氧化苦参碱对小鼠肉瘤和肝癌的体内外抗肿瘤作用

目的： 研究氧化苦参碱对小鼠肉瘤和肝癌的体内、外抗肿瘤作用,为氧化苦参碱在抗肿瘤方面的应用提供实验依据。方法： 取对数生长期S₁₈₀和H₂₂细胞悬液预培养24 h,分别设立小鼠S₁₈₀和H₂₂细胞的空白对照组（RPMI-1640培养基）、阴性对照组（不加药的S₁₈₀和H₂₂细胞悬液）、5-氟尿嘧啶（5-FU,5×10^-5 g/L）阳性对照组及5个不同浓度（1×10^-4、1×10^-5、1×10^-6、1×10^-7、1×10^-8 g/L）的氧化苦参碱培养组,连续培养48 h后,采用四甲基噻唑蓝（MTT）法检测氧化苦参碱对S₁₈₀和H₂₂细胞的增殖抑制率。分别将S₁₈₀和H₂₂瘤细胞悬液接种于昆明种小鼠,建立S₁₈₀和H₂₂荷瘤小鼠模型,分别设立正常对照组、模型组、阳性对照组、氧化苦参碱高、中、低剂量组,每组10只。正常对照组和模型组灌胃给予等体积蒸馏水,高、中、低剂量小鼠分别灌胃浓度为100、50、25 mg/kg的氧化苦参碱,阳性对照组灌胃给予30 mg/kg的环磷酰胺。各组连续给药8 d后,检测氧化苦参碱对S₁₈₀和H₂₂荷瘤小鼠的抑瘤率、胸腺系数和脾系数以及对S₁₈₀和H₂₂腹水瘤小鼠生存期的影响。结果： 体外研究结果表明,与阴性对照组比较,氧化苦参碱对小鼠S₁₈₀和H₂₂细胞的增殖均有抑制作用（P<0.05）。动物实验表明,与模型组比较,氧化苦参碱100、50和25 mg/kg剂量组均能够显著抑制小鼠S₁₈₀肉瘤的生长,抑瘤率分别为48.48%、41.67%和32.58%,差异具有统计学意义（P<0.05）;氧化苦参碱100和50 mg/kg剂量组均能够显著抑制小鼠肝癌H₂₂的生长,抑瘤率分别为33.95%和31.63%,差异具有统计学意义（P<0.05）;氧化苦参碱50 mg/kg剂量组可显著延长S₁₈₀腹水型小鼠的生存期,其生命延长率为31.18%,差异具有统计学意义（P<0.05）。与正常对照组比较,氧化苦参碱各剂量组对S₁₈₀荷瘤小鼠和H₂₂荷瘤小鼠的胸腺系数和脾系数无明显影响（P>0.05）。结论： 氧化苦参碱对小鼠肉瘤和肝癌体外和体内均具有一定的抗肿瘤作用。     

肉苁蓉苯乙醇总苷抗肝癌作用的实验研究

目的：研究肉苁蓉苯乙醇总苷（CPhGs）的抗肝癌作用,并探讨其可能的作用机制。方法：采用前肢右侧腋部皮下注射法建立小鼠肝癌H22荷瘤模型,实验设空白对照组、肝癌H22荷瘤模型组、肝复乐阳性治疗组（1 351.5 mg/kg）、CPhGs高剂量组（500 mg/kg）、中剂量组（250 mg/kg）、低剂量组（125 mg/kg）,共6组,每组10只。除空白对照组和模型组外,其余各组分别灌胃给予肝复乐或CPhGs,连续10 d。期间监测小鼠的一般状况,观察各组H22荷瘤小鼠瘤体生长情况,实验结束时,摘眼球取血,酶联免疫（ELISA）法检测血清白介素2（IL-2）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和甲胎蛋白（AFP）含量;分离脾脏、肝脏,称质量,计算脏器系数;完整剥取瘤体,计算各组小鼠的肿瘤抑制率;HE染色观察瘤体病理组织学变化。结果：荷瘤模型组动物腋下肿瘤出现早且生长最快,CPhGs低、中剂量组次之,高剂量组和阳性治疗组瘤体生长较慢。与模型组比较,CPhGs中、高剂量组瘤质量均明显降低（P < 0.05）,各剂量组抑癌率随CPhGs剂量增加依次升高（P < 0.05）;阳性治疗组和CPhGs各剂量组脾脏系数均明显升高及肝脏系数均明显降低（P < 0.05）;CPhGs中、高剂量组和阳性治疗组IL-2含量均明显升高（P < 0.05）,而AFP含量均明显降低（P < 0.05）;CPhGs各剂量组和阳性治疗组TNF-α含量均明显降低（P < 0.05）。病理结果发现CPhGs各剂量组小鼠肝癌细胞生长受到抑制、数目较少、异质性降低、并伴有大量坏死细胞。结论：CPhGs能降低肝癌H22荷瘤小鼠肝脏损伤,并对其肿瘤生长有抑制作用,可能与CPhGs降低荷瘤小鼠血清中AFP含量及提高荷瘤小鼠免疫能力有关。     

