IgA肾病外周血单个核细胞T-betGATA-3ROR-γt和Foxp3mRNA的表达及其意义研究

目的 在mRNA水平探讨IgA肾病患者外周血Th1、Th2、Th17和Treg细胞免疫失衡及其与IgA肾病(IgAN)牛津分型的相关性。方法 以2010年11月至2011年11月在大连医科大学附属第一医院肾内科经肾活检病理确诊的原发性IgAN患者为研究对象,应用实时荧光定量PCR检测IgAN患者(20例)和健康对照组(10名)外周血单个核细胞的特异性转录因子T-bet、GATA-3、ROR-γt、Foxp3的mRNA表达水平。结果 与对照组比较,IgAN组ROR-γt表达明显升高(P<0.05)、Foxp3表达明显下降(P<0.05),且ROR-γt/Foxp3比值明显升高(P<0.05);而T-bet、GATA-3的表达与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。按IgAN牛津分型病理指标分组结果比较显示,M1组T-bet表达及T-bet/GATA-3的比值较M0组明显升高(P<0.05)。进一步相关分析显示,IgAN组T-bet表达与系膜增殖积分呈显著正相关(r=0.541,P<0.01)。S1组T-bet表达显著升高(P<0.01),ROR-γt表达无明显差异(P>0.05),T-bet/ROR-γt比值明显升高(P<0.05);而GATA-3、Foxp3无变化(P>0.05)。结论 IgAN患者外周血单个核细胞在mRNA水平出现了偏向Th17极化,而Treg的应答被抑制。IgAN系膜增殖程度与Th1极化呈正相关,而肾小球节段硬化的Th1/Th17的比值明显升高。     

过敏性紫癜性肾炎肾组织中CD71表达的分子特征及意义

目的阐明转铁蛋白受体（CD71，TfR）在过敏性紫癜性肾炎（NHSP）肾组织中表达的分子构象特征及其与IgA分子构象特征之间的相互关系．探讨其在NHSP免疫发病机制中的作用。方法122例肾活检患者根据临床表现和肾活检病理诊断分为NHSP组40例、IgA肾病组44例、无IgA沉积肾病组（对照组）38例。运用免疫荧光双套色法标记的抗体在激光共聚焦荧光显微镜下观察四甲基罗丹明（TRITC）标记CD71和异硫氰荧光素（FITC）标记IgA在肾组织上的分子表达。结果CD71在对照组患者的肾小球上呈现微弱表达或不表达，在NHSP组和IgA肾病组呈现阳性高表达，且激光共聚焦荧光显微镜下观察到CD71的表达与IgA表达呈现共位。结论CD71是IgA的受体之一，其在NHSP患者肾小球上呈现高表达，且其分子构像与IgA分子呈现共位状态，提示CD71参与了NHSP的免疫发病过程。     

CD71在IgA肾病肾组织中的表达与临床病理关系

目的研究CD71在人类IgA肾病肾组织中的表达强度及与IgA肾病临床病理关系,分析其作为IgA肾病病理和预后标记物的可能性。方法选取该院180例肾穿刺活检为IgA肾病患者,收集患者临床资料,采用光镜、免疫组织化学、免疫荧光、IgA肾病半定量评分等方法检测IgA肾病组肾组织中CD71的表达,并与正常对照组比较;分析CD71与病理严重程度及临床的相关性。结果 (1)在IgA肾病组,CD71的表达明显高于正常对照组(P0.05),且CD71的表达强度随肾组织病理损害加重而增强;(2)IgA肾病肾组织中CD71表达量与IgA肾病组织学半定量评分法中的系膜细胞增生指数(Ms HI)和系膜基质增多指数(Ms MI)呈正相关(P0.05);(3)IgA肾病肾组织中CD71的表达量与患者的蛋白尿水平呈正相关,与肌酐清除率水平呈负相关(P0.05),而与患者血尿水平无明显相关性(P0.05)。结论 CD71在IgA肾病不同病理肾组织表达不同,随病理损害的加重而增强,且CD71的表达与反应系膜细胞和系膜基质增多指数相关,提示CD71与系膜细胞增殖关系密切;另外,CD71表达量与蛋白尿呈正相关,与肌酐清除率呈负相关,提示其与IgA肾病肾功下降及预后不良有关。因此,肾组织CD71的表达可作为判断该症严重程度和预后的生物学标记物之一。     

