多药耐药基因1与人肝细胞耐砷性关系

目的 观察多药耐药基因1(MDR1)在耐砷的人肝细胞(L-02)中的表达情况,探讨其与L-02耐砷性的关系.方法 培养L-02和耐砷的L-02,用real-time PCR和免疫组织化学法检测细胞MDR1 mRNA和P糖蛋白的表达情况;2种细胞单用亚砷酸钠(NaAsO2)2.5,5.0,10 mmol/L及NaAsO2与MDR1抑制剂环胞菌素D衍生物(PSC833)联合作用24 h后收集细胞,四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法和石墨炉原子吸收光谱法检测细胞生存率和细胞内总砷浓度.结果 MDR1 mRNA及P糖蛋白在耐砷的L-02中的表达强度分别为(8.890±0.968),(68.76± 3.81)%,高于L-02的(1.014±0.189),(24.44±4.03)%,差异有统计学意义(P<0.001);NaAsO2单用时,低、中、高剂量组耐砷的L-02生存率分别为(109.630±0.511)%,(95.469±0.054)%,(78.890±0.024)%,明显高于L-02的(104.841±0.015)%,(91.534±0.026)%,(64.811±0.079)%;而耐砷的L-02内总砷浓度分别为(0.682±0.004),(1.355±0.005),(3.274±0.010)μg/L,明显低于L-02的(1.165±0.010),(3.661±0.002),(7.529±0.006)μg/L,差异有统计学意义(P<0.001);NaAsO2与PSC833联合作用则可增加细胞内总砷浓度、降低细胞存活率(P<0.001).结论 L-02细胞的耐砷性与MDR1高表达有关,在mRNA和蛋白水平均有体现.     

胃癌组织多药耐药与血红蛋白和缺氧诱导因子-1α表达的相关性研究

目的通过检测P-糖蛋白（P-gp）、拓扑异构酶-Ⅱ（TOPO-Ⅱ）、谷胱甘肽转移酶-π（GST-π）及缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）在胃癌组织中的表达，探讨胃癌患者术后化疗多药耐药（MDR）与血红蛋白（Hb）浓度、HIF-1α表达水平的相关性及其可能的内在机制。方法采用免疫组化方法检测56例胃癌组织及20例癌旁正常组织中P-gp、TOPO-Ⅱ、GST-π及HIF-1α的表达。结果（1）胃癌组织P-gp、GST-π、HIF-1α表达水平高于癌旁正常组织，TOPO-Ⅱ表达水平低于癌旁正常组织（P〈0．05）。（2）Pgp、GST-π在不同组织学类型之间差异有统计学意义，HIF-1α在不同癌肿浸润深度及有、无淋巴结转移之间差异有统计学意义（P〈0．05）。（3）在胃癌组织中，P-gp、GST-π及HIF-1α表达水平与Hb成正相关，TOPO-Ⅱ表达水平与Hb呈负相关，HIF-1α与P-gp表达水平之间呈正相关。结论胃癌患者术后化疗MDR与Hb浓度、HIF-1α表达水平成正相关，HIF-1α可能是贫血导致胃癌患者术后化疗MDR的介导因子之一。     

JNK信号通路在NaAsO2诱导L-02肝细胞 凋亡过程中的作用

摘要:目的　研究JNK在NaAsO2诱导L-02肝细胞凋亡中的作用。方法　用不同浓度NaAsO2染毒L-02肝细胞,采用流式细胞术检测L-02肝细胞凋亡率;Western-blot检测L-02肝细胞中Jnk、p-Jnk、Caspase-3蛋白的相对表达量。结果　0、50、100 和 150 μmol/L组细胞凋亡率分别为3.33%±0.30%、7.49%±0.23%、9.48%±0.49%和 14.87%±2.17%,染毒组的细胞凋亡率随NaAsO2浓度的增加而升高,差异有统计学意义（P＜0.05）;染毒组细胞内Jnk、p-Jnk、Caspase-3蛋白相对表达量均增高,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论　NaAsO2能诱导L-02肝细胞凋亡的发生,这可能与激活JNK,增加JNK磷酸化水平,继而激活凋亡调控基因Caspase-3有关。     