酒石酸长春瑞滨脂质微球注射液对荷人乳腺癌裸鼠肿瘤生长的影响

目的: 研究酒石酸长春瑞滨脂质微球注射液(NVB-lip)对荷人乳腺癌裸鼠肿瘤生长的影响。方法: 35只雌性BALB/c-nu裸鼠,随机分为NVB-lip高(10 mg/kg)、中(5 mg/kg)、低(2.5 mg/kg)剂量组,阳性对照组(酒石酸长春瑞滨注射液,5 mg/kg)和阴性对照组(脂质化空白溶液),每组7只。给裸鼠接种人乳腺癌BCAP-37瘤株,待成瘤后,每只动物每次按0.20 mL经尾静脉注射给药,间隔3~4 d注射1次,每周注射2次,共注射6次。在第1次注射后第4、7、11、14、18和23天时分别称小鼠体质量和测量肿瘤体积,计算得出相对肿瘤体积、相对肿瘤增殖率和肿瘤抑制率。结果: 与阴性对照组相比,各组荷瘤裸鼠体质量差异均无统计学意义(P均>0.05)。NVB-lip各剂量组的相对肿瘤体积和相对肿瘤增殖率显著减小,肿瘤抑制率显著增大,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论: NVB-lip在2.5~10 mg/kg范围内抑瘤作用明显,具有可开发潜力。     

中药木鳖子乙醇提取物对羟基桂皮醛对小鼠的毒性

目的：检测中药木鳖子乙醇提取物对羟基桂皮醛（CMSP）的毒性,为其应用于临床肿瘤治疗提供毒理学依据。方法：60只昆明小鼠（4~6周龄,雌雄各半）分为空白对照组,CMSP 200 mg/kg和400 mg/kg染毒组,每组20只,采用腹腔注射的方式染毒,每周3次,每次100 μL,连续28 d。观察各组小鼠一般状态,28 d后,处死小鼠,摘眼球取血,采用全自动血细胞分析仪及全自动生化分析仪检测小鼠血常规、肝肾功能和心肌酶谱等生化指标,并计数雄性小鼠精子畸形率,同时采用HE染色观察各组小鼠重要脏器组织的病理改变。观察骨髓细胞微核形成率。结果：观察期内无小鼠死亡,各组小鼠血常规指标、雄性小鼠精子畸形率与对照组相比,差异均无统计学意义（P > 0.05）,高剂量CMSP组小鼠外周血ALT和AST较对照组高（P < 0.05）,肾功能及心肌酶谱无明显差异（P > 0.05）。HE染色结果显示各组小鼠内脏组织均未观察到肉眼可见的病理改变。小鼠骨髓细胞微核形成率亦无明显变化（P > 0.05）。结论：在本研究中,我们发现CMSP具有相对较小的毒性作用,因此可考虑应用于肿瘤临床治疗中,但在后续研究中需充分关注其可能具有的肝功能损伤作用。     

去甲斑蝥酸钠脂质微球注射液对荷人肺癌A549移植瘤裸鼠肿瘤生长的抑制作用

目的: 观察去甲斑蝥酸钠脂质微球注射液对荷人肺癌A549细胞移植瘤裸鼠模型肿瘤生长的抑制作用。方法:在BALB/c-nu裸鼠右前肢腋下接种A549细胞株建立人肺癌动物模型,移植11 d后采用均衡法随机分为5组,即去甲斑蝥酸钠脂质微球注射液高剂量组(5 mg/kg)、中剂量组(2.5 mg/kg)、低剂量组(1.25 mg/kg)以及阳性对照组(2.5 mg/kg去甲斑蝥酸钠注射液)和阴性对照组(等体积空白脂质微球注射液),每组7只裸鼠,给药体积为0.2 mL。采用尾静脉注射给药,各组动物于分组后第1、4、8、11、15、18、22天给药,共7次。于给药第7、14、24天检测并计算各组肿瘤体积(V_t)、相对体积(V_RT)、增殖率(T/C)等,给药后第24天检测并计算各组肿瘤质量和抑瘤率。结果:去甲斑蝥酸钠脂质微球注射液给药第7天后,各给药组肿瘤体积、相对体积均明显小于阴性对照组(P<0.05),并具有剂量-效应关系(r_{7 d}=0.994,r_{14 d}=0.993,r_{24 d}=0.996,P均<0.05);24 d后各剂量组动物肿瘤T/C均小于35%,其中2.5、5 mg/kg剂量组和阳性对照组T/C均小于20%;各给药组平均肿瘤质量明显低于阴性对照组(P<0.01),肿瘤生长抑制率均大于50%。结论:去甲斑蝥酸钠脂质微球注射液具有抑制人肺癌A549细胞生长,降低人肺癌A549细胞移植瘤增殖率的作用。     

