黄芪-当归配伍对气道变应性炎症大鼠 IFN-γ,IL-4,STAT6,STAT4的影响

目的:通过研究黄芪-当归配伍对气道变应性炎症模型大鼠血清干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)含量及肺组织信号转导因子和转录活化因子4( STAT4)、信号转导因子和转录活化因子6(STAT6)表达的影响,探讨黄芪-当归配伍治疗气道变应性炎症的作用机制.方法:采用卵清蛋白(OVA)致敏及喷雾激发的方法造成大鼠气道变应性炎症模型,分别用黄芪、当归、黄芪-当归配伍灌胃给药治疗.应用ELISA方法测定血清中IFN-γ、IL-4含量.应用Western blot方法检测肺组织STAT4、STAT6表达.结果:模型组血清IFN-γ含量降低,IL-4含量升高.黄芪组血清中IFN-γ含量增加,当归组血清中IL-4含量降低,芪归配伍组可增加血清中IFN-γ含量,降低IL-4含量.模型组肺组织STAT6、磷酸化信号转导因子和转录活化因子6( p-STAT6)表达增加,STAT4、磷酸化信号转导因子和转录活化因子4(p-STAT4)表达减少.黄芪组可降低STAT6,p-STAT6表达,增加p-STAT4表达.当归组可降低p-STAT6表达.芪归组可降低STAT6,p-STAT6,增加STAT4,p-STAT4表达.结论:黄芪-当归配伍可能通过抑制STAT6、促进STAT4,调节气道变应性炎症中Th1/Th2细胞因子平衡,从而对气道变应性炎症有抑制作用.     

鼻敏煎对小鼠γδ T细胞的作用机制

目的 探讨鼻敏煎对小鼠γδ T细胞的作用机制.方法 制备大鼠鼻敏煎含药血清,分离、扩增小鼠脾γδ T细胞,使用含药血清、IL-2、IL-2+含药血清分别作用于小鼠γδ T细胞后,阴选Vδ1 T和Vδ2 T细胞,流式细胞术分析鼻敏煎含药血清对小鼠γδ T细胞STAT信号转导通路的影响;Milliplex方法检测小鼠yδ T细胞活化增殖过程中细胞因子释放情况;Western blot检测γδ T细胞核内转录因子T-bet、GATA3、Foxp3、RORγ表达水平.结果 IL-2+含药血清可抑制Vδ1 T细胞STAT3磷酸化;含药血清使IL4、IL-6、TNF-α分泌水平下降,IL-10显著上升;含药血清与IL-2分别刺激时可引起γδ T细胞核内转录因子T-bet下调、GATA3上调,而共同刺激时两者无明显变化.结论 鼻敏煎含药血清在体外可通过STAT3信号通路及核内转录因子T-bet、GATA3干预小鼠γδ T细胞活化及Th1/Th2/Treg/Th17细胞相关炎症因子释放.     

中医药与哮喘细胞外信号调节激酶通路的关联

细胞外信号调节激酶是一种传递丝裂原信号的信号转导蛋白,属于丝裂原活化蛋白激酶家族重要成员,通过磷酸化激活该条信号通路从而参与调节细胞的增殖、分化等多种生物反应,并介导支气管哮喘气道炎症、气道高反应以及气道重塑等病理环节,且与中医药在发病条件及病理因素上相关联。中医药能够降低该蛋白的表达水平,抑制其磷酸化,从而治疗哮喘。     

基于miR-181c-3p/STAT3通路探讨增液润燥汤治疗干燥综合征作用机制

目的:基于miR-181c-3p/信号转导与转录激活因子3(STAT3)通路探讨增液润燥汤对干燥综合征(SS)模型小鼠的作用机制。方法:免疫诱导法制备SS模型小鼠；将BALB/c小鼠随机分为模型组、对照组、白芍总苷组、增液润燥汤低剂量组、增液润燥汤高剂量组、增液润燥汤高剂量+STAT3通路激活剂(Colivelin)组、增液润燥汤高剂量+miR-181c-3p激动剂组，每组3只；测量小鼠日饮水量、唾液流率、颌下腺脏器指数、血沉；ELISA法检测血清免疫球蛋白G(IgG)水平；观察颌下腺组织病理学变化；实时荧光定量PCR检测颌下腺miR-181c-3p的表达；Western blot法检测颌下腺同源异形盒基因A1(HOXA1)、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)、白介素-17(IL-17)和叉头盒蛋白P3(Foxp3)的表达；流式细胞仪检测外周血辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)比例。结果:与模型组比较，其余各组小鼠日饮水量、HOXA1、STAT3、p-STAT3、IL-17表达、Th17细胞比例、Th17/Treg明显下降，唾液流率、Foxp3、miR-...     