无机砷对Chang肝细胞株血红素单加氧酶-1 mRNA和蛋白表达的诱导作用

[目的]观察亚砷酸钠（sodium arsenite,NaAsO2）对Chang肝细胞株血红素单加氧酶-1（heme oxygenase-1,HO-1）mRNA和蛋白表达的诱导作用。[方法]以5μmol／L和10μmol／L的NaAsO2作用Chang肝细胞株2、6、12h和24h,分别用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western Blot法检测细胞内HO-1的mRNA和蛋白表达情况。[结果]5μmol／L和10μmol／LNaAs02暴露2h开始出现HO-1mRNA的诱导表达;6h的表达水平明显高于对照组和2h暴露组（P〈0．01）。其中,10μmol／LNaAsO2暴露12h和24h的mRNA表达均明显高于该浓度的6h暴露组（P〈0．01）;但24h的HO-1 mRNA表达水平与12h组相比没有明显升高。NaAsO2暴露诱导的HO-1蛋白表达则从6h开始出现,12h组明显高于6h组,24h组明显高于12h组（均P〈0．01）;5μmol／L和10μmol／L NaAsO2分别暴露6、12h和24h的HO-1蛋白表达量分别是对照组的2．80、9．34、18．15和3．97、12．92、23．29倍;此外,10μmol/LNaAsO2暴露12h和24h的HO-1 mRNA和蛋白表达均明显高于对应时间的5μmol／L组（P〈0．01）。[结论]NaAsO2暴露能够有效和持续性诱导Chang肝细胞株HO-1的mRNA和蛋白表达,是无机砷暴露的一种细胞保护性适应性反应。     

纳米二氧化钛与醋酸铅联合诱导人胚肝细胞氧化应激作用

[目的]研究纳米二氧化钛（TiO2）与醋酸铅（PbAc）联合作用于人胚肝细胞（L-02）,对细胞内活性氧（ROS）、氧化应激作用及细胞活性的影响。[方法]以1．000mg／LPbAc和10．000、1．000、0．100、0．010、0．001mg／LTi02单独以及1．000mg／LPbAc及前述浓度Ti02混合处理L-02细胞24h,以体积分数为0．1％二甲基亚砜为阴性对照,30gmol／LH2O2为阳性对照。用噻唑蓝法检测细胞毒性,采用流式细胞术检测胞内ROS水平,检测谷胱甘肽（GSH）与超氧化物歧化酶（SOD）以评价细胞内抗氧化物质水平。[结果]与阴性对照、PbAc染毒组及其他浓度TiO。染毒组相比,10．000mg／LTi02染毒组细胞活力明显降低（P〈0．05）。与阴性对照、PbAc染毒组和其他浓度混合物染毒组相比,10．000mg／L混合物染毒组细胞活性明显降低（P〈0．05）;1．000、0．100mg／L混合物染毒组细胞活力也明显低于阴性对照组（P〈0．05）。与阴性对照、PbAc染毒组相比,各浓度混合物染毒组细胞ROS水平均明显增加（P〈0．05）.与阴性对照相比,1．000至0．010mg／L混合物染毒组细胞GSH水平均明显升高（P〈0．05）,0．100、0．010mg／L混合物染毒组细胞SOD活性也明显升高（P〈0．05）。[结论]本研究条件下,低剂量纳米TiO2和PbAc共同作用于L-02,可增加活性氧水平,同时诱导细胞增加GSH和SOD水平以自我保护;随着染毒剂量升高,ROS水平明显增加,抗氧化能力下降,导致细胞活力下降。     

无机砷对人皮肤成纤维细胞增殖毒性的实验观察

目的观察亚砷酸钠诱导体外培养的人皮肤成纤维细胞的作用，探讨砷性皮肤损伤的分子机制。方法通过直接细胞计数法和噻唑蓝（MTT）还原法检测亚砷酸钠对皮肤成纤维细胞生长的影响。结果与对照组比较，皮肤成纤维细胞经不同剂量的亚砷酸钠诱导后，吸光度值均有改变，存在剂量效应关系（P〈0.01）。0．5～5．0μmol／L浓度的亚砷酸钠对皮肤成纤维细胞有明显的增殖作用，而10μmol／L浓度的亚砷酸钠产生明显的毒性作用。结论低浓度NaAsO2、NaAsO2刺激人皮肤成纤维细胞增殖，高浓度具有细胞毒性。     