基于转录组测序方法研究加替沙星对小鼠的肝损伤作用

目的： 探讨加替沙星（GAT）对小鼠肝脏的损伤作用及其机制。方法： 选取32只SPF级雄性昆明小鼠作为研究对象，随机分为4组：低、中、高剂量（分别为25、50、100 mg/kg） GAT组和对照组。给药体积按10 mL/kg，连续灌胃给药7 d，对照组给予对应体积的生理盐水。通过检测各组小鼠血清中的谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（AKP）、肌酐（CRE）和甘油三酯（TG）浓度，初步评价加替沙星导致的小鼠肝组织损伤。进一步利用转录组测序技术检测各组小鼠肝脏的基因表达谱，筛选差异表达基因，对差异基因进行基因本体论（GO）功能分类，并采用京都基因与基因组百科全书（KEGG）数据库进行信号通路富集分析。结果： 与对照组比较，高剂量GAT组小鼠肝脏质量显著降低（P<0.01）；低、中剂量GAT组肝脏系数显著降低（P<0.01）；低、中剂量GAT组小鼠血清ALT浓度显著降低（P<0.05或0.01）；低剂量GAT组小鼠血清AST浓度显著降低（P<0.01）。与对照组比较，中剂量GAT组共筛选出27个差异表达基因（包括20个上调基因，7个下调基因）。GO功能分类提示这些基因主要富集在免疫系统、多细胞生物、多生物及生殖过程等17个生物过程中。KEGG通路分析提示差异基因主要富集于脂质代谢、萜类化合物和聚酮化合物的代谢等22条通路中。结论： GAT可导致小鼠肝功能发生变化，并通过影响小鼠肝脏内胆汁酸和胆固醇等内分泌系统和脂质代谢等的平衡，造成肝组织损伤。     

刺山柑果风湿止痛凝胶膏对SD大鼠的一般生殖毒性

目的：评价刺山柑果风湿止痛凝胶膏对SD大鼠的一般生殖毒性。方法：SD大鼠随机分为辅料对照组(辅料贴)、阳性对照组(环磷酰胺)和刺山柑果风湿止痛凝胶膏高(117.8g/m2)、中(58.9g/m2)、低(29.5g/m2)剂量组,每组雌、雄鼠各25只。每天经皮外贴给药1次,雄鼠给药4周、雌鼠给药2周后按1∶1合笼交配,雄鼠给药至交配成功,雌鼠给药至妊娠第6天,阳性对照组在大鼠给药第1天单次腹腔注射(0.1g/kg环磷酰胺)。实验期间观察动物的一般状况,体质量、摄食量和交配情况;雄鼠于交配成功当天解剖检查睾丸、附睾及精子情况;雌鼠于妊娠第14天解剖检查子宫、卵巢及胚胎情况。结果：与辅料对照组比较,刺山柑果风湿止痛凝胶膏各剂量组对雄鼠和孕鼠的体质量、饲料消耗量均无明显差异(P>0.05);对雄鼠交配率、睾丸横径、精子数目的：评价刺山柑果风湿止痛凝胶膏对SD大鼠的一般生殖毒性。方法：SD大鼠随机分为辅料对照组(辅料贴)、阳性对照组(环磷酰胺)和刺山柑果风湿止痛凝胶膏高(117.8g/m²)、中(58.9g/m²)、低(29.5g/m²)剂量组,每组雌、雄鼠各25只。每天经皮外贴给药1次,雄鼠给药4周、雌鼠给药2周后按1∶1合笼交配,雄鼠给药至交配成功,雌鼠给药至妊娠第6天,阳性对照组在大鼠给药第1天单次腹腔注射(0.1g/kg环磷酰胺)。实验期间观察动物的一般状况,体质量、摄食量和交配情况;雄鼠于交配成功当天解剖检查睾丸、附睾及精子情况;雌鼠于妊娠第14天解剖检查子宫、卵巢及胚胎情况。结果：与辅料对照组比较,刺山柑果风湿止痛凝胶膏各剂量组对雄鼠和孕鼠的体质量、饲料消耗量均无明显差异(P>0.05);对雄鼠交配率、睾丸横径、精子数量、精子活动度和畸形率、附睾和睾丸质量均无明显影响(P>0.05);对雌鼠妊娠率、子宫连胎质量、平均黄体数、平均着床数、平均活胎数、平均死胎数、平均吸收胎数、死胎率、卵巢质量亦均无明显影响(P>0.05);但刺山柑果风湿止痛凝胶膏117.8g/m²剂量组着床前胚胎丢失率升高(P<0.05)、着床率降低(P<0.05),29.5g/m²组着床前胚胎丢失率降低(P<0.01)、着床率升高(P<0.01)。结论：刺山柑果风湿止痛凝胶膏对雄鼠的生育力无明显毒性影响,高剂量(117.8g/m²)刺山柑果风湿止痛凝胶膏对雌鼠的生育力存在一定影响,中(58.9g/m²)、低(29.5g/m²)剂量对雌鼠的生育力无明显毒性影响。量、精子活动度和畸形率、附睾和睾丸质量均无明显影响(P>0.05);对雌鼠妊娠率、子宫连胎质量、平均黄体数、平均着床数、平均活胎数、平均死胎数、平均吸收胎数、死胎率、卵巢质量亦均无明显影响(P>0.05);但刺山柑果风湿止痛凝胶膏117.8g/m2剂量组着床前胚胎丢失率升高(P<0.05)、着床率降低(P<0.05),29.5g/m2组着床前胚胎丢失率降低(P<0.01)、着床率升高(P<0.01)。结论：刺山柑果风湿止痛凝胶膏对雄鼠的生育力无明显毒性影响,高剂量(117.8g/m2)刺山柑果风湿止痛凝胶膏对雌鼠的生育力存在一定影响,中(58.9g/m2)、低(29.5g/m2)剂量对雌鼠的生育力无明显毒性影响。     