中药苦参水提取物抑制Th17细胞分化的研究

目的探讨苦参水提取物(Sophora flavescens aqueous extract,SFAE)对Th17细胞分化的影响。方法通过体外分离豚鼠淋巴结获取原代淋巴细胞,采用磁珠分选技术获得初始CD4^+T细胞。采用CCK-8法筛选SFAE对T细胞活力的最佳抑制浓度。通过白细胞介素-6(IL-6)和转化生长因子-β(TGF-β)诱导建立初始CD4^+T细胞向Th17细胞分化的细胞模型,并以SFAE进行干预;采用流式细胞仪检测各组Th17细胞比例,采用qRT-PCR及Western Blot法检测各组细胞中视黄酸相关的孤儿受体γt(RORγt)、信号转导子和转录激活子3(STAT3)、白细胞介素-17A(IL-17A)和白细胞介素-17F(IL-17F)的mRNA及蛋白表达水平。结果与对照组比较,SFAE浓度在0.01 mg·mL^-1时对初始CD4^+T细胞的活力有抑制作用(P<0.01),选择该浓度作为后续实验浓度。与对照组比较,模型组能明显上调CD4^+IL-17A+T细胞的比例(P<0.001),上调RORγt、STAT3、IL-17A、IL-17F mRNA及蛋白的表达(P<0.01,P<0.001)。与模型组比较,SFAE干预后模型处理组的CD4^+IL-17A+T细胞比例明显下调(P<0.05),STAT3、RORγt、IL-17A、IL-17F mRNA及蛋白表达水平均明显下调(P<0.05,P<0.01)。结论SFAE能够抑制Th17细胞分化,降低Th17细胞比例,其作用机制可能是通过抑制转录因子RORγt及STAT3的活性,降低IL-17A、IL-17F的表达。     

穴位贴敷防治哮喘复发的免疫应答机制研究进展

穴位贴敷是中医经典外治法之一,可以有效防治哮喘的复发。关于其作用机制,从免疫学角度分析,与气道炎症、血液循环、贴敷处皮肤炎症及三者之间的联系有关。其一,穴位贴敷通过引起辅助型T细胞1(Th1)介导的接触性皮炎抑制以Th2为主导的哮喘,且皮炎程度与临床疗效密切相关;其二,穴位贴敷通过降低哮喘患者血液中免疫球蛋白E(IgE)水平,升高γ-干扰素(IFN-γ)含量、降低白细胞介素-4(IL-4)含量或升高转录因子T-bet mRNA含量、降低GATA-3 mRNA含量使Th1/Th2向Th1方向偏移;其三,穴位贴敷能够降低哮喘患者气道和肺中胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)含量,减轻气道炎症。综上,穴位贴敷可以通过调节皮肤、血液循环、气道免疫通路使机体达到免疫动态平衡,防治哮喘复发。参考文献54篇。     

Th17细胞与肝脏疾病的相关性

Th17细胞与Th1细胞、Th2细胞分属不同的CD4^＋T细胞亚群。Th17细胞分化的关键因子有：白细胞介素6、转化生长因子β（TGF-β）、IL-23、干扰素γ、IL-4、转录因子（ROR-γt）等。Th17细胞能分泌IL-17、IL-6、IL-22等细胞因子,IL-17多通路影响肝细胞损伤,IL-22对肝脏损伤的保护作用,而中医药具有Th17细胞诱导作用。     

异补骨脂查尔酮抑制IL-4产生及其机制研究

目的 从补骨脂单体化学成分中筛选抗哮喘的小分子化合物,并阐释其抗哮喘作用机制.方法 基于IL-4在哮喘病理中的作用,采用IL-4-GFP转基因报告小鼠(4get鼠)和流式细胞术,设计一种抑制白细胞介素-4(IL-4)产生的抗哮喘药物筛选新方法.结果 与DMSO组相比,异补骨脂查尔酮能显著抑制Th2细胞中IL-4的产生(P＜0.001),减少转录因子GATA-3的表达(P＜0.01),降低信号转导与转录激活因子STAT6磷酸化水平(P＜0.01).结论 异补骨脂查尔酮通过抑制STAT6磷酸化而减少GATA-3的表达,从而抑制IL-4的产生,其具有开发成为治疗哮喘药物的潜力.     

