.15±10.97）%,P<0.01,H₂O₂所致乳鼠心肌细胞LDH释放量降低（319.53±23.48）,（495.27±31.57）U·L^-1,P<0.01,CK释放量降低（279.29±32.91）,（397.01±29.36）U·L^-1,P<0.01,SOD活性增高（47.94±2.64）,（37.19±5.78）U·mg^-1,P<0.01,CAT活性增高（34.95±4.67）,（16.35±4.84）U·mg^-1,P<0.01,MDA含量降低（14.27±2.43）,（20.11±2.09）μmol·g^-1,P<0.01,细胞核形态改善,Caspase-3的表达降低（1.40±0.20）,（1.94±0.22）,P<0.05。结论：番茄红素对H₂O₂所致乳鼠心肌细胞氧化应激损伤有明显保护作用。     

温阳、解郁及温阳解郁方对LPS“二次应激”诱发的抑郁样行为小鼠海马小胶质细胞的影响

目的 观察母婴分离（MS）联合脂多糖（LPS）应激后抑郁样行为小鼠海马区小胶质细胞活化及炎症因子的表达情况,从温阳、解郁及温阳解郁二方合用的角度探讨温阳解郁法抗抑郁的可能机制。方法 将70只仔鼠随机分为正常组（10只）、LPS应激组（LPS,10只）和造模组（MS,50只）,造模组小鼠在产后第5天（PD₅）-PD₁₄进行8 h·d^-1的母婴分离,后将造模组分为母婴分离+脂多糖应激组（MS+LPS）,温阳组（WY）,解郁组（JY）,温阳解郁组（WYJY）及氟西汀组（FLU）,每组10只。将仔鼠出生日期记为PD₀,正常,LPS及MS+LPS组小鼠于PD₂₁-PD₉₀饲喂正常饲料,其余各组给予对应的药混饲料喂养,且于PD₉₁给予脂多糖腹腔注射7 d,建立抑郁症小鼠模型。采用旷场,O迷宫和社会交互实验检测各组小鼠抑郁样行为;免疫组化法观察海马组织小胶质细胞钙结合蛋白-1（Iba-1）蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应法检测白细胞介素-1β（IL-1β）,白细胞介素-6（IL-6）,肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,Iba-1及糖皮质激素受体（GR） mRNA表达量。结果 与正常组比较,LPS组小鼠5 min中心区停留时间有减少趋势、运动总路程显著减少（P<0.01）,活动总路程显著减少（P<0.01）,MS+LPS组小鼠开放臂活动时间及活动总路程明显减少（P<0.05,P<0.01）,训练、辨别探查时间显著升高（P<0.01）,LPS,MS+LPS组小鼠海马CA1区Iba-1表达显著升高（P<0.01）;与LPS组比较,MS+LPS组小鼠5 min运动总路程明显增长（P<0.05）,训练、辨别探查时间明显升高（P<0.05,P<0.01）,海马CA1区Iba-1表达显著升高（P<0.01）;与MS+LPS组比较,各给药组小鼠5 min运动总路程均明显减少（P<0.01）,训练探查时间均显著降低（P<0.05,P<0.01）,JY,WYJY,FLU组小鼠辨别探查时间均显著降低（P<0.01）,各给药组小鼠海马CA1区Iba-1表达显著降低（P<0.01）。结论 温阳解郁法可能通过抑制抑郁症小鼠海马区小胶质细胞的激活,降低IL-1β,IL-6,TNF-α等炎症因子的表达,进而抑制抑郁症发生及发展。     