全氟辛烷磺酸和全氟辛酸对秀丽隐杆线虫的生殖毒性

目的：探讨全氟辛烷磺酸（PFOS）和全氟辛酸（PFOA）对秀丽隐杆线虫的生殖毒性，寻找评价PFOS和PFOA生殖毒性的替代模型。方法：PFOS和PFOA分别设高、中、低3个染毒剂量（0.1、0.01、0.001 mmol/L）组和空白对照组，同步化后L4期幼虫在24孔板里染毒24 h，L1期幼虫染毒48 h，测定后代数目和世代时间。结果：L4期幼虫染毒24 h后，与对照组比较，PFOS高、中剂量组后代数目差异具有统计学意义（P<0.05），PFOA的3个剂量组后代数目差异均有统计学意义（P<0.05）；PFOS和PFOA各剂量组世代时间差异均无统计学意义（P>0.05）。L1期幼虫染毒48 h后，与对照组比较，PFOS和PFOA高、中剂量组后代数目差异具有统计学意义（P<0.05）；PFOS 3个剂量组的世代时间差异均具有统计学意义（P均<0.05）。结论：后代数目是PFOS和PFOA生殖毒性的敏感指标，L1期幼虫的世代时间对PFOS暴露比L4期幼虫更敏感，但PFOA不影响线虫的世代时间。线虫可能成为评价PFOS和PFOA生殖毒性的替代模型。     

活性氧在异烟肼诱导L-02细胞DNA损伤中的作用及槲皮素的保护效应

目的：探讨活性氧（ROS）在异烟肼（INH）诱导的L-02细胞DNA损伤中的作用及槲皮素的保护效应。方法：将L-02细胞分为空白对照组、INH组（10 mmol/L INH）;槲皮素低剂量组（10 mmol/L INH+25 μmol/L槲皮素）;槲皮素高剂量组（10 mmol/L INH+50 μmol/L槲皮素）。细胞处理24 h后,采用彗星试验检测细胞DNA损伤情况;分别应用荧光探针DCFH-DA和Rhodamine123检测细胞ROS水平及线粒体膜电位。结果：与空白对照组比较,L-02细胞经INH和槲皮素处理后,INH组细胞尾部DNA百分含量、尾长和尾矩均显著增加（P<0.01）;与INH组相比,低和高剂量槲皮素组细胞的尾部DNA百分含量、尾长和尾矩均明显减少（P<0.05或P<0.01）。INH组细胞线粒体ROS水平比空白对照组显著升高（P<0.01）;而低和高剂量槲皮素组细胞线粒体ROS水平比INH组明显降低（P<0.05或P<0.01）。INH组细胞线粒体膜电位显著低于空白对照组（P<0.01）,而低和高剂量槲皮素组细胞线粒体膜电位明显高于INH组（P<0.05或P<0.01）。结论：INH能诱导L-02细胞DNA损伤,ROS介导的线粒体损伤在INH诱导L-02细胞DNA损伤的过程中发挥了重要作用;槲皮素对INH诱导L-02细胞DNA损伤具有保护效应,可能与其抑制ROS介导的线粒体损伤有关。     

节拍化疗通过影响血管形成及免疫系统抑制肿瘤细胞生长的机制

目的 研究节拍化疗方案对乳腺癌肿瘤细胞的影响及其作用机制。方法 建立荷瘤小鼠模型,给予常规剂量卡培他滨化疗作为常规化疗组,持续低剂量卡培他滨化疗作为节拍化疗组,不应用化疗作为对照组。测定肿瘤血管微密度(Microvessel density,MVD)、血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)、凝血酶敏感蛋白1(Thrombospondin 1,TSP-1)的表达情况,通过流式细胞仅检测不同化疗方案中骨髓来源抑制性细胞(Myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)、NK细胞、巨噬细胞的比例,观察化疗结束后小鼠的肿瘤大小和血中白细胞计数。结果 节拍化疗组与常规化疗组比较,MVD、VEGF降低,TSP-1升高,差异有统计学意义(P＜0.05)。节拍化疗组与常规化疗组比较,MDSCs比例降低,NK细胞、巨噬细胞的比例升高,差异有统计学意义(P＜0.05)。节拍化疗组与常规化疗组在治疗结束后肿瘤体积没有区别(P＞0.05),但节拍化疗组小鼠白细胞计数明显高于常规化疗组(P＜0.05)。结论 持续低剂量卡培他滨化疗通过抑制新生血管形成,调整免疫细胞的比例来抑制肿瘤形成,同时降低化疗引起的副反应,提高生存质量。     