胃癌IMP3和GST-π的表达及其与临床病理特征的关系

目的探讨IMP3及GST-π在胃癌组织中的表达及意义。方法应用免疫组织化学方法检测49例胃癌及其癌旁正常黏膜组织中IMP3和GST-π的表达。结果（1）胃癌中IMP3的阳性表达率为81．63％（40／49）,其中（＋）18例、（＋＋）14例、（＋＋＋）8例,IMtr3的表达与胃癌组织学分型有关,差异有统计学意义（P〈0．01）;GST-π的阳性表达率为89．79％（44／49）,其中（＋）8例、（＋＋）18例、（＋＋＋）18例。GST-π在胃癌组织学分型中的表达差异也有统计学意义（P〈0．01）,并且肠型表达较强。IMP3和GST-π表达在胃癌患者的年龄、性别、淋巴结有无转移和临床分期等方面的差异均无统计学意义（P〉0．05）。（2）sperman等级相关分析显示胃癌中IMP3和GST-π的表达无明显相关性（P〉0．05）。（3）癌旁组织中,IMP3和GST-π不表达或仅弱表达,与癌组织相比差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论IMP3在胃癌的发生中可能起到一定的作用,并影响胃癌的分型;多耐药基因GST-π在肠型中高表达,提示高分化胃癌更易产生耐药。     

贫血对胃癌患者术后化疗耐药的影响

目的本研究通过检测P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、拓扑异构酶-Ⅱ(topoisomerase-Ⅱ,TOPO-Ⅱ)、谷胱甘肽转移酶-π(glutathione-S-transferase-π,GST-π)及缺氧诱导因子-1α(hypoxia-induciblefactor-1α,HIF-1α)在胃癌组织中的表达情况,探讨贫血在胃癌术后化疗肿瘤的多药耐药[1](multidrugresistance,MDR)中的影响及其可能的内在机制。方法采用免疫组化SupervisionTM二步法检测56例胃癌组织及20例癌旁正常组织中P-gp、TOPO-Ⅱ、GST-π的表达,采用SABC法对检测上述组织中HIF-1α蛋白的表达。结果①胃癌组织P-gp、GST-π、HIF-1α表达水平高于癌旁正常组织,TOPO-Ⅱ表达水平低于癌旁正常组织。②P-gp、GST-π在不同组织学类型之间有显著性差异,HIF-1α在不同癌肿浸润深度及有、无淋巴结转移之间有显著性差异。P-gp、TOPO-Ⅱ、GST-π、HIF-1α表达水平与年龄、性别之间无关。③在胃癌组织中,P-gp、GST-π及HIF-1α表达水平与Hb成正相关,TOPO-Ⅱ表达水平与Hb成负相关,且HIF-1α与P-gp表达水平之间成正相关。结论胃癌患者术后化疗MDR与贫血成正相关,HIF-1α可能是贫血导致胃癌患者术后化疗MDR的介导因子之一。     

亚砷酸钠对HaCaT细胞NF-κB蛋白表达的影响

目的 研究不同浓度亚砷酸钠（NaAsO2）对人角质形成细胞株（HaCaT）核转录因子（NF-κB）蛋白表达的影响及其与活性氧（ROS）及过氧化物酶（CAT）的关系。方法 用流式细胞仪检测细胞内ROS水平，用紫外速率直接法测定CAT活性，用蛋白印迹（western blot）方法检测NF-κB蛋白表达。结果 从2．5μmol／L组开始。细胞内ROS水平增高，且呈剂量一反应关系；5μmol／L以上组CAT活性明显下降，5μmol／L以上组NF-κB表达减弱（P〈0．05）。结论 砷诱导HaCaT细胞氧化应激，抑制NF-κB蛋白的表达。     

肝肿瘤发生中过氧亚硝酸阴离子标志物作用

目的比较过氧亚硝酸阴离子（ONOO^-）对正常人胚肝细胞株L-02和肝母细胞瘤细胞株HepG2 DNA损伤和细胞毒性差异，探索ONOO^-在肝肿瘤发生中的作用及可能标志物。方法0．01，0．05，0．1mmol／L ONOO^-作用细胞后，检测ONOO^-对2株肝细胞的细胞生存率，超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、过氧化氢酶（CAT）、丙二醛（MDA）含量变化，DNA损伤，生长抑制DNA损伤基因（GADD）表达的影响差异。结果ONOO^-使2种肝细胞的生存率下降、SOD含量降低（P〈0．05）和CAT、GSH的显著变化，显著升高MDA的含量；DNA损伤程度和GADD45、GADD153基因表达水平在2株肝细胞均随着剂量的增加显著升高。2种肝细胞相比，各浓度组L-02细胞损伤程度大于HepG2细胞，但只有GADD基因表达水平差异有统计学意义（P〈0．05）。结论ONOO^-对正常肝细胞和肝癌细胞均显示细胞毒性作用，引起DNA损伤，诱导GADD表达。GADD基因表达水平在不同肝细胞中差异有统计学意义，可能是ONOO^-细胞损伤效应的标志物。     

