浓香型酒醅中一株高产蛋白酶菌株的鉴定及产酶条件的优化

菌株J-1为实验室保存的高产蛋白酶菌株，分离自浓香型发酵酒醅。经过形态学及分子生物学鉴定菌株J-1为解淀粉芽孢杆菌。以蛋白酶活力为指标，通过单因素实验优化产酶条件得出：选用牛肉膏蛋白胨培养基、摇床转速200 r/min、培养温度37℃的实验条件，解淀粉芽孢杆菌所产蛋白酶活力最高，可达到39.6 U/mL。在最优条件下测定蛋白酶最适p H值和最适温度，结果显示：解淀粉芽孢杆菌所产蛋白酶的最适p H值为4.0、最适温度为30℃，并在此条件下蛋白酶活力为45.3 U/mL。结果表明：通过对解淀粉芽孢杆菌产酶条件的优化，提高了菌株蛋白酶活力。期望通过对糟醅中蛋白酶及其产酶条件的研究，能够为白酒酿造生产提供科学理论指导。     

南瓜多糖抑制α-淀粉酶及抑菌活性的研究

研究了南瓜多糖对α-淀粉酶活性的抑制效果及其抗菌性。结果表明:南瓜多糖对α-淀粉酶活力的抑制作用较弱;热水提取的南瓜多糖抗菌活性较高,并且对大肠杆菌的抑制作用强于枯草芽孢杆菌,但是对黄曲霉和黑曲霉没有抑制性。     

降解南瓜纤维素菌株的分离筛选及酶活测定

目的:筛选出能高效降解南瓜纤维素的菌株,以制备南瓜可溶性膳食纤维。方法:从土壤、腐烂的树叶和水果上分离出具有降解南瓜纤维素的菌株,用刚果红染色透明水解圈进行初筛,然后用CMC-Na、滤纸和南瓜渣为碳源测所有菌株及混合菌株的羧甲基纤维素酶活力,最终选出1株酶活力较高菌株进行下一步实验。结果:共分离到能够有效降解纤维素的共有5株细菌和7株真菌,通过测单菌株和混合菌株的酶活力,表明混合菌株的酶活力最大值比单菌株的酶活力最大值要高3倍之多。结论:混合菌株的酶活力比单株菌酶活力值高,发酵培养72h南瓜渣可溶性多糖降解力最强。     

响应面法优化南瓜多糖的提取工艺及其降糖作用研究

实验目的:优化水溶性南瓜多糖(Pumpkin Polysaccharide,PP)提取的最佳工艺条件,并验证所提取的南瓜多糖的降血糖效果。实验方法:实验依次采用加热浸提、有机溶剂分步萃取等工艺技术手段,利用响应面分析法(RSA),通过响应面的等值线分析来寻求浸提的最优工艺参数;并结合动物实验,分别设置南瓜多糖实验组、空白对照组及阴性对照组,实验当天南瓜多糖实验组小鼠腹腔注入南瓜多糖500mg/kg,其余两组小鼠分别腹腔注射生理盐水0.5mL,测试各组小鼠给药前、给药7h及11h时的血糖值。实验结果:提取工艺的最佳参数为:温度55℃、料液比1:30、提取时间130min,在此条件下,南瓜多糖的得率为5.32%,所获得的南瓜多糖具有明显的降血糖效果(P<0.001)。结论:通过响应面法优选的工艺条件适合南瓜多糖的提取。     

南瓜多糖的提取工艺及其降糖作用的研究

本文介绍了南瓜多糖的提取方法及其组分与理化性质,并将提取的南瓜多糖用于动物实验,结果证实了南瓜多糖的降糖作用。说明南瓜多糖在糖尿病辅助治疗方面存在着非常重要的价值。     

南瓜多糖对α-葡萄糖苷酶抑制作用的研究

实验目的:通过南瓜多糖(Pumpkin Polysaccharide,PP)对α-葡萄糖苷酶活性的影响,探讨南瓜多糖降血糖作用的可能机制.实验方法:实验依次采用加热浸提、有机溶剂分步萃取、减压浓缩、冷冻干燥等工艺方法制备南瓜多糖;提取正常大鼠小肠上段-α葡萄糖苷酶,酶活力采用P-硝基苯麦芽庚糖(PNPG)比色法进行测定,优化α-葡萄糖苷酶作用的最佳实验条件,考察南瓜多糖对α-葡萄糖苷酶活性的影响.实验结果:在实验优化的α-葡萄糖苷酶作用的反应条件下,即在反应时间2h、反应温度49℃、缓冲液pH6.0、底物PNPG浓度为10mmol/L的实验条件下,南瓜多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用较弱.结论:南瓜多糖的降血糖作用不是通过抑制α-葡萄糖苷酶的活性实现的,而是通过其它途径实现的.     