紫癜性肾炎患者血和肾组织P选择素的表达及意义

目的　探讨粘附分子P选择素 (CD62P)在紫癜性肾炎 (HSPN)患者中的致病作用。方法　以肾穿刺活检法取HSPN患者肾组织 ,采用直接免疫荧光标记单克隆抗体 ,常规和特殊病理染色 (苏木素 伊红染色、过碘酸雪夫染色、Masson三色染色、六胺银染色 ) ,外周血采用流式细胞术的方法进行了CD62P表型的研究。结果　① 3 2例HSPN患者肾组织中显示CD62P表达 2 7例( 84 4% ) ,表达部位常见于肾小球系膜区、血管袢 ,其次为间质小血管、肾小管。病理类型的表达以Ⅲ、Ⅳ型显著 ,Ⅱ型次之 ,Ⅰ型最弱。② 3 2例HSPN患者外周血CD62P表达量较对照组显著增高 (P<0 0 1) ;CD62P在肾组织表达与外周血表达水平密切相关 ,且与肾脏病理类型的病变部位相一致。结论　CD62P在HSPN患者肾组织和外周血中表达增强 ,提示其在HSPN发病机制中具有重要作用     

老年胰腺癌患者外周血CD44表达及其临床意义

目的探讨黏附分子CD44在老年胰腺癌外周血淋巴细胞中的表达及其意义.方法用流式细胞检测法(FCM)测定60例老年胰腺癌患者外周血中CD44水平并与正常人及胰腺炎患者进行相互比较,对照分析手术前后或热疗前后CD44的变化.结果胰腺癌组外周血CD44含量为564.51±16.64,明显高于正常对照组(382.46±15.28,P<0.01)及慢性胰腺炎组(396.37±16.32,P<0.01),且手术前或热疗前胰腺癌患者外周血CD44的表达也明显高于手术后或热疗后(P<0.01).亦发现CD44的表达水平与患者的临床分期和组织学分级有关(P<0.01).结论外周血淋巴细胞中CD44含量可作为老年胰腺癌诊断的参考指标,其表达水平的高低可判定临床疗效及预后.     

不同肝纤维化分级患者外周血T、B淋巴细胞Bcl-2的表达

目的探讨不同肝纤维化(LF)分级患者外周血单个核细胞Bcl-2蛋白表达及其临床意义。方法47例LF患者(男17例,女30例)与35例(男24例,女11例)同期住院治疗的慢性乙型肝炎无LF及41例(男29例,女12例)正常对照进行比较研究。以流式细胞仪双标记免疫荧光方法测定外周血T、B淋巴细胞Bcl-2蛋白表达和CD3+T细胞Bcl-2蛋白表达的平均荧光强度(MFI)。结果1.LF组CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群和CD19+细胞Bcl-2蛋白表达明显高于慢性乙型肝炎无肝纤维化组和对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。外周血CD3+T细胞蛋白表达Bcl-2的MFI为0.61±0.17亦明显高于慢性乙型肝炎无肝纤维化组0.32±0.11和对照组的0.19±0.15(P<0.01)。2.Spearman相关分析显示CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群及CD19+细胞的Bcl-2蛋白表达与肝纤维化患者年龄、病程无明显相关,而与肝纤维化分期密切相关。3.抗病毒治疗连续1年,LF患者临床症状改善,且其淋巴细胞亚群Bcl-2蛋白表达亦较治疗前有明显下降(P<0.01),CD3+T细胞蛋白表达的MFI从0.61±0.17减少到0.43±0.14(P<0.01)。结论外周血淋巴细胞Bcl-2蛋白异常表达对LF发病及临床症状有重要作用。     

