高效液相色谱-串联质谱法同时测定配制酒中5种紫杉烷

建立了同时测定配制酒中紫杉醇、三尖杉宁碱、巴卡亭Ⅲ、7-表-紫杉醇和10-脱乙酰基巴卡丁Ⅲ(10-DAB)5种紫杉烷的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法。样品经40℃氮吹浓缩,二氯甲烷与水(6:3,v:v)萃取净化,采用Thermo Hypersil Gold C₁₈色谱柱(100 mm×2.1 mm,3 μm)分离,以乙腈和0.1%甲酸水进行梯度洗脱,质谱正离子多反应监测(MRM)模式测定。结果显示,5种紫杉烷在0~120 ng/mL范围内线性关系良好,相关系数r≥0.9982;紫杉醇、7-表-紫杉醇、巴卡亭Ⅲ检出限为4 μg/kg,三尖杉宁碱、10-DAB检出限为2 μg/kg;回收率为71.84%~87.68%,相对标准偏差为1.33%~8.82%。该方法操作简单、灵敏度高,能对配制酒中5种紫杉烷进行定性、定量检测,从而辅助鉴别配制酒中非法添加红豆杉的行为,为开展配制酒中红豆杉非法添加的整治工作提供技术支撑。     

虎杖中白藜芦醇测定方法的比较研究

虎杖中有效成分白藜芦醇经提取、分离纯化后,用HPLC法、一阶导数光谱法、紫外分光光度法测其含量。结果表明:HPLC法分离度好,测定结果稳定、准确,相对标准偏差小;样品未经分离纯化时,干扰组分较多,一阶导数光谱法、紫外分光光度法测定结果与HPLC法相关性不显著,相对标准偏差较大;分离纯化可消除背景干扰,提高检测结果的准确性。一阶导数光谱法操作简单,测定结果较紫外分光光度法准确;可替代HPLC法用于白藜芦醇的测定。     

不同月份的福建红豆杉中各部位紫杉醇含量分布研究

紫杉醇是目前已发现的优秀的天然抗癌药物,在临床上已经得到了广泛的应用。本实验对福建宁德地区红豆杉中的紫杉醇最佳浸提工艺条件进行了研究。通过单因素实验和正交试验考查了浸提溶剂、浸提温度、料液比和浸提时间对紫杉醇浸提含量的影响。确定对紫杉醇的提取影响因素由大到小依次是:浸提时间>料液比>浸提温度>浸提溶剂;最佳提取工艺条件为:浸提时间4h,料液比1∶30,浸提温度60℃,浸提溶剂三氯甲烷。用HPLC法测定了不同月份采摘的南方红豆杉树皮、枝和叶中紫杉醇的含量。结果表明:红豆杉中紫杉醇的含量随着部位的不同而不同,在皮中最多,叶中最少。其含量随着季节的不同而不同,十月份采摘的红豆杉皮、枝中紫杉醇含量要高于五月份。     

D4020大孔树脂提纯发酵液中紫杉醇的研究

采用D4020型大孔树脂对红豆杉产紫杉醇内生真菌发酵液的粗提液进行吸附和洗脱试验,同时应用HPLC进行分析检测,确定了最佳工艺条件。结果表明,D4020型吸附树脂对紫杉醇有吸附分离效果。优化工艺条件为:室温下,样品溶于体积分数50%甲醇-水溶液,上柱液体积流量1.5 mL/min,体积分数80%乙醇-水溶液以体积流量0.5 mL/min洗脱,洗脱剂用量为7倍量树脂体积,回收率达90%。     

液相色谱-串联质谱法测定白酒中紫杉醇和三尖杉宁碱含量

目的建立液相色谱-串联质谱(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)检测白酒中红豆杉特征组分紫杉醇和三尖杉宁碱含量的方法。方法样品经甲醇-水(7:3,V/V)提取液提取,采用水(A)和甲醇(B)作为流动相进行梯度洗脱,外标法定量,质谱采用电喷雾电离正模式(positive electrospray ionizationm,ESI+)和多离子检测模式(multiple reactions monitoring,MRM)对紫杉醇和三尖杉宁碱的定量离子、定性离子进行监测。结果在50～1000 ng/L范围内,紫杉醇和三尖杉宁碱呈良好的线性关系,相关系数r2不小于0.995,方法的检出限为2.5μg/kg,定量限为8.3μg/kg。紫杉醇和三尖杉宁碱在2.5、7.5、25.0μg/kg 3个水平下加标回收率为96.4%～115.6%,相对标准偏差不超过2.53%(n=6)。用该方法检测市售红豆杉果实酒、红豆杉树皮酒,均检测出紫杉醇和三尖杉宁碱。结论该方法便捷、高效、准确、灵敏,可用于测定非法添加红豆杉保健酒中紫杉醇和三尖杉宁碱含量。     