黄连素改善小鼠结肠腺癌恶病质实验研究

目的通过小鼠结肠腺癌恶病质模型实验探索传统中药提取物黄连素改善恶病质状态的作用及机制。方法将40只BALB/c小鼠随机分成5组,每组8只。即非荷瘤健康对照组、肿瘤恶病质组、黄连素低剂量干预组、黄连素中剂量干预组、黄连素高剂量干预组,使用小白鼠结肠腺癌细胞株CT-26皮下注射BALB/c小鼠,构建荷瘤小鼠肿瘤恶病质模型。黄连素低、中、高剂量干预组小鼠分别给予黄连素12.5 mg/（kg·d）、25 mg/（kg·d）、50mg/（kg·d）灌胃,连续15天。健康对照组、肿瘤恶病质组给予等量生理盐水灌胃。观察低、中、高剂量黄连素对恶病质小鼠的体质量、摄食量、饮水量以及血清中三酰甘油、血糖及总蛋白、白蛋白水平的影响,并比较各组肿瘤组织炎性细胞因子白细胞介素1（interleukin-1,IL-1）、IL-6、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）水平以及肝、肾组织形态。观察不同剂量黄连素纠正恶病质的疗效及对肝肾的保护作用。结果与肿瘤恶病质组比较,黄连素干预各组能抑制癌症恶病质小鼠体质量下降,增加小鼠的摄食量、饮水量（均P〈0.05）;可升高血中总蛋白、白蛋白、血糖浓度,降低血清中三酰甘油的异常升高（均P〈0.05）;可降低肿瘤组织中的IL-1、IL-6及TNF-α表达水平（均P〈0.05）;可改善肝、肾组织形态。结论黄连素能有效改善小鼠结肠腺癌恶病质状态,以黄连素中、高剂量组疗效更佳,其机制可能与其有效降低细胞因子（IL-1、IL-6及TNF-α）表达相关。     

熊果酸对小鼠H22 移植瘤的抑制作用研究

目的： 观察熊果酸 (ursolic acid,UA)对小鼠H22移植瘤的抑制作用并对其机制进行探讨。方法：将75只昆明种小鼠于左前腋下皮下接种H22肝癌细胞,24 h后随机分为5组,每组15只,模型组、环磷酰胺 (cyclophosphamide,CP)对照组[25 mg/ (kg·d)] 和UA低、中、高剂量药物组[50、100、150 mg/ (kg·d)]。UA各剂量组和CP对照组分别以相应剂量UA和CP灌胃,模型组以等体积花生油灌胃,每天灌胃1次,连续给药2周。末次给药24 h后,称小鼠体质量,摘除眼球取血后处死。无菌条件下完整剥离小鼠肿瘤及肝、肾、脾组织,计算抑瘤率及肝、肾、脾指数;HE染色观察肿瘤组织病理学改变;分离脾淋巴细胞,CCK8法测定小鼠脾淋巴细胞增殖活性;免疫组化法检测肿瘤组织中CD4+、CD8+ T细胞亚群的分布情况,计数CD4+ T细胞和CD8+ T细胞个数。并采用酶联免疫吸附法 (ELISA)检测血清中白细胞介素12 (interleukin-12,IL-12)的浓度。结果：UA各剂量组小鼠H22肿瘤质量增长均较缓慢,其中UA中、高剂量组肿瘤质量明显减小,与模型组比较,差异均具有统计学意义 (P<0.05);UA中、高剂量组抑瘤率分别为30.15%和39.80%。UA各剂量组肝、肾指数与模型组比较差异无统计学意义 (P>0.05),而脾指数则随UA剂量增加逐渐升高,其中,UA中、高剂量组脾指数与模型组比较差异具有统计学意义 (P<0.05)。HE染色病理观察结果显示,模型组肿瘤细胞生长旺盛,细胞体积较大,胞质丰富,少见坏死区域;UA干预组肿瘤组织中瘤细胞生长增殖明显受到抑制,肿瘤细胞数量减少,密度降低,排列稀疏,细胞核固缩深染或破裂,细胞间质较多,核浆比例减少,坏死区域明显增多。CCK8实验结果显示,随着UA剂量增加,脾淋巴细胞增殖活性逐渐升高,其中,UA中、高剂量组脾淋巴细胞增殖活性显著升高,与模型组间的差异具有统计学意义 (P<0.05)。免疫组化结果显示,UA中、高剂量组肿瘤组织中CD4+、CD8+ T细胞个数与模型组比较均明显增加,差异具有统计学意义 (P<0.05)。UA高、中、低剂量组血清中IL-12的含量均较模型组升高,差异均有统计学意义 (P<0.05);UA高剂量组与CP对照组相比亦显著升高 (P<0.05)。 结论：一定剂量UA可抑制H22荷瘤小鼠肿瘤生长,其作用机制可能与UA促进机体免疫器官发育和淋巴细胞增殖,增加CD4+、CD8+ T细胞向肿瘤组织浸润,并提高血清中IL-12等抗肿瘤活性细胞因子的浓度诱导细胞免疫有关。     