肾小球肾炎肾组织megsin的表达及其意义

目的 :观察megsin在肾小球肾炎患者肾小球内表达及其特点 ,对原发性肾小球肾炎 (IgA肾病 ,IgAN)和继发性肾小球肾炎 (狼疮性肾炎 ,LN)进行研究。　 方法 :应用针对人类megsin的多克隆抗体 ,采用免疫组化法检测肾活检组织中肾小球内megsin的表达 ,其中IgAN 10例、LN 2 0例 ,并采用半定量方法与正常肾组织和轻微病变性肾病进行比较。　 结果 :正常肾组织和轻微病变性肾病均可表达一定量的megsin ,而在IgAN和LN的肾小球内megsin均表达明显增加。megsin仅表达于肾小球系膜区域 ,小管间质未见表达。在IgAN系膜增生性病变中megsin表达量较硬化性病变明显增多 (P <0 0 5 )。而在LN肾小球megsin的表达量虽较正常肾组织和轻微病变型肾病显著增多 ,但与原发性肾小球肾炎IgAN相比较 ,其表达量少 ,即使在LNⅣ型时。　 结论 :megsin在原发性和继发性肾小球肾炎均有一定的表达 ,并在其疾病进程中以及肾小球系膜功能调节中起一定作用 ,但在原发性和继发性肾小球肾炎中megsin的表达调节可能存在不同的机制     

扁桃体灭活菌株对IgA肾病扁桃体CD4+ CD25+细胞和J链产生的影响

目的:以扁桃体隐窝内甲型链球菌(HS)灭活菌株刺激IgA肾病(IgAN)患者和非肾炎患者扁桃体淋巴细胞,观察未刺激及刺激后CD4 CD25 细胞和分泌J链IgA细胞数量,探讨IgAN的发病机制。方法:(1)收集37例IgAN患者及37例非肾炎慢性扁桃体炎患者手术摘除的扁桃体;(2)分离鉴定两组患者扁桃体隐窝内细菌及分离培养扁桃体淋巴细胞;(3)以分离最多的灭活菌株HS体外刺激扁桃体淋巴细胞72h;(4)以流式细胞仪检测扁桃体淋巴细胞CD4 CD25 细胞数,以原位杂交技术检测J链mRNA表达,以免疫荧光及荧光原位杂交技术同步分析分泌J链IgA细胞。结果:(1)两组患者均有甲型链球菌,且甲型链球菌在分离的细菌中是最多的。两组患者的细菌谱和细菌量无统计学差异。(2)未刺激、非肾炎患者HS(HS-controls)、IgAN患者HS(HS-IgAN)刺激后CD4 CD25 细胞数[(0.98±0.204)% vs (3.58±0.554)%,P<0.05,(1.37±0.214)% vs (5.78±0.562)%,P<0.05,and(1.43±0.202)% vs (6.05±0.521)%,P<0.05],IgAN组与非肾炎组比较,前者均显著低于后者。HS对IgAN组CD4 CD25 细胞的刺激指数(stimulation index,SI)显著低于非肾炎组(P均<0.05)。(3)未刺激、HS-controls、HS-IgAN刺激后J链mRNA阳性IgA细胞[(11.9±3.1)% vs (6.5±1.5)%,P<0.05,(33.5±5.7)% vs (13.9±1.2)%,P<0.05,and(35.1±6.2)% vs (13.9±1.2)%,P<0.01],IgAN组与非肾炎组比较,前者均显著高于后者。HS对IgAN组J链mRNA阳性IgA细胞的SI显著高于非肾炎组(P均<0.01)。(4)HS对CD4 CD25 细胞的SI与对分泌J链IgA细胞的SI呈显著性负相关(P均<0.01)。结论:IgAN患者扁桃体CD4 CD25 细胞减少和分泌J链IgA细胞增多可能与IgAN的发病机制有关。     