洋葱皮中黄酮类物质的提取及分离纯化研究

采用超声波辅助法提取洋葱皮中黄酮类物质,通过柱层析等方法进行分离纯化,利用高效液相色谱对黄酮类物质进行检测,在超声波辅助萃取洋葱皮中总黄酮的研究中,确定乙醇浓度80%、料液比1∶10、超声时间20min条件下对总黄酮提取率最高。获得总黄酮物质后采用萃取、聚酰胺柱层析进行分离纯化,获得不同浓度乙醇洗脱组分,建立HPLC方法为进样量5μL、检测波长360nm、甲醇∶水（含0.1%冰乙酸）=45∶55、柱温为室温。分离纯化中得到结晶,通过质谱、核磁共振鉴定此晶体物质为槲皮素。     

一种新型赭曲霉黄色素的分离纯化和稳定性分祈

分离纯化了赭曲霉所产生的黄色素,并对其稳定性进行了研究.分离纯化色素首先使用硅胶柱进行初分离,再用制备型HPLC进行纯化,纯化后色素的纯度达到95.2%.制备色谱条件为:V(甲醇):V(水):V(磷酸)=60:40:0.5;进样量:200mg;流量:60mL/min;检测波长:254nm.色素稳定性研究表明,食品添加刑、金属离子(除Fe2+)、温度、光照和氧化还原剂对其稳定性没有显著影响.     

板栗花粉雌二醇提取及分离纯化工艺研究

对板栗花粉雌二醇提取条件进行优化,雌二醇的最佳提取条件为:提取温度70℃、提取时间2.5h、乙醇浓度80%、液固比10:1(V/V),用HPLC定量雌二醇的含量为9.72μg/g。AB-8大孔树脂柱层析分离纯化雌二醇,薄板层析和HPLC表征分离纯化情况,其理想分离纯化体系为:洗脱液60%乙醇4BV、丙酮4BV依次洗脱。     

高速逆流色谱法分离纯化杜仲叶中绿原酸

目的:建立高速逆流色谱(HSCCC)法从杜仲叶中分离纯化绿原酸。方法:将杜仲叶用50%乙醇提取,乙酸乙酯萃取,减压浓缩得粗提物,绿原酸含量为16.15%,再进行HSCCC分离纯化。用HPLC考察了绿原酸在不同溶剂体系中的分配情况,选择正丁醇-乙酸乙酯-水(3∶1∶4)为HSCCC为溶剂体系,上相为固定相,下相为流动相,主机转速850r/min,流速2m L/min,检测波长327nm。结果:从100mg杜仲粗提物中分离到8.27mg绿原酸,经HPLC分析绿原酸质量分数为86.20%,紫外、红外光谱扫描与对照品特征峰一致。结论 HSCCC法可用于杜仲叶中高纯度的绿原酸快速分离纯化。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定保健酒中紫杉醇的含量

建立了超高效液相色谱-串联质谱法测定保健酒中紫杉醇含量的方法。样品用水稀释10倍后经GCB固相萃取小柱净化,采用LunaC₈ 100A(150 mm×2 mm,3 μm)柱以0.2%甲酸溶液和乙腈为流动相进行梯度洗脱分离,电喷雾电离(ESI)正离子化和多反应监测模式(MRM)检测。紫杉醇在1~100 μg/L范围内呈良好的线性关系,决定系数(R2)大于0.999,方法的定量限(S/N=10)为10 μg/L;以保健酒为基质,紫杉醇在10.0、50.0和100.0 μg/L 3个水平下的平均加标回收率为88.9%~92.4%,相对标准偏差(RSD,n=6)为7.8%~9.5%;用建立的方法分析了17批实际样品,其中2批次样品有检出,且含量均超过方法定量限的100倍以上。该法简单、高效、灵敏、准确,可用于测定保健酒中紫杉醇的含量,为执法机关监管保健酒里添加红豆杉的违法行为提供了技术支持。     

Paclitaxel and other taxanes in hazelnut

Small amounts of paclitaxel (Taxol^®) were isolated from Tombul hazelnut (Corylus arellana L.) hard shells, green shell covers and leaves. In addition to paclitaxel, 10-deacetyl baccatin III, baccatin III and cephalomannine were found in the extracts. Taxanes were not detected in nut kernels or hulls from this cultivar. The amounts present varied between 8.61 and 68.22 micrograms per gram sample on a defatted and dried basis. While it is possible that these taxanes may have been made by fungi associated with the hazelnut, it is likely that they are made by the plant tissues.     