基于胆碱能抗炎通路的类风湿关节炎治疗机制与中医药作用机制研究进展

胆碱能抗炎通路(CAP)是一种神经免疫调节通路,具有胆碱能神经系统与免疫系统之间吻合的结构基础,激活后可调节全身炎症和免疫反应。类风湿关节炎(RA)的发病机制与核转录因子(NF-κB)、Janus蛋白酪氨酸激酶2/信号转导子和转录激活子3(JAK2/STAT3)炎症信号通路密切相关。在CAP中,乙酰胆碱与α-7nAchR结合可以调节这两条通路的信号转导,从而发挥抗炎效应。总结近年来有关CAP与NF-κB、JAK2/STAT3、RA关系的研究及CAP在中医药抗炎、免疫调节机制中的作用,为今后相关研究提供参考。参考文献35篇。     

黄芪对卵蛋白致敏大鼠肺组织中信号转导子和转录激活子6及mRNA表达的影响

 目的观察黄芪(Radix Astragali,RA)对支气管哮喘大鼠支气管信号转导子和转录激活子6(STAT6)及其mRNA表达的影响。方法用卵清白蛋白建立哮喘模型,SD大鼠随机分成4组:正常对照组、模型组、低剂量RA组和高剂量RA组。留取支气管肺泡灌洗液(BALF)进行嗜酸性粒细胞(EOS)和分类计数;采用免疫组化法和原位杂交法分别检测STAT6蛋白和STAT6 mRNA的表达。结果①模型组BALF中EOS绝对值和EOS占细胞总数的百分比(EOS％)均显著高于正常对照组(P<0.01), 黄芪组上述指标均显著低于模型组(P<0.01);②免疫组化和原位杂交显示,模型组支气管STAT6蛋白和STAT6 mRNA表达均显著高于正常对照组,黄芪组较模型组均明显减弱(均为P<0.01),其主要表达细胞是上皮细胞;③支气管STAT6蛋白、STAT6 mRNA分别与BALF中的EOS绝对值呈显著正相关。结论黄芪有抑制哮喘气道EOS性炎症的作用,其机制可能与其下调 STAT6及其mRNA的表达有关。     

基于Th1/Th2失衡初探益气温阳护卫法对哮喘炎症白三烯通道干预作用

支气管哮喘(简称哮喘)是慢性气道炎症为特点的一种异质性疾病,有多种细胞及细胞组分共同参与,涉及多机制多通路。白三烯通道是哮喘气道炎症重要的通道。以T细胞为细胞免疫应答的Th2占优势的Th1/Th2失衡是哮喘发病机制,Th1/Th2失衡与白三烯通道共同参与哮喘气道炎症形成,相互影响。气阳虚弱为哮喘气道炎症产生根本所在。文章就Th1/Th2失衡与白三烯通道在哮喘气道炎症方面的关系及益气温阳护卫法是否通过调节Th1/Th2失衡影响炎症白三烯通道展开初步探讨。     

中药防治哮喘的免疫学机理研究进展

近年来,支气管哮喘发病机理的研究已聚集到气道变应性炎症(AAI)上,这种炎症主要由嗜酸粒细胞、肥大细胞、T淋巴细胞等多种炎性细胞参与,与哮喘遗传基因、T淋巴细胞亚群平衡失调、某些转录因子(NF-κB等)、细胞因子(IL-5、IL-4、IFN-γ、GM-CSF)、粘附分子(ICAM-1、VCAM-1等)参与以及嗜酸粒细胞活化、募集、凋亡,肥大细胞脱颗粒等方面密切相关。中医药防治哮喘的不断深入研究是我国研究哮喘的特色之一[1],不论是平喘单味药(或单味药提取物),还是复方在免疫学研究领域渐渐集中到针对AAI上,较全面地涉及到以上诸环节。本文简要从…     