N-乙酰半胱氨酸对纳米二氧化钛诱发细胞遗传损伤的保护作用

目的：探讨抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)对纳米二氧化钛(TiO₂-NPs)诱发人正常肝细胞L-02和肺细胞HBE遗传损伤的保护作用。方法：分别将对数生长期的L-02和HBE细胞分为3组,即正常培养的对照组、TiO₂-NPs(80μg/mL)暴露组、TiO₂-NPs(80μg/mL)与NAC(20μmol/L)联合暴露组;各组细胞处理72h后,采用H₂O₂试剂盒检测细胞内H₂O₂浓度;实时荧光定量(qPCR)法检测L-02、HBE细胞端粒长度(TL)的改变;胞质分裂阻断微核细胞组试验(CBMN-Cyt)评估受试细胞的染色体不稳定性(CIN)及细胞死亡率。结果：与对照组相比,TiO₂-NPs暴露72h后,可诱导L-02和HBE细胞内H₂O₂浓度显著升高(P<0.05),致使L-02和HBE细胞TL缩短、CIN增加、细胞死亡率增加(P<0.05);当TiO₂-NPs与NAC联合暴露72h后时,两种受试细胞的H₂O₂水平和CIN仍较对照组显著升高(P<0.05),而TL和细胞死亡率与对照组间的差异均无统计学意义(P>0.05);与单独暴露TiO₂-NPs组相比,联合暴露时两种受试细胞的TL显著增加(P<0.05),且CIN及细胞死亡率显著降低(P<0.05)。结论：抗氧化剂NAC可抑制TiO₂-NPs诱发的人肝细胞L-02和肺细胞HBE的TL缩短和细胞死亡,维护染色体稳定,对细胞有一定保护作用。     

桑黄素在脂多糖诱导的急性肺损伤中的相关机制

目的： 探究桑黄素在脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)中的相关机制。方法： 将32只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组(生理盐水)、ALI模型组(LPS处理)、LPS+桑黄素低浓度(25 mg/kg)处理组和LPS+桑黄素高浓度(50 mg/kg)处理组,共4组,每组8只。LPS(6 mg/kg)溶液经气管滴入小鼠气道刺激支气管及肺组织建立ALI模型。桑黄素溶液经腹腔注射给药3 d后,收取双肺,对一部分肺组织测定湿/干质量比,进行HE染色和组织病理学观察。采用实时荧光定量PCR(qPCR)和Western blot检测肺组织中氧化应激信号通路相关基因(NOX1、NOX4、Nrf2和HO-1)的表达情况。结果： HE染色和肺湿/干质量比测定结果显示气道滴入LPS成功构建了ALI小鼠模型,与对照组比较,桑黄素处理可有效缓解LPS诱导的急性肺损伤。qPCR和Western blot实验结果显示,与对照组比较,ALI模型组肺组织中,Nrf2和HO-1的表达上调(P<0.01);与ALI模型组比较,桑黄素处理可显著降低肺组织NOX1和NOX4的表达(P<0.05或P<0.01);且桑黄素处理可进一步上调Nrf2和HO-1的表达从而抑制氧化应激的发生(P<0.05或P<0.01)。结论： 氧化应激的发生参与ALI 的发生发展,桑黄素可通过激活Nrf2-HO-1信号通路降低NOX1和NOX4表达抑制氧化应激,从而减缓LPS引起的肺损伤。     

甘油致不同性别SD大鼠急性肾脏损伤模型的评价

目的:探讨甘油经肌肉注射对不同性别大鼠急性肾脏损伤的影响。方法:将24只健康成年SPF级SD大鼠(雌雄各半)按性别随机分为4组,雄性对照组、雄性试验组、雌性对照组与雌性试验组,每组6只。试验前禁水24 h,按照10 mL/kg的剂量分别给予大鼠两侧后肢肌肉注射生理盐水或50%甘油生理盐水,用代谢笼采集24 h尿液;并在注射48 h后麻醉通过腹主动脉采集血液,手术摘取肾、肝、脾等脏器,检查血清生化、血常规、尿常规及血凝等指标,观察肾、肝、脾等脏器的病理学变化。结果:与对照组比较,试验组大鼠血液中白蛋白(ALB)、红细胞(RBC)均出现明显降低(P<0.05),而肌酐、尿素氮、谷丙转氨酶、血小板均明显升高(P<0.05);雌性试验组大鼠的总蛋白及尿比重均明显降低,而门冬氨酸氨基转移酶出现明显升高(P<0.05);病理结果显示试验组动物肾小管扩张,可见透明管型与蛋白管型,肝血窦发生扩张,其中肾损伤最明显。结论:肌肉注射甘油不仅造成肾脏损伤,而且还造成轻微的肝脏损伤。在甘油诱导的急性肾损伤模型中,雄性大鼠的肾损伤程度低于雌性大鼠。     