皖南山区红豆杉多糖提取、纯化方法及单糖组成分析

研究皖南地区野生红豆杉茎、叶中多糖的提取、纯化方法,分析其单糖组成情况。结果表明,闪式提取为最佳提取方法,其中太平红豆杉细茎和黟县红豆杉叶多糖提取量最高,分别达到7.09、10.25 mg/g,其中细茎比粗茎多糖含量高10~20倍。Sevag法脱蛋白效果最好,对太平红豆杉细茎、黟县红豆杉叶多糖的脱蛋白率分别为66.5%、69.1%。H_2O_2法脱色效果最好,对太平红豆杉细茎、黟县红豆杉叶多糖的脱色率为84.2%、85.3%。红外光谱显示,红豆杉细茎、粗茎和叶多糖谱图相似。2个产地的红豆杉细茎、粗茎和叶中精制多糖Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ,三者单糖种类相似,木糖物质的量比均较高,但单糖组成比例不同。该研究为红豆杉多糖的开发和应用提供参数。     

芦苇叶类黄酮高效液相色谱分析

目的：分析芦苇叶类黄酮的组分。方法：制备芦苇叶类黄酮提取浓缩过程中形成的析出物和浓缩液再经大孔树脂纯化后产生的初纯物,优化两种样品中类黄酮苷转化为苷元的水解条件,采用高效液相色谱(HPLC)法测定两种样品和其水解样品类黄酮的组分。结果：析出物和初纯物的总黄酮含量分别为57.1%和18.5%,酸浓度1.4mol/L、温度80～90℃条件下水解4h可获得相对最好的水解效果;HPLC测定表明,析出物含32种组分,其中7种得到确定,初纯物含22种组分,其中5种得到确定;水解析出物含28种组分,其中7种得到确定,水解初纯物含25种组分,其中7种得到确定。结论：芦苇叶含有芦丁、野黄芩苷、橙皮苷、木犀草素、槲皮素、芹菜素、山奈酚、异鼠李素(或橙皮素)、异甘草素和黄芩素,其中芹菜素含量最高,还有许多未确定的类黄酮。     

橄榄叶黄酮类抗氧化物质的分离纯化研究

将橄榄液黄酮粗提取液用聚酰胺柱层析分离,所分离的组分经抗氧化活性筛选得到A5,再由制备型薄层色谱纯化样品A5,经过抗氧化活性筛选得到C3,经过高效液相色谱分析,结果表明,所得到的组分是一个纯物质.     

Inhibition of 7,12-dimethylbenz[a]anthracene induced mouse skin carcinogenesis by Artemisia capillaris

ABSTRACT:  Anticarcinogenic activity of medicinal herbs ( Artemisia capillaris, Taxus cuspidata, Anthriscus sylveatris, and Curcuma longa ) was examined for 7,12-dimethylbenz[a]anthracene (DMBA)-induced mouse skin carcinogenesis. Four types of solvent fractions (hexane, chloroform, ethyl acetate, and butanol) were prepared from the methanolic extract of medicinal herbs. The cytotoxicity and anticarcinogenic activities of solvent fractions were examined for mouse leukemia L1210 cancer cells and for female ICR mouse epidermal carcinogenesis induced by DMBA, respectively. The chloroform fraction of Artemisia capillaris, Taxus cuspidata, and Anthriscus sylveatris was more toxic to L1210 cells than other solvent fractions. The chloroform fraction of Artemisia capillaris markedly reduced the number of tumors/mouse and tumor incidence relative to that of other medicinal herbs tested. Major active chemical constituents in the chloroform fraction of Artemisia capillaries were found to be camphor, 1-borneol, coumarin, and achillin when analyzed by TLC and GC-MS. These results suggest that Artemisia capillaris was the most effective anticarcinogenic medicinal herb for DMBA-induced mouse epidermal carcinogenesis among 4 medicinal herbs tested, and the effect might be attributed to chemical compounds of camphor, 1-borneol, coumarin, and achillin.     