矿物药青礞石对PTZ点燃癫痫大鼠脑组织、血浆中金属元素的影响

目的 研究青礞石对戊四氮（PTZ）点燃癫痫大鼠脑组织、血浆中金属元素的影响,探讨青礞石可能的效应物质基础。方法 采用PTZ点燃法建立癫痫大鼠模型,运用电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）和电感耦合等离子体发射光谱法（ICP-OES）测定空白组、模型组、卡马西平组（0.1 g·kg^-1）和青礞石组（2 g·kg^-1）大鼠脑组织、血浆中的金属元素含量,实验数据用SPSS 18.0软件进行统计学分析。结果 与空白组比较,模型组大鼠脑组织中Sr,Sb,Ba含量明显上升（P<0.05,P<0.01）;Zn,Fe,Cu,K,Li,Co,Sn,Pb含量明显下降（P<0.05,P<0.01）。与模型组比较,青礞石组大鼠脑组织中Zn,Fe,K,Li,Co,As,Pb含量明显上升（P<0.05,P<0.01）;Sr,Sb含量显著下降（P<0.01）。说明青礞石对大鼠脑组织中金属元素含量向正常水平的调节具有积极作用,干预效果明确,且总体效果优于卡马西平组。与空白组比较,模型组大鼠血浆中K,Sr,Cd含量明显上升（P<0.05）;Li,Al,Ti,Cr含量明显下降（P<0.05）。与模型组比较,青礞石组大鼠血浆中Ca,K,Li,Al,V含量明显上升（P<0.05,P<0.01）;Fe,Ti,Sr,Cd含量明显下降（P<0.05,P<0.01）。各组间金属元素相关性分析显示,大鼠脑组织中有17对元素存在显著正相关性,2对元素存在显著负相关性,大鼠血浆组织中有8对元素存在显著正相关性,6对元素存在显著负相关性。结论 以Zn,Fe,K,Li,Co,As,Pb,Sr,Sb,Ca,Al,V,Ti,Cd为代表的金属元素群可能是青礞石干预PTZ点燃癫痫模型大鼠的效应物质基础,作用机制可能与这些金属元素群干预影响神经递质的释放及神经元的电平衡、调节离子（Na⁺,K⁺,Ca²⁺等）通道失常诱发的异常同步放电及干预癫痫相关代谢通路等有关,使兴奋与抑制活动相互牵制,最终达到神经元、细胞电平衡等趋于正常生理状态。青礞石组的干预作用总体优于卡马西平组。     

大黄（庶虫）虫丸加减对大鼠肾间质纤维化的保护作用及机制

目的：探讨大黄（庶虫）虫丸加减对梗阻性肾病大鼠肾间质纤维化的保护作用及机制。方法：采用单侧输尿管结扎（UUO）致大鼠肾间质纤维化模型,将50只SD大鼠随机分为5组,分别为假手术组,模型组,依那普利组（0.001 g·kg^-1）,大黄（庶虫）虫丸加减大、小剂量组（19,9.5 g·kg^-1）。术后第15天处死各组大鼠,收集血清,酶法测定血肌酐（SCr）,尿素氮（BUN）水平,收集24 h尿液,连苯三酚红钼终点法测定24 h尿蛋白量（24 h-Upro）;留取结扎侧肾组织行苏木素-伊红（HE）染色,马松（Masson）染色;采用免疫组化法（IHC）检测转化生长因子-β₁（TGF-β₁）,纤连蛋白（FN）,α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测TGF-β₁,p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）,磷酸化p38 MAPK（p-p38 MAPK）蛋白表达。结果：与假手术组比较,模型组大鼠24 h-Upro,SCr,BUN含量明显增高（P<0.01）,光镜下肾组织损伤严重,TGF-β₁,FN,α-SMA含量明显升高（P<0.05）,TGF-β₁,p38 MAPK,p-p38 MAPK蛋白表达明显升高（P<0.05）;与模型组比较,大黄（庶虫）虫丸加减大、小剂量组24 h-Upro,SCr,BUN明显降低（P<0.05）,肾脏组织损伤减轻,TGF-β₁,FN,α-SMA含量明显降低（P<0.05）,TGF-β₁,p-p38 MAPK蛋白表达明显降低（P<0.05）。结论：大黄（庶虫）虫丸加减方可通过降低FN,α-SMA的高表达,下调p38 MAPK信号通路中的p-p38 MAPK,TGF-β₁表达,减少细胞外基质过度沉积和肾脏固有细胞损伤来改善肾间质纤维化。     