贫血对胃癌患者术后化疗耐药的影响

目的本研究通过检测P-糖蛋白（P—glycoprotein，P—gp）、拓扑异构酶-Ⅱ（topoisomerase-Ⅱ，TOPO-Ⅱ）、谷胱甘肽转移酶-π（glutathione—S—transferase-π，GST-π）及缺氧诱导因子-1α（hypoxia—inducible factor—1α，HIF-1α）在胃癌组织中的表达情况，探讨贫血在胃癌术后化疗肿瘤的多药耐药（muhidrug resistance，MDR）中的影响及其可能的内在机制。方法采用免疫组化SupervisionTM二步法检测56例胃癌组织及20例癌旁正常组织中P—gp、TOPO-Ⅱ、GST-π的表达，采用SABC法对检测上述组织中HIF-1α蛋白的表达。结果①胃癌组织P—gp、GST-π、HIF-1α表达水平高于癌旁正常组织，TOPO-Ⅱ表达水平低于癌旁正常组织。②P—gp、GST-π在不同组织学类型之间有显著性差异，HIF-1α在不同癌肿浸润深度及有、无淋巴结转移之间有显著性差异。P—gp、TOPO-Ⅱ、GST-π、HIF-1α表达水平与年龄、性别之间无关。③在胃癌组织中，P—gp、GST-π及HIF-1d表达水平与Hb成正相关，TOPO-Ⅱ表达水平与Hb成负相关，且HIF-1α与P—gp表达水平之间成正相关。结论胃癌患者术后化疗MDR与贫血成正相关，HIF—1α可能是贫血导致胃癌患者术后化疗MDR的介导因子之一。     

GST-π与非小细胞肺癌多药耐药的相关性研究

目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）的化疗耐药性和参与介导多药耐药的相关基因谷胱甘肽转移酶（CST）-π表达的关系，明确GST-π在介导NSCLC耐药中的作用。方法应用肿瘤细胞体外培养和药敏试验（MTT法）对91例未经化疗的NSCLC患者进行体外化疗药物敏感性测试。观察NSCLC分别对环磷酰胺、阿霉素、顺铂＋氟尿嘧啶三种单药和联合用药方案耐药情况和总的耐药情况，并用免疫组织化学方法对其进行CST-π表达的检测，并将其表达情况与对应的化疗耐药性进行相关分析。结果91例NSCLC化疗敏感性检测结果显示：53例（58．2％）对环磷酰胺耐药。51例（56．0％）对阿霉素耐药，42例（46．2％）对顺铂＋氟尿嘧啶耐药。其中，19例（20．9％）对三种用药均敏感，27例（29．7％）对三种用药均耐药，其耐药性与组织学类型和分化程度无关（P〉0．05）。GST-π在91例NSCLC中总的阳性表达率为64．8％。鳞癌和腺癌比较GST-π的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。GST-π的表达与对三种化疗药物的耐药性均呈正相关（P〈0．05），并且不同表达程度问差异也有统计学意义（P〈0．05）。结论GST-π在NSCLC中均有较高的阳性表达并参与介导了NSCLC固有化疗耐药的机制。     

GST-π与p53在大肠癌和肠道异型增生病变中的表达及临床意义

目的 探讨谷胱甘肽S转移酶π（GST-π）与p53在大肠癌和肠道异型增生病变中的表达及临床意义。方法 应用免疫组织化学SP法检测30例大肠癌、加例肠道异型增生、20例正常肠道黏膜组织中GST-π与p53的表达情况。结果 30例大肠癌、加例肠道异型增生病变、20例正常肠道黏膜组织中GST-π的阳性表达率分别为86．7％、52．5％和15．0％，各组相比差异有统计学意义（P〈0．05）；p53的阳性表达率分别为80．0％、47．5％和0，各组相比差异有统计学意义（P〈0．05），p53阳性者GST-π阳性率高于p53阴性者。结论 肠道病变由正常黏膜、异型增生向恶性变化的过程中，组织内GST-π与p53也逐渐升高，说明GST-π与p53和肠道病变的发生、发展有关，可作为大肠癌及癌前病变的标志物之一。     