系统性硬化患者内皮祖细胞连接黏附分子-A表达

目的研究系统性硬化(SSc)患者外周血内皮祖细胞连接黏附分子-A(JAM-A)表达情况。方法收集13例SSc患者及13例对照组新鲜EDTA抗凝血2ml,采用流式细胞仪方法检测,用PerCP-CY5.5、PE、Alexa Fluor 647和FITC标记CD34、CD133、CD309和JAM-A。内皮祖细胞定义为CD34、CD133、CD309(VEGFR-2,KDR)均阳性的细胞。结果内皮祖细胞表达JAM-A,SSc患者内皮祖细胞中JAM-A表达较正常对照减少(分别为0.0775±0.0385和0.1567±0.1223,P<0.05),SSc患者内皮祖细胞数量亦较对照组少(分别为0.0817±0.0403和0.1746±0.1419,P<0.05)。结论 SSc患者内皮祖细胞中JAM-A的减少是由于患者内皮祖细胞数目减少所致。SSc患者存在血管生成障碍,JAM-A表达异常,并且在SSc发病机制中起一定作用。     

肾组织粘附分子及树突状细胞与IgA肾病小管间质病变的关系

目的:观察粘附分子P-选择素与树突状细胞(DC)在IgA肾病(IgAN)患者肾组织中的表达与分布,探讨P-选择素及DC与肾小管间质病变以及肾功能损害的关系.方法:选择经肾活检和临床资料确诊的IgAN患者45例,根据小管间质病变程度分为3组:轻度组29例,中度组10例,重度组6例;10例正常人肾组织作为对照.采用免疫组化法观察IgAN患者肾组织中P-选择素表达;免疫双标记染色与荧光图像分析法,观察CD1a CD80 DC在肾组织中的分布,并探讨DC与患者肾小管间质病变及肾功能损害的关系.结果:①P-选择素在正常肾组织中基本不表达,在IgAN肾组织中以肾小管上皮细胞为主广泛高表达,重度组肾小管间质表达明显强于轻、中度组,且与肾小管间质病变程度轻重显著相关.②正常人肾组织中基本未见CD1a CD80 DC分布,IgAN肾组织中以肾小管间质为主分布明显增多;其在患者肾小管间质的分布于重度组明显高于轻、中度组,亦与肾小管间质病变程度及血肌酐显著相关.此外,CD1a CD80 DC在患者肾小管间质分布与P-选择素表达明显相关.结论:P-选择素尤其DC可能参与了IgAN肾小管间质病变的免疫病理损伤机制,且推测DC肾炎组织迁移聚集可能与P-选择素介导有关.     

血管通路的评价、选择及并发症防治

随着终末期肾衰竭患者的逐年增多，用于维持性血液透析患者的费用支出也逐年增加，其中相当比例的资金用于血管通路的建立及相关并发症的处理。据Lysaght估计，2001年全球维持性透析患者超过110万人，并以每年7％的速度增长，到2010年将达到200万人，今后10年医疗费用将超过1万亿美元。美国国立卫生研究院(NIH)估计，每年因血管通路建立和相     

Preparation and separation of the glucuronide and sulfate conjugates of thyroxine and triiodothyronine

An enzymatic method for synthesis of labelled thyroxine glucuronide (T4G) and triiodothyronine glucuronide (T3G) from labelled thyroxine (T4) and triiodothyronine (T3) is presented. The synthetic glucuronides are completely digested by beta-glucuronidase, with recovery of the parent T4 or T3. They have distinctive elution patterns on HPLC and on Sephadex G25 chromatography, and can be clearly separated from T4 and T3 as well as from synthetic T4 sulfate (T4S) and T3 sulfate (T3S). On LH 20 chromatography, elution of T4G and T3G is intermediate between that of T4 and T3 and that of T4S and T3S. T3G can be well separated from other thyronines by HPLC alone, but T4G coelutes with rT3 on HPLC; these are then separated by adding a Sephadex G25 chromatography step. Biosynthetic 131I-T3G and 125I-T4G from the bile of a cat given 131I-T3 and 125I-T4 had similar HPLC chromatographic patterns to those of synthetic T3G and T4G. That the identified peaks from analysis of the bile were indeed T3G and T4G was confirmed by recovery of the parent T3 and T4 after beta-glucuronidase digestion.     