低温提取南瓜多糖的理化性质及清除DPPH自由基作用

首次采用低温水提的方法对南瓜多糖进行提取,从得率、理化性质、清除DPPH自由基活性方面对低温提取的南瓜多糖进行了研究,并与高温提取的南瓜多糖进行了比较。实验结果表明:经缓冻处理后,室温提取的南瓜多糖得率为5.06%,低于70℃提取的多糖得率5.48%(P>0.05)。低温提取的南瓜多糖为白色粉末I,2-KI反应阴性,分子量分布主要为4 ku~270 ku;低温南瓜多糖清除DPPH自由基的效果明显高于高温提取的南瓜多糖(P<0.05)。     

南瓜及红甜菜多糖对小鼠免疫功能的影响

研究南瓜和红甜菜苷多糖对正常小鼠免疫功能调节作用的影响。利用超声提取法得到80%的乙醇粗提物,并绘制葡萄糖标准曲线,测定南瓜和红甜菜多糖含量分别为67.30%和85.82%。实验小鼠分为2组,将南瓜和红甜菜多糖配成(50 mg/kg.d),分别经胃灌注南瓜及红甜菜苷多糖,每天1次连续7 d,对照组小鼠用等量蒸馏水灌胃。于实验第8天进行小鼠体内免疫功能测试。结果表明:南瓜多糖和红甜菜多糖能提高小鼠免疫器官重量、巨噬细胞的吞噬功能及单核巨噬细胞对血流中碳粒的清除能力,红甜菜多糖的作用更加明显。南瓜多糖及红甜菜多糖具有免疫调节活性作用。     

高产胞外多糖沙棘根瘤内生细菌的筛选、鉴定及其发酵条件优化

目的:从6株产胞外多糖的沙棘根瘤内生细菌中,筛选出高产胞外多糖的菌株,并对其进行鉴定和发酵条件优化。方法:利用苯酚-硫酸法联合DNS法测定菌株胞外多糖产量,筛选高产胞外多糖菌株;利用形态学观察、生理生化特征及16S rRNA基因序列分析法对高产胞外多糖菌株进行鉴定;利用单因素实验法优化产多糖的发酵培养基与发酵条件,并利用正交实验法进一步优化培养基中蔗糖、KNO₃、KH₂PO₄的最适添加量。结果:筛选得到一株高产胞外多糖菌株TT207,鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。经条件优化,确定其高产胞外多糖的最优培养基组分为蔗糖50 g/L,KNO₃ 10 g/L,KH₂PO₄ 8 g/L;最佳发酵条件为:培养时间48 h,培养温度34℃,初始pH6.5,接种量4%,装液量70 mL/250 mL,摇床转速140 r/min。利用优化后的发酵条件,菌株胞外多糖产量提高了6.04倍。结论:高产胞外多糖菌株枯草芽孢杆菌TT207在最优发酵条件下,胞外多糖产量达到12.39 mg/mL,是一株具有开发潜力的胞外多糖生产菌株。     

南瓜多糖硫酸酯化衍生物的制备及抗氧化研究

采用氯磺酸一吡啶法,对南瓜粗多糖和分离得到的南瓜AP1多糖进行硫酸酯化;采用邻二氮菲-金属铁离子-H2O2体系和邻苯三酚自氧化法,测定南瓜多糖对羟自由基和超氧阴离子自由基的清除作用.结果表明,四种南瓜多糖均能有效清除羟基自由基,并随着浓度的增加,清除作用加强,且水提南瓜粗多糖对羟基自由基清除作用显著高于其它三种多糖.南瓜粗多糖和南瓜AP1多糖对超氧阴离子自由基的清除作用不明显,经硫酸酯化后的多糖能有效清除超氧阴离子自由基,并呈量效关系.实验结果表明,硫酸酯化南瓜多糖具有抗氧化性.     

南瓜皮多糖锌的制备及生物利用率研究

本研究以南瓜皮多糖和锌为原料制备南瓜皮多糖锌,通过单因素和响应面法优化得到最佳制备工艺,并采用体外模拟胃肠道消化法测定南瓜皮多糖锌中锌离子的生物利用率。结果表明:南瓜皮多糖锌的最佳制备工艺为:南瓜皮多糖与锌质量比18:1,反应时间104 min,反应pH9,此时螯合率达到最大值为99.37%±0.12%。通过电感耦合等离子体质谱仪测定锌含量约为23.17±0.05 mg/g。体外模拟胃肠道消化试验表明:多糖锌受胃中的酸性环境影响小,在肠道中多糖锌中锌离子的溶解率和透析率均高于无机锌。综上,南瓜皮多糖锌生物利用率高、稳定性好,为开发新型的多糖补锌剂以及提高南瓜资源的综合利用提供了依据。     