双酚A及纳米二氧化钛对人胚肝L-02细胞内活性氧含量及DNA损伤的联合作用

[目的]观察双酚A（BPA）、纳米二氧化钛（nano-TiO2）单独及联合作用对人胚肝L-02细胞内活性氧（reactive oxygen species，ROS）含量及DNA损伤的影响。[方法]生长良好的L-02细胞，分别单独加入0．1、1、10μmol／L的BPA，1、5、10mg／L的nano-TiO2，以及上述各浓度的BPA和nano-TiO2混合染毒24h；采用流式细胞仪检测各组L-02细胞内ROS含量，采用彗星试验观察各组DNA断裂损伤程度。[结果]10μmol／L BPA单独染毒组，1mg／L nano-TiO2与1、10μmol／L BPA，以及5、10mg／L的nano-TiO2分别与0．1、1、10μmol／L BPA联合作用于L-02细胞后，均可引起ROS含量升高，DNA断裂损伤加重，与阴性对照组比较差异有统计学意义（P〈0．001）；而nano-TiO2单独染毒组对于L-02细胞ROS的升高、DNA损伤作用与阴性对照组比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。析因分析结果显示两种受试物混合染毒存在协同作用。[结论]BPA和nano-TiO2联合作用可增加各自对L-02细胞内ROS水平和DNA损伤断裂水平的影响，对细胞的损伤作用增大。     

低剂量长期砷暴露对HaCat细胞周期及周期蛋白影响

目的 探讨低剂量长期砷暴露对人皮肤角质形成细胞系HaCat细胞周期及周期蛋白D1(cyclin D1)和p21影响.方法 HaCat细胞暴露于浓度为0、0.05、0.1μmol/L的NaAsO2 15周后,用流式细胞仪测定10 000个细胞的细胞周期分布;用western blot法检测细胞cyclin D1和p21的蛋白表达水平.结果 与对照组比较,NaAsO2染毒组细胞的G0/G1期细胞数明显增高,S期细胞数明显降低,而G2/M期无明显变化;0.05、0.1μmol/L砷染毒组细胞内cyclin D1表达水平分别为(152.40 ±8.17)％、(145.59 ±2.89)％,与对照组[(99.99±1.13)％]比较,均明显增高;0.05、0.1μmol/L砷染毒组细胞内p21表达水平分别为(64.06± 1.62)％、(39.57±1.82)％,均明显低于对照组的(99.9±2.83)％,呈剂量效应关系(P＜0.05).结论 长期低剂量砷暴露可诱导HaCat细胞周期异常,cyclin D1表达上升,p21表达下降.     

NaAsO2对L-02肝细胞氧化应激性损伤及SOD1、AUF1表达影响

目的 观察不同剂量亚砷酸钠（NaAsO2）对L-02肝细胞氧化应激性损伤作用及超氧化物歧化酶1（SOD1）、AU 碱基富集元件RNA 结合因子1（AUF1）表达影响。方法 用0、10、20、40μmol/L NaAsO2分别处理L-02肝细胞24小时，化学比色法检测谷胱甘肽巯基转移酶（GST）、γ-谷氨酰转肽酶（γ-GT）活力及总胆汁酸（TBA）含量和SOD1、谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）活性；荧光探针2,7-二氯二氢荧光素二乙酸酯检测细胞内活性氧族（ROS）相对荧光密度；实时荧光定量PCR和Western Blotting分别检测SOD1和AUF1转录和蛋白表达。结果 （1）与对照组比较，20、40μmol/L NaAsO2组GST活性和TBA含量均升高（P<0.05）；10、20、40μmol/L NaAsO2组γ-GT活性也升高（P<0.05）。（2）与对照组比较，20、40 μmol/L NaAsO2组SOD1活性均下降（P<0.05）；GPx活性仅在10μmol/L升高（P<0.05）；细胞内ROS先降低后升高（P<0.05）。（3）与对照组比较，20和40μmol/L NaAsO2组AUF1和SOD1 mRNA表达均升高（P<0.05），AUF1蛋白表达先升高后降低（P<0.05）；10、20μmol/L NaAsO2组SOD1蛋白表达升高（P<0.05），但40μmol/L NaAsO2组SOD1蛋白表达有降低趋势。结论 NaAsO2对L-02肝细胞产生氧化应激性损伤，其机制可能是NaAsO2通过降低AUF1的蛋白表达降低，从转录后调控降低了SOD1 mRNA的稳定性而使其蛋白表达和酶活力降低。     