百合多糖联合大蒜素对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤生长及血清细胞因子水平的影响

目的:探讨百合多糖联合大蒜素对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤生长及血清细胞因子水平的影响。方法:雄性 BALB/c小鼠腋下注射肝癌H22细胞计数瘤液建立荷瘤模型,分为百合多糖组（100 mg/kg）、大蒜素组（40 mg/kg）、百合多糖低剂量+大蒜素组（50 mg/kg+40 mg/kg）、百合多糖中剂量+大蒜素组（100 mg/kg+40 mg/kg）、百合多糖高剂量+大蒜素组（150 mg/kg+40 mg/kg）、正常组、模型组和环磷酰胺组（30 mg/kg）。处理7 d后,观察小鼠的肿瘤重量,计算抑瘤率;胸腺、脾脏称重,计算胸腺指数和脾脏指数;ELISA法检测血清免疫相关细胞因子IL-18、TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-6水平及促血管生长因子VEGF水平。结果:大蒜素组、百合多糖中剂量+大蒜素组、百合多糖高剂量+大蒜素组抑瘤率分别为27.27%、34.68%和30.64%。百合多糖中剂量+大蒜素组和百合多糖高剂量+大蒜素组胸腺指数明显高于模型组(P<0.01)。百合多糖高剂量+大蒜素组较模型组明显升高IL-18水平(P<0.01)。百合多糖中剂量+大蒜素组TNF-α水平高于模型组(P<0.05)。百合多糖中剂量+大蒜素组较模型组明显升高IL-2水平(P<0.01)。百合多糖高剂量+大蒜素组较模型组降低VEGF水平(P<0.05)。结论:百合多糖联合大蒜素能抑制肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤的生长,提高荷瘤小鼠的胸腺指数,并促进小鼠分泌免疫相关细胞因子IL-18、TNF-α、IL-2,减少分泌VEGF。     

丹蛭降糖胶囊对糖尿病模型大鼠心、肾组织的影响

目的:探讨丹蛭降糖胶囊对糖尿病模型大鼠心脏和肾组织病理学变化的影响。方法:雄性SD大鼠70只,随机选取10只作为正常组,普通饲料饲养,其余大鼠高脂饲料喂养4周,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)34 mg/kg制作Ⅱ型糖尿病大鼠模型,造模不成功大鼠腹腔注射补注STZ 25 mg/kg。成模大鼠根据血糖、体质量分为4组:模型组、高剂量[1.08 g/(kg·d)]丹蛭降糖胶囊组、低剂量[0.54 g/(kg·d)]丹蛭降糖胶囊组、吡咯列酮组[10 mg/(kg·d)],每组10只。正常组、模型组大鼠给予同体积生理盐水。连续灌胃给药6周,测定大鼠一般体征指标,全自动生化分析仪检测血糖、血脂、肾功能指标(BUN、Scr、m Alb、尿蛋白量),心脏组织采用HE及MASSON染色,肾组织采用HE、MASSON及糖原PAS染色,观察组织的病理变化。结果:与正常组相比,模型组大鼠体质量下降,摄食量、摄水量明显增加,血糖、血脂、肾功能指标升高(P<0.01),病理组织学观察可见心脏炎性细胞浸润,心肌纤维化增加,肾脏包曼氏囊结构改变,细胞质基质增多,纤维化程度明显增加。给药6周后,与模型组比较,吡咯列酮组、高、低剂量丹蛭降糖胶囊组大鼠体质量明显增加,摄食量、摄水量下降(P<0.01),病理学观察可见心脏、肾脏各项病变均有所减缓。吡格列酮组、高剂量丹蛭降糖胶囊组血糖、血脂、肾功能指标下降(P<0.05或P<0.01),低剂量丹蛭降糖胶囊组大鼠血糖、血脂、肾功能指标虽下降,但TC水平差异无统计学意义(P>0.05),且Hb Alc、TG、TC、m Alb水平与吡格列酮组存在统计学差异(P<0.05或P<0.01)。结论:高剂量丹蛭降糖胶囊能有效地改善大鼠的血糖血脂水平,缓解多饮、多食症状,并可减轻高血糖对大鼠心肌及肾脏组织的损害。     