光石韦化学成分研究

目的： 对水龙骨科 Polypodiaceae石韦属植物光石韦 Pyrrosia clavata （Bak.） Ching的化学成分进行研究。 方法： 光石韦用90%乙醇回流提取,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,对各萃取部分采用各种柱色谱进行分离纯化,通过波谱数据分析 （¹H-NMR,¹³C-NMR,MS） 进行结构鉴定。 结果： 从中分离鉴定了8个化合物,其中包括1个何柏烷型三萜、3个脂肪酸类化合物,1个 (口山)酮苷和3个其他类化合物,分别鉴定为里白烯 （diploptene,1）,正三十一烷 （hentriacontane,2）,十六烷酸二十八烷酯 （octacosyl palmitate,3）,二十二烷酸二十烷酯 （eicosyl behenate,4）,芒果苷 （mangiferin,5）,β-谷甾醇 （β-sitosterol,6）,胡萝卜苷 （daucosterol,7） 和蔗糖 （sucrose,8）。 结论： 其中化合物1~4为首次从光石韦中分离得到。     

中华苦荬菜根部化学成分研究

采用硅胶柱色谱,HPLC 等方法对中华苦荬菜根部化学成分进行分离纯化,得到 15 个化合物,依据理化性质和波谱数据分析鉴定它们的结构分别为 chinensioide G（1）,chinensioide B（2）,10α-羟基-愈创木烷-12,6-内酯-3-酮（3）,chinensioide C（4）,10α-羟基-11βH-4（5）-愈创木烯-12,6-内酯（5）,3β,10α-二羟基-4βH-11（13）-愈创木烯-12,6-内酯（6）,3β,10α-二羟基-4βH,11βH-愈创木-12,6-内酯（7）,3β,10α-二羟基-4（15）,11（13）-愈创木二烯-12,6-内酯（8）,咖啡酸（9）,对羟基苯乙酸（10）,对羟基苯乙酸甲酯（11）,对羟基苯乙酸乙酯（12）,β-谷甾醇（13）,胡萝卜苷（14）,ixerin D（15）。其中化合物 1 为新化合物,命名为chinensioide G,化合物 6,7 首次从该植物中分离得到。     

远志与炆远志对心肾不交失眠大鼠学习记忆，HPA轴功能及神经递质的调控作用

目的 比较远志与炆远志对心肾不交型失眠大鼠学习记忆、下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA轴）功能及神经递质的调控作用。方法 多因素共同刺激致大鼠心肾不交失眠模型,造模结束后,给药组灌胃给予远志与炆远志提取物（给药剂量8 g·kg^-1·d^-1）,正常组和模型组给予等体积生理盐水,连续灌胃7 d。采用Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力的变化;酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定各组大鼠血清中促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）,促肾上腺皮质激素（ACTH）,皮质醇（CORT）水平;超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）测定大鼠下丘脑中5-羟色胺（5-HT）,多巴胺（DA）,γ-氨基丁酸（GABA）及谷氨酸（Glu）的含量。结果 与正常组比较,模型组大鼠空间学习记忆能力下降,在目标象限停留的次数和时间明显减少（P<0.05,P<0.01）;血清中CORT,CRH,ACTH水平显著升高（P<0.01）;下丘脑组织中GABA,DA,5-HT含量显著降低（P<0.01）,Glu含量显著升高（P<0.01）。与模型组比较,远志与炆远志组大鼠空间学习记忆能力提高,在目标象限停留的次数和时间显著增加（P<0.05,P<0.01）;血清中CORT,CRH,ACTH水平明显降低（P<0.05,P<0.01）;下丘脑组织中GABA,DA,5-HT含量明显升高（P<0.05,P<0.01）,Glu含量明显降低（P<0.05）;炆远志组各指标恢复程度均优于远志组。结论 远志与炆远志均可提高心肾不交型失眠大鼠的学习记忆能力,改善HPA轴功能,调节中枢神经递质水平,从而起到安神益智的功效,且炆远志作用优于远志。     