同一乳腺癌患者新辅助化疗前后ER／PR、MVD、Neu、PCNA及MDR的表达及其相关性研究

目的探讨新辅助化疗前后同一乳腺癌患者雌／孕激素受体（ER／PR）、微血管密度（MVD）、癌基因（Neu）、增殖细胞核抗原（PCNA）及多药耐药基因（MDR）的表达有否变化及其相互关系。方法选择确诊为乳腺癌的45例患者为观察组,分别检测经新辅助化疗前后同一乳腺癌患者ER／PR、MVD、Neu、PCNA、MDR的表达,观察化疗后腋窝淋巴结（ALN）的情况;同期设未行化疗的乳腺癌40例作为对照。结果化疗前后ER／PR及PCNA的阳性表达有变化,有统计学差异（P〈O．05）;化疗前后MVD计数有变化,有统计学差异（P〈0．01）;化疗前后Neu、P—gP、GST-π阳性表达有部分变化,无统计学差异（P〉0．05）。手术后ALN转移观察组为40％（18／45）,对照组为58％（23／40）,有统计学差异（P〈O．05）。新辅助化疗前PR与PCNA、P—gP间有显著负相关性,PCNA与P—gP间有显著相关性;化疗后P—gP与Neu、PCNA、GST-π有非常显著相关性;化疗前后ER与PR、Neu与P—gP、P—gP与GST-π间存在有非常显著相关性。结论新辅助化疗可降低ER、PR的表达,乳腺癌患者手术后内分泌治疗与否应根据患者化疗前的受体表达情况来决定。新辅助化疗后MVD的计数及PCNA的表达的减少可能是乳腺癌术后复发减少的因素之一。新辅助化疗方案AC或TA治疗二个疗程后未见Neu表达的改变,也未见耐药性的改变,但可降低患者术后淋巴结转移率。新辅助化疗后乳腺癌患者ER／PR、MVD、Neu、PCNA、P—gP及GST-π之间的关系部分可发生改变。     

砷对淋巴细胞增殖的影响及硒的拮抗作用

目的 :研究砷对淋巴细胞增殖的影响 ,观察硒对砷的拮抗作用。方法 :不同浓度的砷及砷硒联合作用淋巴细胞 ,培养 6d ,用四氮唑 (MTT)还原法观察淋巴细胞生长情况 ;用倒置显微镜观察细胞形态学改变。结果 :NaAsO2 在一定浓度范围内以浓度依赖方式抑制淋巴细胞生长 ,其IC50 为 8 6 3μmol/L ;淋巴细胞的生存率随着NaAsO2 浓度的增加而降低 ;硒的浓度为 0 5 μmol/L对砷有一定的拮抗作用。结论 :NaAsO2 对淋巴细胞的生长有抑制作用 ,且硒能够拮抗砷的细胞毒性。     

无机砷对Chang肝细胞活性氧的诱导和核转录因子表达的影响

目的 研究亚砷酸钠(NaAsO2)对Chang肝细胞中活性氧(ROS)的诱导以及对核转录因子Nrf2的活化作用.方法 体外实验采用0～10μmol/L NaAsO2溶液对Chang肝细胞染毒2、6、12和24 h.分别用流式细胞仪和免疫印记实验(Westernblot)技术检测细胞内ROS含量和Nrf2蛋白的表达.结果 2.5lμmol/LNaAs02溶液染毒6h、5.0Ixmol/LNaAsO2 溶液染毒2、6、12、24 h的平均荧光强度的相对比值均高于对照组,差异有统计学意义(P(0.05或P＜0.01);且ROS的产生量随着NaAsO2溶液浓度的升高而增多.5.0 μmol/L NaAsO2溶液染毒12 h、5.0 μmol/L NaAsO2溶液染毒2、6、12 h的核转录因子Nrf2蛋白表达均强于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);且核转录因子Nrf2蛋白表达的活化具有时间相关性,即在NaAsO2溶液染毒12 h时核转录因子Nrf2蛋白表达的活化出现高峰,而后逐渐降低至正常水平.结论 无机砷能够诱导Chang肝细胞内ROS的生成和增强核转录因子NIf2蛋白的表达.