香蕉皮多糖的提取及其体外抗氧化性作用研究

以动物、植物油脂为底物,以过氧化值为指标,对香蕉皮多糖的提取及其抗氧化性能做了初步研究。结果表明：香蕉皮多糖对植物油脂均有显著的抗氧化性,可以有效地延缓油脂氧化反应;其抗氧化效果随其用量的增加而加强;香蕉皮多糖与酒石酸、柠檬酸和VC复配后,对花生油有较好的抗氧化协同增效作用,其中增效作用的顺序为：VC〉柠檬酸〉酒石酸。     

南瓜硒多糖的制备表征及活性分析

对南瓜多糖进行硒化修饰,并对南瓜硒多糖的体外抗氧化和抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-231生长等活性进行研究。以提取、分离、纯化的南瓜多糖为前体物,用Na2SeO3硒化修饰制备南瓜硒多糖,并用紫外光谱、红外光谱、原子荧光光谱、热重分析对产物结构进行表征,采用邻苯三酚自氧化法、水杨酸法、四甲基偶氮唑蓝比色法测定其清除超氧阴离子自由基（O2－•）、羟自由基（•OH）的能力以及对人乳腺癌细胞MDA-MB-231生长的抑制作用。结果表明：制备产物结构中含有Se＝O键和Se-C键,即实现了南瓜多糖的硒化。南瓜硒多糖对O2 － ·、·OH的清除作用显著强于南瓜多糖,与样品量呈正相关;南瓜硒多糖对人乳腺癌细胞MDA-MB-231生长有抑制作用,比南瓜多糖具有更好的抑制效果。     

南瓜AP1多糖结构的分析和原子力显微镜研究

采用热水浸提法提取南瓜粗多糖并对从中分离得到的南瓜AP1 多糖进行结构分析。采用分光光度法,以半乳糖醛酸为对照品测定糖醛酸含量;采用高效凝胶渗透色谱法测定其相对分子量;采用紫外- 可见光谱法、红外光谱法、气相色谱法及原子力显微镜对其进行化学结构分析。结果显示：南瓜AP1 多糖的糖醛酸含量为38.87%,平均分子量为2 .0 × 105D,不含核酸及蛋白质,由阿拉伯糖、鼠李糖、核糖、果糖、半乳糖、葡萄糖组成,具有糖类物质的特征吸收峰,同时存在呋喃环和吡喃环,具有高度分枝的结构,并且糖链间形成小环或螺旋结构。     

南瓜多糖复合酶法提取及纯化的研究

南瓜中的有效成分南瓜多糖对糖尿病症状有显著的治疗效果,为了开发和利用这一功能成分,本实验采用酶解的方法提取南瓜多糖。首先利用正交试验确定复合酶添加量为纤维素酶1%,果胶酶1.5%,木瓜蛋白酶1%;利用正交试验确定复合酶的最佳反应条件为温度40℃,pH值为5.5,反应时间为30min。在最佳条件下,多糖的提取率为28.8%。将复合酶法制得的南瓜粗多糖经脱色、透析后,上DEAE-纤维素柱层析,得到三种级分。主要级分PPIII经SepharoseCL-4B凝胶柱层析、紫外扫描和冻融分析鉴定为均一组分。     

洋河大曲中抗胁迫酵母菌的筛选及生物特性初探

以洋河酒厂高温大曲为研究对象,分离得到20株酵母菌,经筛选得到2株耐性较强的酵母菌J-9和J-10,并对其生理生化特性和发酵情况进行研究。结果表明,高浓度的糖、酒精和盐均抑制2株酵母菌的生长,J-10无论在糖的抑制浓度、高盐浓度或发酵性能指标都相对优于J-9;2株菌的较适发酵温度为30℃,pH值为3.0～4.5时生长良好;产酒精能力分别为5.6%vol和6.3%vol。     

植物性多糖的强化提取

以新鲜南瓜为研究对象,用超声波和缓冻2种方法强化提取水溶性多糖。电子显微镜显示,植物细胞壁在超声波作用下产生了明显的褶皱,一些细胞破裂;植物细胞经过缓冻处理后,由于植物细胞内形成了晶粒较大的冰晶,从而使大部分植物细胞产生破碎作用。超声波和缓冻2种方法都能强化植物性多糖的提取,缓冻的效果优于超声波。     

南瓜种籽蛋白降血糖活性的研究

本文对南瓜种籽发芽前后的脱脂蛋白粉以及从南瓜瓜肉中分离的南瓜多糖进行了小鼠降血糖作用研究,小鼠血糖值显示经过发芽后的种籽蛋白具有显著的降血糖作用。氨基酸分析结果显示经发芽处理的南瓜种籽的精氨酸含量增加了2.5％,发芽后南瓜种籽的降血糖作用与精氨酸增加有关。