我国骨关节结核诊治的回顾与展望

骨关节结核是危害人们健康的严重感染性疾病,近95％由他处结核病继发而来.罹患骨关节结核疾病后几乎均将致残,严重影响人们的健康、工作和生活.建国以来在党和国家的关心和支持下,骨关节结核的诊治水平取得了长足进步.时至今日,由于多种原因,学科发展和被重视程度受到一定的制约,同整个医疗行业的发展不相适应.回顾过去,展望未来,我们需要重新审视骨关节结核的诊治方法,努力推进骨关节结核诊疗技术的科学发展.     

妊娠时间与肺结核复发的相关性研究及诊治对策

目的 分析肺结核史患者妊娠时间和肺结核复发间相关性.方法 选取我院收治的有肺结核史的妊娠妇女576例作为研究对象,对其妊娠前肺结核治疗、治愈后妊娠时间、妊娠后复发肺结核等进行分析,总结有肺结核史育龄女性的妊娠时间和肺结核复发之间的关系.结果 肺结核治愈后不同时间段妊娠者的结核复发率比较,差异具有显著性（P＜0.05）,停药后间隔时间越久妊娠,肺结核复发的几率越小.结论 加强孕期痰菌检查,及早发现复发肺结核,提高母婴安全.     

咽部吞咽的生理解剖学与吞咽障碍的失代偿

0引言吞咽是维持人体生存的重要功能活动.每人每天均必须进行无数次吞咽.对吞咽障碍(deglutitiondisoders,DD)进行有效的预防、诊断和治疗必须了解咽部有关的解剖和功能.1吞咽的生理解剖学“吞咽”不仅指口腔内食团(包括液、固体食物、药物和唾液等)在咽部的通过,而应将之定义为是在构成吞咽通道的唇、舌、腭、咽、喉、食管等各器官肌肉、神经的密切协同下,将吞咽物顺利、安全地运送至胃的全过程[1].食物在口腔内经过咀嚼、搅拌,由唾液润湿,变成食团,然后被吞咽经咽和食管入胃.咀嚼的作用是把大块食物分成小块,并经舌肌、颊肌、颌肌等的搅…     

Kinetics and persistence of cardiovascular and locomotor effects of immobilization stress and influence of ACTH treatment

Stress triggers crucial responses, including elevated blood pressure and heart rate (HR), to handle the emergency and restore homeostasis. However, continuation of these effects following cessation of the stress is implicated with many stress-related disorders. Here, we examine the kinetics and persistence of cardiovascular and locomotor responses to single and repeated immobilization stress (IMO), with and without prior treatment with adrenocorticotropic hormone (ACTH). Radiotelemetry probes were implanted into male Sprague-Dawley rats to continually monitor mean arterial pressure (MAP), HR and locomotor activity. Rats were subjected to IMO for 2 h daily (10 a.m. to noon, 6 consecutive days). The first IMO induced the greatest change in MAP (about 30 mm Hg) and HR (about 200 bpm). Following each IMO, MAP and HR were elevated during the remaining light phase and in the subsequent dark phase, HR was lower than prior to IMO. We further examined whether elevation of ACTH to a level similar to IMO will elicit similar effects, and if it will alter subsequent responses to IMO. Injection of ACTH (13 IU/kg, s.c.) triggered a short-lived rise in MAP, and decreased HR. After six daily injections of ACTH and recovery time (8 days), rats were immobilized as above. The cardiovascular responses were similar during the IMO, but the ACTH-pretreated group displayed differences following cessation of the IMO. In addition, IMO led to a large reduction of locomotor activity during the dark (normally active) phase to levels similar to the light phase. Following the IMOs, locomotor activity recovered more slowly in the ACTH-pretreated group. The study revealed that IMO-triggered cardiovascular and locomotor responses are evident after termination of the stress. In addition, prior exposure to ACTH delayed recovery in cardiovascular and locomotor functions following cessation of stress.