紫草素对银屑病T淋巴细胞增殖、活化的影响

目的:研究具有凉血、解毒作用的中药单体紫草素对银屑病病理状态下异常活化的T淋巴细胞功能及相关信号转导通路的影响。方法:选取Jurkat E6-1 T淋巴细胞,以佛波醇酯和离子霉素活化Jurkat E6-1 T淋巴细胞,同时将0. 5～2μg/m L浓度的紫草素作用于细胞,采用CCK-8法检测T淋巴细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞膜CD69的表达及细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的变化;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测T淋巴细胞释放白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平;用Realtime-PCR和Western blotting法分别观察核转录因子mRNA及蛋白的表达影响。结果:不同浓度的紫草素均可明显抑制细胞增殖、CD69表达及Th1类细胞因子分泌;均可有效降低[Ca2+]i和蛋白激酶C(PKC)磷酸化蛋白的水平;显著降低核转录因子NF-AT mRNA的表达,下调c-Jun的mRNA及蛋白表达并可抑制核因子-κB蛋白的表达。以上各项指标均有一定量效关系。结论:紫草素可以通过抑制过度活化的T淋巴细胞功能从而发挥免疫调控作用,为紫草素治疗银屑病的作用机制及应用前景提供实验依据。     

Th17-STAT3正反馈通路在类风湿性关节炎促炎机制中的研究进展

类风湿性关节炎是一种慢性炎症性系统性的自身免疫性疾病,发病可累及多关节以及全身多个系统。其发病机制与多种细胞因子有着密切的关系。Th17细胞是T细胞新发现的亚群,经研究证实其分泌的IL-17等多种细胞因子能诱导严重的自身免疫性反应。JAK/STAT信号通路,尤其是STAT3信号通路对类风湿慢性炎症有着重要的正反馈促进作用。Th17细胞的分化与调节机制和STAT3信号通路正反馈调节作用的进一步研究可以为探索类风湿性关节炎的治疗方法提供新的思路。     

雷公藤内酯醇对致敏小鼠支气管组织白细胞介素-5mRNA原位表达的影响

哮喘是以嗜酸性粒细胞(Eos)和淋巴细胞等浸润为主的气道慢性炎症,在炎症的发生过程中,CD_4~+ T 辅助淋巴细胞(Th2)起关键作用。实验证实,CD_4~+ Th2淋巴细胞生成并释放白细胞介素-5(IL-5),能促使 Eos 增殖、活化、募集并释放炎性介质,参与哮喘 Eos 炎症的形成,因此抑制 CD_4~+ Th2淋巴细胞因子 IL-5的表达是治疗哮喘的一条有效途径。雷公藤治疗哮喘能改善症状并减低气道反应性,但作用机制不很清楚。我们采用原位杂交方法对卵蛋白致敏小鼠过敏性气道炎症模型中 IL-5 mRNA 表     

启膈散对食管癌EC9706细胞株抑制树突状细胞成熟的影响

目的观察启膈散对食管癌细胞干预树突状细胞成熟的影响。方法制备条件培养基,用Fieoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,体外诱导培养树突状细胞(Dendritic Cells,DCs),流式细胞术检测DCs表面标志物,MTT法检测淋巴细胞细胞增殖;LDH释放法检测细胞毒T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)杀伤力;ELISA检测细胞因子分泌,Western blot检测STAT3蛋白表达。结果食管癌EC9706细胞条件培养基可以减少外周血单核细胞诱导的树突状细胞表达CD80、CD86、CD1a,抑制DCs刺激淋巴细胞增殖和减弱CTL的杀伤力,减少IL~(-1)2分泌,增加STAT3蛋白表达和磷酸化;与肿瘤条件培养基相比,启膈散条件培养基组DCs CD80、CD86、CD1a增加,淋巴细胞的增殖能力、CTL杀伤作用增强,IL~(-1)2分泌增加,STAT3蛋白表达和磷酸化减少。结论启膈散可以通过STAT3信号通路减弱食管癌细胞上清对树突状细胞成熟的影响。     