断藤益母汤对人脐静脉内皮细胞模型的作用机制

目的 探讨断藤益母汤（DTYM）对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）模型细胞活化的作用,以及对相关活化蛋白与血管内皮生长因子（VEGF）信号通路的作用。方法 VEGF和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导HUVEC,DTYM （200,400 mg·L^-1）作用后,采用细胞增殖与活性检测-8（CCK-8）,5-乙炔基-2''-脱氧尿苷（EdU）法,transwell鬼笔环肽荧光染色法及基质胶法检测细胞增殖活力、迁移和管形成能力,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测黏附因子E选择素（E-selectin）,细胞间黏附分子-1（ICAM-1）和脉管细胞黏附分子-1（VCAM-1） mRNA的表达,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测血管性血友病因子（VWF）,血小板-内皮细胞黏附分子31（CD31）,血管诱导生成因子61（CYR61）,血管生成素-1（ANG-1）,VEGF和VEGF受体2（VEGFR2）的表达,免疫荧光检测CD31的表达。结果 与正常组比较,模型组HUVEC的增殖活力、迁移和管形成能力明显升高（P<0.05,P<0.01）;E-selectin,ICAM-1,VCAM-1 mRNA表达升高（P<0.01）;VWF,CD31,ANG-1,CYR61,VEGF-α,磷酸化（p）-VEGFR2蛋白表达升高（P<0.05,P<0.01）,CD31免疫荧光强度升高（P<0.01）;与模型组比较,DTYM两剂量组HUVEC的增殖活力、迁移和管形成能力明显降低（P<0.05,P<0.01）;E-selectin,ICAM-1,VCAM-1 mRNA表达降低（P<0.05,P<0.01）,VWF,CD31,ANG-1,CYR61,VEGF-α,p-VEGFR2蛋白表达降低（P<0.05,P<0.01）,CD31免疫荧光强度降低（P<0.01）。结论 DTYM抑制HUVEC的增殖、迁移、黏附和管形成,与其调控HUVEC中CD31,VWF,CYR61,ANG-1的表达及VEGF信号通路有关。     

酸枣仁汤防治睡眠剥夺性大鼠学习记忆功能变化及其对NLRP3通路的影响

目的 基于Nod样受体蛋白3（NLRP3）炎性小体通路探讨酸枣仁汤改善睡眠剥夺大鼠学习记忆功能的作用机制。方法 将实验大鼠随机分为正常组,模型组,艾司唑仑组（5.4×10^-4 g·kg^-1·d^-1）,酸枣仁汤低剂量组（4.59 g·kg^-1·d^-1）,酸枣仁汤高剂量组（18.36 g·kg^-1·d^-1）。除正常组外,其他组构建睡眠剥夺动物模型,造模与给药同时进行,连续给药30 d。应用水迷宫评价小鼠学习记忆力;应用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测小鼠海马中Nod样受体蛋白3（NLRP3）,半胱天冬酶募集结构域的凋亡相关斑点样蛋白（ASC）,天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-1（Caspase-1）,白细胞介素-1β（IL-1β）,白细胞介素-18（IL-18） mRNA和蛋白表达水平。结果 与正常组比较,模型组大鼠上平台潜伏期,游泳总路程和第1次抵原平台时间则显著增加（P<0.01）,穿越平台次数和目标象限时间减少（P<0.01）;与模型组比较,酸枣仁汤低剂量组和酸枣仁汤高剂量组大鼠上平台潜伏期,游泳总路程和第1次抵原平台时间不同程度减少（P<0.05,P<0.01）,穿越平台次数和目标象限时间明显增加（P<0.05,P<0.01）,艾司唑仑组变化不显著。与正常组比较,模型组大鼠海马中NLRP3,ASC,Caspase-1,IL-1β,IL-18 mRNA和蛋白表达量明显升高（P<0.05,P<0.01）;与模型组大鼠比较,酸枣仁汤低剂量组和酸枣仁汤高剂量组大鼠海马中NLRP3,ASC,Caspase-1,IL-1β,IL-18 mRNA表达量均有不同程度降低（P<0.05）,艾司唑仑组大鼠海马中NLRP3,ASC,Caspase-1,IL-1β,IL-18 mRNA表达量也有所减少,但差异无明显统计学意义。结论 酸枣仁汤可改善睡眠剥夺大鼠学习记忆功能,其机制与抑制海马NLRP3炎性小体通路,减轻神经炎性相关。