己二酸二(2-乙基己基)酯灌胃染毒对大鼠的一般生殖毒性研究

目的： 观察己二酸二（2-乙基己基）酯（DEHA）灌胃染毒对亲代大鼠的一般毒性、交配行为和对胎仔生长发育的影响。方法： 将120只成年SPF级SD大鼠按体质量随机分为4组，分别为对照组（玉米油）和低、中、高剂量[分别为28、170、1 080 mg/（kg·d）]DEHA染毒组，每组30只，雌：雄比例2：1，采用灌胃方式给予受试物，每天灌胃1次，雄鼠染毒10周、雌鼠染毒2周后同组动物合笼。各组雄鼠结束染毒后，雌鼠在交配期、妊娠期持续染毒至实验结束，测定亲代大鼠体质量、相关脏器质量及其脏器系数并进行组织病理检查，测定亲代大鼠血清生化指标。记录交配成功天数、怀孕动物数、每窝胎仔数和胎仔体质量。结果： 与对照组比较，在亲代大鼠中，高剂量DEHA染毒组亲代雄性大鼠终体质量减少（P < 0.01）、睾丸脏器系数增加（P < 0.05），谷草转氨酶（AST）水平、肌酐（CREA）水平均升高（P < 0.05）；与对照组比较，高剂量组亲代雌性大鼠肝脏和肾脏质量及肝、肾脏器系数均增加（P < 0.01或P < 0.05），低剂量组亲代雌性大鼠AST水平降低（P < 0.05）；高剂量组亲代雌性大鼠血清球蛋白（GLO）、总胆固醇（TC）水平均升高（P < 0.05）；高剂量组的胎仔体质量降低（P < 0.01）。组织病理学检查结果未见明显异常。结论： DEHA灌胃染毒可影响亲代大鼠体质量增长，对亲代大鼠肝、肾有毒性作用，引起胎仔生长发育障碍。     

沙苑子黄酮抗肝癌生长作用及对免疫功能的影响

目的:探讨中药提取物沙苑子黄酮(flavonoids extracts from semen Astragali complanati,FAC)对小鼠肝癌H22细胞生长的影响及其机制.方法:建立H22荷瘤小鼠模型,观察FAC对H22肝癌移植瘤生长的抑制作用及其对荷瘤小鼠免疫器官、巨噬细胞吞噬功能、淋巴细胞转化功能及生存期的影响.结果:高、中、低剂量组FAC对荷瘤小鼠肝癌细胞生长具有显著抑制作用,与正常对照模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05);其中环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)对照组的抑瘤率与FAC高剂量组相近(P>0.05). FAC可以明显延长荷瘤小鼠的存活期,高、中、低剂量组的生命延长率分别为64.9%、56.7%和28.1%,与CTX对照组比较差异具有统计学意义(P<0.01).另外,高、中、低剂量组FAC明显提高荷瘤小鼠的胸腺指数和脾指数,与正常对照模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05);且高、中剂量组能显著提高巨噬细胞吞噬功能和淋巴细胞转化能力,与正常对照模型组比较差异具有统计学意义(P<0.01);而CTX的作用方向相反,与正常对照模型组比较差异也具有统计学意义(P<0.01).结论:FAC可抑制肝癌H22细胞生长,延长荷瘤小鼠存活期,并能提高荷瘤小鼠的非特异性免疫功能.FAC可能通过调节机体免疫功能来发挥抗肿瘤作用.     

采用体内碱性彗星试验检测两种聚醚醚酮材料的遗传毒性

目的：采用哺乳动物体内碱性彗星试验,检测两种聚醚醚酮材料的遗传毒性,为医疗器械及其材料的遗传毒性体内碱性彗星试验方法的建立提供依据。方法：采用0.9%氯化钠注射液(SC)和棉籽油(CSO)两种介质制备聚醚醚酮材料的试验液,以SC和CSO作为阴性对照,甲基磺酸甲酯(MMS)作为阳性对照。选取 SD大鼠 70只,雌雄各半,大鼠连续两次(间隔 24 h)染毒,SC组和MMS阳性对照组按照 10 mL/kg的剂量由静脉途径染毒,CSO组按照 5 mL/kg的剂量由腹腔途径染毒,末次染毒后 3 h处死大鼠,称取肝脏和肾脏的质量并进行组织病理学检查。取肝脏、肾脏和外周血分别制备单细胞悬液进行碱性彗星试验,以尾部DNA百分比、尾矩和Olive尾矩为分析指标判断DNA损伤程度。结果：试验组的大鼠肝脏系数、肾脏系数分别与SC和CSO阴性对照组相比差异均无统计学意义(P >0.05),所有大鼠的肝脏和肾脏形态结构正常,未见明显的组织病理学改变。与 SC和 CSO阴性对照组相比,MMS阳性对照组尾部DNA含量百分比、尾矩和Olive尾矩的差异有统计学意义(P<0.01),两种聚醚醚酮材料组间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论：应用体内碱性彗星试验的研究方法,在本研究条件下,两种聚醚醚酮材料的试验液不能诱导大鼠肝细胞DNA链断裂,未检测出遗传毒性。