黄芪、当归、忍冬藤水提冻干粉组合对白细胞介素1β诱导大鼠T细胞亚群增殖与分化的影响

目的探讨黄芪、当归、忍冬藤活性成分对白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)诱导大鼠T细胞增殖和分化的影响。方法 IL-1β诱导T细胞分化,IL-β抑制剂为阳性对照组,黄芪、当归、忍冬藤水提物冻干粉干预;流式细胞仪检测大鼠脾淋巴细胞T细胞亚群比率的改变,Western-Blot检测T辅助细胞(helper T cell,Th)特异性转录因子T-bet、GATA-3、ROR-γ表达差异。结果黄芪、当归、忍冬藤水提物冻干粉组合能显著降低细胞毒T细胞比率,显著降低Th1和Th17、升高Th2和调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)比率;升高GATA-3,并降低ROR-γ和T-bet的表达。结论黄芪、当归、忍冬藤水提物冻干粉组合可能通过抑制IL-1β诱导的T细胞异常增殖和分化,缓解炎症免疫应答,恢复T细胞免疫应答的动态平衡。     

中医药对哮喘Th17/Treg失衡作用机制研究进展

综述中医药对哮喘Th17/Treg失衡作用机制研究进展。Th17/Treg失衡在哮喘发病机制中有重要作用,研究表明中药单体(黄芩苷、淫羊藿苷等)、多种复方(固本防哮汤、平喘方等)、外治法(针灸)可通过调节Th17/Treg细胞数量、相关炎症因子等,减轻气道炎症,改善哮喘症状。     

中医药调节免疫平衡治疗咳嗽变异性哮喘研究进展

咳嗽变异性哮喘（CVA）是以咳嗽为主要症状的慢性呼吸系统疾病。CVA的发生与非特异性气道炎症密切相关，发病机制涉及环境、遗传、免疫等因素。近年来，中医药在CVA治疗中的优势得到国内外专家学者的关注，尤其在调节免疫平衡缓解CVA患者咳嗽症状、减少复发次数等方面具有突出作用。辅助性T细胞（Th）1、Th2、Th17、调节性T细胞（Treg）由CD4⁺ T细胞分化而来，Th1/Th2、Th17/Treg免疫失衡是CVA发病机制研究中的新热点，也是中医药治疗CVA的潜在关键靶标。Th细胞亚群生理情况下处于动态平衡，维持促炎细胞因子与抑炎细胞因子平衡的呼吸道免疫稳态。CVA发病阶段，未成熟的辅助T细胞（Th0）受微环境中细胞因子类型影响分化为Th1、Th2、Th17、Treg等细胞亚群，Th2细胞增殖引发嗜酸性粒细胞性气道炎症，Th17细胞过度分化诱发中性粒细胞性气道炎症的产生。Th1/Th2、Th17/Treg细胞在数量及功能上相互制约，Th1/Th2、Th17/Treg免疫失衡易加剧炎症反应的产生，恢复免疫平衡对CVA的气道抗炎治疗尤为重要。该文对Th1/Th2、Th17/Treg失衡与CVA发病机制进行系统阐述，同时对中药复方、单味中药及其有效成分调控免疫失衡治疗CVA的最新研究进行梳理，为揭示中医药调节免疫平衡治疗CVA的科学内涵及CVA临床治疗和基础研究的开展提供思路和借鉴。     

肺结节病细胞免疫机制与中医药治疗研究进展

肺结节病为复杂疑难疾病,起病隐匿,发病缓慢,目前认为环境、免疫、遗传共同参与了肺结节病的发病过程,其中主要是CD4⁺T淋巴细胞介导的免疫反应失衡,从而导致炎症反应持续存在,形成肉芽肿。近年来,发现辅助性T淋巴细胞1(Th1)、辅助性T淋巴细胞17(Th17)、调节性T淋巴细胞(Tregs)、巨噬细胞、树突状细胞、自然杀伤细胞均参与了结节病肉芽肿的形成,涉及多种免疫细胞及细胞因子之间的复杂作用,为研究肺结节病发病机制提供了新见解。但目前关于中医药对肺结节病细胞免疫的影响探讨尚匮乏,故本文以此为切入点,探讨肺结节病细胞免疫发病机制及中医药对此类细胞的调控作用,旨在深入了解肺结节病发病机制,为肺结节病的治疗开拓新思路。