基于UPLC-MS/MS分析红豆杉鲜叶和茶叶非挥发性差异成分

该研究以曼地亚红豆杉鲜叶（T. media Fresh Leaves，TFL）为材料，通过杀青、揉捻、干燥制成红豆杉茶叶（T. media Tea，TT）。运用超高效液相色谱串联质谱（UPLC-MS/MS）分析比较曼地亚红豆杉鲜叶加工前后的差异化合物。在TFL和TT中共鉴定到796种化合物，TFL中有777种化合物，TT中有768种化合物。根据PCA结合OPLS-DA筛选出差异化合物330种，其中氨基酸、脂质、黄酮、酚酸等255种化合物在TFL中含量高，有机酸等105种化合物在TT中含量高。TFL和TT的关键差异化合物有11种，包括柠康酸、3,5-二羟基-3-甲基戊酸、(2''S3''R)-5-(N,N二甲基-3''-苯基异丝氨酰)-红豆杉三烯A、1,3,5-苯三酚、澳大利亚紫杉碱、3-羟基吡啶、吡咯-2-羧酸在TT中含量较高；苯甲醛、橙皮素-7-O-葡萄糖苷、9-过氧-10E,12Z-十八碳二烯酸、木犀草素-7-O-(6''-咖啡酰)鼠李糖苷在TFL中含量较高。该研究将为红豆杉鲜叶的开发利用提供理论依据。     

臭灵丹中黄酮类化合物的鉴定及抗氧化活性的研究

采用乙醇室温浸泡臭灵丹粉,60℃减压浓缩后,用石油醚除脂,然后用乙酸乙酯萃取,得到臭灵丹的乙酸乙酯萃取物;利用硅胶柱层析法对乙酸乙酯萃取物进行分离,得到两个单体化合物;利用核磁共振技术鉴定单体化合物为黄酮类化合物;采用高效液相色谱法检测单体化合物的纯度均大于95%;以维生素C为对照,采用清除DPPH自由基试验方法研究单体化合物的抗氧化活性。结果显示臭灵丹中含有的黄酮类化合物为洋艾素和金腰乙素,它们均有明显的抗氧化作用,其体系终浓度IC50分别为9.88μg/mL和10.28μg/mL,但其抗氧化活性均弱于维生素C。     

Carotenoids in cassava: Comparison of open-column and HPLC methods of analysis

Cassava leaves and tubers from six cultivars were analysed for carotenoids by both open-column chromatography and high-performance liquid chromatography (HPLC). The major carotenoids of leaves were the non-vitamin A carotenoid lutein (86-290 mg kg^?1 fresh weight (FW)) and the pro-vitamin A carotenoid β-carotene (13-78 mg kg^?1 FW). Immature leaves contained less than mature leaves. Tubers contained 0.1-3 mg kg^?1 FW of β-carotene and 0.05-0.6 mg kg^?1 FW of lutein. Carotenoids present in small amounts included α-, γ-, and §-carotenes and β-cryptoxanthin and others were separated and partially identified. Yellow tubers contain much more β-carotene than white tubers and cassava is a good source of pro-vitamin A carotenoids compared with other root crops. Both methods gave similar results for β-carotene and lutein, but the open-column method did not allow separation and quantitation of carotenoids present in small amounts. HPLC separated many carotenoids, but most peaks could not be identified for lack of reference compounds. A great advantage of open-column chromatography for developing countries is its use of simple equipment and readily available reagents and solvents compared with HPLC, which requires complex equipment needing careful maintenance and expensive solvents. The open-column method is more labour intensive but this is not a constraint in developing countries.     

马杜拉放线菌（Actinomadura sp.）FXJ1.344发酵产物的分离鉴定与活性分析

分离鉴定来源于江西酸性红壤中的马杜拉放线菌（Actinomadura）FXJ1.344所产生的次级代谢产物,并对其中生物活性物质进行分析。采用无水乙醇提取放线菌FXJ1.344发酵菌丝体,粗提物依次用硅胶柱层析法和凝胶柱层析法分离纯化,高效液相色谱法进行制备,并采用超高效液相色谱串联质谱法和核磁共振分析鉴定化合物结构。最终得到2个纯化物,分别为6-hydroxytetrangulol和tetrangulol。用滤纸片扩散法和对倍稀释法检测其抑菌活性,结果表明这2个纯化物均有较好的抗藤黄微球菌（Micrococcus luteus）活性,其最小抑菌浓度分别为3.90 μg/mL和15.6 μg/mL。